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BIODEGRADACION DE FENOL

EXPERIENCIAS PARA EL FORTALECIMIENTO DE LA BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL EN LA REGION CARIBE COLOMBIANA

BIOTECNOLOGIA

CELULA ANIMAL

CELULA VEGETAL

MICROORGANISMOS

QUE ES ?

APLICACION

QUE ES ? APLICACIÓ APLICACIÓN TECNOLOGICA .

ADITIVOS PROTEINA AMBIENTE SECTOR ALIMENTARIO MICROBIANA ENZIMAS BIOTECNOLOGIA ENZIMAS INDUSTRIALES AMINOACIDOS FARMACOLOGIA DIAGNOSTICO SECTOR QUIMICO VITAMINAS EPIDEMIOLOGIA MEDICINA HORMONAS COMBUSTIBLES Y MATERIAS ORGANICAS TRATAMIENTO .

ENFERMEDAD ALIMENTACION MICROORGANISMOS AGRICULTURA ENERGIA Y MEDIO AMBIENTE BIOTECNOLOGIA .

BIOTECNOLOGIA MICROBIANA .

TRATAMIENTO DE RESIDUOS. CONTROL DE POLUCION GENERACION DE TECNOLOGIAS LIMPIAS SUSTENTABLES PRESION SOCIAL BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL SALUD OCUPACIONAL LEGISLACION AMBIENTAL .

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TRATAMIENTO DE AGUA POTABLE RESIDUOS GASEOSOS Y AIRE TRATAMIENTO DE SUELO Y LODOS RESIDUOS SÓLIDOS .AGUAS RESIDUALES Y EFLUENTES INDUSTRIALES.

MEJORA DE PROCESOS INNOVACION DE PRODUCTOS .

DETECCION Y MONITOREO DE MICROORGANISMOS USADOS PARA BIORREMEDIACION. DETECCION Y MONITOREO DE EFECTOS ECOLOGICOS. BIOSENSORES.DETECCION Y MONITOREO DE CONTAMINANTES. .

TECNOLOGIA DE DNA RECOMBINANTE .

APLICACIÓN A PROBLEMAS BIODIVERSIDAD ELIMINACION DE CONTAMINANTES ENERGIA Y MEDIO AMBIENTE TECNOLOGIAS LIMPIAS ORGANISMOS MODIFICADOS GENETICAMENTE. .

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POTENCIAL MICROBIANO EN BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL: LA BIODEGRADACION Y BIORREMEDIACION .

BIODEGRADACION Y BIORREMEDIACION AMBIENTE INTERNO AMBIENTE EXTERNO RESIDUOS LIQUIDOS RESIDUOS GASEOSOS RESIDUOS SOLIDOS MENOR IMPACTO AMBIENTAL Y DE SALUD .

las cuales son necesarias para una amplia aplicació aplicación.BIORREMEDIACIÓN Bajo costo Tecnología emergente Efectiva Segura para el medio ambiente Ofrece: Nuevas alternativas para eliminar residuos peligrosos del medio ambiente. en particular en el control e incremento de la eficiencia de estos procesos a diferentes condiciones ambientales. la aplicació aplicación de la biorremediació biorremediación está está limitada por : La falta de conocimiento en los procesos de biodegradació biodegradación. Sin embargo. La ausencia de diferentes té técnicas ingenieriles. .

1998) microorganismos degradadores. transformació transformación o detoxificació detoxificación de contaminantes por microorganismos y plantas. . Biodegradació Biodegradación. agua y biomasa por una especie o por un conjunto de microorganismos (consorcio). la cual se refiere a la parcial y algunas veces total. Mineralizació Mineralización. té término restringido referente a la completa conversió conversión de un contaminante orgá orgánico a dió dióxido de carbono.DEFINICIONES Biorremediació Biorremediación es una estrategia o proceso que utiliza microorganismos y/o plantas para detoxificar contaminantes del suelo u otros ambientes. té término referente a la transformació transformación de un contaminante sin que este compuesto sea utilizado como fuente de carbono y energí energía por los (Skipper. Cometabolismo. Cometabolismo.

