Plasticos Biodegradables

Metodologa de la Investigacin Cientfica Plsticos Biodegradables
XI.-INDICE
XI.-INDICE ..................................................................................................... ...................... 1
OBTENCIN DE PLASTICOS BIODEGRADABLES POR MEDIO DE LA
Escherichia Coli RECOMBINANTE .......................................................................... 2
I.- JUSTIFICACIN .................................................................................... ....................... 2
II.-HIPTESIS .................................................................................................................... .. 2
III.-OBJETIVOS .......................................................................................................... ......... 3
GENERAL ......................................................................................................................................... 3
ESPECFICOS ................................................................................................................................... 3
IV.-REVISIN DE LITERATURA .......................................................... .......................... 3
4.1 ASPECTOS CONCEPTUALES .............................................................................................. 3
4.1.1 CONTAMINACIN AMBIENTAL POR PLSTICOS ...................................................... 3
4.1.2 PLSTICOS .......................................................................................................................... 4
4.1.3 DEGRADACIN ................................................................................................................. 7
4.1.4 BIOPOLMERO .................................................................................................................... 8
4.1.5 CLASIFICACIN DE POLIMEROS BIODEGRADABLES ............................................. 8
Medina, (2007) los biopolmeros se clasifican de la siguiente manera .......................................... 8
4.1.6 PHA (POLIHIDROXIALCANOATOS) ............................................................................... 9
4.1.7 TIPOS DE PHA .................................................................................................................. 10
4.1.8 PHB (POLI-3-HIDROXIBUTIRATO) ................................................................................ 11
4.1.9 BIOTECNOLOGAS .......................................................................................................... 12
4.1.10 ESTRS NUTRICIONAL ................................................................................................ 13
4.1.11 QUINES PRODUCEN PHA? ...................................................................................... 14
4.1.12 PRODUCCION DE PHA EN ESCHERICHIA COLI RECOMBINATE ......................... 15
4.1.13 INYECCIN .................................................................................................................... 16
4.1.14 Extrusin ........................................................................................................................... 17
4.1.15 MTODO PARA LA FABRICACIN DE UN MATERIAL PLSTICO
BIODEGRADABLE. .................................................................................................................... 19
4.2 ANTECEV.- ANTECEDENTES .............................................................................. .... 20
VI.- MATERIALES Y METODOS ........................................................................ ............ 25
5.1 MATERIALES Y EQUIPOS .......................................................................... ............. 25
6.1.1 Del trabajo de laboratorio .................................................................................................... 25
6.1.2 Del trabajo de proceso ......................................................................................................... 25
6.1.3 Del trabajo de gabinete ........................................................................................................ 25
6.2 TRATAMIENTO DE ESTUDIO ........................................................................... ....... 26
6.3.1 FASE DE LABORATORIO ..................................................................................... 27
6.3.2 FASE DE PROCESO .......................................................................................................... 29
VII.-DURACIN PROBABLE PARA LA REALIZACIN DE ESTE PROYECTO.
......................................................................................................................................... 32
VIII.-FINANCIAMIENTO ........................................................................................... 32
Este proyecto ser financiado por las empresas de fabricacin de plsticos que buscan
mejorar sus productos para disminuir la contaminacin ambiental. ................... ............ 32
IX.-BIBLIOGRFA CONSULTADA ............................................................ ..................... 33
X.-ANEXOS: MATRIZ DE CONSISTENCIA .............................................. ................... 35
1
OBTENCIN DE PLASTICOS BIODEGRADABLES POR
MEDIO DE LA Escherichia Coli RECOMBINANTE
I.- JUSTIFICACIN
La basura generada por las actividades humanas hasta
mediados del siglo XX consista principalmente en desechos
biodegradables o reciclables. Al incorporarse el plstico a la vida
cotidiana, una parte considerable de los desechos producidos
comenz a acumularse en el ambiente, precisamente por la
resistencia de los plsticos a la corrosin, la intemperie y la
degradacin por microorganismo (biodegradacin).
La degradacin de los plsticos sintticos es muy lenta. Como
ejemplo, la descomposicin de productos orgnicos tarda 3 o 4
semanas, la de telas de algodn 5 meses, mientras que la del
plstico puede tardar 500 aos.
Esta durabilidad es uno de los problemas que presentan los
plsticos para el medio ambiente.
El otro problema es que se fabrican a partir del petrleo, que son
fuentes no renovables de energa. Buscando una solucin a
estos problemas, los cientficos e ingenieros vienen
desarrollando plsticos biodegradables obtenidos de fuentes
renovables, como por ejemplo las bacterias. La razn por la cual
los plsticos tradicionales no son biodegradables es porque son
polmeros demasiados largos y compactos como para ser
atacados y degradados por los organismos descomponedores.
Pero los plsticos biodegradables producidos por bacterias
