Anaerobios y

bacilos no
fermentadores
de la glucosa
(BNF)
Bioq. Esp. Paulo Cortes - Bacteriologa y Virologa
Fac. Ciencias Qumicas - UNC 2009

ANAEROBIOS: Caractersticas generales:

Son bacterias que no crecen en la superficie de los medios slidos
(10% CO2, 18% O2).
Las facultativas crecen en presencia o ausencia de
oxgeno
Una bacteria es microaerfila cuando crece pobremente o nada
aerbicamente y mejor en presencia de 10% CO2
Se los puede clasificar en (s/ Loesche):
anaerobios estrictos (no toleran >0,5% O2)
anaerobios moderados ( toleran 2-8% O2)
Son importantes las concentraciones de O2 y superxido y el
potencial de oxido reduccin, muchos carecen de catalasa, pero
poseen superxido bismutasa

ANAEROBIOS: Caractersticas generales:

Son nutricionalmente exigentes (vit K, hemina, hidratos de
carbono, cisteina)
No son extremadamente virulentos, deben esperar la rotura de
una barrera anatmica, y se producen asociaciones para
compartir factores de virulencia (sinergismo).
Son prevalentes en reas corporales expuestas al aire (piel,
nariz, boca y garganta) debido a consumo de O2 por flora
aerbica y facultativa y tambin a la proteccin del aire en
microambientes (criptas, folculos)

ANAEROBIOS: hbitat natural

Piel
Nariz
Orofaringe
Saliva (107-108 UFC/ml)
Colon (>cantidad de bacterias que cualquier regin del cuerpo
humano: 1011 UFC/gr de contenido colnico seco)
anaerobios (1000) : aerobios (1)
Bacteroides grupo fragilis, Peptoestreptococcus, Clostridium,
decenas de gneros y entre 300-400 especies
Uretra
Vagina

ANAEROBIOS
Rol en la fisiologa: proteccin (competencia:

bacteriocinas, prod metablicos, disminucin pH,

interferencia para unin a mucosa. Ej. Lactobacillus con
Gardnerella y enterobacterias, tambin sntesis de vitamina
K, metabolizan drogas, sales biliares, colesterol, etc) y
estmulo inmune.

Rol en la patologa: virtualmente todas de origen

endgeno, aunque algunas pocas exgeno: Clostridium

difficile, C tetani, C botulinum.
Se caracterizan por supuracin, formacin de abscesos (til
drenaje) y destruccin tisular (toxinas), tambin producen
gas.
Pocos factores de virulencia, siempre en floras mixtas, olor
nauseabundo

ANAEROBIOS - PATOGNESIS
Fuente de anaerobios es la flora comensal
Rotura de una barrera anatmica (ciruga: oral, TGI,
pelvis
femenina,
traumas:
mordeduras,
accidentes,
enfermedad: cncer de colon, tero o pulmn)
Mecanismos de defensa del husped: inmunidad,
disminucin del potencial redox, tamao del inculo, sinergia
Factores de virulencia del microrganismo: adhesin e
invasin, toxinas y enzimas, constituyentes de superficie:
cpsula, LPS

Condiciones que predisponen a la infeccin

por anaerobios:

Generales:
diabetes
mellitus,
inmunosupresin, esplenectoma.

neutropenia,

neoplasias,

Disminucin del potencial redox: obstruccin, anoxia tisular,

destruccin tisular, infeccin por aerobios, quemaduras,
insuficiencia vascular.

Consideraciones diagnsticas

Dx clnico, el cultivo tiene poca utilidad generalmente

(ttanos, botulismo, infecciones de piel; apendicitis
salvo complicaciones)
Reportes generalmente demorados
Obtencin del material por personal entrenado (nunca
hisopados, biopsias preferidas a aspirados, usar
contenedores anaerbicos).

<>

Consideraciones diagnsticas
Examen de la muestra: purulencia y olor son de gran valor,
el microscpico til como control de calidad y orientacin
teraputica
Cultivos: siempre deben utilizarse medios enriquecidos con
sangre, vitamina K y hemina, incorporar un medio selectivo
Antibiograma: por dilucin (CLSI)
Teraputica: intervencin quirrgica (si es necesario),
antimicrobianos

