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Xiomara Yez Rueda, Omar Giovanny Prez, Hernando Meza

Actividad larvicida del aceite esencial foliar de Eucaliptus globulus contra Aedes aegypti Linnaeus
Bistua: Revista de la Facultad de Ciencias Bsicas, vol. 8, nm. 1, enero-junio, 2010
Universidad de Pamplona
Colombia
Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=90315226009

Bistua: Revista de la Facultad de Ciencias

Bsicas,
ISSN (Versin impresa): 0120-4211
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Revista Bistua
Facultad de Ciencias Basicas
Universidad de Pamplona
Pamplona-Colombia
Vol 8 (1),2010:71-77

Actividad larvicida del aceite esencial foliar de Eucaliptus globulus contra Aedes aegypti Linnaeus
Larvicidal activity of essential oil isolated from Colombian Eucalyptus globulus against Aedes
aegypti Linnaeus
Xiomara Yez Rueda1, Omar Giovanny Prez2 ,Hernando Meza 1
1

Grupo de Investigacin en Productos Verdes (GPV), Universidad de Pamplona, Pamplona, Norte

de Santander, Colombia. Correo electrnico: ipv@unipamplona.edu.co
2
Grupo de Investigacin en Parasitologa y Enfermedades Tropicales (GIEPATRI), Universidad de
Pamplona, Pamplona, Norte de Santander, Colombia.

RESUMEN
La actividad larvicida del aceite esencial (AE) de las hojas secas de Eucaliptus globulus cultivado en
la regin de Chincota, Norte de Santander (Colombia), contra la cepa de referencia Rockefeller
del mosquito Aedes aegypti Linnaeus fue evaluada a nivel de laboratorio, teniendo en cuenta la
metodologa de la OMS. El AE fue obtenido por Hidrodestilacin asistida por radiacin de
Microondas (HDMO) y sus componentes mayoritarios fueron analizados por Cromatografa de
Gases de Alta Resolucin (GCAR).
Las larvas de cuarto estadio de A. aegypti resultaron susceptibles frente al AE en concentraciones
de 100 ppm con una mortalidad del 100%. El anlisis estadstico Probit-log de los bioensayos
permiti determinar el valor de la dosis diagnstica en 0.0348% (348 ppm). La susceptibilidad de
las larvas fue asociada con los componentes voltiles mayoritarios el 1,8-Cineol o Eucaliptol y el Pineno presentes en concentraciones del 82.38% y 8.69% respectivamente, seguidos de otros
componentes como Bourboneno, Limoneno y Nerol, los cuales se supone poseen un efecto
sinrgico. El AE de E. globulus se propone como una herramienta alternativa, ecolgicamente
compatible, en la estrategia de lucha integrada que se lleva a cabo en nuestra regin tropical, para
controlar este importante vector del dengue y la fiebre amarilla.
PALABRAS CLAVES: Eucaliptus globulus, Larvicida, Aedes aegypti, eucaliptol, pineno, limoneno.
*Para citar este articulo: Yez Rueda X, Giovanny Prez O, Meza H . Actividad larvicida del aceite
esencial foliar de Eucaliptus globulus contra Aedes aegypti Linnaeus. Bistua 2010;8(1):71:77

+Autor para el envio de correspondencia y la solicitud de separatas: Grupo de Investigacin en

Productos Verdes (GPV), Universidad de Pamplona, Pamplona, Norte de Santander, Colombia.
Correo electrnico: ipv@unipamplona.edu.co

ABSTRACT
The aim of this work was to study the larvicidal activity of E. globulus essential oil against Aedes
aegypti larvae. The essential oil was obtained by vapor extraction and their chemical composition
was determined by gas chromatography coupled to mass spectroscopy. Bioassays were run with
the essential oil pure and diluted. The results obtained showed that essential oil have larvicidal
action, causing an almost instantaneous mortality. Eucaliptol, -Pinene, Limonene, Buorbuneno y
Nerol were identified as the active principle responsible for the larvicidal action of E. globulus

essential oil, causing 100% larval mortality at the lowest tested concentration of 100ppm. These
results suggest that the essential oil of E. globulus is promising as larvicide against A. aegypti and
could be useful in the search of newer, more selective, and biodegradable larvicidal natural
compounds to be used in official combat programs and at home.

KEY WORDS: Eucalyptus globulus, larvicidal activity, Aedes aegypti, Eucalyptol,

-Pinene, Limonene.

