NUEVOS AVANCES EN PROGRAMAS DE SINCRONIZACION DE CELOS EN VAQUILLONAS INSEMINADAS A TIEMPO FIJO

Cutaia L123., Peres L2., Pincinato D2., A. Menchaca34, Bo G.A12 Instituto de Reproduccin Animal Crdoba (IRAC), 2Universidad Catlica de Crdoba, 3 Syntex SA, 4Universidad de la Repblica Uruguay.

Introduccin Durante los ltimos aos se ha producido un gran avance en el desarrollo de programas de inseminacin artificial a tiempo fijo, lo cual increment notablemente la cantidad de animales incluidos en estos programas. (Bo et al., 2005; Baruselli et al., 2003). Datos de la bibliografa indican que es posible obtener porcentajes de preez promedios del 50% a primo inseminacin, tanto en vacas con cra al pie como en vaquillonas (Cutaia et al., 2003). Este incremento en la cantidad de animales IATF se debi fundamentalmente a que se incluyeron una gran cantidad de vacas con cra al pie y en pobre condicin corporal. Se ha demostrado que la adicin de 400 UI de Gonadotropina Corinica Equina (eCG) a los protocolos que utilizan dispositivos intravaginales con progesterona (P4) y benzoato de estradiol (EB) resultan en un incremento de alrededor de 20 puntos en los porcentajes de preez en esta categora, llegando a valores promedios del 50% (Cutaia simposio 2003, Baruselli Simposio 2003, Bo, Simposio 2005). Sin embargo, no se han desarrollado programas especficos para incrementar los porcentajes de preez obtenidos en vaquillonas ya que es de esperar una mayor tasa preez en esta categora que en las vacas con cra al pie. Una de las posibles causas de los resultados obtenidos en vaquillonas, podra deberse al hecho de que altos niveles de P4 circulantes durante el tratamiento, suprimen la frecuencia y magnitud de los pulsos de LH. Esta supresin de la LH podra derivar en un menor crecimiento del folculo dominante. Esta situacin sera mucha mas marcada an en animales de menor peso y tamao metablico como es el caso de las vaquillonas, las cuales por lo general se encuentran cclicas, es decir con un cuerpo lteo (CL) funcional. Por lo tanto durante el tratamiento se producira una sumatoria entre la P4 endgena (luteal) y la exgena aportada por el dispositivo con P4. Datos preliminares indican que mediante la aplicacin de una dosis de PGF en el da 4 del tratamiento con un dispositivo con P4 (Moreno et al) o mediante la adicin de media dosis de PGF en el Da 0 del tratamiento (Cutaia et al) se obtiene una mayor tasa de crecimiento del folculo dominante. Efecto de la dosis de P4 contenida en un dispositivo intravaginal con P4 y la induccin de luelisis temprana. Se disearon dos experimentos con el objetivo de: 1) evaluar el efecto de la aplicacin de una dosis reducida de PGF (Ciclase, Syntex) en el momento de inicio (Da 0) de un tratamiento utilizando dispositivos intravaginales con P4; 2) evaluar el efecto del uso de

DIB (Syntex, Argentina) conteniendo 1g de progesterona (P4) 0,5 de P4 (Syntex); y 3)evaluar el uso de DIB (Syntex, Argentina) conteniendo 1g de progesterona (P4) 0,5 de P4 (Syntex) nuevos o reutilizados.

