UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL FRANCISCO DE MIRANDA Area Ciencias del Agro y del Mar Programa de Ingeniera Agronmica Dpto.

Ambiente y Tecnologa Agrcola

PRACTICA No.1

COLECCIN Y PRESERVACIN DE INSECTOS

OBJETIVO: Practicar algunas tcnicas para colectar y preservar insectos que se van a destinar a estudios de clasificacin e identificacin. MATERIALES DE TRABAJO: 1. EQUIPOS DE COLECCIN* a) b) c) d) e) f) g) h) i) j) k) Malla o red para la captura (fig.1). Bolso para guardar los instrumentos de coleccin (fig.2). Cmaras preparadas con dicloroetano para matar los insectos colectados (fig.3). Cajitas o latas con tapa para guardar el material colectado en sobres (fig.4). Bolsas plsticas y de papel para recoger muestras de tierra, hojarascas, etc. Libreta de notas, papel para etiquetar las colecciones y lpices. Estuche con pinzas, tijeras, agujas de diseccin, regla, lupas, etc. Separador de insectos (fig. 5). Machete, cuchillo y navaja. Aspirador de insectos (fig. 6). Trampas de diferentes tipos (fig. 7).
* Para mayor informacin sobre el uso y la descripcin de estos equipos se recomienda revisar la literatura especializada.

2. MATERIALES DE LABORATORIO. a) b) c) d) e) f) g) h) a) b) c) d) e) f) g) Insectos para montar. Papel para etiquetar. Alfileres entomolgicos y alfileres corrientes con cabeza de plstico. Pinzas. Banco para fijar la altura del insecto y las etiquetas (fig. 8). Papel encerado o glassine. Extendedor de alas de mariposa (fig. 9). Anime de tres centmetros de espesor. Alcohol etlico o isoproplico. Eter actico. Benceno. Goma arbiga. Hidrato de cloral. Glicerina. Dicloroetano.
PRCTICA 01 Entomologa/UNEFM

3. PRODUCTOS QUMICOS:

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MATERIALES DE TRABAJO
Fig. 2. Bolso para Instrumental de Coleccin de Insectos

Fig. 3. Cmara para matar insectos

Fig. 4. Caja para insectos

Fig.5. Separador de insectos

Fig. 6. Aspirador de Insectos

Fig. 7. Trampas para Insectos

Fig. 8. Banco para fijar altura

Fig. 9. Extendedor de alas de mariposa

MTODO DE TRABAJO. 1. Leer cuidadosamente la presente gua. 2. Atender rigurosamente las explicaciones previas. 3. Montar los insectos que se le suministren tomando en consideracin las instrucciones dadas en la presente gua. 4. Presentar el trabajo para que le sea calificado.
OBSERVACIN: No debemos olvidar que cada insecto debe llevar por lo menos una etiqueta, la cual contendr los datos de coleccin: Lugar, fecha, hbitat y nombre del colector.
El Manantial, Sta Mara. Falcn. 12-VII-1998. Inflorescencia Mango Yanet Zavala Gmez

LA BSQUEDA DE LOS INSECTOS. Los insectos se encuentran en todas partes: en el aire, en las aguas corrientes o estancadas, nadando libremente sobre o dentro de stas o escondidos bajo el fango, debajo de las piedras u otros objetos, sobre las plantas o los animales, encima o dentro de la tierra, en productos procesados o almacenados asociados con materia orgnica, etc. Sin embargo, si una persona no desarrolla una habilidad especial para verlos, es difcil diferenciarlos del medio donde estn. La poca del ao tiene una influencia marcada en el nmero y la variedad de insectos presentes en una determinada zona. En nuestro medio, en la estacin de lluvias es cuando ms abundan, especialmente al inicio de la misma. Algunas especies tienen hbitos diurnos, otros crepusculares o nocturnos por lo que la hora de la captura variar en cada caso. Si se colecta durante el da, es preferible hacerlo en la maana antes de que salga el sol caliente, procure desechar los das nublados, pues no son los mejores. ALGUNAS ESTRATEGIAS PARA CAPTURAR INSECTOS: 1. Mallas o redes: Instrumento consistente de un mango largo, un anillo de metal y una bolsa de tela o metal (fig. 10-12). Las mallas segn al fin que se destinen pueden ser: a) Mallas livianas de tela ligera para capturar insectos voladores. b) Mallas fuertes y ms pesadas para pasarlas por sobre la vegetacin baja y capturar los insectos que se encuentran all comiendo o reposando. c) Mallas de metal dedicadas a la captura de especies acuticas.
Fig. 10. Malla Liviana Fig. 11. Malla Fuerte Fig. 12. Malla Acutica

