PreLBM 352001 66

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA Programa: Ingeniera Agroforestal
PREINFORME: Laboratorio Bioqumica Metablica-LBM Nombre y Apellido: Mara de los ngeles Oate Cdigo: 26871741; Fecha: 04-05-2013
BIOQUIMICA METABOLICA PREINFORMES
MARIA DE LOS ANGELES OATE LPEZ CDIGO 26871741 GRUPO: 352001_66
Tutora NIDIA CARREO
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA - UNAD ESCUELA DE CIENCIAS AGRARIAS, PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE. PROGRAMA DE INGENIERIA AGROFORESTAL CEAD VALLEDUPAR 2013
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA Programa: Ingeniera Agroforestal PREINFORME: Laboratorio Bioqumica Metablica-LBM Nombre y Apellido: Mara de los ngeles Oate Cdigo: 26871741; Fecha: 04-05-2013
TTULO DE LA PRCTICA CAPACIDAD AMORTIGUADORA BIOLGICAS. Y POTENCIAL AMORTIGUADOR DE MUESTRAS
Mentefacto conceptual
Se usa la tcnica potenciomtrica que consiste en cuantificar la concentracin de una sustancia en disolucin, relacionando su actividad inica con la fuerza electromotriz existente en la clula electroqumica con la que entra en contacto.
Haciendo uso de la titulacin volumtrica logramos conocer que tan cida o bsica es una solucin o su concentracin.
Practica de laboratorio: capacidad amortiguadora y potencial amortiguador de muestras biolgicas.
Es importante realizar anlisis del potencial bufferante de muestras d origen biolgico.
Se busca cuantificar la capacidad amortiguadora de muestras biolgicas
Harina
Orina
Concentrado
Forraje
Sangre
1. MATERIALES Y MTODOS 1.1 Materiales y Equipos requeridos Materiales Vidriera Equipos Balanza analtica Beaker de 250mL Pipetas graduadas de 10mL Soporte universal Potencimetro
Muestras biolgicas (concentrado, orina, sangre, harina y forraje ).
Erlenmeyer de 125Ml. Esptula metlica Agitador de vidrio Probeta graduada de 100mL Bureta de 25mL Equipo de titulacin 1.2 Reactivos a utilizar Reactivo Hidrxido de sodio Acido clorhdrico Fenolftalena Agua destilada Solucin buffer fosfato Frmula NaOH HCl C20H14O4 H2O KH2PO4 Concentracin 0,1N 0,1N 2 gotas 20ml 1ml /ml de H2O
1.3 Procedimiento 1.3.1 Toma de muestra (cuando se requiere) Las muestra de sangre fue obtenida de un deposito de sangre en un expendio de carne, la orina la aporto uno de los compaeros de curso. El procedimiento llevado a cabo para llevar a cabo el procedimiento de determinacin de la capacidad y potencial amortiguador se utilizaron muestras de origen biolgico (orina, concentrado, sangre, forraje, harina.) y reactivos qumicos (buffer fosfato, NaOH, HCl), y algunos equipos que nos ayudaron en dicho experimento. Con el fin de determinar la variacin de acidez (segn escala pH) y la capacidad amortiguadora de dicha solucin buffer, se realizaron procesos de medicin con el phmetro, tomando 2 registros; El primero en la muestra biolgica estril y el segundo al adicionarle HCl. Con el uso de la bureta se realizo la titulacin con NaOH. Los datos obtenidos se registraron en tablas y de acuerdo a estos se hicieron los clculos necesarios los cuales determinaron la capacidad y potencial amortiguador de la muestra biolgica 1.3.2 EN LABORATORIO (Con base en lo descrito en las guas, En este espacio, elaborar un diagrama de flujo mapa conceptual del procedimiento que se va a desarrollar en laboratorio, puede incluir dibujos)
Parte I: Pruebas para el Mtodo de titulacin volumtrica