tienen una estructura que puede ser destruida por los
microorganismos.
II.-HIPTESIS
Elaboracin de plsticos biodegradables por medio de la
Escherichia Coli recombinante.
2
III.-OBJETIVOS
GENERAL
Obtener plsticos biodegradables a partir de la Escherichia Coli recombinante.
ESPECFICOS
Modificar genticamente a la Escherichia Coli.
Producir plsticos biodegradables en condiciones de estrs
nutricional en el medio de cultivo.
Utilizar fuente renovable de carbono.
IV.-REVISIN DE LITERATURA
4.1 ASPECTOS CONCEPTUALES
4.1.1 CONTAMINACIN AMBIENTAL POR PLSTICOS
Segn (Solke,1998) en la ciudad de Mxico se generan al da 11
mil toneladas de desechos slidos, de las cuales los plsticos
representan cerca del 20% del volumen total, y aproximadamente
el 12% en peso. De ese volumen, ocho mil toneladas se destinan
a dos rellenos sanitarios, uno de ellos al lmite de su capacidad.En
los Estados Unidos, la produccin de plsticos excede 50 millones
de toneladas mtricas por ao, y aproximadamente 25 millones de
toneladas se acumulan en el ambiente cada ao.Durante 1991, la
produccin mundial de plsticos fue cercana a los 78 millones de
toneladas, y es necesario considerar que casi la mitad de este
volumen se desecha en corto tiempo. Los plsticos son materiales
orgnicos macromoleculares, producidos por la transformacin de
sustancias naturales de origen vegetal y, sobre todo, por sntesis
directa de sustancias derivadas del petrleo (etileno, propileno,
estireno). El uso de plsticos sintticos se ha extendido
ampliamente en el mercado, debido a sus propiedades
consistentes en peso ligero, hidrofobicidad, estabilidad qumica,
resistencia especial a qumicos corrosivos y al deterioro biolgico;
adems no son txicos y resultan verstiles en estructura. Dentro
3
de los plsticos sintticos existen tres familias que ocupan tres
cuartas partes del mercado: las poliolefinas, polmeros derivados
de hidrocarburos alifticos con doble ligadura, como el etileno,
propileno e isobutileno, que en su forma oligomrica son ceras o
grasas biodegradables (polietileno, polipropileno), los polmeros
vinlicos (cloruro de polivinilo) y los productos estirnicos
(poliestireno).De estas tres familias, las poliolefinas constituyen la
ms importante, debido a que los plsticos ms utilizados
comercialmente se encuentran dentro de este grupo. Estos se
caracterizan por ser difcilmente biodegradables y permanecer en
la naturaleza durante decenios. De todos los sectores de
aplicacin de los materiales plsticos, el 60% representa los que
se desechan en corto tiempo y se utilizan sobre todo en
empaques, envases y en la agricultura. En 1986, se vendieron en
los Estados Unidos 21 millones de toneladas de plsticos, debido
a su estabilidad estructural y propiedades. El 75% se destin a
aplicaciones de larga vida y a productos en los que la resistencia
al deterioro biolgico es un requisito primordial y el 25% restante,
a la elaboracin de empaques y productos de usos similares, en
los que el material es desechado rpidamente 1989, se
manufacturaron en Europa 23 millones de toneladas de plsticos,
de los cuales 40% se utiliz en empaques.
4.1.2 PLSTICOS
Segn (Sosa,2000) la industria de los plsticos empez en 1863,
cuando la firma fabricante de bolas de billar Phelan & Collander
ofreci diez mil dlares a quien pudiera desarrollar un sustituto del
marfil que se usaba para fabricar las bolas. Quiz la compaa
haya querido proteger a los elefantes, pero es ms probable que
buscara un material semejante al marfil, el cual era cada vez ms
escaso y caro. Alentados por esta oferta los estadounidenses
Isaiah y John Hyatt desarrollaron el plstico celuloide y aunque
lograron popularizarlo, nunca ganaron el premio porque las bolas
4
de billar fabricadas con este nuevo material tenan la tendencia a
explotar al ser golpeadas. En la actualidad muchos de los objetos
con los que tenemos contacto estn hechos total o parcialmente
de algn tipo de plstico, debido a la variedad de propiedades
casi ilimitada que se puede dar a estos materiales, los hay duros,
blandos, rgidos, flexibles, densos, ligeros, transparentes, opacos,
pegajosos, antiadherentes, impermeables, absorbentes,
conductores, aislantes, etc.La posibilidad de disear las
propiedades de los plsticos a la medida inici con los intentos
de los qumicos por imitar a la naturaleza en la sntesis del hule
natural, cuyas propiedades elsticas se conocen desde hace
aproximadamente cinco siglos. Originario de Amrica, el hule era
utilizado por los primeros habitantes de Mxico, quienes lo
extraan del arbusto del guayule para impermeabilizar utensilios y
fabricar las bolas del juego de pelota. Aunque los colonizadores
espaoles tambin lo usaron, durante los siguientes 300 aos,
slo se emple para fabricar pelotas y otras curiosidades. La
primera fbrica que us hule natural fue establecida en Pars en
1803. En un principio produca ligas y tirantes, pero despus
incorpor hule en las gabardinas para hacerlas impermeables.
Estos productos tenan algunos inconvenientes, pues el hule se
reblandeca y se haca pegajoso en verano mientras que en
invierno era rgido y quebradizo. La solucin lleg en 1839,
cuando Charles Goodyear descubri que al calentar hule natural
en presencia de azufre se obtena un producto mucho ms
elstico y resistente. A este proceso se le llam vulcanizacin. Los
usos del hule vulcanizado aumentaron y se diversificaron; pronto
las plantaciones en Amrica resultaron insuficientes para cubrir la
demanda, y la posibilidad de controlar este nuevo mercado
impuls a los ingleses a establecer enormes plantaciones en
Ceiln, Malasia y Singapur, con semillas del rbol Hevea
brasiliensis llevadas de contrabando desde Brasil. Durante la
Segunda Guerra Mundial la imposibilidad de importar hule natural
para las llantas de los aviones propici que en los laboratorios de
5
investigacin, estadounidenses y alemanes, se iniciara la
bsqueda por descubrir, reproducir y mejorar los secretos de la
estructura qumica del hule.Hoy sabemos que el hule natural, al
igual que el pelo, la lana, las telaraas, los capullos de las polillas
y el gusano de seda, as como muchas otras sustancias
provenientes de organismos vivos, son polmeros. Los polmeros
son molculas gigantes que resultan de la unin de miles de
molculas ms pequeas a las que se llama monmero. La
estructura bsica de estas sustancias es similar a la de una larga
cadena (el polmero) formada por pequeos eslabones (los
monmeros). En algunos polmeros las cadenas lineales pueden
