Clase N 4 Fisiologa I Fisiologa del musculo esqueltico - El msculo se compone en un 75% de agua, 20% de protenas y un 5% de sales inorgnicas, fosfatos

de alta energa, urea, iones aa, lpidos y carbohidratos. - Funciones del tejido muscular: movimiento, posiciones de estabilizacin del cuerpo, termognesis. - Dividimos los msculos en dos grandes grupos Tnicos: tienen un tono muscular que es mayor, estado de semicontraccin del msculo en estado de reposo, hay una pequea descarga de neurotransmisor que llega a la placa motora lo cual genera una pequea liberacin de calcio lo cual producir una contraccin. Msculos del cuello, zona de la columna. Fsicos: se encuentran en extremidades, tienen un tono muscular menor. Gnesis muscular esqueltica - Primera etapa: provienen del mesodermo, que generan clulas musculares llamadas mioblastos hipoaxiales y epiaxiales (clula mononucleada que se fusionan en clulas polinucleadas). - Segunda etapa: maduran miocitos formando miotubos (clulas polinucleadas que dan el aspecto estriado) apareciendo adems clulas satlites en la membrana basal que proliferan en el tejido lesionado reparndolo. Es una clula indiferenciada que es estimulada por factores de crecimiento dependientes de insulina. Ubicadas en la periferia muscular, proliferan con estmulos como micro desgarro o dao muscular. Su acciones proliferar al sitio de lesin. - ltima fase: En la ltima fase se diferencia la fibra muscular. Protenas que participan en la miognesis (predomina genotipo sobre fenotipo) son la MyoD, MyoG, Myf5, Mrf4 y miogenina, estimuladas por Paf3 y Paf7. *Hiperplasia es el aumento del nmero de clulas, la hipertrofia el aumento del dimetro del msuclo (adicin en paralelo), mientras que la adicin en serie es el estiramiento del msculo.

Tipos de fibras musculares en seres humanos La Map kinasa P38 (MAPK P38) determina el tipo de fibra muscular: - Fast Twich (FT): Blanca y glicoltica. Tipo 2 (MHCIIA, MyH IIA, MHC IIX, MyH IIX). Su frecuencia es de 50-75 Hz. Desde el punto de vista genotpico, estamos predispuestos a generar este tipo de fibras, posteriormente y segn el ambiente estas fibras se podran diferenciar en isoformas ms lentas o fibras ST. - Slow Twich (ST): Roja y oxidativa. Tipo 1 (MHC I, MyH I), de encendido lento derivan de las anteriores. Su frecuencia es de 15-25 Hz
LENTAS ST ROJAS Predominantemente oxidativa Tipo I MHCI RPIDAS SF BLANCAS Predominantemente glicoltica Tipo IIA, IIX, IId, IId(x) MHCIIA, MHCHX,MyHIIA,MyHIIX

Proceso oxidativo: fosforilacin oxidativa es un proceso metablico que utiliza energa liberada por la oxidacin de nutrientes para producir adenosn trifosfato (ATP). Proceso glicoltico: escisin de una molcula de glucosa en condiciones anaerobias ( sin la intervencin del O2) hasta ser reducida a 3 molculas de cido Pirvico ( producto final de la Gluclisis).

- En el humano existen dos tipos de fibras rpidas 2A y 2X 2DX, donde esta ltima es ms rpida. La fibra 2B solo se expresa en mamferos pequeos. Poseen R.S ms desarrollados para liberar ms Ca++ - En el proceso de plasticidad estas fibras puras pueden ser modificadas apareciendo isoformas.

I I/IIA IIA/IIX IIX/IIA II

Dentro del proceso de miognesis hay muchas protenas involucradas en la elaboracin o construccin del msculo, pero hay protenas que se irn expresando al mismo tiempo en que este msculo se vaya desarrollando.