Bioaumentació Bioaumentación es la inoculació inoculación de un sitio contaminado con microorganismos para facilitar la biodegradadació biodegradadación. para estimular a los microorganismos autó autóctonos en el suelo.ESTRATEGIAS DE BIORREMEDIACIÓN Biorremediació Biorremediación intrisí intrisínca es la biorremediació biorremediación natural de un sitio contaminado por la microflora autó autóctona. Los organismos son seleccionados por su alto potencial de degradació degradación del contaminante en cuestió cuestión. tales como oxí oxígeno y metano. (Skipper. Bioventeo es una forma de bioestimulació bioestimulación donde nutrientes en fase gaseosa. 1998) . tales como nitró nitrógeno y fó fósforo. son suministrados pasiva o forzadamente dentro del suelo para estimular la actividad microbiana. Bioestimulació Bioestimulación es la adició adición de nutrientes.

AREAS PRIORITARIAS DE INVESTIGACIÓN Residuos tóxicos Solventes Petró Petróleo y sus derivados (HC(HC-halogenados. HPA’ HPA’S) Insecticidas. herbicidas. etc. Bifenilos policlorados Metales Otros .

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INDUSTRIAS COMUNIDAD CONTAMINACION FINCAS AGUA SUELO AIRE MICROBIOLOGIA AMBIENTAL ACCION .

INDUSTRIAS-SECTORES PRODUCTIVOS ALTA CARGA ORGANICA Y SUSTANCIAS PELIGROSAS .

BACTERIAS DEGRADADORAS .

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Para la ACGIH. son los siguientes: N-Hexano BENCENO TOLUENO Xileno Etilbenceno Estireno Fenol Metiletilcetona Percloroetileno Tricloroetano Tricloroetileno Dimetilformamida Disulfuro de Carbono . los Solventes a tener en cuenta para Vigilancia Biológica e Indices de Exposición.

FENOL .

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4.05 .0 micras.5 .PSEUDOMONAS: @Bacteria @Tamaño: recta o curva. 0. .1.0 micras x 1. @Son organismos ecológicamente importantes en suelos y agua. Los compuestos orgánicos los utilizan como fuente de carbono y donadores de electrones para producir energía. @Son @ adaptables nutricionalmente. @Gramnegativas.

Degradación de un residuo orgánico por la acción de los microorganismos Humedad Temperatura pH Disponibilidad de nutrimentos Diseño de reactor Fuentes alternativas de carbono .

Contaminante enlazado a la enzima

Transporte a través de la membrana

A

A

A

A A A A A A Célula bacteriana A A A A A

A

Célula bacteriana A A A A A

B C

A CO2

H2O D

O2

DIAGRAMA ESQUEMÁTICO DE LA BIODEGRADACIÓN

SECUENCIA DE UN PROCESO BIOTECNOLOGICO CON EL USO DE MICROORGANISMOS

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GUSTAVO ECHEVERRI JARAMILLO Investigadores: Esp. CLAUDIA CONSUEGRA M.Sc. LERSY LOPEZ . GESIRA DE AVILA Esp.Sc.GIMA GRUPO DE INVESTIGACION MICROBIOLOGIA Y AMBIENTE Director: M.

MISION Fomentar y desarrollar innovaciones y tecnologías que integren la microbiología y el medio ambiente para contribuir en la mejora de la calidad de vida de la población en el Caribe Colombiano. .