PRUEBAS PARA EL MTODO DE TITULACIN VOLUMETRICA Se lleva a cabo el proceso
1. Alistamos 3 beaker erlenmeyer pequeos y rotular as: 1, 2, 3.
2. Adicionamos al beaker uno, 20mL de agua destilada, al dos, 20mL de solucin buffer, al tercero, 20 mL de leche.
a. se coloco 2 gotas de fenolftalena y agitamos por 10 segundos.
3. se procedi a llenar la bureta con solucin de NaOH 0,1N para hacer la titulacin.
a. se registraron los datos en la tabla.
PRUEBAS PARA LA TCNICA POTENCIOMTRICA
Se lleva a cabo el sig proceso
1. se alistaron 5 beakers erlenmeyers y se rotularon del 1 al 5
2. Al primer frasco, se adicionan 5 gramos de concentrado pulverizado y 100 mL de agua destilada.
a. se agit con la varilla de vidrio por 5min, filtramos y se midi el pH de este filtrado, se registr como pH1.
3. Posteriormente, agregamos 5 mL de HCl 0,1N, agitar de nuevo por un minuto y volvimos a medir el pH2.
4. En el segundo y tercer beakers, repetimos el procedimiento con las muestras de harina y forraje picado, respectivamente
5. En el cuarto vaso, se agreg 1mL de sangre y 19 mL de agua destilada, se agit por 30 segundos y medimos pH1, luego, adicionamos 5mL de NaOH 0,1N, agitamos por un minuto y volver a observar el pH final (pH2).
a. se agit con la varilla de vidrio por 5min, filtramos y se midi el pH de este filtrado, se registr como pH1.
Se registraron datos en la tabla.
los
6. En el quinto frasco, se colocamos 20mL de orina junto con 20mL de agua destilada, agitamos por 30 segundos y registramos el pH1, luego, se adicionaron 5mL de NaOH 0,1N, agitamos nuevamente por 1min y evaluamos el pH final (pH2).
2. TABLA DE DATOS (Ver guas de laboratorio) Tabla 1. Datos volumtricos para capacidad amortiguadora de muestras biolgicas
Muestras Agua destilada Buffer fosfato Leche
Vm (ml) 20 20 20
VNaOH 0,7 0,3 12,8
0,1N (ml)
Tabla 2. Datos potenciomtricos para capacidad amortiguadora de muestras biolgicas Muestras concentrado Harina Forraje Sangre Orina Wm (g) 5g 5g 5g 1 ml 20 ml Vm (ml) 5 ml 5 ml 5 ml 5 ml 5 ml pH1 6,23 5,96 7,62 6,08 6,60 pH2 5,77 5,30 6,60 9,16 7,87
Tabla 3. Valores de capacidad y potencial amortiguador para las muestras analizadas muestras (mEq HCl (mEqNaOH /pH) /pH) Concentrado Harina Forraje Sangre Orina 21.700 15.100 9.800 16.200 39.370 4,33 4,17 3,99 4,20 4,59
3. RESULTADOS ESPERADOS (segn lo planteado en las guas de laboratorio) Se espera que los datos de pH varen de acuerdo al tipo de muestras biolgicas, del mismo modo la capacidad y el potencial amortiguador de cada una de las variantes. Las soluciones reguladoras o buffer son capaces de mantener la acidez o basicidad de un sistema dentro de un intervalo reducido de pH. Realizar un anlisis comparativo del potencial bufferante de muestras de origen biolgico, como: leche, sangre, orina, concentrado y forrajes 4. GLOSARIO
Buffer: Un tampn, buffer, solucin amortiguadora o solucin reguladora es la mezcla en concentraciones relativamente elevadas de un cido dbil y su base conjugada, es decir, sales hidrolticamente activas. Tienen la propiedad de mantener estable el pH de una disolucin frente a la adicin de cantidades relativamente pequeas de cidos o bases fuertes. Este hecho es de vital importancia, ya que solamente un leve cambio en la concentracin de hidrogeniones en la clula puede producir un paro en la actividad de las enzimas. Tcnica potenciometrica: Se trata de una tcnica analtica que permite cuantificar la concentracin de una sustancia en disolucin, relacionando su actividad inica con la fuerza electromotriz existente en la clula electroqumica con la que entra en contacto. Capacidad amortiguadora: es la cantidad de cido (H+) o de base (OH-) que una solucin tampn puede neutralizar antes de que el pH del medio ambiente que est siendo regulado cambie apreciablemente. Esta capacidad depende de la cantidad de cido y de sal que componen la solucin amortiguadora. A modo de ejemplo, analizaremos la pr4eparacin del tampn acetato (cido actico- acetato de sodio) de pH = 5 PH: El pH (potencial de hidrgeno) es una medida de acidez o alcalinidad de una disolucin.
TTULO DE LA PRCTICA:
DETERMINACIN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE), POR EL MTODO DE FENOL-CIDO SULFRICO: INTRODUCCIN El proceso de determinacin de carbohidratos no estructurales (CNE), por el mtodo de fenol-cido sulfrico es un procedimiento que nos ayuda a conocer dichas proporcionas en alimentos lquidos, extractos lquidos, materiales de celulosa, entre otros, esto se logra gracias a las reacciones llevadas en laboratorio , ya que los azucares simples, oligosacridos, polisacridos, y sus derivados dan una coloracin al entrar en contacto con fenol acido sulfrico.