unirse entre s a travs de otras cadenas, dando lugar a redes que
pueden formar arreglos tridimensionales. Los eslabones pueden
ser todos iguales, lo que se denomina homopolmero, o pueden
estar constituidos por unidades diferentes y alternarse siguiendo
un patrn especfico formando lo que se conoce como un
copolmero. Las sorprendentes y variadas propiedades que
pueden darse a estas sustancias dependen precisamente del tipo
de monmero, la longitud de las cadenas y la forma en que stas
se acomodan en el material. Aunque generalmente se utilizan los
trminos plstico y polmero como sinnimos, plstico hace
referencia a cualquier material que puede moldearse fcilmente,
mientras que polmero clasifica a una sustancia por su estructura
molecular. A pesar de que todos los plsticos comerciales
conocidos son polmeros, algunas de las biomolculas ms
importantes como las protenas, el almidn e incluso el ADN
tambin pueden incluirse dentro del conjunto de los polmeros
pero no en el de los plsticos.
6
4.1.3 DEGRADACIN
Segn (Noeller,1996) en el caso de los plsticos, se dice que un
plstico es degradable cuando su estructura qumica puede sufrir
cambios significativos que resultan en una prdida de algunas
propiedades que pueden variar segn el test que se aplique y la
unidad de tiempo en que se aplique dicho test.Sus resultados
determinarn la clasificacin del plstico estudiado partiendo de
sus caractersticas fundamentales bsicamente su composicin
qumica.Si consideramos la temtica del presente documento
tenemos que contemplar que la definicin de degradacin a tener
en cuenta ya que estamos introducindonos en el concepto de lo
que se considera una degradacin biolgica (biodegradacin)-
corresponde a un proceso de tipo qumico y por lo tanto para los
compuestos orgnicos la bibliografa define como degradacin a
la prdida de carbonos, por ejemplo la degradacin de hidratos de
carbono que deriva en una prdida de dixido de carbono y un
hidrato de carbono inferior en su longitud de cadena. Los tipos de
degradacin son:
BIODEGRADACIN
FOTODEGRADACIN
DEGRADACIN QUMICA
Hidrlisis
Oxidacin
Cualquiera de estos tipos de degradacin tiene 3 componentes
esenciales. Si falta alguno de ellos la degradacin no se produce.
Estos componentes esenciales fundamentales para que ocurra la
degradacin son:
tiene que haber un sustrato a ser degradado
(sustancia, materia orgnica).
7
tiene que haber un agente que efecte la
degradacin.
tiene que haber un ambiente de
caractersticas especficas: humedad, oxgeno
(O2) en estado molecular si lo consideramos
aportado por el aire, o dentro de los procesos
anaerobios el aportado por las sales (por
ejemplo los sulfatos), con su correspondiente
generacin de gas metano, agua (H2O) o
temperatura adecuada, cantidad bsica de
nutrientes limitantes, etc.
4.1.4 BIOPOLMERO
Segn (Estenoz,2007) una macromolcula de unidades repetitivas
dependiendo del tipo de unidad que se repita, es el tipo de
polmero que se procesa. Con propiedades biodegradables, por
elaborarse con bacterias y no con productos no renovables.
Los biopolmeros abarcan a los polmeros de la vida, esto es,
aqullos presentes en sistemas vivos tales como polisacridos,
protenas, cidos nucleicos porque se encuentran en Conchas de
moluscos, cido lctico (residuo procedente de la elaboracin de
quesos), gluten de trigo o almidn, etc.
4.1.5 CLASIFICACIN DE POLIMEROS
BIODEGRADABLES
Medina, (2007) los biopolmeros se clasifican de la
siguiente manera
8
4.1.6 PHA (POLIHIDROXIALCANOATOS)
Segn (Segura, Noguez y Guadalupe 2007) los PHA son polmeros
naturales producidos por bacterias.Son polisteres conformados
por unidades o monmeros de hidroxiacilos polimerizados en
forma lineal.Las bacterias que los producen los utilizan como
reserva de nutrientes.Por ser biodegradables, por sus propiedades
fsicas semejantes a las de los plsticos derivados del petrleo (ya
que estos polmeros presentan propiedades que van desde plsticos
rgidos y quebradizos, hasta los semejantes al hule) y por ser
producidos a partir de recursos renovables, los PHA han atrado la
atencin. El primer polister descrito de esta familia de compuestos,
desde la dcada de los veinte, fue el polihidroxibutirato (PHB), pero
su existencia pas desapercibida para la mayora de la comunidad
cientfica hasta 30 aos despus, cuando se propuso su empleo
como termoplstico biodegradable para resolver el problema de los
desechos plsticos. En 1982 la compaa Imperial Chemical
Industries Ltd. (ICI), en Inglaterra, comenz el desarrollo de un
polister termoplstico completa-mente biodegradable que poda
ser fundido para la produccin de pelculas plsticas, fibras, etc. Este
polmero comenz a producirse a gran escala mediante un proceso
de fermentacin semejante a la produccin de bebidas fermentadas
como la cerveza o el vino, es decir, en tanques agitados conteniendo
un medio lquido adecuado para la multiplicacin (crecimiento) de
las bacterias productoras de PHA.El polmero se acumula en el
interior de las bacterias, que en este primer proceso eran de la
ORIGEN Y PRODUCCIN EJEMPLOS
Obtenidos directamente a partir de
biomasa
Celulosa, almidn, quitosan
Sintetizados a partir de fuentes
renovables
Poli- cido (PLA), poli-cidos glicoles
(PGA), poli-caprolactonas (PCL)
Producidos por microorganismos o
genticamente modificados
Poli-hidroxialcanoatos (PHA)
Poli-3-hidroxibutarato (PHB)
Mezclas de polmeros
biodegradables
Polivinilalcohol (PVOH) y
policaprolactonas (PCL)
9
especie Alcaligenes eutrophus (llamado actualmente Wautersia
eutropha).El producto obtenido se llam comercialmente Biopol, un
copoliester de hidroxibutirato e hidroxivalerato. Este PHA presenta
mejores caractersticas fsicas que el PHB, pues es ms flexible y
resistente. Las compaas Zeneca y Monsanto tambin comenzaron a
producir Biopol. Posteriormente, Metabolix inici la produccin de
diversos PHA de bacterias y de plantas transgnicas, y Procter &
Gamble y la empresa japonesa Kaneka Corporation desarrollaron
nuevos PHA que son producidos con el nombre de nodax.
4.1.7 TIPOS DE PHA
Segn (Segura, Noguez y Guadalupe,2007) en el caso de los PHA,
los monmeros o unidades que se enlazan para formar la cadena
del polmero son molculas de diversos hidroxialcanoatos. Todos los
PHA forman la misma estructura bsica de polister con unidades
de tres carbonos formando el esqueleto del polmero, pero
difieren en el tipo de grupo alquilo que se encuentra unido al
carbono nmero 3 de cada monmero. A la fecha se han
descubierto ms de 100 monmeros diferentes en los PHA
producidos por bacterias, aunque slo unos cuantos se han
