Universidad de los Lagos Departamento de Ciencia y Tecnología de los Alimentos Carrea Ingeniería en Alimentos

VARIABILIDAD DE LOS NIVELES DE POLIFENOLES EN POBLACIONES DE MAQUI (Aristotelia chilensis (Molina)Stuntz), UBICADAS EN LA PROVINCIA DE OSORNO, DÉCIMA REGIÓN DE LOS LAGOS, CHILE .

Profesor Patrocinante: Dr. Emir Valencia

Iván A. Hernández Segovia Osorno Chile 2010

..................................................................... Ubicación geográfica del estudio....... 11 .......................................ÍNDICE I........................ Bibliografía .................. 7 V......................... 7 IV................................................2 Tratamiento de la muestra ................................ REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA .................1 Objetivo General:...........................................................................................................2 Objetivos Específicos: ............................................1........ 3 I.........................................1...............................1 Material .................................................................................................. METODOLOGÍA .....................................................................................................1 OBJETIVOS .............................................. INTRODUCCIÓN .......................................................... 3 I............................................. 3 I................................................................................................. 7 IV....1.......................................................................................... 3 II..................1................... 4 IV........................... 7 IV................

1. depresión intermedia y precordillera de Los Andes de la provincia de Osorno. M. en relación a otras frutas y verduras.323 Mmoles Fe/100g) en relación a estudios comparativos con otros alimentos.2 Objetivos Específicos: . CHILE realizada por Enzo Freddy Pizarro Zúñiga el año 2009. existen berries nativos con usos medicinales muy arraigados a la cultura mapuche y rural del país. 2009). así como su capacidad antibacteriana. Los extractos de las especies chilenas Aristotelia chilensis (Mol. I. debido a la composición fenólica de sus hojas (Avello. al.. el cual es comestible y se usa en la preparación de confites. En consecuencia. principalmente. El objetivo del siguiente estudio es evaluar el nivel de polifenoles en la especie Aristotelia chilensis en su estado silvestre. que han sido estudiados tanto por investigadores nacionales como internacionales (Fredes. el interés por los polifenoles se debe principalmente a sus propiedades antioxidantes. Muchos frutos conocidos como berries presentan capacidades antioxidantes más altas. 2009). C.1 OBJETIVOS I. en el fruto. bebida fabricada por los pueblos araucanos (Pizarro. la importancia de esta especie radica. Otras investigaciones se han referido al maqui como un caso excepcional por su alta capacidad antioxidante (12. En Chile. mermeladas y en la fabricación de jugos y bebidas alcohólicas como es el caso del Tecu .) Stuntz Elaeocarpaceae (Maqui) y Ugni molinae Turcz. DÉCIMA REGIÓN DE LOS LAGOS. et. todas ellas bajo distintas condiciones climáticas y comparar los resultados con estudio VARIABILIDAD Y DIFERENCIACIÓN FENOTÍPICA EN POBLACIONES DE MAQUI (Aristotelia chilensis (Molina) Stuntz).1.1 Objetivo General: I. UBICADAS EN LA PROVINCIA DE OSORNO. INTRODUCCIÓN Dentro de los productos naturales de origen vegetal. han mostrado interesantes resultados tanto por su acción antioxidante. en 5 localidades geográficamente distribuidas en: cordillera de la Costa. 2009). Myrtaceae (Murtilla).I.

distribuidas en las regiones tropicales. Esta familia consta de 10 géneros y alrededor de 400 especies. además en las laderas de los cerros y bordes de bosques. V. y éstas asociaciones mono-específicas reciben la denominación de macales . REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA REINO DIVISIÓN CLASE ORDEN FAMILIA GÉNERO ESPECIE NOMBRE COMÚN : Plantae : Magnoliophyta : Magnoliopsida : Oxalidales : Elaeocarpaceae : Aristotelia : Aristotelia chilensis : Maqui La flora chilena representa un recurso genético importante. donde se conoce con el nombre de koelon (Leal. C.2 Hábitat El Maqui prefiere los lugares húmedos y ricos en tierra vegetal. especialmente si se considera su riqueza de especies. Esto se traduce en que el 46.5% de las 300. 2006). 2009). Tiene alrededor de 1. II. 2004).II.1. subtropicales y templadas del mundo (con excepción del continente africano). Es de las primeras especies que invaden los terrenos recién rozados. . siendo el más abundante el maqui. desde cerca del nivel del mar hasta los 2500 metros sobre el nivel de éste. En Chile se encuentran 2 géneros (Aristotelia y Crinodendron) con tres especies. El mismo autor. el cual se encuentra ubicado en la zona central y sur del país y en el suroeste de Argentina. pero se encuentra. que sirven para proteger al suelo de la erosión (Verdi.1 Antecedentes generales del maqui El maqui (Aristotelia chilensis Mol.8% de las plantas descritas en Chile sean endémicas (Fredes.605 plantas endémicas. tanto en el valle central como en ambas cordilleras. Chile central es un hotspot de biodiversidad.) es un árbol que pertenece a la familia de las Eleocarpaceas. II. sostiene que esta planta se distribuye desde el Río Limarí (IV región) hasta la provincia de Aysén (XI región). A. También se le encuentra en el Archipiélago de Juan Fernández. 2006). lo que corresponde a la zona entre Illapel y Chiloé (Leal.1 Distribución geográfica El maqui es una especie endémica de los bosques subantárticos y prospera en la zona comprendida entre los paralelos 31 y 40.1. II. A. que equivalen al 0.000 especies de plantas descritas mundialmente.