Mentefacto conceptual Por el mtodo de fenol-cido sulfrico Mediante la tcnica en laboratorio se evidencia un color amarillo-naranja muy estable cuando reacciona con fenol acido sulfrico. Este mtodo determina la cantidad de carbohidratos totales No estructurales, basndose en su contenido de almidones hidrolizables y azcares solubles.
DETERMINACIN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE).
Se hace una mezcla de reactivos para lectura espectrofotomtrica
1. MATERIALES Y MTODOS 1.1 Materiales y Equipos requeridos Materiales Vidriera
Filtrado para carbohidratos no estructurales
Equipos Tubos de ensayo Gradilla pinzas para bureta erlenmeyer de 125mL pipetas de 5 y 10mL matraz aforado de 100mL bao termostatado beaker de 400mL bureta de 25mL soporte universal
1.2 Reactivos a utilizar Reactivo Fenol Acido sulfrico Hidrxido de sodio Agua destilada
Frmula C6H5OH H2SO4 NaOH H2O
Concentracin 5% 1N O,6N 20 mL
1.3 Procedimiento 1.1 Extraccin: Pesar +/- 1.0g de muestra de forraje, en balanza analtica y registrar como: (Wm) depositarla luego en un vaso de precipitado y agregar 50 mL de solucin de HCl 0,6N. Agitar constantemente con la varilla de vidrio durante 3 minutos. Llevar el breaker con la solucin al bao termostatado y calentar a 90C, durante 10 min. Dejar enfriar por 5 min y filtrar sobre papel filtro. Medir el volumen del filtrado (Vf) y pasar 5mL a un tubo de ensayo, adicionar a ste 5mL de NaOH 0,6N, agitar por 15 segundos, tapar y rotular as: FCNE: Filtrado para carbohidratos no estructurales. 1.3.2 EN LABORATORIO DETERMINACIN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE), POR EL MTODO DE FENOL-CIDO SULFRICO:
Depositarla luego en un vaso de precipitado Pesar +/- 1.0g de muestra en balanza analtica y registrar
Agregar 50 mL de solucin de HCl 0,6N.y registrar
Llevar el beaker con la solucin al bao termostatado y calentar a 90C,durante 20 min
Dejar enfriar por 5 min y filtrar. pasar 5mL a un tubo de ensayo, adicionar a ste 5mL de NaOH 0,6N, agitar por 15 segundos, tapar y rotular as: FCNE
Durante 20 min y Medir el volumen del filtrado(Vf)
Alistar el espectrofotmetro y calibrar el aparato con el tubo blanco , ajustando a 100% de Transmitancia (%T) y 0,000 de Absorbancia (A)
Leer el % de Transmitancia (T),de los tubos st y m, convertir estos valores a Absorbancia (A), mediante la ecuacin : A =2- Log%T , trabajar con 3 cifras decimales,ejemplo:0,023.
2. TABLA DE DATOS (Ver guas de laboratorio)
3. RESULTADOS ESPERADOS (segn lo planteado en las guas de laboratorio) Con en el proceso llevado a cabo en el laboratorio se busca la determinacin y composicin de las muestras en cuanto a su contenido de carbohidratos. Con este laboratorio se lograra mostrar definiciones de algunos conceptos, procedimientos, datos y soluciones que debemos tener y manejar como la base fundamental del conocimiento de la bioqumica metablica. Se espera que los resultados obtenidos sean similares a los encontrados en la literatura. Se busca corroborar si los carbohidratos son particularmente sensibles a cidos fuertes y altas temperaturas. 4. GLOSARIO Mtodo de fenol-sulfrico: Este mtodo propuesto por Dubois en 1956 se fundamenta en que los carbohidratos son particularmente sensible a cidos fuertes y altas temperaturas. Bajo estas condiciones una serie de reacciones complejas toman lugar empezando con una deshidratacin simple, si se contina el calentamiento y la catlisis cida se producen varios derivados del furano que condensan consigo mismos y con otros subproductos para producir compuestos coloridos producto de la condensacin de compuestos fenlicos y con heterociclos con el nitrgeno como heterotomo. Termostato: Es el componente de un sistema de control simple que abre o cierra un circuito elctrico en funcin de la temperatura. Su versin ms simple consiste en una lmina bimetlica como la que utilizan los equipos de aire acondicionado para apagar o encender el compresor. Acido sulfrico: Es un compuesto qumico extremadamente corrosivo cuya frmula es H2SO4. Es el compuesto qumico que ms se produce en el mundo, por eso se utiliza como uno de los tantos medidores de la capacidad industrial de los pases. Lectura espectrofotomtrica: es un mtodo de anlisis que hace uso de la interaccin entre la materia y la energa radiante la cual se refiere a como la ondas electromagnticas se propagan y trasportan sin trasferencia de materia.
TTULO DE LA PRCTICA CUANTIFICACIN DE NITRGENO NO PROTEICO (NNP) (Fraccin A de Van Soest ) Mentefacto conceptual
Se utiliza el cido Tricloroactico (ATA) tambin denominado fraccin A de Van Soest , CUANTIFICACIN DE NITRGENO NO PROTEICO (NNP) (Fraccin A de Van Soest. El nitrgeno no proteico (NNP) en el rumen de algunos animales se transforma en amoniaco. Con el uso de tcnicas instrumentales analticas de Kjeldhal y espectrofotomtricas se determina el contenido de NNP y Protena verdadera (PV) en forrajes y concentrados.