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2. Trampas: Consiste en recipientes y equipos que dejados en el ambiente permiten la captura de los insectos, pemitiendo su entrada ms no su salida. Existen variados tipos de trampas entre las cuales se encuentran: a) Trampas con cebo: Se entiende como tal cualquier recipiente al cual se le pone un cebo que hace que el insecto entre y no pueda salir despus. Una de las ms sencillas consiste en enterrar una lata o botella hasta que el extremo abierto o boca quede al nivel del suelo, dentro de los recipientes se coloca cualquier sustancia atrayente segn el insecto que nos interese: melaza, carne, frutas podridas, lquidos azucarados, productos qumicos especiales, etc. Los insectos as atrados, Figura 13 generalmente especies que viven en el suelo, caen dentro del envase y son incapaces de salir (fig. 13). La trampa se puede proteger contra la lluvia o animales grandes con una cubierta. Para atrapar a algunos tipos de moscas y abejas se puede utilizar una trampa en la que los insectos son atrados por el cebo colocado y al tratar de escapar vuelan hacia arriba quedando atrapados en una cmara sin salida, sta puede tener o no algn tipo de veneno dependiendo del entomlogo. Algunas especies de mariposas diurnas pueden capturarse con una variante de esta trampa o con una trampa especfica tal como se muestra en la figura 14.

Figura 14

b) Trampa de Luz: Consiste en emplear durante horas de la noche la accin atrayente de la luz sobre los insectos. La ms sencilla consta de una fuente de luz blanca y una tela blanca extendida junto a ella, para proceder a seleccionar y capturar en forma directa los insectos que atrados por la luz se lleguen a posar en dicha tela. Otras variantes de trampas de luz para uso continuo, incluyen un recipiente con veneno voltil en donde caen los ejemplares una vez que mueren por efecto de los gases (fig. 15), tambin pueden variar las Figura 15 fuentes de luz a emplear segn las especies de insectos que se quieran capturar, tenindose luz incandecente, fluorescente, ultravioleta, etc. c) Trampa Malaise: Consiste en una estructura parecida a una carpa (fig. 16), elaborada en tela muy fina y soportada verticalmente por uno o ms postes y cuerdas. Esta trampa funciona por la tendencia de muchas especies de insectos voladores de trepar o volar hacia arriba. Al hacer esto y subir dentro de la trampa, termina en un frasco con veneno, de donde se recogen diaria o semanalmente. En esa forma se pueden capturar muchas moscas, avispas y otros insectos de vuelo rpido difles de atrapar con una malla

Figura 16

3. Separadores: Muchos insectos se encuentran en la hojarasca, residuos vegetales, en el suelo, etc, hacindose necesario para su colecta dispositivos que permitan separar los
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especmenes del material donde se encuentra. Los separadores son los empleados en esta tarea pues cuentan con bastidores de malla metlica de diferentes dimetros segn el tipo de material a separar y el tamao de los especmenes que se buscan. Entre los separadores el ms usado es el embudo de Berlese(fig.17), que consiste en un cono truncado e invertido, hecho de latn, abierto en su base y en su vrtice, y con un tamiz metlico para sostener los materiales que se colocan dentro. Sobre el material a separar se coloca una puente de calor (bombillo incandescente) que provoca una reaccin de escape de los insectos los cuales bajan Figura 17 atravezando la malla, para luego caer a travs del embudo en un recipiente hermtico adosado al vrtice del embudo. 4. Aspiradores: Es un aparato especial para colectar pequeos insectos, consiste en un frasco o vial, cuya abertura se encuentra tapada con un tapn de corcho o goma doblemente perforado; a travs de estos orificios se conectan: un tubo de vidrio doblado por donde el colector succiona con la boca, y en el otro una manguera flexible que termina en un tubo de vidrio por donde entran los insectos violentamente al succionar el colector, quedando de esta manera atrapados en el frasco (fig.18).
Figura 18