Especificacin de la fibra muscular: va de calcineurina NFAT

- La actividad de una alfa motoneurona lenta va a producir una liberacin de calcio en el msculo esqueltico, la cual activa una calmodulina, la cual a su vez activa una calcineurina. Calcineurina desfosforila al factor de transcripcin NFATc1 lo cual produce que este se transloque o migre hacia la zona del ncleo donde comenzara la generacin de fibras lentas y la inhicin del produccin de fibras rpidas. - La actividad del nervio va a generar cambios en el fenotipo de la fibra muscular; segn la descarga del nervio, su actividad o frecuencia podemos modificar la produccin de fibras rpidas a fibras lentas. Sin embargo, tambin hay hormonas que pueden controlar este proceso, como por ejemplo el factor de crecimiento.

*Para considerar: los estudios realizados no siempre consideran la degradacin de fibras y solo se enfocan en la sntesis. Cuando hay un crecimiento de un msculo o subimos una escalera y generamos fibras lentas podemos a la vez estar degradando otras fibras.

- Cmo la disminucin de la actividad neuromuscular (parlisis) genera una mayor produccin de fibras rpidas? Esto se debe al esquema que se mostr anteriormente, al haber un predominio de fibras lentas o solo considerando que estas fibras vienen de las fibras rpidas, en un estado de inmovilizacin, por genotipo, volveremos solo a la produccin de fibras rpidas (las lentas se formaban por trabajo muscular, msculo que no trabaja, le llega menos oxgeno, menos oxgeno ms gliclisis que oxidacin) Isoformas de protenas miofibrilares en fibras lentas y rpidas Existen distintas isoformas para msculos lentos y para msculos rpidos, es por esto que el proceso de transicin del paso de fibras es lento.

Organizacin del msculo (Tejido conectivo) Miofibrillas (Endomisio) Fibra Muscular (Permimiseo) Fascculo (Epimiseo)

Organizacin de protenas sarcomricas

- Actina, Troponina (T,I,C), Tropomiosina. La actina en su cabeza contiene 3-metil histidina que se libera frente dao musuclar. - Miosina: Motor molecular, su cabeza se une a ATP. La hidrlisis de este permite el movimiento. La velocidad de la ATPasa es proporcional a la velocidad anterior. - Titina: Provee elasticidad y estabiliza la miosina permitiendo su unin a la lnea Z. La protena est formada por mltiples dominios, aproximadamente 244, que contribuyen a su estructura. Estos dominios responden a la tensin desplegndose y volviendo a renaturalizarse, de manera que la cadena polipeptdica acta como un resorte dentro del sarcmero, unidad funcional y contrctil del msculo. Esta protena es importante en la contraccin del msculo estriado y sus tejidos asociados. Acta conectando la lnea Z con la lnea M en el sarcmero, de modo que contribuye a la transmisin de fuerza en la lnea Z y libera tensin en la regin de la banda I. Adems, limita el margen de movimiento del sarcmero cuando ste se tensiona, proporcionando al msculo cierta rigidez. Durante la relajacin, la titina genera tensin pasiva mediante extensin elstica cuando se distiende el sarcmero. - Pectina y Desmina: Unen sarcmero en paralelo - Costamrica: Une la miofibrilla al sarcolema - Nebulina: estabiliza filamentos de actina

Sarcmero - Corresponde a la unidad contrctil del msculo. Est delimitado por las lneas Z. Banda A corresponde a filamentos gruesos y delgados. Banda I corresponde a filamentos delgados y la banda H a Filamentos gruesos. Banda M o miomesina o lnea central: Presenta creatina fosfokinasa (CFK) que cataliza la conversin de ADP a ATP. Al romperse el msculo es liberada.

Estructura del Musculo: - Cisternas Terminal: A cada lado del tbulo T, formado por retculos sarcoplasmticos. - Tbulo T: Invaginacin del sarcolema que permite la propagacin del impulso nervioso al interior de la fibra. - Triada: Corresponde a dos cisternas terminales y un tbulo T al medio.

