METABOLISMO DEL NITRGENO Y DEL ESQUELETO DE CARBONO DE LOS AMINOCIDOS

Dra. Carmen Pelez Pinelo Bioqumica para 2 Ao Medicina - CUNOR, 2012

CATABOLISMO DEL ESQUELETO DE CARBONO Y DEL NITRGENO DE LOS AMINOCIDOS Competencia: El estudiante explica los procesos enzimticos que permiten metabolizar los aminocidos de las protenas dietticas.
Subcompetencias: Explica el recambio diario de protenas y aminocidos. Explica el destino metablico del Nitrgeno de los aminocidos. Explica las reacciones de Transaminacin, Desaminacin Oxidativa del cido Glutmico y el ciclo de la Urea. Explica el destino metablico de los esqueletos de carbono de los L-Alfa aminocidos. Explica las diferencias entre los grupos de aminocidos, Glucognicos, Cetognicos y Gluco-cetognicos. Clasifica a los aminocidos segn le den origen a Oxalacetato, AlfaCetoglutarato, Succinil- CoA, Fumarato, Piruvato o Acetil CoA (intermediarios anfiblicos del Ciclo de Krebs) Explica la desaminacin de Asparagina y Glutamina. Relaciona los trastornos del metabolismo del nitrgeno con hallazgos clnicos de enfermedad heptica y/o renal.

GENERALIDADES

Aminocidos:
Elemento

estructural en pptidos y protenas Precursores de neurotransmisores y hormonas Fuente de energa de la dieta y durante ayuno
Gluconeognesis:

Esqueletos carbonados usados para producir glucosa combustible metablico a tejidos aminocidos glucognicos Produccin de acetil-CoA o acetoacetato proporcionan precursores inmediatos de lpidos o cuerpos cetnicos aminocidos cetognicos

Consumo adecuado de protenas

Cantidad

de aa puede convertirse en carbohidratos (glucgeno) o grasas (TAG) para su almacenamiento Los aa no tienen forma de almacenamiento

Cuando se metabolizan aa N resultante en exceso debe excretarse amonio libre es txico se convierte en Urea
Urea:

Neutra, menos txica, muy soluble y se excreta en orina Producida por Ciclo de Urea en hgado >80% N excretado en forma de urea (25-30 g/24 horas) y en forma de cido rico, creatinina e in amonaco

Esqueletos carbonados derivados de metabolitos en vas centrales, no son necesarios en la dieta

Esqueletos carbonados que no pueden derivarse del metabolismo humano normal, deben aportarse con la dieta

Proporcin significativa de reservas potenciales de energa (normalmente no se usan en produccin de energa) Ayuno prolongado: protena muscular se degrada a aa para sntesis de protenas esenciales y gluconeognesis (mantener [glicemia]) prdida de masa muscular

Para que protenas contribuyan al metabolismo energtico o reservas de aa esenciales

Aminocidos libres transportados a vena porta y conducidos al hgado para metabolismo energtico o biosinttico o se distribuyen a otros tejidos En tejidos: aa se desaminan para proporcionar esqueleto carbonado

Luego de digestin y absorcin.

Degradacin de aminocidos se produce dentro de clula Elimina grupo amino que se incorpora a urea para excrecin Esqueleto carbonado restante (-cetocido) puede degradarse a CO2 y H2O, convertirse a glucosa, acetil-CoA o cuerpos cetnicos

Existen 3 mecanismos para eliminacin del grupo amino de aminocidos:

Transaminacin
Transferencia de grupos amino a aceptor cetocido apropiado (cetoglutarato u oxalacetato) + fosfato de piridoxal (intermediario piridoxamina)

Desaminacin oxidativa
Eliminacin oxidativa del grupo amino (produce cetocidos) + oxidasas (flavoprotenas) que producen amonaco

Eliminacin de una molcula de agua por una deshidratasa

Se hidroliza para producir un -cetocido y amonaco

TRANSAMINACIN

Antes de metabolizarse los esqueletos carbonados de aa, debe eliminarse el grupo -amino Principal mecanismo para eliminacin: transaminacin o transferencia de grupo amino desde aa hasta aceptor apropiado cetocido (-cetoglutarato u oxalacetato) Aminotransferasas o transaminasas eliminan grupo amino de aa y producen el -cetocido

Usan fosfato de piridoxal

Aceptor principal del grupo amino

Grupo amino del glutamato se transfiere a oxalacetato x 2 reaccin de transaminacin

Produce aspartato y regenera alfa cetoglutarato

1.