. suelo. Estudiar bioprocesos que contribuyan en el control de riesgos fisicos-químicos y biológicos en el ambiente.OBJETIVOS ESPECÍFICOS Conocer la generación. Caracterizar y determinar indicadores de microorganismos patógenos y benéficos aislados en ambiente y el ser humano. y aire. identificando peligros potenciales para el medio ambiente y para la salud del ser humano. Caracterizar factores de riesgo fisico-químico y biológico en aguas. en muestras de origen biológico. el manejo y la disposición de residuos generados por las comunidades y los diferentes sectores de la producción. Caracterizar metabolitos o analitos y otras sustancias químicas.

para contribuir en la mejora de las condiciones de vida de la población. Objetivo y ejes de línea Espacios públicos Espacios cerrados .LINEA DE INVESTIGACION 1 LINEA 1 “Calidad Ambiental e Indicadores” Desarrollar indicadores microbiológicos y químicos en diferentes ambientes que permitan hacer gestión de programas y monitoreos ambientales y de salud.

. para contribuir en el control del medio ambiente y mejorar la calidad de vida de las poblaciones humanas. en ambientes impactados por diferentes tipos de contaminación. suelo y aire. la disminución de sustancias químicas o microorganismos de interés sanitario. hecha por los microorganismos estudiados. a través de pruebas in situ utilizando los microorganismos con esta capacidad. suelo. utilizando microorganismos con capacidad de degradación o capacidad de atenuación. el control de la contaminación. Objetivo y ejes de línea Demostrar en el laboratorio a nivel de microcosmos. con el fin de contribuir en el desarrollo biotecnológico para el control de riesgos químicos y biológicos en el ambiente. Estudiar bioprocesos con microorganismos aislados en diferentes entornos. y aire.LINEA 2 “Procesos Biológicos y Desarrollar procesos de saneamiento ambiental que contribuyan en la disminución de Biotecnología” la contaminación química o biológica de agua. Buscar y caracterizar microorganismos con capacidad degradativa o capacidad de atenuación. Probar en ambientes contaminados de agua.

FUNDAMENTACION BIOTECNOLOGIA GESTION AMBIENTAL PREVENCION CONTAMINACION GESTION BIOTECNOLOGICA MICROBIANA AMBIENTAL PROBLEMATIZACION ACTIVIDADES HUMANAS CONTAMINACION AMBIENTAL AGUA SUELO AIRE DESARROLLO TECNOLOGICO BIOFILTROS BIOSENSORES PROTOCOLOS TECNICAS DIAGNOSTICO PRODUCTOS PARA DEGRADACION .

.MACROPROYECTOS POR PROYECTOS Y ENTIDADES ESPECIFICAS DE APOYO DESARROLLOS MICROBIOLOGICOS EN AMBIENTES HIDRICOS PERTENECIENTES A LA JURIDICCION DE CARDIQUE. ASPECTOS MICROBIOLOGICOS PARA EL DESARROLLO DE UN PROCESO DE BIORREMEDIACION: ESTUDIO DE UN CASO CON FENOL USANDO BACTERIAS DEL GENERO Pseudomonas AISLADAS DE AMBIENTES CONTAMINADOS ESTRAEGIAS BIOTECNOLOGICAS PARA EL SANEAMIENTO AMBIENTAL DEL RELLENO SANITARIO DE INGEAMBIENTE.

EXPERIENCIAS .

“ ASPECTOS MICROBIOLOGICOS PARA EL DESARROLLO DE UN PROCESO DE BIORREMEDIACION: ESTUDIO DE UN CASO CON FENOL USANDO BACTERIAS DEL GENERO Pseudomonas AISLADAS DE AMBIENTES CONTAMINADOS“ .

UN BIOPROCESO (FILTRO BACTERIANO / .“ A S P E C T O S M I C R O B I O LO G I C O S P A R A E L D E S A R R O L L O D E U N PR O C ES O D E B IO R REM ED IA C IO N : ESTU D IO DE U N C A S O C O N FE N O L US A N D O B A C T E R IA S D E L G EN E R O P s e u d o m o n a s A IS L A D A S D E A M B I E N T E S CO N TAM IN ADO S“ ETAPAS ETAPA 1 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN BACTERIANA COMPROBACIÓN DE DEGRADACIÓN CARACTERIZACION BIOQUIMICA DE BACTERIAS ETAPA 2 DEGRADABILIDAD BACTERIANA ETAPA 3 ASPECTOS PARA FERMENTACION).