producido en grandes cantidades y se han caracterizado. Como
consecuencia, se sabe poco sobre las caractersticas qumicas y
mecnicas de muchos de los polmeros que las bacterias pueden
producir. Se han encontrado PHA con monmeros rectos,
ramificados, con o sin dobles enlaces y tambin con anillos
aromticos. Son especialmente interesantes los PHA que contienen
grupos qumicos funcionales en las cadenas laterales y que
permiten llevar a cabo modificaciones qumicas posteriores. Pues
esto posibilita la sntesis de nuevos polmeros no naturales o
semisintticos con nuevas propiedades que permitan nuevas
aplicaciones de los PHA, conservando en la mayora de los casos su
biodegradabilidad.
Los PHA pueden clasifcarse en tres tipos: de cadena lateral de
monmero corta (de 3 a 5 tomos de carbono), de cadena media (de
10
6 a 14 tomos de carbono) y de cadena larga (con ms de 14
tomos de carbono). Esta longitud se refiere al tamao de la
cadena lateral de cada monmero y no al tamao del polmero, el
cual puede llegar a ser tpicamente de 200 000 a 3 000 000 de
daltones.
La longitud de la cadena lateral y el grupo funcional tienen una
influencia considerable sobre las propiedades del polmero, como
son, el punto de fusin y la cristalinidad del bioplstico, y por lo tanto
determinan el tipo de procesamiento que se requiere y la aplicacin
final que ste puede tener.
La especie de bacteria empleada y las condiciones bajo las cuales
se le cultiva, determinan la composicin qumica del PHA producido
(tipo de polmero). Dentro de esas condiciones de cultivo, la fuente
de carbono presente en el caldo de cultivo es muy importante en la
de-terminacin de la composicin del polmero, es decir, el tipo de
polmero depende tambin de qu se le da de comer a la bacteria.
4.1.8 PHB (POLI-3-HIDROXIBUTIRATO)
Segn (Povolo, Hermidaa, Miyazaky y Quaglianoc,2000) el poli-3-
hidroxibutirato (PHB) es un polister de origen bacteriano
obtenido bajo condiciones de estrs nutricional en el medio de
cultivo, como por ejemplo deficiencia de nutrientes tales como
nitrgeno, fsforo u oxgeno en presencia de una fuente en
exceso de carbono y energa. Se acumula en el citoplasma dentro
de grnulos y representa para el microorganismo una reserva de
carbono y poder reductor (captador de electrones).
El PHB es un polmero biodegradable, biocompatible, de regular
cristalinidad y moderada resistencia mecnica, utilizable en varias
aplicaciones una vez procesado, como por ejemplo en la
fabricacin de envases plsticos completamente biodegradables.
Al obtenerse adems a partir de fuentes de carbono naturales
renovables, representa un material promisorio para reemplazar a
los plsticos sintticos en algunas reas.
11
Azotobacter chroococcum y Rhodospirillum rubrum son dos de las
especies que pueden producir PHB de diferentes pesos
moleculares. Adems, bajo condiciones especiales de
crecimiento, tambin pueden producir el copolmero poli(3-
hidroxibutirato-3hidroxivalerato) (PHBV) a partir de sustratos
simples, lo cual es importante ya que se evita recurrir a
precursores txicos y costosos para producir el copolmero. Las
cepas aisladas son capaces de sintetizar y acumular el PHB y su
copolmero en forma de grnulos intracitoplasmticos de entre 0.2
y 3um. La extraccin del PHB a partir de la biomasa se realiza
mediante disolucin en solventes orgnicos.
La distribucin de pesos moleculares modifica las propiedades
mecnicas y de biodegradabilidad. El agregado de cidos
orgnicos como el propinico permite obtener copolmeros ms
flexibles.
4.1.9 BIOTECNOLOGAS
Segn (Lpez,2000) la biotecnologa ha sido una herramienta
importante en el desarrollo cientfico de nuestros tiempos. En el
ltimo cuarto del siglo XX, el estudio de los mecanismos de
funcionamiento de la clula, en las reas de microbiologa,
fisiologa celular y bioqumica se consolidaron aceleradamente
gracias al progreso de una nueva disciplina: la biologa molecular.
La explotacin del potencial industrial del cultivo de clulas
alcanza un nivel imprevisto cuando las herramientas de la biologa
molecular se incorporan a los procesos biotecnolgicos. Surge as
la biotecnologa moderna, cuyo mbito de aplicacin se ha
extendido rpidamente a clulas de seres de todo tipo, incluyendo
las de organismos pluricelulares como las plantas, los animales y
el ser humano mismo. La definicin del (Convenio sobre
Diversidad Biolgica de 1992) dice que es toda aplicacin
tecnolgica que utiliza sistemas biolgicos y organismos vivos o
sus derivados para la creacin o modificacin de productos o
procesos para usos especficos.
12
En la aplicacin de este proyecto de tesis , los genes de bacterias
que codifican la produccin de polihidroxialcanatos como por
ejemplo azotobacter lo insertamos en un plasmido que luego lo
transferimos a Escherichia Coli y permiti la obtencin de PHB en
la cepa recombinante a partir de glucosa .la cepa utilizada
tambin degrada lactosa , por lo que se analizo la produccin del
polmero utilizando lactosa y tambin lactosuero (fuentes de
carbono)en un medio salino , obtenindose una buena cantidad
de polmeros en ambos casos.
Como el lactosuero es un desecho de la industria lechera y como
se trata de un desecho contaminante cuya eliminacin adecuada
involucra un costo elevado su utilizacin como sustrato de una
fermentacin cuyo producto es una sustancia con un buen valor
econmico implica entonces un doble beneficio.
4.1.10 ESTRS NUTRICIONAL
Deficiencia de nutrientes tales como nitrgeno, fsforo u oxgeno
en presencia de una fuente en exceso de carbono y energa. El
polmero se sintetiza mediante un camino metablico que
involucra tres enzimas: una b-cetotiolasa, que condensa dos
molculas de acetil-CoA para formar acetoacetil-CoA, una
acetoacetil-CoA reductasa, que convierte este compuesto en 3-
hidroxibutiril-CoA, y una polimerasa, que polimeriza los
monmeros. Este camino metablico es el que utilizan la mayora
de las bacterias productoras de PHB, tales como Ralstonia
Eutropha, Azotobacter Choococcum, Rhodospirillum Rubrum, etc.
En Azotobacter estas enzimas estn codificadas por los genes
phaB, phaA y phaC. Este mecanismo de obtencin es similar en
las mayoras de bacterias productoras de PHA. Se acumula en el
citoplasma dentro de grnulos y representa para el
microorganismo una reserva de carbono y poder reductor
(captador de electrones). El PHB es un polmero biodegradable,
biocompatible, de regular cristalinidad y moderada resistencia
mecnica, utilizable en varias aplicaciones una vez procesado,
13
como por ejemplo en la fabricacin de envases plsticos