Reaccin de aminotransferasa se produce en 2 etapas con 3 pasos cada una Conversin de aminocido a cetocido

Transiminacin Tautomerizacin Hidrlisis

2.

Conversin de -cetocido en aminocido

Hidrlisis Tautomerizacin Transiminacin

Aminotransferasas difieren en especificidad para aa sustrato en 1 etapa de reaccin de transaminacin: genera -cetocidos diferentes La mayora acepta slo -cetoglutarato u oxalacetato como -cetocido en 2 etapa de reaccin genera glutamato o aspartato como nico aa producto Los grupos amino provenientes de la mayora de aa son encauzados en formacin de glutamato o aspartato

DESAMINACIN OXIDATIVA

Glutamato se desamina oxidativamente por accin de Glutamato Deshidrogenasa (GDH) origina amonaco y regenera -cetoglutarato (reacciones de transaminacin adicionales) GDH: nica enzima mitocondrial que acepta NAD o NADP como coenzima redox
Inhibida alostricamente por GTP y NADH (abundante energa metablica) Activada por ADP y NAD (necesidad de generar ATP) y su activacin estimula flujo a travs del ciclo ATC para produccin de ATP aumentada por fosforilacin oxidativa (por que -cetoglutarato intermediario ciclo ATC)

1.

2.

tomos de N se incorporan a urea a partir de 2 fuentes Amonaco producido a partir de glutamato (glutamato deshidrogenasa) entra como carbamol fosfato cido asprtico: Forma fumarato y se recicla en ciclo de ATC a oxalacetato puede aceptar otro grupo amino para volver a formar aspartato o participar en ciclo ATC o gluconeognesis

Canalizacin de grupos amino de otros aa al glutamato y aspartato proporciona nitrgeno para sntesis de urea Otros mecanismos (aminocido oxidasas o deshidratasa) contribuyen menos al flujo de grupos amino de aa a la urea

Glutamina y Alanina son transportadores clave de grupos amino entre msculo e hgado Glutamato
Portador de grupos amino para reaccin de GDH y precursor de glutamina (consume 1 amonaco) 3 formas (glutamato, cetoglutarato, glutamina) se convierten unas en otras por aminotransferasas, glutamato deshidrogenasa, glutamina sintetasa y glutaminasa

Glutamina

Tampn para utilizacin de amonaco, fuente de amonaco y portadora de grupos amino

Amonaco por ser txico debe tener equilibrio entre produccin y utilizacin Reaccin de GDH es reversible en condiciones fisiolgicas si se requieren grupos amino para biosntesis de aa y otros procesos biosintticos

CICLO DE LA UREA

Reaccin global Los 2 tomos de N de urea son aportados por amonaco y aspartato; tomo de C proviene de HCO3 2 reacciones mitocondriales y 3 reacciones citoslicas

Adquisicin de 1er tomo de N de la urea

El inicio es la sntesis de carbamol fosfato a partir de in amonio y bicarbonato en mitocondrias hepticas

Requiere

2 ATP y es catalizada por CPS I (enzima carbamol fosfato sintetasa) en matriz mitocondrial
Requiere

N-acetilglutamato como cofactor

CPS I (Carbamoil fosfato sintetasa) cataliza una reaccin esencialmente irreversible: PASO LIMITANTE DE VELOCIDAD DEL CICLO DE LA UREA

Fosforilacin activa HCO3 para formar intermediario carboxifosfato + ADP

NH3 ataca carboxifosfato para producir carbamato (desplazamiento del fosfato) + Pi