(ETAPA 1). Caracterizar bioquímicamente bacterias con potencial de degradar fenol (ETAPA 1) Medir la degradabilidad de las Pseudomonas aisladas. Colombia.(ETAPA 3) Ensayar la degradación de fenol en biofiltros con los soportes estudiados.(ETAPA 3) Ensayar la degradación de fenol a partir de extractos producidos por las Pseudomonas estudiadas.(ETAPA 3) . en la ciudad de Cartagena de Indias.(ETAPA 2) Medir la carga bacteriana de Pseudomonas en diferentes soportes para un biofiltro.OBJETIVOS GENERAL Conocer el manejo microbiológico en las etapas de un proceso de biorremediación usando el fenol como contaminante y bacterias del género Pseudomonas como degradadoras. ESPECIFICOS Aislar e identificar bacterias del género Pseudomonas en ambientes contaminados (ETAPA1) Comprobar el potencial de degradar fenol de Pseudomonas aisladas.

SEMILLERO “MARCHA MICROBIOLOGICA PARA LA BUSQUEDA E IDENTIFICACION DE Pseudomonas CON POTENCIAL DE DEGRADAR FENOL. ECHEVERRI ROQUE FIGUEROA TERMINADO . EN AMBIENTES DE RECEPCION DE AGUAS RESIDUALES GENERADAS EN LABORATORIOS DE LA USB-CTG“ GUSTAVO E.

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Se encuentren bacterias de del género Pseudomonas con potencial de degradar fenol. MANEJO MICROBIOLOGICO No contar con un protocolo de manejo para el aislamiento de este género en entornos contaminados. Sitios de almacenamiento de las aguas residuales.PROBLEMA Muestras de aguas residuales Generadas por actividades de laboratorios. . con uso de sustancias tóxicas.

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Punto de muestreo agua.TOMA DE MUESTRA. PISO 3 SIFON DE DESAGUE PISO 2 PISO 1 PLANTA ACTUAL EDIFICIO DE LABORATORIOS Punto de muestreo superficies. .

sobre un medio mineralizado con fenol como única fuente de carbono y energía. ESPECÍFICOS • Aplicar un protocolo de manejo microbiológico. • Comprobar el crecimiento de cepas aisladas puras de los tanques de almacenamiento. desde el muestreo hasta el aislamiento de cultivos puros en muestras de pared y aguas residuales en tanque de almacenamiento en la USB. . • Caracterizar bioquímicamente las cepas aisladas de los tanques de almacenamiento y con crecimiento positivo sobre medio mineralizado con fenol.OBJETIVOS GENERAL Aislar e identificar bacterias del género Pseudomonas que puedan crecer en medio con fenol en tanques recolectores de aguas residuales generadas por las actividades de los laboratorios de la USB.

API 10S Siembra sobre A. Prueba de oxidasa. Cultivos Microbiológico. MacConkey. • A. BD BBL Crystal • Cdo. Tiras Bactident. Cetrimide A. A. PROCEDIMIENTO MICROBIOLÓGICO Coloración de Gram. Nutritivo Inclinado. Potencial de Caracterización Bioquímica degradación de Fenol. Nutritivo. Nutritivo. Cetrimide. Cetrimide Conservación. con potencial de degradar fenol. Cetrimide A.METODOLOGÍA Y RESULTADOS Protocolo de muestreo. TOMA DE MUESTRA. aislamiento y caracterización bioquímica de bacterias del género Pseudomonas. • A. repique Cdo. Fase 1 Fase 2 Fase 3 Fase 4 Fase 5 . A. Aislamiento primario Aislamiento específico. M9 con fenol como única fuente de C y energía.