En el Experimento 1 se utilizaron 482 (Bo et al., 2006) vaquillonas cruza ceb, de entre 24 y 30 meses de edad con una condicin corporal (CC) de 3,0 a 3,5 (Escala 1-5). Todas las vaquillonas se encontraban ciclando (presencia de cuerpo lteo), determinado por ultrasonografa (Pie Medical, Falco 100-7,5 Mhz) en el da de inicio del tratamiento (Da 0). En el Da 0 las vaquillonas fueron divididas al azar para recibir uno de cuatro tratamiento en un diseo 2x2 factorial. Las vaquillonas del Grupo PGF Da 0y8 recibieron media dosis de PGF (75ug de D-Cloprostenol; Ciclase, Syntex) en el Da 0 del tratamiento junto con 2 mg de EB (Benzoato de Estradiol, Syntex) y otra dosis igual en el momento de retirado el dispositivo (Da 8). Las vaquillonas del Grupo PGF Da 8) recibieron solo una dosis completa de PGF (150ug de D-Cloprostenol; Ciclase, Syntex) en el Da 8. A su vez los animales de cada grupo fueron subdivididos para recibir un DIB (Syntex) conteniendo 1 g de progesterona (P4; Grupo DIB 1g) o un DIB (Syntex) conteniendo 0,5 g de P4 (Grupo DIB 0,5g) por 8 das. El esquema de los tratamientos se encuentra resumido en la Tabla 1. Tabla 1. Grupos de Tratamiento Experimento 1.
DIB 1 g PGF Da 8 DIB 1g+2 mg EB X DIB+150ug PGF 1 mg EB IATF (52 a 56h pos DIB) DIB 1 g PGF Da 0y8 DIB 1g+2 mg EB +75ug PGF X DIB +75ug PGF 1 mg EB IATF (52 a 56h pos DIB) DIB 0,5 g PGF Da 8 DIB 0,5g+2 mg EB X DIB+150ug PGF 1 mg EB IATF (52 a 56h pos DIB) DIB 0,5 g PGF Da 0y8 DIB 0,5g+2 mg EB +75ug PGF X DIB +75ug PGF 1 mg EB IATF (52 a 56h pos DIB)

Da 0 Da 8 Da 9 Da 10

Se encontr una diferencia (P=0,04: Tabla 2) a favor del grupo que recibi PGF en el Da 0y8 respecto al grupo que recibi PGF en el Da 8, para los grupos con DIB de 1 g de P4, sin embargo los porcentajes obtenidos en los dos grupos de DIB 0,5 g de P4 fueron intermedios, encontrndose una diferencia numrica a favor de las vaquillonas que recibieron PGF en el Da 0y8 respecto al grupo que recibi PGF en el Da 8. Tabla 2. Porcentajes de preez obtenidos en vaquillonas tratadas con DIB con 1g 0,5 g de P4 y tratadas con PGF en el Da 0 y 8 8 del tratamiento. DIB 1 g PGF Da 8 60/121 (49,6%)a P=0,04 DIB 1 g PGF Da 0y8 74/118 (62,7%) b DIB 0,5 g PGF Da 8 63/119 (52,9%) ab DIB 0,5 g PGF Da 0y8 70/124 (56,5%) ab

Se analizaron los grupos de tratamiento por efectos principales (Tabla 3) y no se encontr diferencias entre los porcentajes de preez en vaquillonas tratadas con DIB de 1 g de P4 o de 0,5 g de P4 (P>0,05). Sin embargo los porcentajes de preez tendieron a ser diferentes (P=0,06) entre los grupos con PGF al Da 8 o al Da 0 y 8. Tabla 3. Porcentajes de preez obtenidos en vaquillonas tratadas con DIB con 1g 0,5 g de P4 y tratadas con PGF en el Da 0 y 8 8 del tratamiento por efectos principales. Dispositivo DIB 1 g P4 DIB 0,5 g P4 Momento PGF 134/239 (56,1%) 133/243 (54,7%) PGF Da 0 PGF Da 0y8 P=0,06 Concluimos que la lutelisis temprana incrementa las tasas de preez en vaquillonas cruza Ceb tratadas con un DIB con 1,0 o 0,5 g de P4. Se dise un segundo experimento (Cutaia et al., 2006) con el objetivo de evaluar las tasas de preez obtenidas en vaquillonas cruza ceb tratadas con dispositivos nuevos o usados impregnados con 0,5 o 1,0 g de P4. Se utilizaron 239 vaquillonas cruza ceb de 20 a 26 meses de edad y con una condicin corporal de entre 2,5 a 3,5 (Escala 1-5). Las vaquillonas fueron asignadas a azar a 1 de 4 grupos de tratamiento en un diseo 2 x 2 factorial. En el Da 0, todas las vaquillonas recibieron 2 mg de benzoato de estradiol (EB, Syntex, Argentina) i.m. y fueron divididas para recibir un dispositivo intravaginal nuevo o usado impregnado con 0,5 g de P4 (DIB 0.5; Syntex) o un dispositivo impregnado con 1 g de P4 (DIB, Syntex). En el Da 8, se retiraron los DIB y se aplic una dosis de 150 g D (+) cloprostenol (Ciclase, Syntex) i.m. En el Da 9, todas las vaquillonas recibieron 1 mg de EB y fueron IATF entre las 52 y 56 h luego de retirados los DIB. El da de colocacin de los DIB se realiz ultrasonografa (US) para determinar la presencia de un cuerpo lteo y todas las vaquillonas presentaron uno. El diagnstico de preez se realizo tambin por US a los 30 das de la IATF. Como puede observarse en la Tabla 4, no se encontr diferencia (P>0.6) en las tasas de preez de las vaquillonas tratadas con DIB nuevos o usados de 1,0 g de P4 o aquellas tratadas con DIB nuevos conteniendo 0,5 g de P4. Sin embargo, se encontr un menor porcentaje (P<0,003) de preez en aquellas vaquillonas tratadas con DIB usados de 0,5 g de P4. 144/242 (59,5%)y 123/240 (51,3%) z

