Identificacin y Cuantificacin de CN- en semillas

OBJETIVO GENERAL Aplicar tcnicas analticas (volumetra) para cuantificar el contenido de cianuro en semillas de frutos

OBJETIVOS PARTICULARES Identificar que semillas tienes CN en su composicin _ Cuantificar la cantidad de CN que tienen las semillas de ciertos frutos
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HIPTESIS Si realizamos una titulacin de nitrato de plata sobre un extracto de semillas podremos cuantificar la cantidad de cianuros presentes en estas.

Introduccin
El cianuro podemos encontrarlo en diversas formas, por tanto, las fuentes de exposicin son mltiples y no nicamente de origen industrial: Glucsidos cianognicos: En la naturaleza lo encontramos en ciertas plantas en forma de amigdalina, sustancia que a nivel del intestino puede convertirse en cianuro por bacterias. Se puede encontrar, la amigdalina, no solo en las hojas y flores, sino tambin en las semillas y sus envoltorios. Algunos de los vegetales que contienen el precursor del cianuro son la almendra amarga, sorgo, algunas especies de csped, bamb, guisantes, linaza. El principal mecanismo de metabolizacin del cianuro (80%) es su transformacin por las enzimas rodanasa mitocondrial (hgado, riones y msculo esqueltico) y mercaptopiruvato sulfurtransferasa (en hgado, riones y eritrocitos). Ambas enzimas median la transferencia de azufre desde el tiosulfato hacia el cianuro, formando as tiocianato, un compuesto marcadamente menos txico que el cianuro. El paso limitante de esta reaccin es la presencia del tiosulfato como dador de azufre. El cianuro posee la capacidad de unirse a diversas protenas como la mioglobina o las enzimas nitrato reductasa, anhidrasa carbnica, catalasa y diversas metaloenzimas. Tambin afecta el metabolismo de lpidos y el transporte de calcio. Sin embargo, su toxicidad radica principalmente en su capacidad para inhibir la enzima citocromo oxidasa, ltima enzima en la cadena de transporte de electrones Debido a su alta afinidad por el hierro en estado frrico (Fe3+), el cianuro se une casi inmediatamente al hierro presente en el grupo hemo del complejo citocromo aa3 presente en los tejidos. De esta manera, inhibe la fosforilacin oxidativa y detiene la produccin de la mayor parte del ATP celular, por impedir la respiracin aerobia. Se genera as una hipoxia histotxica, ya que los tejidos no extraen oxgeno de la sangre por no poder utilizarlo. Provocando arterializacin de la sangre venosa, que tiene un alto contenido de oxgeno y un color rojo similar al de la sangre arterial. Ante esta situacin, las clulas recurren a la respiracin anaerobia, con menor produccin de ATP y mayor produccin de lactato e hidrogeniones, resultando en una acidosis metablica. Al afectar este proceso rganos esenciales, se comprende por qu al poco tiempo sobreviene la muerte. Las dosis letales de cianuro se han calculado en 200 a 300 mg para las sales de potasio y de calcio (por va oral), 50 mg para el HCN lquido (va oral), y 200 a 300 ppm de HCN gaseoso, para provocar la muerte de forma casi inmediata (menores exposiciones por ms tiempo pueden tambin resultar letales).

PROPUESTA EXPERIMENTAL Tabla 1. Material, sustancias y reactivos necesarios. Material : Sustancias: Buretas de 25 mL Esptula Mantilla chica Matraz aforado de 50ml Matraz erlenmeyer 50ml Mortero con pistilo Parrilla c/ agitacin magntico Pipeta volumtrica 2ml Pipetas de 2ml Pipetas de 5ml Piseta Propipetas Soportes con pinzas y nuez Varilla de vidrio Vasos de pp. de 100ml Vasos de pp. de 250 mL Vasos de pp. de 50 mL Matraz de bola Refrigerante Codos 2 1 2 2 5 2 1 2 2 2 1 3 2 2 2 2 4 2 2 4 Semillas de manzana Semillas de uva Semillas de durazno Semillas de ciruela Fruto rojo de arbusto de FESC

Reactivos: Acido pcrico 1% CO3Na2 10% Ioduro de potasio NH4OH 6N NaOH Nitrato de plata 0.02N

ANLISIS CUALITATIVO Ensayo de Grignard: Se fundamenta en que el cido pcrico en presencia del HCN, liberado de la muestra cida, forma isopurpurato alcalino, de color rojo al rojo naranja en el transcurso de cinco minutos. Este nos va a ayudar para saber en qu semillas tenemos presentes CN- para despus hacer la valoracin cuantitativa

Procedimiento: Macerar semillas con agua

Tiras Grignard: Embeber tiras de papel filtro con solucin acuosa de cido Pcrico y escurrir el exceso. Colocar carbonato de sodio. Si el papel se prepara en el momento, el ensayo presenta su mxima sensibilidad. El reactivo dura indefinidamente. El papel es puesto en la boca del recipiente que contiene la muestra a analizar. Un color rojo naranja indica resultado positivo. ENSAYOS CUANTITATIVOS Los ensayos cuantitativos permiten valorar la cantidad del txico Mtodo de Denigs Constituye una valoracin en donde se forma una sal estable de AgCN y el exceso de Ag+ en el punto final forma un compuesto de color amarillo con el in ioduro de acuerdo con las siguientes reacciones:

Imagen1. Reacciones

Procedimiento: Macerar las semillas en agua y dejar reposar de 10 a 14 horas Destilar el macerado de semillas y dejar caer el destilado en NaOH para estabilizar el ion cianuro aforar a 250 ml con agua Tomar 50 ml de destilado y agregar 4ml NH4OH + 1 ml de KI al 10%(indicador) Titular con solucin de nitrato de plata 0.02N hasta aparicin de turbidez permanente.(algo de color) Realizar clculos para saber concentracin

Imagen 2. Organigrama R1.- Residuos de muestras maceradas tirar en tarja R2.- Residuos de papel filtro con reactivo Guignard almacenar R3.- Residuos de titulacin separa almacenar en contenedor especial

RESULTADOS Tabla de resultados parte 1 MUESTRA HAY PRESENCIA DE CN-

Tabla de resultados parte 2 MUESTRA VOLUMEN GASTADO DE NITRATO DE PLATA

CALENDARIO DE ACTIVIDADES Tabla 5 cronograma. DA ACTIVIDAD Pedir y lavar material; as como la preparacin de las soluciones que se usaran durante la experimentacin. Anlisis cualitativo de CN- semillas muestra Anlisis cuantitativo de CN- en semillas muestras Hacer el anlisis de lo obtenido y tratamiento de residuos comenzar el reporte

Bibliografa UNJBG, Facultad de Ciencias Mdicas Txicos Cianhdricos Tanca-Peru. 2010. PDF www.biol.unlp.edu.ar/toxicologia/seminarios/parte_1/toxicos_metalicos/acidos.html http://www.ehowenespanol.com/fuente-natural-cianuro-plantas-sobre_83237/ http://www.magrama.gob.es/ministerio/pags/biblioteca/revistas/pdf_plagas%2FBSVP16-02-499-503.pdf