Puede eliminarse a travs de la orina,
La mayora de los microorganismos ruminales pueden sintetizar protena a partir de amoniaco proveniente de fuentes no proteicas tales como la urea
El proceso de reciclaje es ms eficiente cuando la dieta tiene niveles bajos de protena.
1. MATERIALES Y MTODOS 1.3 Materiales y Equipos requeridos Materiales Vidriera
Filtrado para carbohidratos no estructurales
Equipos Tubos de ensayo gradilla pinzas para bureta Erlenmeyer de 125mL pipetas de 5 y 10mL matraz aforado de 100mL bao termostatado beaker de 400mL bureta de 25mL soporte universal
1.4 Reactivos a utilizar Reactivo cido tricloroacetico (ATA) Agua destilada 1.3 Procedimiento Pesar +/- 1,0 g de muestra (forraje) y colocar en vaso de precipitado. Frmula CI3- C- COOH) H2O Concentracin 10 %. 20 mL
Adicionar 30 mL de agua destilada, agitar por un minuto. Dejar reposar la mescla por un minuto. Adicionar 20 mL de solucin de ATA, agitar por un minuto. Reposar a temperatura ambiente 15 minutos. Filtrar con papel filtro sobre probeta. Medir el volumen de filtrado (VF). Recolectar 5 Ml del filtrado, colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo: FNNP- filtrado para nitrgeno no proteico. Tuvo con la muestra de forraje y Proceso de filtrado nitrgeno no proteico (NNP) 1.3.2 EN LABORATORIO
CUANTIFICACIN DE NITRGENO NO PROTEICO (NNP) (Fraccin A de Van Soest )
Adicionar 30 mL de agua destilada, agitar por un minuto.
Pesar +/- 1,0 g de muestra (forraje) y colocar en vaso de precipitado
Dejar reposar la mescla por un minuto.
Adicionar 20 mL de solucin de ATA, agitar por un minuto.
Reposar a temperatura ambiente 15 minutos.
Medir el volumen de filtrado (VF).
Filtrar con papel filtro sobre probeta y medir el volumen de filtrado (VF).
Recolectar 5 Ml del filtrado, colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo: FNNPfiltrado para nitrgeno no proteico. Tuvo con la muestra de forraje y Proceso de filtrado nitrgeno no proteico (NNP)
2. TABLA DE DATOS (Ver guas de laboratorio)
3. RESULTADOS ESPERADOS (segn lo planteado en las guas de laboratorio) Con este laboratorio se lograra mostrar definiciones de algunos conceptos, procedimientos, datos y soluciones que debemos tener y manejar como la base fundamental del conocimiento de la bioqumica metablica. Debido a que cerca del 90 % del nitrgeno total (NT) se encuentra en forma insoluble con el desarrollo del laboratorio se busca conocer el contenido de este en una muestra de forraje y concentrados. Se busca comprender la manera en la que en nitrgeno a travs de muchos procesos internos del animal se convierte en amoniaco o gas carbnico. Se espera que los resultados obtenidos sean similares a los encontrados en la literatura. Cuantificar el Nitrgeno en el filtrado, por mtodo espectrofotomtrico de Biuret-Lowry. Se busca desarrollar los clculos siguiendo las formulas propuestas en la gua de laboratorio. 4. GLOSARIO Nitrgeno no proteico: Se denomina Nitrgeno no proteico a los compuestos de nitrgeno que pueden ser convertidos en protenas por algunos organismos vivos. Muchos organismos superiores no pueden obtener aminocidos de otras formas, ms que absorbindolos de la dieta. Los cuales pueden ser convertir algunos aminocidos en otros diferentes. Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amonaco, nitritos y nitratos y otros como la urea, el biuret o el cido rico. Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos, las plantas y algas, bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos. Espectrofotomtricas: Un espectrofotmetro es un instrumento usado en el anlisis qumico que sirve para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentracin o reacciones qumicas que se miden en una muestra. Tambin es utilizado en los laboratorios de qumica para la cuantificacin de sustancias y microorganismos. Anlisis Kjeldahl: Las determinaciones de nitrgeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias. El mtodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales: digestin, destilacin y valoracin. Forraje: Pasto puede ser el verde plantado o el seco. El forraje es cualquier hierba seca que sirva de alimento a los animales.
BIBLIOGRAFA
http://quimicosfarmacobiologos.bligoo.com.mx/media/users/10/523320/files/51871/ManualBioqu_mica_II.pdf http://es.scribd.com/doc/20270275/Informe-N%C2%BA1-laboratorio-de-bioquimica-II http://www.elergonomista.com/quimica/q9.html http://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3lisis MODULO BIOQUIMICA METABOLICA, UNAD http://www.a14.san.gva.es/laboratorio/web/potenciometricas.htm http://espanol.answers.yahoo.com/question/index?qid=20101014210010AADGjg6 http://www.slideshare.net/ekathy80/mentefacto-conceptual

