Enterobacterias

Prof. Olga Tkachuk de Saad

Cátedra de Microbiología
 T
axonomía
 Orden Enterobacteriales
 Familia: Enterobacteriaceae (unica fla. )
 Géneros: 41antes por criterios fenotipicos,
actualmente mas por criterios geneticos
 Solo unas 28 especies de los cientos que posee la
familia tienen importancia clínica en medicina.
 Representan 80 % de los aislamientos de bacilos
gramnegativos en laborarorios
 50% casos de septicemia y 70% infecciones TGU
 Nomenclatura de la Flia. Enterobacteriaceae
Tribu Géneros Especies
Escherichiae Escherichia E. coli
Shigella S. dysenteriae, S. flexneri, S.boydii,
S.sonnei
Edwarsiellae Edwarsiella E. tarda
Salmonelleae Salmonella S. typhi, S. typhimurium, S. enteritidis,
etc.
S. arizonae diversos serogrupos
Citrobacter C. freundii, C. diversus
Klebsiellae Klebsiella K. pneumoniae, K. ozaenae,
K. rhinoscleromatis
Enterobacter E. aerogenes, E. cloacae
Serratia S. marcescens
Hafnia H. alvei
Proteae Proteus P. vulgaris, P. mirabilis
Providencia Pr. rettgeri
Morganella M. morganii
Yersiniae Yersinia Y. pestis, Y. pseudotuberculosis, Y.
enterocolitica
Erwiniae Erwinia Diversas especies
Pectobacterium Diversas especies
 Defi
nición de grupo
 Bacilos rectos gramnegativos, tamaño
medio (0,4-0,6 x 2 a 3µm)
 Anaerobios facultativos
 Moviles o Inmoviles
 Necesidades nutricionales sencillas
 Fermentadores de glucosa y otros azucares.
 Catalasa positivo, oxidasa negativos.
 Los miembros son designados como
enterobacterias
 M
orfología
 Bacilos medianos rectos de

2-3 um de largo.
 No esporulados.
 Muchas especies son móviles por
flagelos perítricos.
 Poseen en su mayoría cápsula

H
Distribuidos ampliamente en la naturaleza en todos los
nichos ecológicos: agua, tierra, plantas.
ábitat
 Existen especies que se localizan exclusivamente en
su hospedador (Salmonella)

 Son habitantes normales del tracto intestinal formando

parte de la micropoblación bacteriana normal del
intestino grueso
 Su hallazgo en agua y alimentos significa
contaminación fecal reciente
 T
Debido al numero de cepas existentes, las enterobacterias se
tipifican por sus propiedades de:
ipificación
✦ Características bioquímicas: Biotipificación o biotipo
basado en variedades de sus caracteristicas bioquimicas
dentro de la misma especie.
✦ Presencia de antígenos estructurales: Serotipificación.
✦ Sensibilidad a antibiótico: Antibiotipificación o
antibiograma (resistencia a los antimicrobianos)
✦ Sensibilidad frente a fagos específicos:
Fagotipificacíon (perfil de sensibilidad frente a fagos
liticos)
 T
Debido al numero de cepas existentes, las enterobacterias se tipifican por
sus propiedades de:

ipificación
✦ Genes de virulencia de la cepa: Virotipificación
distinguir cepas patogenas de las no patogenas
mediante pruebas de PCR. Ejm. Cepas ECVT genes
de verotoxinas vt1 y vt2
✦ Identificar clones o grupos clonales
Genotipificación molecular: mediante el perfil
plasmídico, secuenciación del DNA, analisis de DNA
por enzimas de restricción, tipificación por PCR,
ribotipificacion mediante analisis de los genes de
DNA que codifican ARNr 16S y 23S
 S
 Es uno de los procesos más importantes y rutinarios.
 Se basa en la detección serologica de los Ag’s de:
erotipificación
✦ Pared Celular o Somáticos: Ag “O”
✦ Capsulares: Ag “K” o “Vi” (envoltura)
✦ Flagelares: Ag “H”
 Al establecerse el Ag “O” se conoce al serogrupo.
 Al establecer otros Ag’s superficiales conocemos los serotipos o
serovariedades: Ejm O:H, O:K ó Vi:H
 Ejm.: Salmonella tiene más de 2.435 serotipos y E. coli posee
tambien numerosos serotipos
 Cepas E. coli verotoxigenicas (ECVT) 0157:H7
 Mas que la sospecha clínica, debe
Dia
prevalecer la
experiencia: diarreas, abscesos, heridas, mastitis,
neumonias, gnostico
aerosaculitis, artritis, poliserositis,
peritonitis
 La muestra varia mucho dependiendo de la alteración
producida, pudiendo ser tejidos, hisopados, heces,
secreciones.
 Se utilizan medios de transporte ordinarios Stuart o con
carbon (Cary-Blair).
 iagnóstico
 Microscopia directalaboratorial
 Las enterobacterias son, al igual que muchos
otros géneros, bacilos Gram negativos, de
bacilos con un tamaño mediano

