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Manual de prácticas definitivo

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MANUAL DE PRÁCTICAS

CURSO DE PROPAGACION DE PLANTAS PARA LA FORMACION DE INGENIEROS AGRÓNOMOS

Elaboró EDWIN ANTONIO GUTIÉRREZ RODRIGUEZ. Ingeniero Agrónomo – Universidad de los Llanos T.P 25.526 M.A.D.R Docente Propagación de Plantas

Universidad de los Llanos Facultad de ciencias agropecuarias y recursos naturales Escuela de Ingeniería en Ciencias Agrícolas Programa de Ingeniería Agronómica 2010

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 Practica 4. Propagación asexual.  Practica 5. Métodos de trazado.  Practica 2. Preparación de sustratos. pruebas de viabilidad y métodos para 2 .  Practica 3. Selección de semillas.TABLA DE CONTENIDO  Introducción  Criterios para la presentación de informes romper dormancia.  Bibliografía 3 4 5 9 11 13 16 19  Practica 1. Cultivo in vitro de meristemos.

generan diversidad de situaciones que requieren la actuación crítica. sociales. 3 . que en su interacción. económicos. En este sentido. este manual recopila una serie de prácticas que incitaran a los estudiantes a la construcción de conocimiento desde la observación y análisis de resultados en cada una de los ejercicios. analítica y propositiva para el planteamiento de alternativas de solución.Introducción El contexto de actuación del Ingeniero Agrónomo. y de esta manera promover la capacidad de indagación. búsqueda e investigación en los estudiantes. técnicos. de modo tal que el componente teórico está acompañado de una serie de prácticas y visitas de observación que buscan la aplicación y confrontación de las temáticas. está caracterizado por la contextualización de acuerdo al curso desarrollado. está caracterizado por la pluralidad de componentes políticos. El proceso de formación del profesional.

cuadros. debe evidenciar el desarrollo de las actividades planteadas y ser consecuente con los resultados.)  Bibliografía Nota. El informe debe responder al análisis crítico y comparativo de los resultados obtenidos en cada una de las prácticas. etc.  Análisis de resultados (Tablas. una consulta exhaustiva de bibliografía que permita desarrollar un adecuado análisis. Debe presentarse evidencia física de los procedimientos realizados 4 .  Objetivos  Revisión de literatura  Metodología desarrollada  Resultados obtenidos. para ello. es necesario en cada caso.Criterios para la presentación de informes El informe presentado. La estructura mínima del informe que deben presentar en un plazo máximo de 8 días a partir de la culminación de la práctica. es:  Titulo.

comprenda y aplique. PRUEBAS DE VIABILIDAD Y MÉTODOS PARA ROMPER DORMANCIA. pretende que el estudiante analice. resistencia a enfermedades. entre otros. los siguientes conceptos básicos: 1. Germinación a. a. y en segundo lugar dar las condiciones adecuadas para la germinación y normal crecimiento de las plantas. Poder germinativo d. 5 . Porcentaje de germinación b. garantizar las características genotípicas deseables en cuanto a altura de la planta. Factores que afectan la dormancia b. SELECCIÓN DE SEMILLAS. Prueba de viabilidad c. que busca en primer lugar. INTRODUCCIÓN La selección de la semilla sexual es un proceso que se realiza bajo criterios técnicos y que hace parte de las primeras medidas dentro de un programa de manejo integrado de cultivos. Dormancia. calidad de frutos.LABORATORIO NO 1. Vigor germinativo e. Latencia 2. colores. El desarrollo de esta práctica. entre otros. Métodos para romper dormancia.

En el proceso de propagación sexual.2 De las semillas que se precipitaron. posteriormente la semilla se limpia en un tamiz por lavados sucesivos. las semillas se retiran de los frutos maduros (en el caso de semilla con arilo carnoso como maracuyá. la semilla está lista para usar. 1. después del lavado se dejan secar sobre papel absorbente estéril bajo sombra. previamente cada grupo debe seleccionar los frutos que van a servir como fuente de semillas a emplear. el primero sumérjalo por 15 segundos es Acido sulfúrico 90%. deseche inmediatamente el acido y lave tres veces las semillas con agua destilada. Determine el porcentaje de semillas que no flotaron.1 Seleccione una especie.  Cinco frascos o cajas de petri. Luego de lo anterior. una vez que secan. Agítela en forma circular por 1 minuto y deje decantar.  Solución de tetrazolio 0. 1. (Prueba de viabilidad) 1. sumérjala en 100 ml de Agua destilada. (Escarificación química) 6 . séquelas y haga cuatro grupos de 20 cada uno. cítricos. los residuos de pulpa pueden eliminarse con una leve fricción manual sobre ellas.5% Procedimiento En primer lugar. se recomienda una previa fermentación en el contenido del fruto para mejor desprendimiento).Materiales  100 semillas de tres especies vegetales diferentes (100 de c/u)  Lija de agua fina  Acido sulfúrico (250 ml para todo el curso). guanábana o de frutos como guayaba.