5. Tela blanca: Muchos insectos cuando son molestados caen al suelo aparentando estar muertos, si colocamos un trozo de tela blanca extendida en el suelo y movemos las ramas de los rboles que estn encima, podemos capturarlos inmediatamente. MUERTE DE LOS INSECTOS: Para matar los insectos colectados se recomienda usar frascos especialmente preparados con gases obtenidos a partir de la sublimacin de sales o a partir de sustancias voltiles. Originalmente se tabajaba con cianuro de potasio, fumigante altamente txico para los humanos, razn por la cual deban extremarse al mximo los cuidados al momento de preparar las llamadas cmaras de cianuro, sto inclua el uso de mscara contra gases txicos, guantes, lentes, bata de laboratorio, y realizar el proceso bajo campanas de evacuacin de gases. Las cmaras de cianuro consistan en un frasco de cristal en el cual se depositaba segn este orden: una cantidad de cianuro de potasio suficiente para cubrir el fondo del frasco, una capa de 1 a 2 cm. de aserrn fino, y finalmente una capa de mortero hmedo de yeso (1 a 3 cm de espesor segn el tamao del frasco), que al secar 2 das despus, mantena al fumigante en su sitio y permita que sus gases txicos percolaran lentamente a travs de los poros del yeso hacia el resto del frasco que deba mantenerse hermticamente cerrado con su tapa. Dada la peligrosidad del cianuro, el requerimiento de equipos de seguridad y laboratorio, y el riesgo de la liberacin repentina del txico debido a la rotura del frasco, en la actualidad se trabaja con Dicloroetano, un veneno lquido muy voltil que puede ser manejado
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en forma bastante segura empleando inyectadoras desechables para preparar las cmaras para matar insectos. La cmara de dicloroetano se Veneno prepara colocando en el fondo del frasco un trozo de esponja vegetal de aproximadamente 2 cm de espesor, en la cual se aplica el dicloroetano (5 a 10 gotas segn tamao del frasco), inmediatamente despus se coloca un tapn bien comprimido de papel absorvente de 2 a 3 cm de espesor y encima de ste una tira de papel absorvente para recoger y separar los insectos (fig. 19). El tapn de papel absorvente se debe retirar con una pinza cada vez que se requiera aplicar el dicloroetano toda vez que este fumigante se evapora muy rpidamente perdindose el efecto activo de esta cmara durante poco tiempo de uso (una o dos salidas de colecta). Para mayor seguridad es necesario colocar una etiqueta de advertencia y abrir el frasco en condiciones de aire libre y lo ms alejado posible de la cara del colector. Al momento de salir al campo a colectar debemos llevar por lo menos dos cmaras para matar insectos, una para insectos frgiles y otro para los insectos fuertes, ya que si se guardan en el mismo recipiente, los primeros pueden ser daados por los segundos. Por la misma razn no debemos meter muchos insectos en un mismo frasco, ya que se deterioran unos con otros por efecto de los movimientos de los insectos en agona dentro de la cmara o bien por los desplazamientos del colector mismo durante sus tareas de captura. Con el fin de obtener insectos limpios debemos asear los frascos por dentro con papel absorbente despus de haber sido usados y seguidamente colocarle nuevas tiras de papel absorbente para separar un poco a los insectos que se introducen vivos, de esta manera se amortiguan los movimientos bruscos y en algo el dao a los especmenes colectados. En el caso de las mariposas (Lepidoptera) que son insectos muy delicados y frgiles, se capturan con mallas entomolgicas y para matarlas se deben agarrar cuidadosamente por el cuerpo sin tocar las alas, preferiblemente se debe emplear una pinza suave especial para esta actividad, luego se le inyecta una pequea cantidad de amoniaco por la parte ventral en el punto donde se une el trax con el abdomen, preferiblemente con inyectadora de aguja subcutnea (ej: para insulina), posteriormente se deben guardar en sobres de papel glassine con las alas plegadas en forma vertical (ver secuencia de imgenes de la fig. 20), para luego montarlas en los extendedores de alas de mariposa lo antes posible pues en nuestro clima estos especmenes se vuelven rgidos en unas pocas horas.
Figura 20 Figura 19

