DETERMINACIN DE SULFATO POR EL MTODO

TURBIDIMTRICO EN AGUAS Y AGUAS

RESIDUALES. VALIDACIN DEL MTODO
I. Aguilera Rodrguez*, R. M. Prez Silva*, A. Maran Reyes**

"

*Centro de Estudios de Biotecnologa Industrial, Universidad de Oriente**Facultad de Ciencias

Naturales, Universidad de Oriente

z Resumen
La validacin de mtodos de ensayos constituye una premisa para la realizacin de servicios
cientficos tcnicos y una garanta de la calidad de los resultados por brindar. El objetivo de un anlisis
qumico es generar resultados correctos y confiables, y uno de los aspectos ms importantes para
conseguir este propsito es la validacin de ensayos. En el presente trabajo se realiza la validacin de la
determinacin de sulfatos por el mtodo turbidimtrico, mediante la determinacin de los parmetros:
linealidad, exactitud, lmites de deteccin y de determinacin. Durante el estudio, se utiliza un patrn de
referencia interno; se realizan ensayos de recuperacin de muestras, y se comparan los resultados
obtenidos en muestras residuales industriales con los reportados por un laboratorio de referencia a travs
de pruebas de hiptesis, prueba de Fisher y test de Student, demostrndose que no existen diferencias
significativas para un 95 % de confiabilidad entre los mismos.
Palabra clave: validacin de mtodos analticos, sulfato, mtodo turbidimtrico.
z Abstract
The validation of analytical methods assays constitutes a premise for the realization of services
scientific technicians and a guarantee of the quality of the results to propose. The objective of the chemical
analysis is to generate correct results and one of the most important aspects to get correct results is to
validate the analytic method that will use. In the present work it is carried out the validation of the
determination of the ions sulfate, by the turbidimetric methods for that which the following parameters
are calculated: linearity, precision, detection and determination limits. During of the study, is utilize one
internal reference patterns, is realize assay of recovered of samples and the results obtained is compare
with the results obtained for the residual industrial samples study object in reference laboratory, though
hypothesis tests, Fisher tests and Student test, being demonstrated that do not exist significant differences
for 95 % of dependability among the same ones.
Key words: validation of analytical methods, sulfate, turbidimetric methods.
z

Introduccin

Los sulfatos pueden tener su origen en que las

aguas atraviesen terrenos ricos en yesos, o a la
contaminacin con aguas residuales industriales. El
contenido de este no suele presentar problemas de
potabilidad para las aguas de consumo, pero, contenidos
superiores a 300 mg/L pueden causar trastornos
gastrointestinales en los nios. Se sabe que los sulfatos
de sodio y magnesio tienen accin laxante, por lo que

no es deseable un exceso de los mismos en las aguas

de consumo.
El contenido de sulfatos en las aguas naturales es
muy variable, y puede ir desde muy pocos miligramos
por litros, hasta cientos de miligramos por litros. Por
esto, la norma cubana para agua potable /1/, establece
como valor orientador de calidad 200 mg/L, y como
lmite mximo tolerable 400 mg/L (concentracin
mxima admisible).

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La determinacin de la concentracin de sulfatos

puede hacerse por diferentes mtodos. Se puede
citar la prueba rpida de sulfatos, /2,3/ el mtodo
gravimtrico mediante precipitacin con cloruro
de bario, el cual es muy preciso y aplicable a
concentraciones superiores a 10 mg/L, y el mtodo
volumtrico, cuyo principio consiste en la
determinacin de los iones sulfatos mediante una
valoracin por retroceso en presencia de sulfato
de bario y en medio alcohlico con la sal disdica
de la EDTA. Este mtodo es aplicable a la
determinacin de sulfatos en concentracin inferior
a 100 mg/L /4/.
El mtodo nefelomtrico se recomienda,
preferentemente, para la determinacin de sulfatos
en aguas con contenidos superiores a 60 mg/L. El ion
sulfato (SO42-) precipita, en un medio de cido actico,
con in Ba2+, de modo que forma cristales de sulfato
de bario (BaSO4), los que deben mantenerse en
suspensin durante un perodo de tiempo que resulte
suficiente para medir la absorbancia que la misma
produzca.
El contenido de SO4= de cada muestra se obtiene
a partir de la curva de calibracin previamente obtenida.
Este mtodo no es recomendable para aguas con
color, materias en suspensin o con elevado contenido
en materias orgnicas, ya que interfieren en la
determinacin, pudiendo ser eliminadas por filtracin
o centrifugacin.
La interferencia del color puede soslayarse
utilizando la muestra coloreada como testigo, a la que
se le adiciona reactivo de la disolucin precipitante de
bario, o empleando como instrumento de medida un
nefelmetro de doble posicin de cubeta, con lo que
elimina la influencia del color /5/.
El Grupo Analtico CEBI-DQ de la Facultad de
Ciencias Naturales de la Universidad de Oriente,
tiene entre sus misiones, la determinacin de
parmetros ambientales en aguas y aguas residuales.
Teniendo en cuenta la existencia en la regin de
industrias que realizan el vertido de sus residuales con
cantidades considerables de sulfato, se propuso la
bsqueda de un mtodo sencillo y rpido para la
determinacin de este parmetro, el mtodo
turbidimtrico, basado sobre la medida de la turbidez