Tabla 4. Porcentajes de preez obtenidos en vaquillonas cruza ceb inseminadas a tiempo fijo y tratadas con dispositivos intravaginales DIB nuevos o usados conteniendo 1,0 o 0,5 g de P4. DIB Nuevo 1,0 g de P4 26/60 DIB Usado 1,0 g de P4 27/59 DIB Nuevo 0,5 g de P4 29/60 DIB Usado 0,5 g de P4 12/60

(43,3%) a (45,0%) a (48,3%) a ab Superndidices diferentes en la misma fila difieren (P<0,003)

(20,0%)b

Concluimos que mediante la utilizacin de DIB nuevos o usados conteniendo 1 g de p4 o DIB nuevo conteniendo 0,5 g de P4 en programas de IATF se obtienen similares resultados de preez. Sin embargo el DIB 0,5 usado resulta en menores porcentajes de preez por lo que no sera factible su reutilizacin.

GnRH y eCG asociados a un dispositivo intravaginal con P4 para incrementar las tasas de preez en vaquillonas prepuberales inseminadas a tiempo fijo.

Se utilizaron 486 (Menchaca et al., 2006) vaquillonas Aberdeen Angus y Hereford de entre 14 y 16 meses de edad con peso 240 kg, y una CC (Media SD) de5.1 0.3 (Escala 1-5). Se determin el estado prepuberal de las vaquillonas por la ausencia de estro 20 das previos al comienzo del experimento y fue confirmado por ultrasonografa transrectal (Aloka 500) al momento de iniciado el tratamiento. Todas las vaquillonas recibieron en el Da 0 del tratamiento un DIB (1,0g de P4, Syntex) junto con 2 mg de BE (Syntex). El DIB fue retirado 7 das mas tarde junto con la aplicacin de 150ug de D(+)cloprostenol (Ciclase, Syntex) y ese momento las vaquillonas fueron divididas para recibir 1 de 4 tratamientos en un diseo 2x2 factorial. Las vaquillonas del Grupo control recibieron 1 mg de EB en el Da 8 y fueron IATF 52 a 56 h de retirado el DIB. Las vaquillonas del grupo EB+eCG recibieron una dosis de 300 IU de eCG (Novormon, Syntex) en el Dia 7 y 1 mg de EB en el Da 8 y fueron IATF 52 a 56 h de retirado el DIB. Las vaquillonas del Grupo GnRH recibieron una dosis de GnRH (Gonasyn, Syntex) a las 48 h de retirado el DIB y fueron IATF 6 h mas tarde. Por ltimo las vaquillonas del Grupo GnRH +_eCG recibieron el mismo tratamiento que las del grupo anterior mas las adicin de 300 UI de eCG en el momento de retirado el DIB. Se realiz diagnstico de preez a los 45 das de la IATF y los datos fueron analizados por regresin logstica. La tasa de preez aument por el uso de GnRH (48,7%, 119/244) vs EB (98/245, 40,0%; P <0.05) y tambin por el uso de eCG (49,8%, 120/241) vs no eCG (40,3%, 97/241; P <0.01). La asociacin entre GnRH+eCG result en una preez del 55.3% (68/123), contra el 36,2% (46/127; P <0.05) obtenido en el Grupo control La preez fue intermedia para los grupos GnRH y EB+eCG (42,4%, 50/118 y 44,1%, 52/118; respectivamente). Los resultados sugieren que la GnRH como inductor de ovulacin y la eCG administrada al momento de retirado el progestgeno resulta en mayores tasas de preez que las obtenidas con el tratamiento convencional utilizando EB. en vaquillonas prepberes. Influencia del dimetro uterino, tamao de los ovarios y estructuras ovricas sobre la fertilidad en vaquillonas cruza ceb inseminadas a tiempo fijo Se realizo un experimento (Cutaia et al., 2006) con el objetivo de evaluar la influencia de diferentes caractersticas del tracto reproductivo de vaquillonas de 15 meses de edad y su relacin con las tasas de preez en programas de IATF. Las vaquillonas (n=107)