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En caso de que no sea posible montar las mariposas en un corto periodo de tiempo, se recomienda guardarlas en el congelador en sus sobres, protegidos dentro de un envase plstico hermticamente cerrado. En algunos casos podemos utilizar tambin lquidos, como alcohol al 60% 70% para matar insectos, para ello se prepara un frasco de boca ancha lleno con este lquido, bien cerrado para evitar derrames. Los insectos capturados se introducen dentro del lquido para morir instantes despus, permaneciendo en el frasco hasta el momento de su montaje (fig. 21). Cabe indicar que este mtodo no debe emplearse con insectos frgiles pues muchos especmenes se daan, tal es el caso de las mariposas y las moscas entre otros, adems la mayora de los insectos pierden su coloracin natutral si permanecen mucho tiempo sumergidos, por lo que resulta conveniente montarlos a la brevedad posible.
Figura 21

MANIPULACIN DE LOS INSECTOS: Se ha comprobado que los insectos adultos de cuerpo duro se conservan montados en alfileres especiales, pues mantienen su forma y se manejan fcilmente sin ser daados. Se recomienda que se preparen lo ms rpido posible, pues de esta manera es ms fcil montarlos, en caso contrario se deben guardar en sobres de papel suave, los cuales, a su vez se almacenan en cajas entomolgicas cerradas (fig. 22), en espera de que se arreglen; es conveniente colocar dentro de la caja un Figura 22 repelente, anteriormente se usaba naftalina pero, debido a su carcter cancergeno, se utiliza actualmente pastillas de alcanfor, de manera que se evite la entrada de insectos vivos que pueden destruir el material colectado. Cuando los insectos se guardan por un tiempo sin montarse se vuelven rgidos imposibilitando el correcto montaje de los mismos, por esta razn se hace necesario ablandarlos. La forma ms simple de lograrlo es colocndolos en una cmara hmeda, la cual puede ser improvisada con una bandeja con tapa, en una cpsula de petri (fig. 23), etc. En esta cmara se coloca papel absorbente humedecido con agua y un algodn con fenol en una esquina para cortar el desarrollo de Figura 23 hongos. Los insectos secos y duros se colocan dentro de esta cmara, sobre el papel absorvente y se cubren con otra capa de papel, luego se coloca la tapa y se deja por varios das a temperatura ambiente o refrigerado, hasta que pierdan la rigidez, ese es el momento de montarlos. En el caso de las mariposas se puede recuperar la movilidad de sus alas
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con slo inyectarles agua en el trax, aunque si se mantienen en sus sobres dentro del congelador conservan la flexibilidad del cuerpo.

LIMPIEZA DE LOS ESPECMENES COLECTADOS: En muchos casos, antes de proceder al montaje, es necesario limpiar los insectos que estn cubiertos con partculas extraas. La forma ms sencilla para limpiarlos es con un pincel de cerdas finas y suaves impregnadas de agua con cloroformo o lquidos especiales usados para este fin (fig. 24). Debe pasarse el pincel sobre la parte del cuerpo sucia, con delicadeza y suavidad, para evitar que se daen. Otra forma de limpiarlos es sumergiendo el insecto en alcohol, o en agua a la cual se le ha agregado un detergente especialmente formulado para ello.

Figura 24

MONTAJE DE LOS INSECTOS: Los alfileres entomolgicos vienen en diferentes dimetros que se adaptan al tamao, finura y fragilidad del espcimen que se va a montar, se denominan segn los siguientes nmeros: 000, 00 y del 0 al 7 (fig. 25 en tamao real). La colocacin del alfiler en cada caso debe hacerse perpendicularmente con los ejes longitudinal y transversal del insecto (fig. 26) la altura a que se deja tambin es importante, siempre debe ser la misma en todos los insectos, lo cual se logra con los medidores de altura en el momento de montarlo (fig. 27). Se uniformiza la altura para optimizar la presentacin de las colecciones, facilitar su manejo y para dejar espacio suficiente para las etiquetas El sitio por donde penetra el alfiler al cuerpo del insecto, ha sido determinado cuidadosamente para cada grupo y se detalla en la bibliografa respectiva (fig. 28).
7 6 5 4 3 2 1 0

Figura 25

Figura 26

Figura 27

Figura 28
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Una vez colocado el alfiler en el insecto se llevan a un trozo de anime, se clava hasta el nivel donde est el insecto y luego se le acomodan las patas y las antenas en la posicin que tena cuando el insecto estaba vivo, para mantenerla se utilizan los alfileres auxiliares los cuales se dejan all hasta que el insecto adquiera rigidez (fig. 29); en ese momento se retiran los alfileres auxiliares, se colocan las etiquetas y se pasa el insecto montado a la caja de coleccin (fig. 30).