Organizacin de Filamentos Delgados: - Actina F (fibrilar): formada por monmero de actina G - Tropomiosina: Estabiliza a la actina unindose entorno a ella. - Complejo Troponina (Tn) Tn I: Inhibe la interaccin actina miosina (-Ca++) Tn C: Se une al Ca++ Tn T: Se une a tropomiosina

Organizacin de Filamentos Gruesos - Presenta una cabeza que se une a dos cadenas livianas, un cuello y una cola. La cola es la parte pesada y el cuello con la cabeza la parte liviana. - La cabeza globular (S-1) posee la actividad ATPasa, cuya actividad enzimtica es acelerada por la unin con actina. Forma puentes cruzados con actina de los filamentos delgados. - La cabeza se asocia con dos cadenas livianas con funciones: Esencial: funcin ATPasa Regulatoria: influye en la actividad cintica entre actina y miosina

Contraccin muscular

1. Recordemos que la miofibrilla es un conjunto de compartimientos cilndricos que se van ubicando uno al lado del otro, constituyendo un cilindro alargado. Cada uno de esos cilindros es un sarcmero y limita con su vecino por una lnea o banda llamada, lnea o banda z. 2. A cada lado de la lnea z se insertan filamentos cilndricos delgados que son los filamentos de actina. Cada filamento de actina esta formado por una doble hebra de molculas de actina que se enrollan una sobre la otra. En esta organizacin la actina se denomina actina F.

3. Cada filamento de actina esta constituido por unas 400 unidades de actina-G, que es una protena globular con un peso molecular de alrededor de 42 kDa. 4. En el centro del sarcmero se insertan filamentos gruesos, de miosina. Cada uno de estos filamentos est formado por 150 a 360 molculas de miosina. 5. En el recuadro en el filamento grueso, vemos que cada molcula de miosina presenta una cola formada por dos fibras alargadas de meromiosina, que es una variedad de miosina considerada liviana. La cola se continua con un segmento llamado cuello que se une a una estructura de la molcula llamada cabeza, que es una estructura bfida. Al conjunto de la cabeza y cuello se le llama meromiosina pesada. El segmento de unin de la cola con la porcin cuello-cabeza parece funcionar como una articulacin y tiene cierto grado de movimiento. Cada cabeza tiene ATP y propiedades ATP-sicas. 6. En el esquema tradicional de un sarcmero, que normalmente se encuentra rodeado de un sistema membranoso, el retculo sarcoplasmtico. Presenta en su centro una zona ms obscura (banda A) formada por las bandas de miosina que esta separada, a cada lado, de las bandas z, por una zona ms clara (banda I) ocupada por los filamentos de actina. En reposo, los filamentos de miosina estn rodeados ordenadamente por filamentos de actina de modo que en los extremos de la banda A ambos tipos de filamentos coinciden aunque permanecen separados. Ello ocurre porque sobre los filamentos de actina se ubican dos protenas, latroponina y la tropomiosina que constituyen un complejo que evita esa unin. 7. La troponina es una protena globular que se ubica, por pares, sobre el filamento de actina cada 40 nm. Cada troponina esta formada por tres subunidades: 8. Troponina C, que tiene afinidad por el Ca2+ 9. Troponina T, unida a la tropomioisina, 10. Troponina I, que inhibe la formacin de puentes entre la miosina y la actina. 11. Para activar este sistema, hacemos clic en el retculo sarcoplsmico. Cuando aumenta la concentracin de calcio en el sarcoplasma, este se une a la troponina, lo cual provoca un cese del bloqueo ejercido por la tropomiosina y se forma un complejo actina- miosina el cual, estructuralmente, aparece como un puente. 12. Al formarse el puente se activa la capacidad ATPsica de la cabeza de la miosina y el ATP presente en la cabeza de la miosina se disocia en ADP + Pi (fsforo inorgnico) proceso que requiere de una cierta cantidad de Mg2+. 13. La salida de fosfato de la cabeza de la miosina provoca un giro o un movimiento de la cabeza lo cual hace que se desplace el filamento de actina a lo largo del de miosina hacia el centro del sarcmero. Esto significa que las bandas z tambin son arrastradas hacia el centro del sarcmero resultando en un acortamiento de esta estructura. Ello se traduce en una reduccin o desaparecimiento de las bandas I. 14. El ATP que se perdi de la cabeza de la miosina es recuperado a expensas del ATP del sarcoplasma. Al ocupar este su posicin, la cabeza de la miosina se suelta de la actina y el sarcmero recupera su longitud inicial. Si ello no ocurre, es decir, cuando por alguna razn (muerte por ejemplo) no se repone el ATP en la cabeza de la miosina se presenta el fenmeno de rigidez.