INTRODUCCIN
La utilizacin de productos naturales como los aceites esenciales (AE) se ha incrementado en los
ltimos tiempos, en las reas alimenticia, farmacutica y cosmtica, como agentes conservantes,
antioxidantes, microbicidas e industriales en general. Colombia a pesar de su gran biodiversidad es
un importador a gran escala de los AE [3]. Muchas especies vegetales poseen gran actividad
biolgica, no slo contra los insectos, sino tambin contra otros organismos como caros,
roedores, nematodos, bacterias, virus y hongos [9].
La familia Myrtaceae est compuesta aproximadamente por 133 gneros y unas 3900 especies, las
cuales se distribuyen en su mayora en las regiones tropicales y subtropicales de Australia y
Suramrica. El gnero Eucaliptus abarca unas 300 variedades [16]. Es uno de los rboles de ms
rpido crecimiento en el mundo y alcanza a veces una altura de 100 m. Debido a que su enorme
sistema de races absorbe vastas cantidades de agua, se ha plantado en reas pantanosas
infestadas de malaria para secar el suelo y purificar el aire. Tiene hojas altamente aromticas de
color verde-azul en forma de corazn cuando son jvenes, y, largas y lanceoladas en su madurez.
Cerca de 50 especies proveen un aceite valioso, con un aroma refrescante, penetrante y
estimulante con reminiscencias medicinales [2]. El componente clave de las hojas de eucalipto es
un aceite voltil conocido como Eucaliptol (1,8-Cineol) encontrado con la ms alta proporcin
(70% como mnimo) [4]. Especies de la familia Myrtaceae han demostrado accin larvicida de su
aceite esencial foliar contra A. aegypti agente transmisor del dengue clsico (DC), dengue
hemorrgico y la fiebre amarilla [1]. Se ha demostrado que un extracto de aceite de eucalipto
resulta eficaz en la proteccin contra distintos tipos de picaduras de insectos [8]. Como la mayora
de las especies del gnero Eucaliptus, las principales investigaciones de esta planta han sido
dirigidas al estudio del AE de sus hojas, en la que tambin se observa la presencia de compuestos
polifenlicos, una -dicetona antioxidante de cadena larga [12] y terpenoides aromticos
conocidos como los euglobales [4, 7]. De acuerdo con las reconocidas propiedades del Eucaliptol,
se especula si este componente mayoritario, podra ser directamente responsable de la
mortalidad de las larvas de A. aegypti o por el contrario requiere de la participacin de los otros
componentes minoritarios. Muchos de estos componentes menores tienen propiedades irritantes
y son removidos por redestilacin del aceite [7, 14].
El aumento de la resistencia al insecticida Abate (Temefs), considerado como el elemento clave
en los programas de control qumico del vector ha propiciado la aparicin de nuevas epidemias de
dengue y dengue hemorrgico en reas tropicales, obligando a revisar la informacin sobre la
situacin de cra y desarrollo de A. aegypti, para retomar iniciativas globales de control [11].
En este trabajo, se ha evaluado el AE obtenido de las hojas secas de E. globulus, cultivado en la
regin de Chincota (Norte de Santander), cuyos componentes qumicos mayoritarios se
consideran responsables frente a la susceptibilidad de las larvas de A. aegypti del cuarto estadio
(cepa Rockefeller). Los resultados obtenidos son promisorios para desarrollar nuevos agentes
antivectoriales de aceptacin ecolgica como estrategia de lucha integrada contra el principal
vector del dengue y la fiebre amarilla.

MATERIALES Y MTODOS
Obtencin del Aceite Esencial (AE)
Las hojas de E. globulus fueron recolectadas en la vereda Iscal, del municipio de Chincota, Norte
de Santander (Fotografa 1). El municipio de Chincota se encuentra ubicado en el valle que forma
al bifurcarse poco antes de Pamplona, la Cordillera Oriental, a 7 37 Latitud Norte y 7236
Longitud Oeste, del Meridiano de Greenwich, tiene una extensin territorial de 166.50 Km2 y una
altitud promedio de 1175 msnm (metros sobre el nivel del mar). Se encuentra en los pisos
trmicos de templado a fro, con temperaturas que oscilan entre los 12C y los 22C
[http://www.chinacota.com].
La especie fue clasificada por el botnico Luis Roberto Snchez, director del Herbario Regional
Catatumbo-Sarare, de la Universidad de Pamplona. Las hojas se separaron manualmente de los
tallos y se secaron al aire y a la sombra por 15 das. El AE fue extrado a partir de 300 gramos de
material mediante el mtodo de Hidrodestilacin asistida por Microondas (HDMO), para lo cual se
utiliz un microondas marca Samsumg, por 40 minutos y potencia del 70%. El rendimiento de AE
se midi como ml de AE por 100g de hojas secas.