Figura 29

Figura 30

Las mariposas se montan utilizando una tabla especial llamada extendedor de alas que permite abrirselas, acomodar stas y las dems estructuras del insecto segn se muestra en la secuencia de imgenes de la figura 31, donde se pueden apreciar los siguientes pasos: 1) abrir las alas, 2) introducir el alfiler en la parte media del trax, 3) fijar este alfiler en el extendedor de alas, 4) las antenas se colocan paralelas al borde anterior del primer par de alas, las cuales deben subirse hasta que el margen posterior forme un ngulo de 90 con el eje longitudinal del cuerpo, asegurando luego las alas con dos tiras finas de papel glassine, 5) las alas posteriores se acomodan de manera que el margen anterior forme un ngulo de 90 con el eje longitudinal del cuerpo, para desplazar las alas se emplearn alfileres finos introducidos cerca de una vena, 6) se fijan las cintas finas y se sostiene el abdomen a nivel de la tabla y 7) se fijan las alas con las cintas anchas rodeando su contorno con alfileres auxiliares a fin de que no se deformen durante el secado.

Figura 31

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DOBLE MONTAJE: Algunos insectos son tan pequeos que no se pueden atravesar, an con el alfiler de menor dimetro, sin daar gravemente sus estructuras. Para ellos se han ideado mtodos diferentes de montaje: CON MICROALFILERES, se toma el microalfiler con una pinza y se le introduce al espcimen en el punto que corresponde segn el orden al que pertenezca, tomando en cuenta que quede perpendicular a los ejes longitudinal y transversal del cuerpo (esto se hace bajo la lupa). Luego el microalfiler se Figura 32 monta cerca de un extremo de una base rectangular de goma o silicn diseado para este fin, mientras que en el otro extremo de esta base se atraviesa un alfiler normal dejando el conjunto a la altura que quedara un insecto montado directamente (fig. 32). La cabeza del insecto debe quedar orientada en sentido opuesto a la posicin del alfiler normal. CON TRINGULOS DE CARTULINA, cortados todos del mismo tamao mediante pinzas especiales, cada tringulo se coloca en un alfiler entomolgico penetrndolo por el rea cercana a su base y llevndolo a la altura donde normalmente se dejan los insectos de mayor tamao; en el vrtice opuesto al alfiler se pega el espcimen con goma especial de la manera ms limpia posible (fig. 33). Es de advertir que con los colepteros se debe tener cuidado de no taparle la unin del trax y el abdomen en su parte ventral.

Figura 33

CON LMINAS PORTA OBJETOS, en casos en que los insectos son an ms pequeos por lo que no se pueden montar de las maneras antes descritas; tal es el caso de piojos, pulgas, trpidos, etc. (mayor informacin en bibliografa recomendada). LAS ETIQUETAS: Un insecto debe llevar por lo menos dos etiquetas: La primera con los datos de coleccin indicando la fecha, sitio de coleccin, hbitat y hospederos, as como el nombre la persona que lo colect; y la segunda, con los datos de identificacin del insecto mismo, tal como se muestra en el siguiente ejemplo:
El Manantial, Sta Mara. Falcn, 750 msnm 12-VII-1998. Malla Yanet Zavala Gmez

Diptera Tabanidae

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PRCTICA 01 10 Entomologa/UNEFM

Es recomendable que las etiquetas se hagan en opalina blanca (cartulina en su defecto) cortadas en dimensiones de 1 cm de largo por 0,7 cm de ancho, pudiendo variar el largo hasta 1,5 cm. Si se escriben a mano, la escritura que se utiliza para etiquetar debe ser clara, en letra tipo imprenta y preferiblemente en tinta china; si las etiquetas se imprimen por computadora resulta recomendable el uso de inyeccin de tinta pues la impresin laser se pierde con los aos. Cuando se vayan a etiquetar insectos que se preservan en alcohol o en algunos lquidos especiales es indispensable que se escriba en tinta china o en grafito, ya que de lo contrario se borrara al introducir la etiqueta en el frasco con el lquido.

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