40% 30% 20% 10% 0% 33% 29% 29% Baclos Gram Cocos Gram + Bacilos Gram + Cocos Gram 4% 4% Levaduras 1 Gráfico. .1 Porcentaje de microorganismos en orden decreciente visto por coloración de Gram en el tanque de aguas residual. COLORACIÓN DE GRAM.PROCEDIMIENTO MICROBIOLÓGICO .

PROCEDIMIENTO MICROBIOLÓGICO .AISLAMIENTO PRIMARIO DE MUESTRAS DE SUPERFICIES Y MUESTRAS DE AGUA RESIDUAL CULTIVOS MICROBIOLÓGICOS Siembra sobre caldo nutritivo Acondicionamiento bacteriano • Turbidez según escala Mac Farlan tubo 1 . •Turbidez según escala Mac Farland tubo 10. 18 horas. 36 horas .2. CULTIVOS MICROBIOLÓGICOS FASE 1 .

Fermentación de la lactosa Lactosa Positiva Crecimiento 18 horas. viraje a amarillo del medio . mucosas. Colonias grandes. Colonias pequeñas puntiformes.CULTIVOS MICROBIOLÓGICOS Siembra sobre Agar Mac Conkey Crecimiento de bacterias Gram Negativas. irregulares Lactosa Negativa Crecimiento escaso 18 horas.

. producción de pigmento. Colonias puntiformes. medianas y grandes.CULTIVOS MICROBIOLÓGICOS Siembra sobre Agar Cetrimide Crecimiento específico del género Pseudomonas Crecimiento abundante y moderado.

esperando que fuesen Pseudomonas. . se diferencian colonias. Repique colonia – colonia. Repique Caldo Nutritivo Agar Cetrimide Crecimiento masivo.CULTIVOS MICROBIOLÓGICOS FASE 2 . cepas puras.FASE DE AISLAMIENTO ESPECIFICO O FASE DE REPIQUE.

CULTIVOS MICROBIOLÓGICOS Repique Agar Cetrimide Agar Cetrimide Buena purificación de colonias. Buena diferenciación de pigmento. .

Después de repique de agar Cetrimide a agar Cetrimide. .REPIQUE DE LAS PLACAS DE AGAR CETRIMIDE A AGAR CETRIMIDE 9% Positivo Negativo 38% 53% Positivo Inermedio Gráfico 2. Porcentaje de producción de pigmentos de las cepas aisladas del tanque de recepción de aguas residuales.

31 cepas puras.CULTIVOS MICROBIOLÓGICOS FASE 3 -CONSERVACIÓN DE COLONIAS Y PRUEBA DE OXIDASA. Colonias puras de Agar Cetrimide Repique Agar Nutritivo inclinado. Conservación de las cepas. . PTE – Pseudomonas Tubo Externo. Codificación.

identificación de no fermentadores (PTE-2 Negativa) Para 15% 3% Positiva Positiva retardada Negativa 82% Gráfico 3. .CULTIVOS MICROBIOLÓGICOS FASE 3 -CONSERVACIÓN DE COLONIAS Y PRUEBA DE OXIDASA. Porcentaje de Oxidasas de las cepas aisladas en tanques de recepción de agua residuales. con tiras comerciales Bactident. Prueba de Oxidasa.

2 PVC-1.COMPROBACIÓN DE CRECIMIENTO Y POTENCIAL DE DEGRADACIÓN SOBRE AGAR MÍNIMO CON FENOL. PPE-2 PPT-1.2 PPA-1. Siembra directa Suspensión 200µL en Sln Salina Revisar 24-48-72 y 92 horas Escaso Crecimiento 24 horas.2 PPD-2. Cepas Conservadas en Agar Nutritiva y Oxidasa Positiva Siembra sobre Agar M9 con 100ppm.3 .2 PVC-1.3 PVC-2.FASE 4 .3 PPA-1.2 PPI-1.