1. (Escarificación física) 1. el primer grupo córtelo en dos secciones.1.4 Caliente 50 ml de agua destilada a 40°. 1.5 Prepare 100 ml de una solución (Una para todo el curso) de Acido giberelico (200 ppm). dejándolas protegidas de la luz durante el procedimiento. Porcentaje de germinación. Porcentaje de perdida 2.6 Tome los cinco grupos de semillas. Tome otra Prueba de tetrazolio en Semilla de Maíz especie. y aplique con atomizador sobre las semillas. posteriormente sumerja el otro grupo durante un minuto y deseche el agua. previamente embebidas desde el día anterior (24 h) y divídalas en dos grupos.5 % 7 las semillas de . evitando destruir el tejido embrionario y sumérjalo en una solución de tetrazolio 0. Tipo de germinación d. Evalué y compare en cada una de ellas: a. Días a emergencia de radícula c. b. haga por separado cámaras húmedas en cajas de petri.3 Tome el segundo grupo y frote contra la lija (u otro medio áspero según el tipo de semilla) varias veces hasta que observe que la testa ha cambiado su apariencia natural.

Compare las dos condiciones de germinación. Tome la otra mitad. Cuestionario Desde el punto de vista bioquímico. el informe debe presentar resultados y análisis de los mismos con base en comparación de revisión de literatura realizada sobre la temática. realice una cámara húmeda. Ocho días después de la práctica debe presentarse informe técnico escrito a mano de los resultados obtenidos. Tome semillas de otra especie. posteriormente póngalas en cámara húmeda. Con el segundo grupo. La observación de los resultados se hará durante ocho días. siembre la mitad en bandejas o bolsas (según las características de la semilla) utilizando suelo normal sin desinfectar. Realice un análisis comparativo a partir de los resultados obtenidos. deseche el hipoclorito y lávelas.bajo completa oscuridad hasta que observe que el tejido se tiñe color violeta (Durante ese tiempo los tejidos vivos se tiñen. durante los cuales se debe tomar tiempos de germinación. y a partir de ella determine el porcentaje de germinación. mientras que los muertos no). y evaluar todos los parámetros referentes a la práctica. lave los excedentes y observe bajo el estereoscopio. sumérjala en hipoclorito de sodio 2% por cinco minutos. explique por qué se da la reacción de tinción en la prueba química de viabilidad. Por qué algunas semillas demoran más en el proceso de imbibición y germinación? 8 . 3.

El sustrato puede intervenir o no en el complejo proceso de la nutrición mineral de la planta.PRACTICA 2. bien si se trata de propagación sexual a raíz desnuda o en envases. mineral u orgánico. Así mismo. La preparación de sustratos adecuados para la multiplicación de plantas. 100% suelo 9 . en forma pura o en mezcla. otros) Metodología 1. una adecuada preparación de sustratos hace parte de un método legal para el manejo de enfermedades e insectos plaga Materiales      60 vasos pequeños Suelo Arena Gallinaza 30 semillas de una misma especie (para siembra en los vasos: Ej. natural. PREPARACIÓN DE SUSTRATOS Introducción Un sustrato es todo material sólido distinto del suelo. de síntesis o residual. o si se van a emplear explantes para propagación asexual. desempeñando. permite el anclaje del sistema radicular de la planta. por tanto. Cítricos. que. colocado en un contenedor. Papaya. Maracuyá. un papel de soporte para la planta. Prepare los siguientes sustratos: a.: Arroz. bajo método sexual o asexual es importante para el adecuado desarrollo de los objetivos a alcanzar.

b. 100% Arena 2.b. posteriormente seque en la mufla (Laboratorio de suelos). y evalúe: a. c. Registre y analice cada uno de los resultados. y determine la cantidad de agua almacenada en cada sustrato (Agua aprovechable por la planta). físicas y organolépticas debe presentar un buen compost para la preparación de sustratos? 10 . Con cada uno de los sustratos.  Que es. Suelo – Gallinaza 2:1 e. teniendo cuidado de separar los tratamientos. Suelo – Arena 1:1 d. siembre una semilla. riegue adecuadamente. e. 3. 4. y deje drenar por 24 horas. Registre el valor de cada uno de los sustratos. y que características químicas. En cinco recipientes de cada sustrato. d. Preguntas  Que fitopatologías están asociadas al sustrato como fuente de transmisión?. Suelo – Arena 2:1 c.  Cuál es la principal función de los sustratos?  A que se le denomina un sustrato hidropónico?  Por que se dice que existen algunos sustratos o suelos supresivos?  Para que es utilizado el poliestireno expandido en algunos sustratos?. Pese un recipiente de cada sustrato. Suelo –Arena – Gallinaza 2:1:1 f. llene 10 vasos pequeños perforados en la base para evitar encharcamiento. Geminación Frecuencia de riego Vigor Sanidad Otros 5.