FOTOGRAFA 1. Zona de recoleccin del eucalipto, en la Vereda Iscal (Chincota). (Fuente Los
Autores).

Anlisis Qumico del Aceite Esencial (AE)

La composicin qumica de los aceites se determin por la tcnica de Cromatografa de Gases de
Alta Resolucin. Se tomaron 30 l del aceite esencial y se disolvieron en 1 ml de diclorometano.
En cada equipo, se inyect 1 l de la muestra anterior. Se estandarizaron las variables del mtodo,
como temperatura inicial y temperatura del horno. Se corrieron las muestras en las columnas HP-5
e INNOWAX, con el aceite esencial y con los patrones de hidrocarburos C-7 a C-32, para calcular
los ndices de Kovts (IK). Se confirmaron los componentes mayoritarios por espectrometra de
masas, de acuerdo con la base de datos NYST- 2005.

Cepa Rockefeller de A. aegypti

Se utilizaron larvas de la cepa de referencia Rockefeller considerada altamente susceptible, la cual
ha sido mantenida y manipulada en el Laboratorio del Instituto de Salud de Norte de Santander,
en Ccuta (Colombia) por 30 aos, sin presin de seleccin con insecticidas, por lo tanto, no ha
sido expuesta, ni ha estado en contacto con otras especies, ni ambientes. Se considera una cepa
de alta confiabilidad para la experimentacin con insecticidas y potenciales plaguicidas (Fotografa
2).

Bioensayos
Teniendo en cuenta la metodologa de la OMS se investig la susceptibilidad de larvas de Aedes
aegypti de cuarto estadio frente al AE de E. globulus. Partiendo de una concentracin inicial de
200 ppm del AE, la cual causa el 100 % de mortalidad de las larvas, se realizaron los bioensayos
preliminares utilizando 2 rplicas por cada concentracin de AE con los controles
correspondientes. Las concentraciones finales probadas para E. globulus fueron de 5 ppm, 15
ppm, 25 ppm, 50 ppm, 75 ppm y 100 ppm, con las que se realizaron bioensayos que contaron con
5 rplicas por concentracin y sus respectivos controles. Los controles fueron tratados siguiendo la
misma metodologa, pero utilizando acetona como solvente. Posteriormente, se aplic a los
resultados el anlisis estadstico Probit-log5 (concentracin vs .mortalidad) para establecer la dosis
diagnstica del AE y las Concentraciones Letales del mismo (CL50 y CL99) [15].

FOTOGRAFA 2. Larvas entre tercer y cuarto estadio de la cepa Rockefeller de Aedes aegypti.
(Fuente: Los autores).