PPA-2.2 Miscelanea. Confirmar pureza del aislamiento . Con API 10S PVC-1. PPD-2.2 Pseudomona spp. Confirmar pureza del aislamiento.3 Miscelanea.CARACTERIZACIÓN BIOQUÍMICA DE LAS CEPAS CON CRECIMIENTO EN AGAR MÍNIMO CON FENOL Caracterización bioquímica con API 10S y BD BBL Crystal Cepas con crecimiento a las 24 horas y cepa Oxidasa negativa PVC-2.2 Con API 10S Pseudomona spp. Con API 10S PPI-1. Con Crysta ID System Pseudomana aeruginosa.2 Con API 10S Stenotrophomonas maltophila. PPA-1. Con API 10S PVC-1.2 PPE-2 No Clasifico con API 10S PPT-1.2 Pseudomana aeruginosa.FASE 5 .3 Pseudomona spp.

“ A S P E C T O S M I C R O B I O LO G I C O S P A R A E L D E S A R R O L L O D E U N PR O C ES O D E B IO R REM ED IA C IO N : ESTU D IO DE U N C A S O C O N FE N O L US A N D O B A C T E R IA S D E L G EN E R O P s e u d o m o n a s A IS L A D A S D E A M B I E N T E S CO N TAM IN ADO S“ ETAPAS ETAPA 1 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN BACTERIANA COMPROBACIÓN DE DEGRADACIÓN CARACTERIZACION BIOQUIMICA DE BACTERIAS ETAPA 2 DEGRADABILIDAD BACTERIANA ETAPA 3 ASPECTOS PARA FERMENTACION). UN BIOPROCESO (FILTRO BACTERIANO / .

TESIS DE GRADO ETAPA 2 “SONDEO DE BACTERIAS DEL GENERO Pseudomonas PRESENTES EN EL ECOSISTEMA MARINO CON POTENCIAL DE DEGRADACIÓ DEGRADACIÓN DE FENOL EN LA ZONA DE INFLUENCIA DE LOS VERTIMIENTOS DE LA REFINERÍ REFINERÍA DE PETRÓ PETRÓLEO. ULTIMA SEMANA DE MAYO DE 2004“ KATIA PRASCA LUISA SAMACA ROQUE FIGUEROA ALIANZA CON CARDIQUE TERMINADO . EN EL SECTOR INSDUSTRIAL DE MAMONAL EN LA HABIA DE CARTAGENA.

PROBLEMA VERTIMIENTOS EN ZONA INDUSTRIAL CONTAMINANDO BAHIA CONCENTRACIONES DE FENOL < 5 mg/L LEGISLACION NO > 0.2 ppm BACTERIAS DEL GÉNERO Pseudomonas CON POTENCIAL DE DEGRADAR FENOL EN BAHIA ? COMPORTAMIENTO DE ESTAS BACTERIAS ? Pseudomonas IDENTIFICADAS CON CAPACIDAD DE DEGRADAR FENOL ? .

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250 ml 250 ml 15 Sub-muestras de 500 ml para un total de 7500 ml. nutritivo Crecimiento Negativo Caracterización bioquímica con ID 32 GN (Mini API) .Composita 2 15 submuestras por duplicado Muestra por duplicado 15 Sub-muestras de 500 ml para un total de 7500 ml. Concentración y aislamiento por filtración por membrana Media UFC/250 ml de Pseudomonas Purificar cepas en Cetrimide Prueba de Oxidasa Pos Media UFC/250 ml de Pseudomonas Neg Crecimiento Positivo Verificar potencial de degradación de Fenol. Conservar cepas puras en A.