 La microscopia directa no es usualmente de mucha utilidad

 En infecciones del tracto urinario, un contaje bacteriano puede ser

llevado a cabo en muestras tomadas recientemente e indicar una
bacteriuria de importancia clínica.

 Aislamiento

 Todos los miembros de la familia Enterobacteriaceae crecen en los

medios rutinarios: Agar sangre (AS) y Agar MacConkey
 Dia
 Sembrar en medios enriquecidos si la muestra es de areas esteriles
sangre o LCR en AS o agar chocolate
gnostico
 Muestras de orina, del TR esputos y de heridas en medios
selectivos y/o diferenciales: agar MacConkey, Agar EM de Levine

 Cultivo de muestras intestinales en medios selectivos: agar

sulfato de bistumo o BSA, Xilosa Lisina Deoxicolato XLD,
Salmonella-Shigella agar (SSA), etc

 Conviene incluir caldo de enriquecimiento como de caldo

selenito o tetrationato potenciar alislamiento de Salmonella
 Dia
 Cultivo a 37-42º C dependiendo del MO que se sospeche.
 Realización de pruebasgnostico
bioquímicas de rutina para identificación
del genero y especie.

 En dado caso, hacer serotipificación.

 Sensibilidad antimicrobiana y su reporte.
 Ojo: Cuidado con el reporte de laboratorio. La identificación de
una enterobacteria en una muestra de heces puede no ser
significativa, pero si en otro tipo de muestra(orina, oído,
peritoneo, LCR, sangre etc) es importante.
 El termino “coliforme”
Coliformes” o “bacterias
coliformes”, no posee un significado
taxonómico
 Se emplea para referirse a los miembros de la
familia Enterobacteriaceae que usualmente
fermentan la lactosa, tales como: Escherichia
coli, y las especies de Klebsiella y
Enterobacter
 Ter
“Es un bacilo mediano gramnegativo, oxidasa
negativo, capaz de crecer aerobicamente en un
mino “Coliforme"
medio de agar que contenga sales de bilis y que sea
capaz de fermentar lactosa dentro de las primeras
48 horas de cultivo a 35-37º C con la producción de
acido y gas.”

M. Cheesbrough (1984)
Géneros y especies de interés
 Género
Escherichia
 Car
 Comprende 5 especies:
acterísticas del Genero
 E. blattae, E. fergunsonii, E. hermanii, E. vulneris y E.
coli
 La E. coli es la principal especie patógena del grupo.
 Es uno de los microorganismos mas estudiados de la
naturaleza.
 Es un habitante normal del intestino, pero existen cepas
con cuadros patógenos graves.
 Fue descubierta 1885 por Theodor Escherich.
 C
La serotipificación antigenica es muy util e
importante en la epidemiología y patogenesis
aracterísticas
de una infección facilitando diferenciar cepas
virulentas e inocuas.

Actualmente se conocen:
173 Ag O (O1-O181)
72 Ag K (K1-K103)
53 Ag H (H1-H56)
actores de virulencia de las cepas Patógenas de E. coli
 Polisacaridos capsulares (K)
 La Endotoxina A
 Ciertas fimbrias y adhesinas
 Alfa y beta hemolisinas
 Sideróforos
 Enterotoxinas: termoestable y termolábil
 Verotoxina
Factores

de Patogenicidad
Cápsula de polisacaridos, producida por algunas
cepas.