completamente biodegradables. Al obtenerse adems a partir de
fuentes de carbono naturales renovables.
4.1.11 QUINES PRODUCEN PHA?
Desde que Maurice Lemoigne descubri en1925 que la bacteria
Bacillus megaterium produce polihidroxibutirato (PHB) y otros
miembros del grupo ms grande de polyhydroxyalkanoates PHAs,
se han reportado ms de 300 bacterias capaces de producir PHA.
Estas bacterias los producen a partir de sustratos orgnicos,
como carbohidratos (glucosa, sacarosa), aceites, alcoholes,
cidos orgnicos, hidrocarburos, y los acumulan en grandes
cantidades dentro de la clula bacteriana en forma de grnulos,
llegando a constituir hasta 90% de la biomasa. Las bacterias
productoras los usan como material de reserva que puede ser
utilizado posteriormente, bajo condiciones de estrs nutricional.
Si bien el PHB es producido en la naturaleza por un sinnmero de
microorganismos, el conocimiento que se tiene de esos microbios
es escaso, si se lo compara con lo que hoy se sabe de una
bacteria de uso habitual en investigacin: la Escherichia coli
(E.coli). Pero este microbio no sintetiza PHB naturalmente. Por
ello, aislaron del microorganismo Azotobacter (un productor
natural de PHB) los genes que codifican para la produccin del
polmero, y los insertaron en un plsmido (una molcula de ADN
que sirve para introducir genes en las clulas), que luego
transfirieron a la E. coli.
Logrando as una posible solucin a la problemtica de producir
plsticos biodegradables ya que es muy costosa su produccin.
14
4.1.12 PRODUCCION DE PHA EN ESCHERICHIA COLI
RECOMBINATE
Los productores naturales de PHB, que es un miembro de PHA,
como Azotobacter, azotobacter chroococcum, Rhodospirillum
rubrum, etc. Se han adaptado a la acumulacin de estos
polmeros durante la evolucin, pero normalmente tienen un
tiempo de generacin largo y temperaturas de crecimiento
relativamente bajas. Adems, son difciles de lisar y poseen
enzimas que degradan el polmero acumulado. Estas
caractersticas dificultan su uso en la produccin industrial de los
biopolmeros.
Entre las cepas bacterianas comnmente utilizadas en procesos
biotecnolgicos, Escherichia coli es el microorganismo mejor
conocido, ya que su metabolismo ha sido extensivamente
estudiado y caracterizado. Debido a esto, es un microorganismo
modelo, ideal para su uso en fermentaciones.
Adems, debido al gran nmero de herramientas disponibles para
realizar manipulaciones genticas, es el organismo adecuado
para realizar ensayos previos al traspaso de los genes a plantas.
E. coli no posee la capacidad de sintetizar o degradar PHA pero
crece rpido y es fcil de lisar. Se han expresado los genes pha
de varias especies bacterianas en E.coli, obtenindose buenos
rendimientos del polmero.
Asimismo, al no poseer enzimas que degraden a los PHA, permite
la acumulacin de polmero de alto peso molecular.
Una vez obtenido el PHB .es un termoplstico que puede ser
procesado mediante tcnicas comveccionales o industriales de
extrusin e inyeccin
15
4.1.13 INYECCIN
Es el principal mtodo de la industria moderna en la produccin
de piezas plsticas, la produccin es en serie, principalmente se
moldea termoplsticos. El material plstico en forma de polvo o en
forma granulada, se deposita para varias operaciones en una
tolva, que alimenta una cilindro de caldeo, mediante la rotacin de
un husillo o tornillo sin fin, se transporta el plstico desde la salida
de la tolva, hasta la tobera de inyeccin, por efecto de la friccin y
del calor la resina se va fundiendo hasta llegar al estado lquido, el
husillo tambin tiene aparte del movimiento de rotacin un
movimiento axial para darle a la masa lquida la presin necesaria
para llenar el molde, actuando de sta manera como un mbolo.
Una vez que el molde se ha llenado, el tornillo sin fin sigue
presionando la masa lquida dentro del molde y ste es
refrigerado por medio de aire o por agua a presin hasta que la
pieza se solidifica. Las mquinas para este trabajo se denominan
inyectora de husillo impulsor o de tornillo sin fin, tambin se le
denomina extrusora en forma genrica.
16
1.- Tolva.
2.- Motor Hidrulico.
3.-Husillo sin fin. (Extrusora)
4.- Sistema de calefaccin del husillo.
5.- Molde Soplado de cuerpos huecos.
4.1.14 Extrusin
Se usa principalmente para termoplsticos. La extrusin es el
mismo proceso bsico que el moldeado por inyeccin, la
diferencia es que en la extrusin la configuracin de la pieza se
genera con el troquel de extrusin y no con el molde como en el
moldeado por inyeccin.
En la extrusin el material plstico, por lo general en forma de
polvo o granulado, se almacena en una tolva y luego se alimenta
una larga cmara de calefaccin, a travs de la cual se mueve el
material por accin de un tornillo sin fin, al final de la cmara el
plstico fundido es forzado a salir en forma continua y a presin a
travs de un troquel de extrusin preformado, la configuracin
transversal del troquel determina las forma de la pieza.
FIGURA 1. En grfico adjunto tenemos un corte transversal de
una parte de un inyector de plstico en la que se observa sus
partes
17
La masa se calienta hasta que est fluido y se vierte en el molde,
luego se cura a temperaturas que vara segn el plstico y luego
se retira del molde. Pero como este proceso se le hace a nivel
industrial sea de plsticos derivados del petrleo solo existes
una pequea variacin si se quieres aplicar con PHA, ya no
tendramos que agregar resinas ya que el PHA es una otra
manera se realiz un mtodo para la preparacin de plsticos
biodegradables de manera industrial agregando estabilizantes ,
plastificantes (solventes de baja volatilidad que puede ser
FIGURA 2. Moldeado de plsticos por extrusin
18
cualquier tipo polimrico) y PVA, estos se agrega noms para
mejorar la calidad del plstico.
4.1.15 MTODO PARA LA FABRICACIN DE UN
MATERIAL PLSTICO BIODEGRADABLE.
Se describe un procedimiento para fabricar un material plstico
biodegradable que incluye las siguientes etapas: (a) mezclar un
estabilizante con un copolimero de poli(alcohol vinilico) (pva)
parcialmente hidrolizado soluble en agua; (b) aadir un
plastificante a la mezcla de estabilizante y pva; y (c) mezclar el
PVA el plastificante y el estabilizante a una temperatura que se
encuentra en el intervalo desde 106 a 140 C , con lo cual el
material resultante puede ser tratado con facilidad mediante
procedimientos conocidos, y resulta adecuado para la fabricacin
de artculos biodegradables solubles en agua, opcionalmente
despus de la etapa de mezclado, incluyendo el procedimiento las