Disposicin de actina y miosina

Acoplamiento exitacin-contraccin - Mecanismo que media entre el potencial de accin en el sarcolema y la generacin de fuerza en el sarcmero - Eventos en el acoplamiento excitacin-contraccin: 1. Despolarizacin del tbulo T, cambio de conformacin de DHPR 2. Interaccin mecnica entre DHPR y RyR1 3. Liberacin de Ca++ por RyR1 y aumento de Ca++ inico citoslico. Activacin del sistema contrctil y generacin de fuerza. 4. Actividad de SERCa reduce la concentracin de Ca++ citoslico que induce a relajacin - Excitacin y contraccin corresponden a dos eventos (elctrico y mecnico) separados en el tiempo

Protenas relacionadas con el impulso La seal llega al tbulo T, que presenta un receptor de dihidropiridinas (DHPR);1 este es un sensor de voltaje. A su vez en el retculo sarcoplasmtico se activa el receptor de ryanodina (RyR) por el cambio de conformacin de DHPR. (Los receptores DHPR se agrupan de a 4, no pueden estar solitos, son como los delfines ya) En la cisterna terminal se encuentra la calsecuestrina (CSQ), unida a Ca++ de manera dbil y que se desprende al abrirse el canal de calcio para la contraccin. SERCa ingresa calcio, para la relajacin muscular, y luego este es transportado por la sarcoluminina. La DHPR es dependiente de potencial en el tbulo T. Un cambio conformacional en las subunidades 2 y 3 activan al RyR, lo que a su vez activa un canal de calcio en la regin transmembrana. SERCa transporta activamente 2 molculas de calcio por ATP hidrolizado al interior del retculo sarcoplasmtico, permitiendo la relajacin del msculo. Su isoforma 1 se encuentra en fibras rpidas en los tipos IIA, IIX y su isoforma 2 en el miocardio y fibras lentas. La SERCa 1 tiene una velocidad de recaptura de calcio mayor (lo cual es obvio porque hay ms contracciones musculares) La CSQ es la protena ligante ms importante de calcio en el R.S disminuyendo la concentracin de calcio libre intracelular. Su isoforma en el msculo humano es CSQ1, rica en dominios de aa cidos. Une de 40 a 50 Ca. Con la apertura del canal de calcio se desliga de este. Une calcio de baja afinidad, no dejan al calcio en estado ionizado.

Protenas RyR - Hay un asa citoslica entre los dominios II y III de la subunidad alfa de DHPR - Regin citoslica o pie que esta en contacto con el sarcolema y el retculo sarcoplsmico - Su colita que da hacia el retculo sarcoplsmico es un modulador de una regin transmembrana que contiene el canal de calcio. - En el msculo esqueltico se expresa RyR1

Estas protenas se llaman as dado que responden a este antibitico el cual las inhibe.