40 Vol. XXII, N 3, 2010

producida por la reaccin de precipitacin del ion

sulfato, con una sal brica en medio cido a una
longitud de onda de 450 nm.
Para conseguir que el sulfato de bario se mantenga
en suspensin, se utiliza una disolucin acondicionadora
que contiene glicerina y alcohol, de forma que se
modifica la viscosidad de la muestra, permitiendo as
una turbidez estable en un perodo de tiempo suficiente
para medir la turbidez /6/. Por tal motivo, el objetivo
del siguiente trabajo es realizar la validacin de este
mtodo en las condiciones actuales del laboratorio
analtico del Grupo CEBI-DQ.
z

Materiales y mtodos

Las determinaciones se realizaron en el

espectrofotmetro Gnesis-10 UV-visible. Toda la
cristalera y el equipamiento utilizado en el anlisis
fueron verificados y calibrados por la Oficina Territorial
de Normalizacin de la provincia Santiago de Cuba.
Los reactivos empleados fueron calidad puro para
anlisis.
z Mtodo

de anlisis

La determinacin de la concentracin de sulfato

en las muestras se realiz mediante el mtodo
turbidimtrico /6/. El protocolo a seguir para la
determinacin de iones sulfato en disolucin,
requiere de una curva de calibracin en el intervalo
de 20,0-100,0 mgL-1 de sulfato, preparadas a partir
de una disolucin patrn interno de sulfato de sodio
(1 000 mgL-1).
Las muestras se filtran a travs de papel para
precipitados finos, evitando as, la interferencia en la
determinacin de cualquier componente que se
encuentre en suspensin. Los patrones y muestras se
llevan a un volumen final de 10 mL, en matraces
aforados, con agua destilada. El contenido de cada
matraz se deposit en tubos de ensayos de 30 mL de
capacidad, para facilitar la agitacin. Se aadi 1 mL
de disolucin tampn (45 mL de agua destilada, 4,5
mL de HCl concentrado, 15 mL de etanol absoluto, 7,5
mL de trietilenglicol y 11,25 g de NaCl), se agit y se
adicion una punta de esptula de BaCl2. La mezcla
resultante fue agitada durante un minuto en vortex
(Haildolph REAX2000) y se dej reposar otro minuto.

La determinacin fue realizada en el

espectrofotmetro UV-Visible Genesys 10 a D.O450nm

Parmetros determinados para la

validacin del mtodo
Los parmetros de calidad del ensayo utilizados
fueron evaluados segn NC "Gua para la validacin
de ensayos qumicos" y los reportados segn /7-9/, los
cuales se relacionan a continuacin:
Linealidad: De la solucin patrn de referencia
interno de sulfato de sodio de concentracin 1 000
mg/L se toman las alcuotas correspondientes para
obtener concentraciones de 20, 40, 60, 80, 100 mg/L,
y se realiza el procedimiento segn PNO para un
tamao de muestra 10 (n= 10).
Precisin: Se determina mediante el clculo de
las desviaciones estndar y tpica relativa, de los
resultados obtenidos del anlisis de las muestras a tres
niveles de concentracin para n= 10.
Exactitud o veracidad: Se evala mediante un
ensayo de recuperacin para n= 10, y se realiza la
determinacin del analito a una muestra de
concentracin conocida, a la que se le ha adicionado
una cantidad de patrn interno que debe corresponder
con la cantidad del analito presente en la muestra.
Limite de deteccin: Se evala como tres veces
la desviacin estndar de veinte muestras blanco.
Limite de cuantificacin: Se determina como
diez veces la desviacin estndar de veinte muestras
blanco.

Procesamiento estadstico: Se realizaron prueba

de hiptesis, test de Student para comparacin de
medias, y prueba de Fischer para comparacin de
varianzas; adems, se evalu la regresin y la
correlacin lineal mediante el programa
STARGAPHICTM.
z

Resultados y discusin

El protocolo que hay que seguir para la

realizacin de la determinacin de iones sulfato
en disolucin, requiere de una disolucin
acondicionadora que contiene glicerina y alcohol
de forma que se modifica la viscosidad de la
muestra, permitiendo as una turbidez estable
en un perodo de tiempo suficiente para medir la
misma.
Teniendo en cuenta, la no disponibilidad de
glicerina en los laboratorios del Grupo CEBI-DQ y
la existencia de cantidades apreciables de
trietilenglicol, se procedi a realizar una
comparacin de los resultados obtenidos en los
ensayos, utilizando disolucin acondicionadora
con glicerina (buffer1) y trietilenglicol (buffer2),
observndose que se cumple la hiptesis de igualdad
tanto de medias como de varianzas, por lo que los
resultados obtenidos con una u otra disolucin, no
difieren significativamente, para un 95 % de
confiabilidad, demostrando que los ensayos de
determinacin de sulfato por el mtodo
turbidimtrico pueden ser realizado con cualquiera
de los buffer (tabla 1).