etapas de componer y granular el producto resultante para
producir grnulos comerciales utilizables, en el cual la
FIGURA 3. Producto terminado
FIGURA4. Maquina de husillo sin fin
19
composicin se lleva a cabo a una temperatura en el intervalo de
195 - 225 C . El procedimiento incluye procesar el material
plstico aun ms mediante moldeo por soplado, extrusin en
moldes, moldeo por inyeccin o cualquier otro tipo adecuado.
4.2 ANTECEV.- ANTECEDENTES
La creciente demanda de la sociedad para la fabricacin de nuevos
productos que sustituyan los plsticos derivados del petrleo se
convierte en la principal motivacin para el presente proyecto de tesis ,
ya que los plsticos suplen gran cantidad de necesidades a la poblacin,
pero dejan a su paso impactos ambientales que perduran por aos. Los
plsticos sintticos se han venido desarrollando por parte de la industria
qumica desde las primeras dcadas del siglo XX, teniendo un mximo
impulso durante la II Guerra Mundial. Debido a su utilidad, el crecimiento
de la industria del plstico ha sido muy elevado, generando avances,
innovaciones y satisfaccin de infinidad de necesidades, razones que
convierten a los plsticos en un material de consumo masivo que est
presente en gran cantidad de artculos de la actualidad. La problemtica
generada por su uso intensivo radica en su baja biodegradabilidad (alta
recalcitrancia) Y, por consiguiente, en su elevada generacin de
residuos. En los aos 70 hubo una crisis mundial de petrleo, en la que
el precio del combustible fsil creci mucho. En ese contexto, las
investigaciones alrededor de los plsticos biodegradables florecieron, y
la empresa ICI desarroll un proceso para producir a escala industrial un
bioplstico que se comercializ bajo el nombre de Biopol. Este
polihidroxialcanoato es un copolmero de monmeros de cuatro y cinco
carbonos, denominados hidroxibutirato e hidroxivalerato. El Biopol se
produca utilizando la bacteria Ralstonia eutropha cultivada en un medio
con glucosa y propionato como fuentes de carbono. A pesar de su costo
relativamente elevado, el Biopol fue utilizado en varias aplicaciones en
algunos pases como Alemania. (Almeida,2004).
20
El almidn es un polmero natural. Se trata de un gran hidrato de
carbono que la planta sintetiza durante la fotosntesis y le sirve como
reserva de energa. Los cereales, como el maz y los tubrculos, como la
papa, contienen gran cantidad de almidn. El almidn puede ser
procesado y convertido en plstico. Para eso, primero el almidn se
extrae (por ejemplo, del grano de maz) y luego los microorganismos los
transforman en una molcula ms pequea, el cido lctico. Despus
este cido lctico es tratado qumicamente de manera de formar
cadenas o polmeros, los que se unen entre s para formar el plstico
llamado PLA (polilctido).
PLA (polilctido) es una de las opciones. Se conforma mediante la
polimerizacin del cido lctico, y nuevos mtodos comercialmente
atractivos para la polimerizacin directa estn siendo recientemente
investigados; de hecho se piensa que el cido lctico se convertir en la
ms importante materia prima en el entorno de los plsticos no
derivados del petrleo Desde hace algunos aos, en diversos pases se
han comenzado a tomar medidas con respecto a la disminucin de las
bolsas plsticas y al reemplazo por productos biodegradables.
(Basf,2005).
Otra fuente de plstico biodegradable a partir del almidn. Que asiendo
unos cambios se llamara el almidn termoplstico (TPS) el TPS es un
material que se obtiene por la disrupcin (modificacin) estructural que
se da dentro del grnulo de almidn cuando este es procesado con un
bajo contenido de agua y la accin de fuerzas trmicas y mecnicas en
presencia de plastificantes que no se evaporan fcilmente durante el
procesamiento. (www.epoiorg/topics/innovation,2001).
El TPS es compatible con el medio ambiente, es un material renovable y
puede incorporarse al suelo como abono orgnico. La acumulacin de
materiales plsticos puede contribuir en cierta medida a la
contaminacin ambiental, aunque la mayora de los materiales plsticos
tradicionales son recalcitrantes (inertes al ataque microbiano), la
contaminacin que producen es fundamentalmente visual, es por ello
21
que el inters hoy en da se ha dirigido al desarrollo de polmeros
biodegradables obtenidos de recursos naturales renovables. En la
actualidad hay mucha investigacin bsica y aplicada sobre el almidn,
por ser un polmero natural barato y abundante. El desarrollo y
produccin de almidn termoplstico biodegradable (Thermoplastic
starch, TPS) se considera importante para reducir la cantidad total de
desechos plsticos sintticos en el mundo.
Adems en la actualidad se esta asiendo nuevos polmeros
biodegradables a base del Acido ctrico el glicerol, el cual es un
subproducto del combustible biodiesel, puede ser combinado
qumicamente con un cido ctrico para producir polmeros
biodegradables con uso en el embalaje de frutas y verduras y otros
productos, segn cientficos del Servicio de Investigacin Agrcola
(ARS). Justin Barone, un qumico en el Laboratorio de Calidad Ambiental
mantenido por el ARS en Beltsville, Maryland, hizo el descubrimiento
durante estudios sobre los procesos para mejorar la eficacia de
insecticidas que contienen cido ctrico como un ingrediente activo. El
cido ctrico se desvanece muy rpidamente en el medio ambiente, una
caracterstica que limita su eficacia. Barone descubri que las molculas
que contienen hidrgeno y oxgeno, tales como glicerol, sorbitol o
polietileno glicol, reaccionaron con el cido ctrico para producir
polmeros conteniendo grupos de cidos ctricos. Las materias formadas
son polisteres biodegradables. Estudios adicionales mostraron que la
viscosidad de la materia puede variar de la consistencia de pintura a un
producto semejante al vidrio y que se disuelve lentamente, dependiendo
de cmo ocurre la reaccin qumica. Los nuevos polmeros
biodegradables podran proveer al sector de biodiesel un nuevo uso para
glicerol, el cual actualmente es desechado despus de la produccin del
biodiesel. El inters en los plsticos biodegradables elaborados a partir
de recursos renovables ha aumentado significativamente en los ltimos
aos. PHBV (polyhydroxybutyrate-polyhydroxyvalerate) copolmeros son
buenos ejemplos de este tipo de materiales. Este documento ofrece un
panorama general del proceso de fabricacin, propiedades,
22
biodegradabilidad, aplicacin y comerciales cuestiones relacionadas con
PHBV copolmeros. Ellos son producidos naturalmente por las bacterias,
y pueden ser procesados para hacer una variedad de productos tiles,