PreLBM 352001 66

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

PreLBM 352001 66

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA Programa: Ingeniera Agroforestal

BIOQUIMICA METABOLICA PREINFORMES

MARIA DE LOS ANGELES OATE LPEZ CDIGO 26871741 GRUPO: 352001_66

Tutora NIDIA CARREO

TTULO DE LA PRCTICA CAPACIDAD AMORTIGUADORA BIOLGICAS. Y POTENCIAL AMORTIGUADOR DE MUESTRAS

Practica de laboratorio: capacidad amortiguadora y potencial amortiguador de muestras biolgicas.

Es importante realizar anlisis del potencial bufferante de muestras d origen biolgico.

Se busca cuantificar la capacidad amortiguadora de muestras biolgicas

Muestras biolgicas (concentrado, orina, sangre, harina y forraje ).

Parte I: Pruebas para el Mtodo de titulacin volumtrica

1. Alistamos 3 beaker erlenmeyer pequeos y rotular as: 1, 2, 3.

a. se coloco 2 gotas de fenolftalena y agitamos por 10 segundos.

a. se registraron los datos en la tabla.

PRUEBAS PARA LA TCNICA POTENCIOMTRICA

Se lleva a cabo el sig proceso

1. se alistaron 5 beakers erlenmeyers y se rotularon del 1 al 5

2. Al primer frasco, se adicionan 5 gramos de concentrado pulverizado y 100 mL de agua destilada.

Se registraron datos en la tabla.

Muestras Agua destilada Buffer fosfato Leche

VNaOH 0,7 0,3 12,8

DETERMINACIN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE).

Se hace una mezcla de reactivos para lectura espectrofotomtrica

1. MATERIALES Y MTODOS 1.1 Materiales y Equipos requeridos Materiales Vidriera

Filtrado para carbohidratos no estructurales

Frmula C6H5OH H2SO4 NaOH H2O

Agregar 50 mL de solucin de HCl 0,6N.y registrar

Llevar el beaker con la solucin al bao termostatado y calentar a 90C,durante 20 min

Durante 20 min y Medir el volumen del filtrado(Vf)

2. TABLA DE DATOS (Ver guas de laboratorio)

Puede eliminarse a travs de la orina,

El proceso de reciclaje es ms eficiente cuando la dieta tiene niveles bajos de protena.

1. MATERIALES Y MTODOS 1.3 Materiales y Equipos requeridos Materiales Vidriera

Filtrado para carbohidratos no estructurales

CUANTIFICACIN DE NITRGENO NO PROTEICO (NNP) (Fraccin A de Van Soest )

Adicionar 30 mL de agua destilada, agitar por un minuto.

Pesar +/- 1,0 g de muestra (forraje) y colocar en vaso de precipitado

Dejar reposar la mescla por un minuto.

Adicionar 20 mL de solucin de ATA, agitar por un minuto.

Reposar a temperatura ambiente 15 minutos.

Medir el volumen de filtrado (VF).

2. TABLA DE DATOS (Ver guas de laboratorio)

También podría gustarte