Los antioxidantes pueden ser de tipo preventivos. o pueden ser reparadores o sintetizadores de las estructuras dañadas.1. 2006). es una baya de color azul oscuro y carnosa. la molécula estable que se lo cede se convierte a su vez en un radical libre por quedar con un electrón desapareado. para apaciguar o disminuir los ardores de la fiebre y para tumores. membranas celulares y tejidos (Avello. razón por lo cual se le atribuyen propiedades melíferas. Suele utilizarse también en la preparación de confites. et. se produce daño oxidativo. con 3-4 semillas. inhibiendo la formación de radicales libres. La polinización es efectuada por insectos.3 Antioxidantes Los antioxidantes. I. muy demandados por los mercados europeos Medicinal : De acuerdo a las costumbres populares. las cuales serían las responsables de la pigmentación púrpura. M.2 Radicales Libres Los radicales libres son átomos o grupos de átomos que tienen un electrón desapareado libre. . Una vez que el radical libre ha conseguido sustraer el electrón que necesita. que provienen principalmente de la contaminación atmosférica y el humo de cigarrillos. minerales. pero tiene la capacidad de reaccionar con todo lo que esté a su alrededor provocando un gran daño a moléculas. para lavar úlceras de la boca y para poner cataplasmas en el dorso o sobre los riñones.. mermeladas. La vida media biológica del radical libre es de microsegundos. inhibiendo las reacciones en cadena. algo ácido y refrescante. le asigna a esta planta las siguientes propiedades: Sus hojas secas y/o molidas como polvos sirven en ungüentos para curar heridas y como cicatrizante. como las enzimas de reparación del ADN. Las hojas frescas en infusión (30 a 60 g por 500 cc). atrapadores de radicales. 2003). M. También se fabrica con su fruto una especie de licor o chicha llamada "Tecu". iniciándose así una verdadera reacción en cadena que destruye nuestras células. de 4-5 mm de diámetro. son sustancias tales como vitaminas. colorantes naturales y otros compuestos de vegetales y enzimas (sustancias propias de nuestro organismo que intervienen en múltiples procesos metabólicos). Cuando éstas son sobrepasadas. Los frutos en tisanas sirven para curar diarreas crónicas. sirven para curar las enfermedades de la garganta. los que producen distintos tipos de radicales libres en nuestro organismo. astringente. I. 2006).II. carotenoides y polifenoles. et.. por lo que son muy reactivos ya que tienden a captar un electrón de moléculas estables con el fin de alcanzar su estabilidad electroquímica. Posee altas concentraciones de pigmentos antociánicos. (Avello. capaces de neutralizar la acción oxidante de los radicales libres mediante la liberación de electrones en nuestra sangre. sin embargo se desconocen las propiedades y características de su miel (FONDEF/INFOR/FUNDACIÓN CHILE. producidos mayormente por contaminantes externos. enteritis simples y disenterías. existe una variedad de defensas antioxidantes las que incluyen antioxidantes endógenos y exógenos provenientes de la dieta como las vitaminas E y C. helados. tumores intestinales. constituyendo la materia prima para la fabricación de colorantes alimenticios orgánicos. Al.3 Uso y propiedades no madereras según categoría Alimento: El fruto comestible. Tintórea : El fruto contiene materias colorantes que se emplean como tinte en tejidos mapuches y también para el tinte de los vinos. principalmente moscardones y abejas. los que son captados por los radicales libres. Melífera: Presenta flores reunidas en umbelas de dos a tres unidades que nacen en las axilas de las hojas. En el organismo. El problema para la salud se produce cuando nuestro organismo tiene que soportar un exceso de radicales libres durante años. jugos y bebidas alcohólicas. Al.