donde su biodegradabilidad y naturalidad son muy beneficiosos. PHBV
copolmeros se encuentran todava en la primera etapa de
comercializacin. Pero ellos se presentan en este documento como un
ejemplo de cmo las nuevas tecnologas pueden ayudar a satisfacer las
necesidades de la sociedad para plsticos y un medio ambiente limpio.
(Luzier, 1992).
En este trabajo se presentan ensayos de traccin en polihidroxibutirato
(PHB), un polmero biodegradable producido mediante la fermentacin
de carbohidratos por microorganismos. No es necesario abundar en las
ventajas que estos polmeros presentan para el cuidado del medio
ambiente tanto por su produccin a partir de fuentes renovables como
por su degradacin. Adems, el PHB es un termoplstico que puede ser
procesado mediante tcnicas convencionales de extrusin e inyeccin.
Las propiedades mecnicas en ensayos de traccin de este polmero
son tiles para evaluar posibles aplicaciones mdicas, ya que su
biocompatibilidad los convierte en potenciales materiales de reemplazo
de tejidos muertos o no-funcionales, soporte para liberacin lenta de
medicamentos o de crecimiento de clulas, material de sutura y de
recubrimiento de implantes, etc. La limitacin de tamao de los
fermentadores determina que la disponibilidad de este material est
limitada a una acotada produccin de pelculas delgadas (de algunos
micrones de espesor). Por ello en este trabajo se describe el dispositivo
experimental que permite realizar ensayos de traccin uniaxiales en
miniprobetas normalizadas delgadas. Tambin se presenta la respuesta
en traccin a temperatura ambiente, para muestras de PHB con
diferentes pesos moleculares, para un copolmero de PHB, en muestras
con el agregado de plastificante y la dependencia de la respuesta
mecnica en traccin con estos parmetros. (Povolo et al, 2000)
23
Los polihidroxialcanoatos (PHA) son sintetizados por muchas especies
de distintos gneros bacterianos en condiciones de crecimiento
caracterizadas por exceso en la fuente carbonada y limitacin de otros
nutrientes como nitrgeno o fsforo. Estos polmeros se acumulan en
grnulos intracitoplasmticos y son utilizados como fuente de carbono y
energa en condiciones de escasez nutricional. Resultados obtenidos en
el laboratorio nos permitieron demostrar que la degradacin de PHA
cumple un papel muy importante en la supervivencia bacteriana y en los
mecanismos de resistencia al estrs, en condiciones de baja
concentracin de nutrientes.
A su vez, estos biopolmeros son termoplsticos y poseen propiedades
similares a las de los plsticos derivados del petrleo. Pueden ser
totalmente degradados por las bacterias que los producen, y por otras
bacterias, hongos y algas. A pesar de las evidentes ventajas de los PHA
frente a los plsticos derivados del petrleo, su uso est muy limitado
debido a su alto costo de produccin. Por este motivo, gran parte de las
investigaciones realizadas sobre los PHA en los ltimos aos se han
concentrado en reducir los costos de produccin y aumentar la
productividad utilizando diversas estrategias. Entre ellas se encuentran
el rastreo de nuevas cepas productoras, la optimizacin de las
estrategias de cultivo y la produccin de PHA utilizando cepas de E. Coli
recombinantes. Todas ellas se estn llevando a cabo actualmente en
nuestro laboratorio. (Almeida, 2004).
24
VI.- MATERIALES Y METODOS
5.1 MATERIALES Y EQUIPOS
6.1.1 Del trabajo de laboratorio
Mquina de extraccin soxle
Placa petri
Cromatgrafo de gases
Reactivo de coloracin tincin de azul de nilo
Estufa
Balanza analtica
6.1.2 Del trabajo de proceso
Reactor fed batch
Maquina de extrusin de un huesillo
6.1.3 Del trabajo de gabinete
Computadora
Impresora
Papel
Otros
25
6.2 TRATAMIENTO DE ESTUDIO
Detallados en base a la identificacin de las variables en estudio
26
6.3 METODOS Y PROCEDIMIENTOS
6.3.1 FASE DE LABORATORIO
VARIABLES INDICADORES INSTRUMENTOS TECNICAS
QUMICO
Tincin de
Gram
Azul de Nilo
Mtodo de
Soxle
Cromatografa
de gases
Reactor fed-batch
Extractor soxle
Estrs
Nutricional
FSICO
Temperatura Sensor de temperatura
caudal de fuga Los rotametros,
flowmeters
viscosidad
efectiva
fluidmetro matthis
elcometer 2280
velocidad de
giro150rpm
sensor de velocidad y
giro
tiempo computadora
Software
Standard to
The production
of plastic for
extrusion
ORGANOLEPTICO textura N.A
Anlisis
organolptico
27
PRIMERA FACE
Para empezar el proceso de fermentacin, se inocular la bacteria
en un reactor fed-batch que contiene un medio equilibrado de
glucosa. Todos los nutrientes se encuentran en exceso, excepto el
fsforo y nitrgeno. El contenido en fosfatos y nitrgeno se limita a
apoyar slo una cierta cantidad de crecimiento celular. El
contenido de fosfato y nitrgeno disminuye a medida que crecen
las bacterias que finalmente llegan a un estrs nutricional.
A este punto en la fermentacin, muy poco PHB ha acumulado en
las clulas.
SEGUNDA FACE
En la fase dos del proceso en el que se aade la glucosa, las
clulas no pueden convertir la glucosa de aminocidos y
protenas, debido a la baja disponibilidad de fosfato y nitrgeno.
En consecuencia, el peso seco de la biomasa aumenta
considerablemente a medida que las clulas convierten la glucosa
en PHA, causando enormes cantidades de PHA a acumularse en
las clulas. El PHA concentracin puede representar hasta el 80%
de la biomasa total del peso seco al final del proceso de
fermentacin.
La acumulacin de PHA se determin cualitativamente mediante
tincin con azul de Nilo y cuantitativamente por cromatografa
gaseosa
TERCERA FACE
Una vez determinadas las condiciones ptimas para el cultivo de
una cepa de bacteria, se extrajo el polmero de la biomasa
mediante un aparato de extraccin contnua de Soxhlet.
CUARTE FACE
Empleando cloroformo como solvente. Se procedi al filtrado,
precipitado y centrifugado hasta obtener grnulos de PHB que
fueron secados en estufa hasta llegar a un peso constante. El
28
peso molecular promedio es del orden de 1 x 10
6
, se trata de un
polmero semicristalino con una temperatura de fusin de
aproximadamente 180 C y una temperatura de transicin vtrea
de 4 a 6 C.
QUINTA FACE
Los grnulos en solucin de cloroformo se dispusieron en
cpsulas de Petri y se dej evaporar el solvente, obtenindose
una pelcula de aproximadamente 10 mm de espesor.
6.3.2 FASE DE PROCESO
A. Inicio del proceso
Los termoplsticos obtenidos se agregan a la tolva para comenzar
el proceso de transformacin.
B. Huesillo con ngulo de hlice
Se empieza la homogenizacin del termoplstico. El ngulo de
hlice influye en la homogenizacin en trminos matemticos.