enfrentándolas a una concentración de fenol de 200 ppm. Evidenciar el potencial de degradación de las cepas obtenidas frente a una concentración de fenol de 200 ppm en medio mínimo líquido M9. . las cepas que presenten crecimiento en medio líquido y sólido M9. en la última semana de mayo de 2004. expresándolo en UFC/250ml. utilizando un protocolo propuesto para su recuperación. en medio mínimo sólido M9. en las zonas aledañas a los efluentes de la refinería de petróleo de la bahía de Cartagena. caracterizar e identificar las cepas que tengan potencial de degradación de fenol. en la bahía de Cartagena. identificando el género y la especie. aisladas en los diferentes puntos de muestreo. en el área de microbiología y ambiente saludable. Conserva las cepas con potencial de degradación de fenol caracterizadas bioquímicamente. Observar el potencial de degradación de las cepas presuntivas de Pseudomonas recuperadas. Caracterizar bioquímicamente mediante sistema ID 32 GN. midiendo densidad óptica durante 7 días.OBJETIVOS GENERAL Hacer un sondeo de bacterias del género Pseudomonas presentes en un ecosistema marino y a través de pruebas bioquímicas. Comparar el comportamiento poblacional de las bacterias del género Pseudomonas. ESPECÍFICOS Recuperar mediante técnicas microbiológicas las especies del género Pseudomonas en la zona de influencia de los vertimientos de la refinería de petróleo. para que contribuyan como insumo a estudios posteriores. sentando bases para estudios futuros que busquen desarrollar proyectos de biorremediación.

O – 67 UFC/100 ml 68 -134 UFC/100 ml 135 – 200 UFC/100 ml Escaso Moderado Abundante Los rangos se obtuvieron dividiendo 200 como límite máximo para obtener 3 intervalos de 67 colonias cada uno aproximadamente.Tabla. Relación UFC – informe cualitativo de crecimiento para conteo de colonias presuntivas de Pseudomonas. 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 Compos #1 Compos #2 Compos #3 Compos #4 Compos #5 188 176 154 126 159 145 144 Compos #6 Compos #7 .

.Características macroscópicas de las colonias aisladas de cada una de las submuestras. en la última semana del mayo del 2004. en la última semana de mayo del 2004. de la zona de influencia de los vertimientos de la refinería de petróleo en la bahía de Cartagena. en la bahía de Cartagena. 120% 100% 100% 80% 60% 40% 20% 0% Pi gm en to Bl an ca Am ar i ll a M ar Tr ró an n sp ar en te Pe qu eñ a M ed ia na G ra nd e Bo rd e en Bo te rd ro e I rr eg ul ar C on Si n ha lo ha lo 35% 18% 47% 76% 65% 58% 41% 35% 12% 6% 6% Tamaño Color Tipo de borde Presencia Halo 6% 0% Positiva Retardada Negativa 94% Porcentaje prueba de oxidasa en las cepas aisladas puras de la zona de influencia de los vertimientos de la refinería de petróleo.

01 0.14 0.13 0.22-oct.24-oct.15 0.1 0.13 0.17 0.1 0. en medio M9 líquido.19 0.2 0.13 0.14 0.07 0.17 0. en la última semana de mayo del 2004.25-oct.01 0.21 0.15 0.15 0.08 0.15 0.14 0.26-oct.15 0.05 0.18 0.Porcentaje de crecimiento observado en medio mínimo M9 en fase sólida.05 0.28-oct.1 0.1 0.29-oct04 04 04 04 04 04 04 04 04 0.05 0 21-oct.23-oct.03 22-Oct 0.09 0.08 0.22 0. de las cepas aisladas en la zona de influencia de los vertimientos de la refinería de petróleo en la bahía de Cartagena.09 0.14 0.08 0.1 0.06 0.04 0.03 0.18 0.12 0.15 0. de cada una de las cepas aisladas en la zona de influencia de los vertimientos de la refinería de petróleo.14 0.18 0.15 0.07 0.06 0.06 0.24 0.03 0.09 0. en la bahía de Cartagena.13 0.03 26-Oct 0.17 0.12 0.14 0.25 0.04 0. en la última semana de mayo del 2004 21-Oct C1a1 C1b1 C2a1 C2b1 C3a1 C3b1 C4a1 C4b1 C4b2 C5a1 C5a2 C5b1 C6a1 C6b1 C7a1 C7a2 C7b1 Control + Control 0.18 0.18 0.03 28-Oct 0.15 0.1 0.03 0.02 0.11 0.2 0. Resultados de la medida de absorbancia a 540 nm.17 0.01 0.02 0.12 0.08 0.08 0.07 0.15 0.03 29-Oct 0.16 0.02 0.13 0.16 0.01 0.02 0.01 0.07 0.14 0.17 0.08 0.07 0.15 0.24 0.3 0.14 0.08 0.21 0.07 0.11 0.17 0.13 0.21 0.07 0.21 0.09 0.2 0.15 Control + Control - .27-oct.03 0.1 0.16 0.08 0.03 25-Oct 0.12 0.2 C1a1 0.01 0.04 0.02 0.18 0.09 0.1 0.01 0.15 0.04 0. 18% 12% 46% Abundante Moderado Escaso Negativo 24% Tabla.