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M2. Pesa Filtro. Espátulas.marca Whatman Schleicher-Schuell. marca Philips. O] (salida sur de Osorno). ubicado a 65 km de Osorno. Ubicación geográfica del estudio. Espectrofotómetro-Spectronic 21D. Todos ellos ubicados en la Décima región de Lagos. 73º1 29 Long. buretas. 73º7 33 Long. De cada infusión se prepararon cinco muestras distintas (M1. Balanza analítica Sartorius sensibilidad 0. S.1. Placas petri.1.1000 xr. matraces de aforo. S. Micropipeta de 1 l -100 l. Puente Rahue [40º40 30 Lat. Hervidor eléctrico.1 mg. . Puaucho [40º36 2 Lat. baguetas.1000 xr. este último ubicado a 67 km de Osorno. ubicado a 30 km de Osorno y Frutillar bajo [41º8 41 Lat. S. probetas. Micropipeta de 100 l -1000 l.1 Material Para el desarrollo de este estudio se utilizó información de la tesis a comparar. Frasco lavador.IV. Papel filtro Nº541. hacia cordillera de Los Andes.2 Tratamiento de la muestra Los frutos enteros de las distintas muestras se pasan por el molinillo y luego se pesan los gramos correspondientes para cada zona. Material de vidrio: vasos precipitados. Modelo Cyclotec 1093. 72º24 20 Long O]. para poder extraer los frutos de las mismas zonas y mismo arbusto.3 Equipos y Materiales y y y y y y y y y y y y y y y y y y y Molinillo eléctrico Marca Kelco Foss . S. Luego se filtra en papel Watman Nº 541. M3. pipetas totales. 73º28 13 Long. METODOLOGÍA IV. IV. Balanza con precisión de 1 mg. Estufa Memmert-Alemana. modelo VE. cordillera de la Costa y el límite Sur de la Provincia. O]. Cronómetro BWR. estos distribuidos en las localidades de Puyehue [40º43 9 Lat. O]. el extracto se realiza según bibliografía eligiendo el método más apropiado ya que existen varios tipos de extracción. luego es secado en estufa a 105ºC por una hora. M4 y M5). El estudio se realizará en 4 sitios determinados por sus distribuciones espaciales y geográficos de la Provincia de Osorno como son el límite Norte. modelo VE. Pinzas metalicas. matraces erlenmeyer. Embudos. Los análisis se aplican a las infusiones de los frutos de cada zona analizada. IV. IV. El material es lavado con abundante agua y enjuagado con agua destilada. Desecador. marca High Tech Lab. pipetas parciales. marca High Tech Lab. tubos de ensayo. ubicado a 11 km de Osorno.

luego se adiciona en el mismo orden agua destilada 0.4. En la desecación por estufa a 105110º C durante 1 a 5 horas. 1981) IV. y Marcar dos pesa filtro por muestra.0 mL en tubos de ensayos. y Trascurrido el tiempo de secado.2 Reactivos y Carbonato de sodio 7.6 mL.8 mL. 0. 0.5 Determinación de Compuestos Polifenólicos Totales IV.4.3 Cálculos Contenido de humedad ( %) = 100 ( ( ( B-A) .5. los resultados dependen del grado de división del material.2 mL.5.6 mL.8 mL.2 Procedimiento y Moler la muestra en caso de ser necesario.H.4 mL. y Folin-Ciocalteu diluido 10 veces: Se toman 3 mL y se le agrega 30 mL de agua destilada. tomar alícuotas de 0. tiempo. 1.1 Principio del Método Los compuestos fenólicos (principalmente polifenoles) se determinan haciendo reaccionar estos con el reactivo de Folin Ciocalteu.4. 0. y Pesar pesa filtro con muestra seca y calcular gramos de agua evaporada.1 Curva Patrón de Polifenoles Totales De la solución de Pirogalol preparada ( 50 g/ mL ) .5 g de carbonato de sodio y se le adiciona 92.5 g de agua destilada. 0. El reactivo de Folin-Ciocalteu tiene una coloración amarilla que en presencia de un fenol se torna azul.4 Determinación de humedad por método directo termogravimétrico por remoción de agua IV. y Tarar cada pesa filtro y agregar aproximadamente 2g de muestra (previamente homogenizada. 0.3. Esta reacción es característica para compuestos que tienen un grupo hidróxilo unido a un anillo de benceno. y Llevar los pesa filtro a la estufa a 105ºC por 5 horas.( C-A ) ) / ( B-A) ) Donde: A = Pesa del peso filtro limpio ( g ) B = Pesa del peso filtro + muestra húmeda ( g ) C = Pesa del peso filtro + muestra seca ( g ) IV. IV. y Usar pinza metálica durante todo el procedimiento.. temperatura y presión mantenida en la estufa (Schmidt. IV.IV. y Pirogalol ( 50µg/mL ) : Se pesan 1000 mg de pirogalol y se aforan a 1000 mL con agua destilada. La intensidad del color azul se mide espectrofotométricamente a 765 nm.4 mL. por diferencia de peso. 0.1 Principio del Método La eliminación térmica del agua y su determinación por pérdida de peso.3 Procedimiento IV. IV. luego se toman una alícuota de 25 mL de esta solución y se aforan a 500 mL. Los resultados se expresan como mg de pirogalol.5% ( Na2CO3 ) : Se pesan 7.Hebbel.5. dejar enfriar peso filtro en desecador hasta temperatura ambiente (aproximadamente 45 minutos).5. para que sea representativa).2 mL .