*
arctg
Donde:

arctg
=ngulo de hlice del canal helicoidal
=Paso del huesillo
=Dimetro del canal

C. Medicin de la viscosidad efectiva
Los termoplsticos fundidos difieren mucho en su viscosidad
adems disminuye al aumentar la temperatura y la velocidad de
corte (velocidad de rotacin del huesillo).
29
1
]
1
,
_
1
1
3
1
*
*
m
ef
V
R
Donde:
ef
=Viscosidad efectiva
=Viscosidad al a temperatura de extrusin

R=Radio del canal
=Constante reologica del termoplstico
m
V
=Velocidad media de extrusin
30
D. Clculo del caudal de fuga
Influenciada por la velocidad de giro del huesillo (150RPM) el
caudal de fuga en trminos matemticos.

2
3
cos * * * 12
* * * * p
f

Donde:
=Viscosidad de la masa fundida
=Coeficiente de excentricidad (generalmente 1.2)

p =Diferencia de presin
f
=Dimetro de fuga
=Altura de rejilla
=Anchura de la rejilla
E. Control del tiempo para su moldeo
El tiempo preciso para calentar el material puede determinarse
por la siguiente expresin:
( )
t
t t C

* * 10 * 15 . 1
* * *
3
2
1 2

Donde:
C=Calor especifico del material J/Kgr*c
=Peso especifico del material N/m

3
t
1
=Temperatura inicial en: c
t
2
=Temperatura de reenblandamiento: c
=Espesor de la lmina: m
31
Y=Conductibilidad trmica: W/m c
=lmina: c
Luego se lleva a cualquier clase de molde para su
distribucin
VII.-DURACIN PROBABLE PARA LA REALIZACIN DE ESTE
PROYECTO.
El trabajo se empezara a realizar en enero del 2010 y la duracin es 6
semanas. La programacin del proyecto es la siguiente
ACTIVIDADES SEMANAS
1 2 3 4 5 6
Elaboracin de un documento de sntesis de la
informacin
X
Formacin del grupo de trabajo X X
Coordinacin con las industrias plsticas X X
Trabajo de laboratorio X
Trabajo de la siembra y modificacin de la bacteria De
la bacteria
X X
Trabajo del proceso X
Elaboracin del documento final para los patrocinadores X X
Correccin y entrega del documento X X
VIII.-FINANCIAMIENTO
Este proyecto ser financiado por las empresas de fabricacin de
plsticos que buscan mejorar sus productos para disminuir la
contaminacin ambiental.
Tambin podra presentar este proyecto al ministerio del medio ambiente ya
que nuestro objetivo es disminuir la contaminacin ambiental que es causada
por los plsticos convencionales.
32
IX.-BIBLIOGRFA CONSULTADA
1. Almeida A.; Ruiz A. J.; Lpez I. N.; Pettinari M. J.(2004) Bioplsticos:
una alternativa ecolgica. QumicaViva Nmero 3, 122 133.
2. Acosta, A.H; Velasco, I.R.; Villada, S.H. (2008) Investigacin de
Almidones Termoplsticos Precursores de Productos Biodegradables,
Informacin Tecnolgica, Colombia, Vol. 19 N 2.
3. Amigos de la Tierra (2000) Reciclar el Plstico. Volumen 1, 1 7.
4. Barone, J.R. (2005) Biological Systems Engineering Department
Virginia Polytechnic. Institute and State University. U.S.A. Universidad
de Massachusset.
5. BASF launches biodegradable packaging plastic (Ahmed Elhamin 2005).
6. En www.epo.org/topics/innovation ledo el 2002.
7. Cock, S.E; Stouvenel, R.D. (2005) Produccin Biotecnolgica del acido lctico:
estado del arte, ciencia y tecnologa de alimentos, Mxico Vol. 5
8. Segura, D.E., Noguez, R.A., Guadalupe E.E. (2007) Contaminacin
Ambiental y Bacterias Productoras de Plsticos Biodegradables;
Biotecnologa Volumen 14, 362 - 371
9. Almeida, A. (2004) Bioplsticos una alternativa ecolgica. Tesis de
maestra en qumica biolgica. Buenos aires: universidad de buenos
aires
10. Povolo, F., Hermida, E.B., Miyazaky, S.A., Quagliano, J.A. (2000)
Traccin en Pelculas de Polmero Biodegradable Jornadas SAM
2000 - IV Coloquio Latinoamericano de Fractura y Fatiga, Agosto
11. En www.patentados.com.inventor:GILTSOFF, BAYAN, OLEG, THADIUS
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12. LUZIER W. D. (1991) Materials Derived from Biomass/Biodegradable
materials; colloquium entitled "Industrial Ecology," Mayo
13. Johnson, K.E.; Pometto, A.L., NIKOLOV, Z.L. (1993) Degradation of
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14. Lpez, M.A. (2000). La biotecnologa.Mxico: Coleccin Tercer Milenio,
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33
15. Medina, T.R. (2007) plstico biodegradable. Mexico: universidad
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16. Noguez, E.R. & Guadalupe, E.I. (2006) Contaminacin ambiental y
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17. Prescott, S.C & Dunn, C.G. (1940) Industrial microbiologyc.New Cork:
McGraw-Hill.
18. Volke, S.T. (1998) Ciencia y Desarrollo (1998) Los Plsticas en la
actualidad y su efecto en su entorno Volumen 24, 54 - 61
19. Sosa, A.M. (2000) Los Plsticos: materiales a la medida volumen 1
, 1 - 4
34
X.-ANEXOS: MATRIZ DE CONSISTENCIA
PROBLEMA OBJETIVOS HIPOTESIS VARIABLE INDICADORES
Por qu es
sostenible el
desarrollo de los
plsticos
biodegradables?
Cules son los
desarrollos en la
actualidad, para la
produccin de
plsticos
biodegradables?
Cmo podemos
disminuir la
contaminacin
ambiental?
Qu tan
competitivo puede
ser la produccin
de plsticos
biodegradables?
O. General
Obtener plsticos
biodegradables a
partir de
Escherichia Coli
recombinante
O. Especficos
Modificar
genticament
e a la E.
Coli.
Producir
plsticos
biodegradabl
es en
condiciones
de estrs
nutricional
en el medio
de cultivo.
Utilizar
fuentes
renovables
de carbono.
Elaboracin de
plsticos
biodegradables por
medio de la E.
Coli recombinante
V. Independiente
E. Coli
recombinante para
producir plsticos
biodegradables.
V. Dependiente
Procesamiento de
plsticos
biodegradables.
I. independientes
Qumicos
Tinsin gram
con azul de
nilo.
cromatografa
de gases.
I. Dependiente
Fsico
Temperatura.
Caudal de
fuga.
Viscosidad
efectiva
Velocidad de
giro
Tiempo de
recalentamien
to
Organolpticos
Textura
35

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Metodologa de la Investigacin Cientfica Plsticos Biodegradables

=Paso del huesillo

=Dimetro del canal

=Viscosidad al a temperatura de extrusin

=Viscosidad de la masa fundida

=Coeficiente de excentricidad (generalmente 1.2)

=Peso especifico del material N/m

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