17 0.2 0.18 0.a 540 nm al 6 día) Abundante Abundante Moderado Moderado Abundante Abundante Abundante Abundante Moderado Abundante Abundante Escaso Negativo Escaso Negativo Moderado Negativo 0.15 0.21 0.21 0.12 0.21 0.16 0.15 0.Tabla . Caracterización bioquímica de cada una de las cepas aisladas con su respetivo potencial de degradación en medio mínimo M9 en fase líquida y sólida.2 0.17 0.21 0.14 0. Cepa aislada Crecimiento medio mínimo M9 Sólido (72 horas) Líquido (pico máximo de Abs .19 Caracterización Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Burkholderia cepacia Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas putida Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas aeruginosa C1a1 C1b1 C2a1 C2b1 C3a1 C3b1 C4a1 C4b1 C4b2 C5a1 C5a2 C5b1 C6a1 C6b1 C7a1 C7a2 C7b1 .15 0.18 0.

“ A S P E C T O S M I C R O B I O LO G I C O S P A R A E L D E S A R R O L L O D E U N PR O C ES O D E B IO R REM ED IA C IO N : ESTU D IO DE U N C A S O C O N FE N O L US A N D O B A C T E R IA S D E L G EN E R O P s e u d o m o n a s A IS L A D A S D E A M B I E N T E S CO N TAM IN ADO S“ ETAPAS ETAPA 1 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN BACTERIANA COMPROBACIÓN DE DEGRADACIÓN CARACTERIZACION BIOQUIMICA DE BACTERIAS ETAPA 2 DEGRADABILIDAD BACTERIANA ETAPA 3 ASPECTOS PARA FERMENTACION). UN BIOPROCESO (FILTRO BACTERIANO / .

BIODEGRADACION DE FENOL EN AGUAS RESIDUALES INDUSTRIALES EN BIOFILTROS ETAPA 3 EN DISEÑO .

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TESIS EN INGENIERIA QUIMICA: ESTUDIO DE INOCULO Y SOPORTES PARAMETROS DEL BIOREACTOR EFICIENCIA DEL BIOFILTRO .BIODEGRADACION DE FENOL EN AGUAS RESIDUALES INDUSTRIALES EN BIOFILTROS PROYECTO PARA CONVOCATORIA ETAPAS ETAPA 1 (AISLAMIENTO SELECTIVO E IDENTIFICACION MICROORGANISMOS DEGRADADORES DE FENOL) TESIS EN BACTERIOLOGÍA: AISLAMIENTO SELECTIVO DE BACTERIAS AEROBIAS COMPROBACIÓN DE DEGRADACIÓN CARACTERIZACION BIOQUIMICA DE BACTERIAS DEGRADADORAS DE ETAPA 2 (DISEÑO Y MONTAJE A ESCALA LABORATORIO DE UN BIOFILTRO AEROBIO PARA LA DEGRADACION DE FENOL EN AGUAS RESIDUALES).

CONCLUSIONES .