TABLA 1. RESULTADO DE COMPARAR LAS DOS SOLUCIONES BUFFER

CON SOLUCIN PATRN INTERNO DE C=25mg/L

Prueba de Fisher: F = 1,0262

p = 0,9698 p > 0,05 se cumple H0 : 1= 2.

Prueba de Student: t = 0,5262 p = 0,5650 p > 0,05 se cumple H0 : 1= 2

Buffer 1 utiliza glicerina como estabilizador de partcula
Buffer 2 utiliza trietilenglicol como estabilizador de partcula

Vol. XXII, N 3, 2010 41

Para la evaluacin de la linealidad del mtodo, se

aplic el anlisis de la regresin lineal, con el objetivo
de obtener la recta de mejor ajuste Y = 0,002 8X. Los
coeficientes de regresin y de correlacin lineal
obtenidos (r= 0,993 3 y r2= 0,989 7), muestran una alta
correspondencia entre la concentracin y la seal
analtica del mtodo para las determinaciones
realizadas, con un 95 % de confiabilidad.
Partiendo de los resultados obtenidos
anteriormente, se procedi a la evaluacin de la

precisin y exactitud en la determinacin de sulfato,

con solucin patrn interno de sulfato de sodio en
tres niveles de concentracin. Los mismos
muestran, que existe una buena precisin y
exactitud, pues los valores de los coeficientes de
variacin (CV) estn por debajo del 10 % y no se
detectan diferencias significativas entre los valores
de concentraciones obtenidas y las reportadas
para el patrn de referencia interno a un 95 % de
confiabilidad de la media, al ser en todos los casos
el valor de p menor que 0,05 (tabla 2).

TABLA 2. EVALUACIN DE LA PRECISIN EN LA DETERMINACIN

TURBIDIMTRICA DE SULFATO CON SOLUCIN PATRN
INTERNO DE SULFATO DE SODIO

Posteriormente, se procedi a la evaluacin de los

lmites de determinacin y de cuantificacin para lo
cual se realizaron determinaciones a veinte muestras
blanco (tabla 3).

de las muestras, demostraron la exactitud del

mtodo, pues los recobrados alcanzados oscilan
entre 98,8102,0 %.

TABLA 3. DETERMINACIN DE LOS LMITE

DE DETECCIN Y DE CUANTIFICACIN

Cuando se realiza el test de Student con datos

pareados comparando las medias de recobrado para
cada residual con respecto al 100 % (recobrado
terico), no se presentaron diferencias
estadsticamente significativas para un 95 % de
confiabilidad de las medias, evidenciando la exactitud
del mtodo para este sustrato.

A partir de los resultados mostrados (tabla 3),

queda establecido que el mtodo puede emplearse en
muestras cuya concentracin de sulfato se encuentre
por encima de 2,14 mg/L y cuantifica con exactitud a
un 95 % de confiabilidad para muestras cuya
concentracin sea igual o mayor a 7,15 mg/L.
La tabla 4 muestra los resultados obtenidos en el
anlisis de muestras de aguas residuales industriales;
de los mismos, se obtuvo que el coeficiente de variacin
no excede del 4 % evidenciando la precisin del
mtodo, y los resultados del ensayo de recuperacin

42 Vol. XXII, N 3, 2010

En la validacin del mtodo turbidimtrico para la

determinacin de sulfato, se realiz un ensayo
interlaboratorio, segn /10/ en el que intervinieron el
laboratorio analtico del Grupo CEBI-DQ y un
laboratorio de referencia acreditado.
Si se comparan los resultados obtenidos en el
laboratorio analtico del Grupo CEBI-DQ, utilizando
el mtodo turbidimtrico con los reportados por el
laboratorio de referencia (mtodo gravimtrico), se
puede plantear que se cumple la hiptesis de igualdad,
tanto de medias como de varianzas, ya que los
resultados obtenidos por ambos laboratorios no difieren
significativamente para un 95 % de confiabilidad.

TABLA 4. DETERMINACIN DE LA PRECISIN Y LA EXACTITUD EN MUESTRAS

DE AGUAS RESIDUALES INDUSTRIALES

CR1: Concentracin terica del residual 1 (mg/L)

CR2: Concentracin terica del residual 2 (mg/L)
A: cantidad de analito adicionada
B: cantidad recuperada
R: % de muestra recuperada
Los resultados son la media de diez determinaciones.
TABLA 5. RESULTADOS DE LA COMPARACIN ESTADSTICA ENTRE
LOS ANLISIS REALIZADOS EN EL LABORATORIO ANALTICO
CEBI-DQ CON LOS OBTENIDOS EN EL LABORATORIO
DE REFERENCIA

En todos los casos se cumple p> 0,05; luego A= B y A= B.

Bibliografa

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