Major Anaerobes Encountered Clinically

Gramnegative bacilli
Bacteroides fragilis group especially B. fragilis, B. thetaiotaomicron, B.
distasonis, B. ovatus, B. vulgatus, Other Bacteroides: B. gracilis, B. ureolyticus,
Porphyromonas spp. especially P. asaccharolytica. Pigmented Prevotella spp. (
P. corporis, P. denticola, P. intermedia, P. loescheii, P. melaninogenica, P.
nigrescens) Other Prevotella spp. P. oris, P. buccae, P. oralis group, P. bivia, P.
disiens. Fusobacterium spp. F. nucleatum, F. necrophorum, F. mortiferum, F.
varium. Bilophila wadsworthia. Sutterella wadsworthensis
Grampositive cocci
Peptostreptococcus: P. anaerobius, P. intermedius,*P. micros, P. magnus, P.
asaccharolyticus, P. prevotii. Microaerophilic streptococci *
Grampositive sporeforming bacilli
Clostridium perfringens, C. ramosum, C. septicum, C. novyi, C. histolyticum, C.
sporogenes, C. sordellii, C. bifermentans, C. clostridioforme, C. fallax, C.
difficile, C. innocuum, C. botulinum, C. tetani
Grampositive nonsporeforming bacilli
Actinomyces (israelii, meyerii, naeslundii, odontolyticus, viscosus, neuii,
radingae, turicensis) Propionibacterium propionicum, Propionibacterium
acnes, Bifidobacterium dentium
*Not true anaerobes.

TABLE 236
2362 Histotoxic Clostridial Syndromes
Clinical Illness

Organism

Toxin

Mouse LD50 (ng)*

ng)*

C. perfringens

a-Toxin (others)
others)

50

poisoning

C. perfringens type
A

Enterotoxin

1400

Enteritis
necroticans

C. perfringens type
C

b-Toxin

AntibioticAntibioticassociated colitis

C. difficile

Toxin A

26 (ip
(ip))

Neutropenic
enterocolitis

C. septicum (others)
others)

Unknown,
Unknown, bb-toxin?
toxin?

Tetanus

C. tetani

Tetanospasmin

0.015 (ip
(ip))

Botulism

C. botulinum

Botulinal toxins AG

0.00625 (type
(type A, ip)
ip)

Soft
tissueinfection

Gas gangrene
Enteric
diseases
Food

Neurologic syndr
syndr

*Lethal dose for 50% of animals (LD50) after intravenous challenge unless otherwise noted.
noted.
Abbreviation:
Abbreviation: ip,
ip, Intraperitoneal.
Intraperitoneal.
C

i ht 2000 1995 1990 1985 1979 b Ch

hill Li i

Clostridium tetani
Egipcios y griegos conocan relacin entre heridas y subsecuente
desarrollo de espasmos fatales.
Pases desarrollados: 0,1/105, en pases en vas de desarrollo:
28/105.
Bacilo Gram positivo, anaerobio obligado, posee flagelo,
esporulado forma de raqueta de tenis o palillo de tambor,
Tetanospasmina 151 KD
produce 2 toxinas:
-S-S-S-S-

(estructura A/B)

1) Tetanolisina
2) Tetanospasmina

cadena
pesada H

Cadena liviana L
Metaloproteasa (Zn)

HC

EFECTOS

Unin a
receptor

HN
traslocacin
transmenbrana
de cadena L

Inhibe la liberacin de
NT en la terminal
presinptica
de
la
placa motora
Cliva sinaptovebrina
Migracin axonal hacia
el cuerpo neuronal en
SNC y difusin hacia
neuronas inhibitorias
Neuronas motoras sin inhibicin
Rigidez e hiperreflexia
(tetania)

Mecanismo de accin de toxinas clostridiales

Existen cuatro tipo de ttanos

GENERALIZADO: trismo, risa sardnica, opisttonos
LOCALIZADO: sitio de inoculacin
CEFLICO: nervios craneales
NEONATAL: cordn umbilical

Diagnstico
Clnico, laboratorio no puede confirmar o excluir.
Tratamiento y profilaxis: vacunacin, inmunizacin pasiva
(Ig humana antitoxina), extirpacin quirrgica y
miorelajantes por ej.

Clostridium botulinum
Botulismo
Ttanos

Neurotoxinas
(muy similares)

placa neuromuscular perif

dem + cel inhib SNC

debilidad
rigidez espasmos

Hay descriptas diversos tipos de toxinas botulnicas (A G)

Bacilo Gram positivo, anaerobio estricto, con espora
subterminal, se dividen en cuatro grupos fisiolgicos, cada
cepa produce casi siempre un solo tipo de toxina
comida
herida

toxina en duodeno
esporas

infantil
etiologa indeterminada

sangre

germinacin
esporas

toxina
toxina

Sinapsis
Perifricas
colinrgicas

Parlisis

Mecanismo de accin de toxinas botulnicas

Diagnstico
sospecha clnica, descartar miastenia gravis, Guillain Barr
Cultivo, deteccin de toxina en suero, materia fecal y alimento

Tratamiento y prevencin
Soporte ventilatorio, suero antitoxina debridamiento, ATB (?).
Correcta manipulacin de alimentos