5 mL de Folin-Ciocalteu a cada muestra.0 mL de carbonato de sodio y 2. IV. de esta dilución se toma 1 mL. Esta mezcla se agita y se lleva por 20 minutos a baño María a 45ºC.para luego agregar carbonato de sodio (Na) 2. IV. se transfiere una alícuota de cada estándar en la celda del espectrofotómetro y se mide su absorvancia contra un blanco a una longitud de onda de 765 nm.5. se le adiciona 1mL de agua. esto se debe a la reacción que se produce entre el Folin-Ciocalteu y el pirogalol.3 Cálculos    ×     À     . luego la mezcla se lleva a baño María a 45ºC por 20 min.2 Determinación de Polifenoles Totales en las Infusiones De cada infusión se toman distintas alícuotas y se aforan en matraces volumétricos a 25 mL para que la lectura de absorbancia esté dentro de los rangos de la curva patrón. Después de la adición de cada reactivo se agita.3.0 mL a cada tubo y por último 2. Se deja enfriar por 20 minutos y se lee la absorvancia a una longitud de onda de 765 nm en el espectrofotómetro. Finalmente. antes de llevar la mezcla a baño María ésta presenta un color amarillo y luego del baño se torna a azul. luego 2.3.5 mL del reactivo de Folin-Ciocalteu.5.

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Evaluación del período de receptividad del estigma en maqui (Aristotelia chilensis (Mol.Ediciones Alfabeto. Tesis Universidad de los Lagos. Y. C. Antioxidantes en berries nativos chilenos. [citado 2009-06-19].V. 13(4). Radicales libres. 2004. Osorno. Capacidad antioxidante de Aristotelia chilensis (Molina) Stuntz. de Consumo en la Ciudad de Osorno. V. Avello. Bibliografía y y y y y y y y y Fredes. 2006. 2009.Santiago. UBICADAS EN LA PROVINCIA DE OSORNO.H. Oyarzún.Concepción. {EPub November 30. Ordóñez JL. Schmidt. 2009} Avello M.. 2008. M. Bol Latinoam Caribe Plant Med Aromat 8(6):469 478. Rev Cubana Plant Med.). antioxidantes naturales y mecanismos de protección. CHILE. Aristotelia chilensis (Mol. .) Stuntz) y murta (Ugni molinae Turcz.Chile Verdi. Valladares R. Valdivia. Clon. Tesis Universidad Austral de Chile. Maquei. 2006.Hebbel. 1981. VARIABILIDAD Y DIFERENCIACIÓN FENOTÍPICA EN POBLACIONES DE MAQUI (Aristotelia chilensis (Molina) Stuntz). Tesis Universidad Austral de Chile. BOLETIN DIVULGATIVO Nº 1.) Stuntz. Queldrón. 2009. y Suwalsky.sld. Atenea.cu/scielo.Ciencia y Tecnología de los Alimentos. DÉCIMA REGIÓN DE LOS LAGOS. FONDEF/INFOR/FUNDACIÓN CHILE.. Concentración de Extracto Enzimático Obtenido de Hojas de Maqui (Aristotelia chilensis Mol. C.) para su Utilización en Quesería. Chile. 2009. Disponible en: http://scielo. Determinación de Polifenoles Totales y Ácido Ascorbico en Infusiones de Hierbas Envasadas y Naturales. A. M. E.php?script=sci_arttext&pid= S1028-7962008000400002&lng=es&nrm=iso Pizarro. 2003. Chile. Soto. Maqui. Valdivia. Leal..

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