Discusin de resultados y conclusiones

El rendimiento de AE obtenido para las hojas secas de E. globulus fue del 1,33%. Por
Cromatografa de Gases se identificaron ms de una decena de componentes terpnicos como se
muestra en el perfil cromatogrfico del AE en la Figura 1. En la Tabla 1, se observan los
componentes voltiles mayoritarios analizados. El 1,8-Cineol o Eucaliptol aparece como el
componente de mayor proporcin con 82.38%, seguido de Pineno con 8.69%, Bourboneno con
2.25%, Limoneno con 1.35% y Nerol con1.22%.
Las pruebas realizadas con concentraciones de 100 y 75 ppm del AE de E. globulus mostraron el
100% y el 73.2% respectivamente de mortalidad de las larvas de A. aegypti, segn se observa en la
Tabla 2. Con las concentraciones de 50, 25, 15 y 5 ppm el nivel de mortalidad result menor al
50%. En general, se observ que la concentracin de los aceites y la mortalidad mantienen una
tendencia a la proporcionalidad, lo que indica que a medida que decrece la concentracin de AE,
se observa la disminucin en el porcentaje de mortalidad de las larvas.
Los resultados del anlisis estadstico Probit-log de los bioensayos para determinar la actividad
larvicida del AE, se muestran en la Tabla 3 y permitieron establecer la dosis diagnstica de
348.9426 ppm (0.0348%) para el AE de E. globulus contra las larvas de A. aegypti Linn., junto con
los valores de las concentraciones letales CL50= 58.566655 % y CL99= 174.47130 %.
Los anteriores valores se aproximaron a los determinados para las mirtceas cubanas Eugenia
melanadenia y Psidium rotundatum, las cuales tambin presentaron efecto larvicida sobre A.
aegypti. Los AE de estas especies vegetales tambin poseen el 1,8-Cineol o Eucaliptol, el Limoneno
y el Pineno, entre sus componentes mayoritarios. Las dosis diagnsticas para los aceites esenciales
de estas 2 plantas fueron de 0,022% (220 ppm) para E. melanadenia y de 0,0164 % (164 ppm)
para P. rotundatum [1].
De igual manera, los valores se acercaron a los determinados para el AE de Curcuma aromatica
con alta actividad contra larvas de cuarto estadio de A. aegypti con valores de CL50 de 57.15 ppm
[6] y para la canela indgena Cinnamomum osmophloeum Kaneh y otros aceites esenciales con
excelente efecto inhibitorio contra larvas de cuarto estadio de variedades del mosquito Aedes,
cuyos valores de CL 50 estuvieron entre 36-44 ppm, y la CL 90 fue de 79-85 ppm respectivamente
[17, 18].
El presente estudio permite avanzar en la bsqueda de una alternativa natural para el control del
vector causante de graves dolencias como la fiebre amarilla y del dengue en nuestra regin
tropical y ofrece una referencia para futuras investigaciones en cuanto a la susceptibilidad de las
poblaciones del mosquito y otras plagas similares, frente a los AE de mirtceas nativas.

GRFICA 1. Perfil cromatogrfico del aceite esencial de Eucaliptus globulus recolectado en la

vereda Iscal del municipio de Chincota (Norte de Santander).

Tabla 1. Componentes voltiles mayoritarios del Aceite Esencial (AE) de Eucalyptus globulus de la
vereda Iscal del municipio de Chincota (Norte de Santander).

Pico

Concentracin
relativa
(%)

IK
Exp.a

IK
Tericob

Compuestoc

8.69

936

936

Pineno

0.46

979

980

Mirceno

0.45

990

988

2 -Octaneno

1.35

1031

1031

Limoneno

82,38

1037

1034

1,8Cineol

0.25

1213

1212

Dihidrocarveol

1.22

1229

1228

Nerol

0,38

1282

1282

-Terpineno

0,36

1342

1340

Acetato de Terpinen-4-ol

10

0,25

1356

1356

Eugenol

11

0,54

1374

1374

Isobutirato de Linalol

12

2,25

1386

1384

Bourboneno

13

0,57

1396

1395

Trimenal

14

0,41

1410

1409

Cedreno

ndice de Kovts experimental establecido por Cromatografa de Gases de Alta Resolucin (CGAR)
con Detector FID, en columna HP-5.
b

Adams, Robert (2005) Identification of essential oil components by gas chromatography/mass

spectroscopy. Allured Publishing Corporation: Carol Stream Illinois, USA. 469p.
c

Identificado por Cromatografa de Gases con Detector Selectivo de Masas.

Tabla 2. Concentracin del AE de Eucaliptus globulus y % de mortalidad de los individuos.

Concentracin (ppm)

Mortalidad (%)

100

100

75

73.2

50

36.8

25

29.5

15

11

TABLA 3. Anlisis Probit-log de bioensayos de laboratorio de larvas de A. aegypti expuestas a

diferentes concentraciones del aceite esencial foliar de E. globulus.

CL

Nivel de confianza

2 = % 22.34171
50 = % 58.566655
90 = % 106.85560
95 = % 126.7231
98 = % 153.52640
99 = % 174.47130

.95
.95
.95
.95
.95
.95

Varianza de CL50 = 4.034856 05

Heterogeneidad = 27.12532 con 2 df.
Dosis diagnstica = 348.9426 ppm (0.0348%).

Rango

9.6675 < CL < 51.52625

42.98471 < CL < 79.78727
64.00238 < CL < 178.59300
68.07637 < CL < 236.22680
72.39598 < CL < 326.16060
75.21402 < CL < 405.54580

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