Clostridium difficile
Bacilo Gram (+) anaerobio estricto, frecuente en el mbito
hospitalario
Es la causa ms comn de colitis asociada a ATB y de colitis
pseudomembranosa
Posee 2 toxinas que atacan la membrana o los microfilamentos
celulares.
A= citotoxina
B= enterotoxina
Patologa: Diarrea autolimitada o
inflamacin aguda de la mucosa
colnica, puede o no presentarse la
pseudomembrana (placas o ndulos
amarillo-blanquecinos compuestos de
fibrina, mucus, clulas epiteliales
necrticas y leucocitos adheridos a la
mucosa subyacente)

Clostridium difficile

Epidemiologa:
todas las edades, > adultos y pacientes debilitados
ATB: Clindamicina o lincomicina
Ampicilina
Cefalosporinas
Antineoplsicos

(Cd
(Cd
(Cd

R)
S)
V)

Pueden ocurrir brotes en hospitales (manos del personal)

Clostridium difficile
Clnica: fiebre, dolor abdominal, GB= 35.000/mm3
Diagnstico: demostrar toxina B en heces y en la
cepa aislada (Elisa PCR)
Cultivo (?)
Tratamiento: Vancomicina, metronidazol,
bacitracina
Suspensin del ATB causante
Soporte
Recurrencias (reinfeccin o germinacin) 10-20%.

Clostridium perfringens
Es el ms comn (20-30%), bacilo Gram (+), forman esporas
subterminales, lecitinasa (+). Posee 12 toxinas diferentes (5
tipos), adems enterotoxina, neuraminidasa, hemolisinas y una
actividad metablica vigorosa (fermentacin tormentosa de la
leche), CAMP inversa (+), capsulado, inmvil y aerotolerante

Infecciones: Bacteriemia, infec intraabdominales y biliares

Infecciones del TGF, pleuropulmonares, entricas.
Infecciones de tejidos blandos

Infecciones comunes: cepas no toxignicas, rara vez ATB

Celulitis crepitante: gas, sec a trauma, s ATB.
Miositis supurativa: pus sin compromiso muscular ni sistmico
Mionecrosis clostridial: (gangrena gaseosa) devastante, rpidamente
progresiva, necrosis muscular y toxicidad sistmica, potentes exotoxinas,
cepas invasoras

Clostridium perfringens
I guerra mundial: 5%

Fosfolipasa C ( toxina)

II guerra mundial: 0,3-0,7%

Leucocidina

Vietnam:

0.00002%

( toxina)

post quirrgicas o traumticas

Diagnstico:
crtico, clnico: signos locales,
sntomas sistmicos, gas.
Tratamiento:
debridamiento (amputacin),
ATB, O2 hipervrico

Clostridium perfringens

Clostridium perfringens
Infecciones entricas: 1) Enterocolitis necrotizante: frec en
nios, causada por la toxina, el microorganismo llega a
intestino y produce la toxina, existe asociacin con mala
nutricin, consumo de batata y colonizacin con Ascaris
lumbricoides. DX clnico, no cultivo ni anti-toxina. TTO: ATB, de
soporte, intervencin quirrgica segn sintomatologa, vacuna
(toxoide)
2) Intoxicacin alimentaria: tipo A es la
tercer causa despus de S aureus y Salmonella spp. enterotoxina
acumula fluido, induce vmitos. En el int delgado se une al
ribete en cepillo-> prdida de permeabilidad de metabolitos de
bajo PM y iones-> disfuncin celular (sint de proteinas) -> dao y
lisis (ocasional) superantgeno.
108 organismos en comida rica en proteinas animales, calor y
lento enfriamiento a T amb. Restaurantes,
instituciones>>>hogar
Diarrea acuosa autolimitada, DX cultivo del alimento (105
UFC/gr) y deteccin de la toxina

CAMP reverso: Clostridium perfringens

Clostridium perfringens

Streptococcus agalactiae

Bacillus spp.
Es parte de la familia Bacillaceae (junto con
Clostridium), posee ms de 47 especies, 3 de las cuales
son clnicamente importantes, >catalasa (+), mviles y
contaminan pimientos, lana, harinas, etc.
B anthracis
B cereus
B subtilis

patgeno obligado
intoxicaciones alimentarias (oportunista)
patgeno oportunista

B anthracis
Bacilo Gram positivo aerbico esporulado (central)
35C (45C avirulento), no mvil, no hemoltico. Su
hbitat natural son los animales herbvoros. In vitro
colonias rugosas cabeza de medusa, in vivo, posee 2
plsmidos importantes para la virulencia (ambos).
Las esporas no se forman en la sangre o en los
tejidos de los animales vivos

Bacilo Gram positivo

con espora central

colonias cabeza de medusa

Aspecto de caa de bamboo

Factores de virulencia
polipptido capsular (poli D-glutmico)
Patognesis

pXO2 97kb

PA (molcula receptor)
Toxina

pXO1 184 Kb

EF (enzima)
LF

(enzima)

Edema
Factor:
adenilciclasa
calmodulina
dependiente aumenta AMPc, disminuye la actividad
fagoctica y oxidativa de PMNs.
Lethal Factor: proteasa zinc dependiente, aumenta
lisis de Macrfagos (altas []) y la sntesis de IL-1
(bajas []) y TNF, cliva MAPKK.