2 ATP fosforila carbamato = carbamoil fosfato + ADP

Condensacin de carbamol fosfato con aa ornitina para formar citrulina es catalizada por ornitina transcarbamoilasa (2 paso) Citrulina se condensa con aspartato (2 tomo de N) para formar argininosuccinato catalizada por argininosuccinato sintetasa y requiere 2 ATP (3 paso)
Escinde

ATP a AMP y PPi ( 2 Pi) Con la formacin de argininosuccinato se ensamblaron todos los componentes de la molcula de urea

Argininosuccinato es escindido por argininosuccinasa en arginina y fumarato

Grupo

amino donado por aspartato permanece unido a esqueleto carbonado se remedia al eliminar fumarato produce arginina (precursor inmediato de urea)

Fumarato se convierte en oxalacetato por fumarasa y malato deshidrogenasa (reacciones iguales al ciclo ATC pero en citosol) oxalacetato se usa para gluconeognesis

Arginina es escindida por arginasa (reaccin de hidrlisis) hasta 1 molcula de urea y regenera 1 molcula de ornitina Ornitina puede usarse para reiniciar esta va Urea se difunde en sangre y es transportada al rin para ser excretada en orina

Sntesis de la Urea
CO2 + NH3

Reacciones de las que consta la sntesis de urea + 2 ATP Carbamoil fosfato + 2 ADP + Pi
Citrulina + Pi Argininosuccinato + AMP + Ppi Arginina + fumarato

Carbamoil fosfato + orinitina Citrulina + aspartato + ATP Argininosuccinato

Arginina
CO2 + NH3 + 3 ATP + aspartato

Urea + ornitina
Urea + 2 ADP + AMP + 2 Pi + PPi + fumarato

Ciclo de urea convierte: 2 grupos amino (1 del amonaco y 1 del aspartato) + 1 tomo de C del HCO3 = producto urea (relativamente atxico)
Costo

de 4 enlaces fosfato de alta energa Energa consumida es mayor que la recuperada por oxidacin de esqueletos carbonados de aa que donaron sus grupos amino al glutamato y aspartato por transaminacin Mitad del oxgeno consumido en hgado se emplea para suministrar esta energa

Primeros pasos del ciclo ocurren en mitocondria Citrulina difunde al citosol para completar ciclo con liberacin de urea (a partir de arginina) y regeneracin de ornitina Ornitina se transporta de nuevo a travs de membrana mitocondrial para continuar ciclo Sntesis de urea ocurre casi exclusivamente en hgado

2 parte del Ciclo de la Urea: Carbonos procedentes de fumarato pueden entrar a mitocondria luego de hidratacin hasta malato y reciclaje a travs de enzimas del ciclo de ATC hasta oxalacetato y finalmente aspartato

REGULACIN DEL CICLO DE LA UREA

Control en concentracin de N-acetilglutamato: Activador alostrico esencial de CPS-I

N-acetilglutamato

se sintetiza a partir de glutamato y acetil-CoA por accin de N-acetilglutamato sintasa Incremento en velocidad de degradacin de aa, [glutamato] aumenta por la transaminacin estimula sntesis de N-acetilglutamato Activacin de CPS-I acelera velocidad de produccin de urea

Concentraciones altas de arginina estimulan la Nacetilacin del glutamato

Concentraciones de enzimas del ciclo aumentan o disminuyen en respuesta a dieta con mucha o poca protena

Acidosis: sntesis y excrecin de urea disminuyen, aumenta excrecin de NH4+

Defecto en enzimas del ciclo tiene consecuencias graves Produce hiperamoniemia y conduce a edema de SNC y muerte Defecto ms comn es: ornitina transcarbamoilasa (patrn hereditario ligado a X) Resto de defectos asociados son autosmicos recesivos Deficiencia arginasa produce aumento de arginina y amonio en sangre

BALANCE NITROGENADO

No hay forma significativa de almacenamiento de N o compuestos amino en humanos EQUILIBRIO NITROGENADO