trazado y establecimiento de un cultivo. en grupos de cuatro personas. será asignado un caso. se encuentran: Cuadrado. Introducción La forma como se planifica y establece un cultivo en el terreno. se denomina método de trazado. el grupo deberá plantear el 11 . de acuerdo con las características particulares de cada sistema productivo.  Determinar la densidad de siembra y población de plantas del cultivo asignado. Entre los métodos más empleados. curvas de nivel. voleo.PRACTICA 3 MÉTODOS DE TRAZADO EN CAMPO Objetivo  Aplicar los conceptos y criterios necesarios para el diseño. donde previa revisión de literatura. triangulo o tres bolillo. Materiales  Flexo metro  Estacas (50)  Cuerda  Barreno Metodología Con base en los conocimientos adquiridos y los criterios para el establecimiento de cultivos.

en dado caso de considerar que no es viable la siembra.procedimiento a seguir. argumente su respuesta. Cultivo de plátano Hartón bajo penumbra del 45 – 50% Caso 3. las posibles dificultades y arreglos que fueran necesarios para el establecimiento del cultivo. Cuestionario  Qué criterios deben tenerse en cuenta al momento de definir un sistema de trazado en campo  Porque es importante conocer el nivel freático y la pendiente del terreno para determinar el sistema de trazado? 12 . Cultivo de Mango Tommy Cuadrado Rectángulo Caso 2. Cultivo de Cacao en asocio con plátano Caso 4. Triangulo ó tres bolillo Caso 1. Cultivo de piña como cultivo transitorio en cultivo de cítricos de un año.

PRACTICA 4 PROPAGACIÓN ASEXUAL Objetivo Analizar los factores fisiológicos y morfológicos que inciden sobre los métodos de propagación asexual. Materiales  Navaja para injertacion  Hipoclorito de sodio  Plástico negro  200 ml de citoquinas 500 ppm (Para todo el grupo)  200 ml de Auxina 500 ppm (Para todo el grupo)  Hormonagro  Trichoderma sp. Metodología Estacas: En bolsa pequeña o vasos pequeños con drenaje. a cada uno de los grupos aplique uno de los siguientes tratamientos: 13 . Desarrollar habilidades básicas en los diferentes métodos de propagación asexual por estructuras especializadas. siembre 60 estacas con características similares (las estacas deben tener la misma longitud. diámetro y el mismo grado de lignificación) de una misma especie en cuatro grupos diferentes (15 cada uno).

Escisión de medio anillo de la corteza.  Siembra de las estacas con la polaridad invertida. y sembrar en posición vertical. Gliricidia sepium). preferiblemente limo de rio: a. preferiblemente en horas de la tarde (después de las 4:00 pm). aplique con atomizador una solución de ANA en el sitio de corte.  Realice los siguientes tratamientos.  Siembra de las estacas en posición vertical sin aplicación de ANA. y tape con suficiente sustrato húmedo. cada uno por cinco repeticiones. Azadirachta indica. 14 .  Aplicación de ANA (Hormonagro 1) en la zona proximal y sembrar con inclinación de 45°. hasta que se observe abundante formación de raíz. Acodos  Seleccione una especie (Liquidámbar styraciflua. utilizando un mismo sustrato previamente esterilizado. Guadua angustifolia. Euphorbia cotinifolia. Aplicación de ANA (Hormonagro 1) en la zona proximal.

aplique con atomizador una solución de ANA en el sitio de corte. aplique la solución de ANA en el follaje.  Por qué algunas especies. hasta que se observe abundante formación de raíz. tienen respuesta más rápida para la rizogénesis?  Que hormonas están implicadas en la rizogénesis? 15 . Escisión completa de un anillo en la corteza. Realice seguimiento y anote los cambios observados Cuestionario  Como afecta la polaridad. el enraizamiento de explantes?. pero en cambio. Realice el mismo procedimiento indicado en el literal a y b.b. c. Es necesario revisarlos periódicamente para mantener las condiciones de sanidad y humedad adecuadas. y tape con suficiente sustrato húmedo. d.