 Endotoxina (LPS): Pirogeno, produce daño

endotelial, CID y choque endotoxico. Efecto muy
importante en cuadros septicemicos.
 Fimbrias- Adhesinas: Permiten la invasión de
mucosas, evitan la expulsión mecánica. Las más
importante en MV son las F4(K88), F5(K99),
F6(987P) y F41.
 Factores de Patogenicidad
 Algunas cepas requieren otras adhesinas
conocidas como Intiminas.
 Producción de enterotoxinas,verotoxinas y
factores citotoxicos necrotizantes
 Todos estos factores son específicos de cepas,
lo que ha llevado a clasificarlas de acuerdo al
cuadro patogeno
actores de virulencia de las cepas Patógenas de E. coli
 Polisacaridos capsulares (K)
 La Endotoxina A
 Ciertas fimbrias y adhesinas
 Alfa y beta hemolisinas
 Sideróforos
 Enterotoxinas: termoestable y termolábil
 Verotoxina
 Tipos de E. coli patógenas
• Cepas de E. coli no patogénicas pueden causar infecciones
oportunistas: Mastitis, Metritis

• Las cepas de E coli que causan enteritis se pueden clasificar en:

• Enterotoxigénicas (siglas en ingles ETEC)

• Enteropatógena (EPEC)

• Enteroinvasiva (EIEC)

• Enterotóxemica por Verotoxinas (EVEC)

E. coli enterotoxigénicas (ECET)
•Son muy frecuentes y muy
especificas de hospedador.

•Producen las enterotoxinas LT y ST,

ademas de las adhesinas de
colonización.

•La LT es una proteína conformada

por 6 subunidades (1 A y 5B)
mientras que la ST (a y b) la forman
varios polipétidos.

•Ella incrementa la actividad de

AMPc y GMPc, provocando un
desbalance de agua y electrólitos.
E. coli enteropatogénicas (ECEP)
•Cuadros diarreicos graves.
•Posee una adhesina (BFP)
y una intimina.

•Modifican la actina celular

provocando desaparición de
las vellosidades con formación
de una copa donde descansa la
bacteria.
 E. coli enteroinvasivas (ECEI)
•Cuadros diarreicos similares a una
shigelosis.
Mecanismo de acción:
•Penetran por endocitosis.
•Lisis de la vacuola endocítica.
•Multiplicación intracelular.
•Desplazamiento en citosol.
•Diseminación a las células
adyacentes
•Producen una enterotoxina
ShET2
E. coli verotoxigénicas (ECVT)
•Cursan con un cuadro de enteritis
hemorrágica y un síndrome
urémico/hemolítico en humano.

•El bovino es el reservorio.

•Las verotoxinas producida esta ligada con
la producida por Shigella dysenteriae. Ellas
inhiben síntesis proteica.

•Adicionalmente provocan desaparición de

las vellosidades intestinales.
 E. coli enteroagregativas (ECEA)
•Produce una diarrea mucosa en humanos.
•Poseen adhesinas que le permiten
unirse a la mucosa y formar un biofilm
que las protege.

•Secretan una toxina termoestable que

puede estar ligada a la desaparición de las
vellosidades y a los cuadros de diarrea.
E. coli con adherencia difusa (ECAD)
•Se cree que causa cuadros
diarreicos en jovenes y adultos.

•Siguen un patrón de
adherencia difuso.

•Se conocen 2 adhesinas.

•Provocan la elongación de
las vellosidades hasta quedar
cubiertas por ella.
 E.
 Patógeno oportunista con cuadro de infecciones agudos.
coli uropatogénicas y septicémicas
 Principal factor de cepas uropatógenas y
septicemicas es la presencia de fimbrias especiales de
adehsión: P, S, F17, F165, etc, dependiendo de la
especie animal.
 Muchas cepas poseen mas de una fimbrias.
 Sideróforo Aerobactin.
 Hemolisina.
 Factor Necrosante Citotóxico 1 y 2 (CNF1-CNF2).
 Sospecha clínica.
Di
 Muestra: Heces, orina, sangre, exudado o pus, líquidos orgánicos,
agnóstico y prevención
leche.
 Siembra de medio especiales: AMcC, EMB o Levine.
 Existen cepas patógenas lactosa negativas
 Realización de pruebas bioquímicas.
 Identificación del serotipo.
 Realización de pruebas especiales (PCR).
 Saneamiento de las aguas, adecuada manipulación de alimentos y
mejoras en las condiciones e higiene.
 G
racias por su Atención