En dieta promedio, contenido de protena excede cantidad requerida para suministrar aminocidos esenciales y no esenciales para sntesis proteica Cantidad de N excretado es aproximadamente igual que la ingerida

BALANCE NITROGENADO POSITIVO

Necesidad de aumentar sntesis proteica (crecimiento del nio, recuperacin de traumatismo, mujeres embarazadas) N excretado es menor que el consumido

BALANCE NITROGENADO NEGATIVO

Salida

de N excede al ingreso Despus de ciruga, cncer avanzado, insuficiencia en ingestin de protenas adecuadas o de alta calidad Malnutricin proteica: Necesidad de sintetizar protenas corporales esenciales Las otras protenas (msculo o Hb) se degradan y se pierde ms N del que se consume en dieta Ayuno, inanicin, diabetes mal controlada
Protenas

corporales se degradan a aa y sus esqueletos carbonatos se usan en gluconeognesis

METABOLISMO DE ESQUELETOS CARBONADOS DE AMINOCIDOS

Metabolismo de aa se entrelaza con metabolismo de Carbohidratos y lpidos Todos los C pueden convertirse en intermediarios de la va glucoltica, ciclo de ATC o metabolismo lipdico
Primer

paso: transferencia de grupo -amino por transaminacin a -cetoglutarato u oxalacetato, suministrando glutamato y aspartato (fuentes de N del ciclo de urea)
Excepcin:

lisina (no sufre transaminacin)

Aminocidos pueden ser glucognicos o cetognicos Glucognicos

Aa

que introducen C en ciclo de ATC a nivel de cetoglutarato, succinil-CoA, fumarato u oxalacetato & producen piruvato = aumentan sntesis neta de glucosa por gluconeognesis que proporcionan C al metabolismo central a nivel de acetil-CoA o acetoacetil-CoA

Cetognicos
Aa

Cetognico

Glucognico

Ala, Asp, Glu Transaminacin o desaminacin oxidativa: -cetocido resultante es precursor directo de oxalacetato
Puede convertirse

en

PEP y glucosa

Glucognico & Cetognico

Triptfano
Escisin

de anillo heterocclico y reacciones complejas ncleo de estructura de aminocido se libera como Ala (precursor glucognico) Equilibrio de C se convierte en glutaril-CoA (precursor cetognico)

BIOSNTESIS DE AMINOCIDOS

Implica sntesis de esqueletos carbonados de cetocidos seguida de adicin de grupo amino por transaminacin Esenciales no pueden ser sintetizados por humanos y deben estar en la dieta Hay aminocidos no esenciales que dependen de una cantidad adecuada de aminocidos esenciales

ENFERMEDADES HEREDITARIAS DEL METABOLISMO DE AMINOCIDOS

Fenilcetonuria

Errores innatos del metabolismo

Alcaptonuria
Deficiencia de oxidacin de cido homogentsico (intermediario del catabolismo de tirosina y fenilalanina) Depsito de pigmento oscuro en cartlago tisular (artritis grave)

Deficiencia de enzima fenilalanina hidroxilasa Hidroxilacin es requerida para degradacin del aa Da lugar a excrecin urinaria excesiva de fenilpiruvato y fenillactato y retraso mental profundo

Enfermedad de la orina de jarabe de arce

Acumulacin de cetocidos de los aa de cadena ramificada por defecto en descarboxilacin Cetoaciduria, retraso fsico y mental, olor a jarabe de arce en orina

UTILIDAD CLNICA

Presencia de Transaminasas en clulas de msculo o hgado las convierte en marcadores de dao tisular SGOT o ASAT (transaminasa glutamato-oxalacetato srica o aspartato transaminasa) SGPT o ALAT (transaminasa glutamato-piruvato srica o alanina transaminasa) Ejemplo:
Aumentan

concentracin luego de IAM cuando msculo cardaco daado libera contenido intracelular Dao heptico

Donde quiera que se ama el arte de la medicina, se ama tambin a la humanidad.