utilizadas fueron cruza ceb, con una condicin corporal de entre 3,0 a 3,5 (Escala 1-5) y con un peso de entre 320 a 360 kg. En el Da 0, todas las vaquillonas fueron examinadas por ultrasonografa transrectal para determinar el dimetro promedio de los cuernos uterinos (inmediatamente craneal a la bifurcacin), la media del tamao de los ovarios (ancho por alto/2) y la presencia de estructuras ovricas [CL, Folculos > 8 mm de dimetro (Fol.) o solamente folculos pequeos (SE, < 8 mm de dimetro)]. El dimetro de los cuernos fue clasificado como 1 (<1cm); 2 ( 1 y < 1,5 cm) y 3 ( 1,5 cm). Los ovarios fueron tambin clasificados como 1 (<1cm); 2 ( 1 y < 1,5 cm) y 3 ( 1,5 cm). Todas las vaquillonas recibieron 2 mg de EB (Syntex, Argentina) y un DIB nuevo (Syntex) en el Da 0, 150 g de D(+)cloprostenol IM (Ciclase, Syntex) en el momento de retirado el DIB (Da 8); 1 mg EB IM en el Da 9 y fueron IATF con semen congelado del mismo toro entre las 52 e 56 h de retirado el DIB. Se determin la tasa de preez por medio de ultrasonografa a los 30 das de la IATF. De las 107 vaquillonas examinadas, 15 (14,0%) fueron clasificadas como tero Grado 1, 69 (64,4%) como tero grado 2 y 23 (21,5%) como tero Grado 3. La distribucin del tamao de los ovarios fue: ovario Grado 1: 3 (2,8%); ovario Grado 2: 30 (28,0%) y ovario Grado 3: 74 (69,1%). La distribucin por estructuras ovricas fue; CL: 68 (63,5%); Fol.: 31 (28,9%) y SE: 8 (7,4%). Se encontr una tendencia a mayor tasa de preez (P=0,08) en las vaquillonas clasificadas como tero Grado 3 (12/23; 52,2%) que aquellas clasificadas como tero grado 1 (5/15; 33,3%) o 2 (22/69; 31,9%). No hubo diferencias (P>0,1) entre las tasas de preez en las vaquillonas con ovario Grado 1 (1/3; 33,3%), 2 (11/30; 36,7%) o 3 (27/74; 36,5%). No hubo diferencia (P>0,1) entre las vaquillonas que presentaron CL (24/68; 35,3%), Fol. (11/31; 35,5%) o SE (4/8; 50,0%). Considerando solamente las vaquillonas que presentaron un CL, las tasas de preez fueron mayores (P=0,01) en las vaquillonas con tero grado 3 (11/18; 61,1%) que aquellas con tero Grado 2 (13/45; 28,9%) o 1 (0/5; 0,0 %). Consideraciones finales Concluimos que la lutelisis temprana en el Da 0 del tratamiento incrementa las tasas de preez en vaquillonas cruza Ceb tratadas con un DIB con 1,0 o 0,5 g de P4. La utilizacin de DIB nuevos o usados conteniendo 1 g de p4 o DIB nuevo conteniendo 0,5 g de P4 en programas de IATF se obtienen similares resultados de preez. Sin embargo el DIB 0,5 usado resulta en menores porcentajes de preez por lo que no sera factible su reutilizacin. Los resultados sugieren que la GnRH como inductor de ovulacin y la eCG administrada al momento de retirado el progestgeno resulta en mayores tasas de preez que las obtenidas con el tratamiento convencional utilizando EB en vaquillonas prepberes. El desarrollo de los cuernos uterinos es crtico para obtener altas tasas de preez en vaquillonas de 15 meses y esto puede estar mas relacionado la madurez de la vaquillona que la presencia o ausencia de un CL al inicio de un programa de IATF. Es necesario seguir avanzado en el desarrollo de protocolos de IATF destinados a incrementar los porcentajes de preez logrados en vaquillonas. REFERENCIAS

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