 Posee regin citoslica o pie que interacta con asa citoslica del receptor del DHPR (el asa se forma por la unin de la subunidad 6 del dominio II con la subunidad 1 del dominio III) Posee un dominio transmembrana que forma el canal de calcio La cafena aumenta la probabilidad estmulo de RyR (por liberacin de epinefrina) sin afectar su conductancia; no porque se abra el canal necesariamente saldr ms calcio. Ayuda a aumentar la fuerza de la contraccin muscular. SERCa Transporte activo de calcio al interior del SR, es clave en la relajacin de la musculatura esqueltica Se transportan dos molculas de calcio por ATP hidrolizado SERCa1: para fibras rpidas, tipo IIA, IIB (en adulto) SERCa2: en fibras lentas tipo I y en miocardio. Su actividad est regulada por fosfolambo. El fosfolambo desfosforilado en un inhibidor de SERCa2. El fosfolambo fosforilado se agrega en grupos de 5 y se disocia de SERCa2 aumentando su actividad. El fosfolambo es sustrato de PKA (protena kinasa A). Fosfolambo en el findo inhibe la recaptura de calcio.

Fuerza generada en funcin de la concentracin de calcio sistlico

- La fuerza de contraccin muscular depende de la liberacin de calcio inico hacia el citosol y esto depende de la frecuencia de descarga de la motoneurona.

- Dos mecanismos nerviosos con los cuales podemos incrementar la fuerza de contraccin muscular: 1. Aumentar la frecuencia de descarga de la motoneurona 2. Aumentar el nmero de unidades motoras y as eliminar ms calcio. 3. Tambin deben haber hartas bombas que recapturen el calcio, debe ser muy rpida para provocar la relajacin a la misma velocidad que ocurre la contraccin. Si no es asi se va a producir un desgarro. - 0,1M de Ca++ (Relajacin) 1M de Ca++ (50% de la fuerza mxima) 5-10M de Ca++ (Fuerza mxima)

Unidad motora - Corresponde al nervio motor y todas las fibras que inerva. - Si la unidad motora es pequea el nervio motor inerva un pequeo grupo de fibras. Genera movimientos precisos (dedos y ojos), en cambio si la unidad motora es grande, el nervio motor inerva un gran grupo de fibras (msculos de extremidades). - La motoneurona determina las caractersticas del msculo (Fibras FT son de gran dimetro porque la resistencia elctrica disminuye as y as la velocidad de conduccin es mayor, la excitabilidad es menor) - Al inervar un msculo lento con una motoneurona rpida aumenta la actividad de Miosina ATPasa y la velocidad de acortamiento (contraccin muscular). Por ende la inervacin modifica el fenotipo. (Experimento Sleo-extensor largo de los dedos) - Plasticidad Muscular: El msculo puede adaptarse, con el ejercicio un msculo lento puede reclutar motoneuronas rpidas. Una persona con hipertiroidismo cambia a un perfil metablico glicoltico por lo que sus fibras se vuelven rpidas. Una persona con tetraplejia al haber una menor circulacin sangunea no llega oxgeno al msculo por lo que su metabolismo no puede ser oxidativo y se vuelve glicoltico (Desuso ST -> FT).

*La actividad atepesica de la miosina va a afectar la velocidad de contraccin. En fibras rpidas es mayor.

Experimento: msculos soleo (lento) n-extensor largo de los dedos es ms rpido. Fijarse en las variaciones al cambiar el nervi de cada msculo y evaluar su actividad.

CONCLUSIN: la inervacin modifica el fenotipo de la fibra muscular Pero, es posible que las caractersticas intrnsecas del msculo puedan modificar las propiedades del nervio?