B. anthrasis

Manifestaciones clnicas

Cutneo
Faringeo-gastrointestinal
Inhalatorio

8000 a 10000 esporas

>5 micras
traquea, laringe, faringe
2-5 micras
ductos alveolares y alvolos
macrfagos alveolares
ndulos linfticos mediastnicos
germinacin
toxina
sistmica
edema
hemorragia necrosis
shock sptico MUERTE

Pstula maligna

ntrax: enfermedad de naturaleza bifsica.

Primero: 4 das comienza la mialgia, fatiga, malestar,
tos no productiva y fiebre.
Segundo: pocos das despus, dura 24 hs y usualmente
culmina en muerte, rpido desarrollo, distress
respiratorio agudo, hipoxemia, cianosis, fiebre,
hipotermia y posterior shock. Compromiso menngeo,
compromiso del mediastino.
Diagnstico: esputo, sangre, serologa PA, RX
Tratamiento: Antibiticos (manipulacin gentica de
cepas de bioterrorismo), UTI, vacunas.0

Bacilos No Fermentadores (BNF)

Pseudomonas spp.: bacilos Gram (-), aerbicos, no

formadores de esporas, metabolismo respiratorio, aerobios

obligados, mviles, oxidasa (+), catalasa (+), viven en estrecho
contacto con ambientes hmedos (H2O, suelos, fluidos mdicos y
en aparatologa).
P aeruginosa, P fluorescens (4C), P putida, P stutzeri

P aeruginosa
Es el patgeno humano ms importante del gnero.
Normoinmune: infecciones tpicas asociadas con H2O
contaminada: canal auditivo, traumas de crnea, osteomielitis del
calcneo, endocarditis secundaria a drogas), colonizacin %
variables y en zonas hmedas.
Hospitalarios: importante (ITU, intubados, heridas (quemados),
dilisis peritoneal, colonizacin: 50%, presagia infeccin invasiva.
Fibrosis qustica: fenotipo mucoide = alginato

P aeruginosa
Pigmentos difusibles:
Pioverdina (amarillento verdoso) fluorescente
Piocianina (azul)

verde brillante

Piorubrina (rojo)
Piomelanina (marrn)
Olor: dulzn, similar a uva, crece a 42C

Patognesis: bajo poder patgeno en poblacin sana

(oportunista), muy adaptada, requerimientos nutricionales
mnimos y relativa resistencia a antibiticos le permiten estar
ampliamente distribuida, esperando la disrupcin de una
barrera fsica o la disfuncin de un mecanismo de defensa. Es
invasiva y toxignica.

Otros gneros de relevancia clnica

Burkholderia spp.
Stenotrophomonas spp
Acinetobacter spp.
Moraxella spp.
Shewanella spp.
Fusobacterium spp.
Alcaligenes spp.
Bordetella spp.

Biofilms
Biofilm

Microcolonias
Heterogeneidad funcional,
espacial y temporal

Por estructura y metabolismo

crecen protejidas
amebas
biocidas
fagos
ATB
Mec de defensa

Tejidos de organismos
superiores

(Expresin gnica y variacin de fase)

Estructura del
biofilm

Lancet,2001; 358: 135-38

Composicin de un biofilm
*Exopolisacrido
*Proteinas
*H2O ( >90%)
*ADN (Science 2002, 295)

Superficies lisas, rugosas, turbulencia

viscoelasticidad

Clinical Microbiology Reviews, Apr2002: 167-193

Infecciones por biofilms

Inmunosupresin

(+)

Vibrio cholerae

Staphylococcus epidermidis

Yersinia pestis

Pseudomonas aeruginosa

(-)
Agudas

Vacunacin
Antibiticos

Crnicas
Mixtas
(hongos y
parsitos)

Caractersticas comunes
-Superficies inertes, tejidos vivos o muertos, dispositivos
mdicos
-Crecimiento lento, en una o ms localizaciones
-Sntomas muy solapados (calidad no cantidad)
-Pueden liberar antgenos

complejos inmunes

-En individuos normoinmunes raramente son resueltas

-El tratamiento antibitico revierte los sntomas, no el
biofilm
-Recurrentes (post ATB)
-Nidos de infecciones agudas (mbolos metastsicos)

Formacin de un biofilm

Anclaje
Cuatro etapas bsicas

Microcolonias
Diferenciacin (QS)
Desanclaje (QS)

Formacin de biofilms

Consecuencias crnicas causadas por

biofilms