pues las características de rápida división celular y ausencia de tejidos conductor diferenciado. de acuerdo a la función dentro del organismo. que según G. El cultivo de meristemos. es empleada principalmente como una herramienta para la producción de plantas libres de enfermedades. generalmente hacen de la zona meristematica un tejido libre de patógenos.  8 semillas de especies de las anteriores especies embebidas por 24 Horas (Las semillas deben ser desinfestadas con una solución de hipoclorito al 5% por 5 minutos y embebidas en agua destilada estéril) 16 . como el grado de especialización de una célula. se define como la capacidad que tiene cualquier célula. dentro de las técnicas de cultivo de tejidos. Materiales  8 semillas de especies diferentes (4 de cada especie) sin embeber. la totipotencia. considerado el pionero del cultivo de células. de formar un organismo idéntico al que proviene. Objetivos Identificar el proceso general para la extracción y siembra in vitro de meristemos con fines de micro propagación Reconocer los equipos e instalaciones para procesos básicos de cultivo de tejidos. y la diferenciación celular. se basan en dos principios fundamentales. Haberlant 1902.PRACTICA 5. CULTIVO in vitro DE MERISTEMOS Introducción Las técnicas de cultivo de tejidos. como herramienta de la biotecnología vegetal.

previamente adecuada para el trabajo aséptico. posteriormente sumerja la semilla desnuda en alcohol 70% por 10 segundos e inmediatamente llévelas a la solución de NaOCl 0.  Realice el mismo procedimiento para las semillas embebidas  Márquelas adecuadamente e incube a 27° C y 12 horas luz.  Lave dos veces las semillas con ADE y séquelas antes de la siembra. Mangos de bisturí. otros)  100 ml de Hipoclorito 5%  50 ml de Hipoclorito 0.  Tome dos semillas de cada especie. Germinación in vitro  Tome las semillas de las especies seleccionadas sin embeber. extraiga el meristemo y siembre en medio de cultivo (En frascos distintos cada especie).  Llévelas en la solución a la cabina de flujo laminar. 17 .5% por tres minutos. realice el proceso de desinsfestacion de la siguiente manera:  Sumerja las semillas en una solución de Hipoclorito de sodio 5% más dos gotas de Tween por 10 min. 10 Explantes apicales de cinco especies diferentes (2 de cada especie)  Medios de cultivo MS  Instrumentos para trabajo en cámara (Pinzas.  Elimine la testa de todas las semillas.5%  Dos frascos de Agua destilada estéril  50 ml de Alcohol 70%  Dos cajas de petri con toalla absorbente (Estériles ) Metodología 1. evitando dañar el tejido embrionario.  Tome las otras dos semillas con cotiledón y siémbrelas.

OBSERVACIONES: . Desde un enfoque agronómico. Extracción y siembra de meristemos .Identifique previamente la filotaxia de las especies a introducir. .Lave dos veces en agua destilada estéril . .Sumerja los explantes en una solución de alcohol por 10 segundos. . identifíquelos a nivel de género. . Analice desde el punto de vista fisiológico. retire cuidadosamente el tejido externo. . ¿Qué diferencias presentó el tejido meristematico de las diferentes especies?. en una solución de NaOCl 5% más dos gotas de Tween 20.Siembre en el medio de cultivo. 4. Cuestionario 1. . estipulas y demás hasta obtener un explante de aproximadamente tres (3) centímetros.Introduzca el explante en la solución de NaOCl por 3 minutos. . ¿cuales considera que pueden ser las aplicaciones de la siembra de embriones y meristemos en condiciones in vitro? 18 . el efecto de la imbibición de las semillas sobre el desarrollo embrionario en condiciones in vitro?.Elimine hojas. ¿Qué ventajas presenta el desarrollo embrionario. Analice ésta situación. cuando se retiran los cotiledones?.Con la ayuda del estereoscopio.Tenga en cuenta el protocolo de trabajo en cabina de flujo. en caso de presentarse crecimiento de microorganismos.Tape y marque adecuadamente.En ambos procedimientos. 3. hasta que tenga un explante de 1 cm aproximadamente. 2.Introdúzcalos a la cabina de flujo. .2.

cesaf. 1998  Vegetative propagation techniques. Colombiana 25(1). Gruber. PROPAGACIÓN DE PLANTAS. Plaza.  Scianna. Susan R. Afganistan. Majerus.  http://www. Mark E. Editorial Guadalupe. November 18. Diego L. Joseph D. Derek. Jalalabad. Reid.html  BEWLEY. Lori M.Bibliografía  OSORIO M.. Winslow. The plant cell. Fisiologia de semillas recalcitrantes de arboles tropicales. Magnitskiy y GUIDO A. Seed germination and dormancy.uchile.  STANISLAV V. and Sam A.cl/cesaf/n14/4. 96-103. J. Unyversity of Guelph. 2007. vol 9. Asexula Plant propagation: Special techniques considerations for sucessful high altitude revegetation. pag 1055 – 1066. 2007 Agronomía 19 .

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