Mecnica de Contraccin Muscular - La fuerza generada (acortamiento del sarcmero) se mide como tensin o acortamiento, dependiendo del estudio que se haga. - Dependiendo del registro. Registro Isomtrico: Se mide la tensin a longitud isomtrica cuando el msculo pasa de inactivo a activo. El msculo se contrae pero mantiene su longitud, notamos cambios en la tensin, pero el msculo no sufre cambios. (Tomar libros con la palma de la mano, el msculo no se est alargando, pero s se est tensionando para no mover la mano; cambios en la tensin dependiendo de la carga) - La tensin puede ser activa frente a la estimulacin o pasiva que es la resistencia que pone el msculo por los componentes del mismo (la tensin que se da por el estiramiento de todas las estructuras, las protenas de la lnea z). La tensin total es la suma de estas. - Existe una longitud ptima del sarcmero para generar una mxima tensin (15% sobre la longitud de reposo)

La tensin va a disminuir si la longitud del sarcmero es mayor y viceversa. La tensin va a ser mayor de acuerdo a ciertos ngulos en que estn los msculos y tambin van a existir otros ngulos en que se va a generar menos fuerzas

Registro Isotnico, Anisotnico o Dinmico: Se registra el acortamiento cuando el msculo se contrae frente a un peso. Se registra la velocidad de contraccin en funcin de la carga (inversamente proporcional). Se define como contracciones isotnicas a aquellas (desde el punto de vista fisiolgico) contracciones en las que las fibras musculares adems de contraerse, modifican su longitud. Cambia velocidad, pero el tono muscular se mantiene.

Contraccin dinmica (el tono va cambiando; lo que cambia es la velocidad, pero el tono se va a mantener, dependiendo del ngulo en el cual trabaje el msculo voy a tener distintos tipos de brazos de potencia), dos tipos: - Contraccin concntrica: Una contraccin concntrica ocurre cuando un msculo desarrolla una tensin suficiente para superar una resistencia, de forma tal que ste se acorta, y moviliza una parte del cuerpo venciendo dicha resistencia. Un claro ejemplo es cuando llevamos un vaso de agua a la boca para beber, existe acortamiento muscular concntrico, ya que los puntos de insercin de los msculos se juntan, se acortan o se contraen. - Concentracin excntrica: Cuando una resistencia dada es mayor que la tensin ejercida por un msculo determinado, de forma que ste se alarga, se dice que dicho msculo ejerce una contraccin excntrica. En este caso el msculo desarrolla tensin alargndose, es decir, extendiendo su longitud. Un ejemplo claro es cuando llevamos el vaso desde la boca hasta apoyarlo en la mesa, en este caso el bceps braquial se contrae excntricamente. Contraccin en alargamiento? Fisiolgicamente hablando hay una alternancia en el patrn de reclutamiento motor, entonces mientras hay fibras que se estaran relajando hay otras que se estn contrayendo isomtricamente.

Modulacin de fuerza de contraccin Reclutamiento de Fibras - Toda fibra de una unidad motora se activan al mismo tiempo - Todas las fibras de una unidad motora son del mismo tipo (por las propiedades motoras) - La activacin de ms fibras musculares requiere del reclutamiento de ms unidades motoras. Msculos lentos: unidades motoras pequeas (100 a 500 fibras) y con alfa motoneurona fcilmente excitable Msculos rpidos: unidades motoras grandes (1000 a 2000 fibras) inervadas por alfa motoneurona difcil de excitar No nerviosas - Concentracin de Ca++ en el citosol (porque a mayor cantidad de calcio, mayor cantidad de troponina C activada y por lo tanto mayor cantidad de puentes cruzados haciendo tensin) - Mayor cantidad de sarcoplasmas en paralelo (Dimetro muscular) - Cantidad de unidades motoras (motoneuronas) reclutadas - Capacidad de descarga de la motoneurona (Frecuencia de descarga) - Amonio, fosforo inorgnico y cidos metablicos generan prdida de la fuerza muscular - Testosterona - Longitud del sarcmero (ptima: 15% ms alargado sobre la longitud de reposo, 2.1 o 2.3 micras)

Tetanos

*Ttanos completo: Cuando ocurren estimulaciones repetidas sin relajacin de por medio, producindose la suma de las contracciones musculares.