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PROCEDIMIENTOS PARA LA TOMA Y ENVO DE MUESTRAS AL LABORATORIO.

Normas Generales:
Para la adecuada recoleccin, conservacin y envo de muestras, es indispensable tener presente las
siguientes normas:
1. Toda muestra debe ser remitida con su historia clnica completa y perfectamente identificada.
2. Las muestras ideales se obtienen de animales vivos en distintos estadios de la enfermedad. Si es
necesaria la necropsia, sta debe guardar un orden y metodologa adecuadas; adems, debe
realizarse al menor tiempo posible despus de la muerte del animal (1 hora).
3. Las muestras para estudio bacteriolgico deben tomarse antes de la administracin de
medicamentos y empleando siempre material estril.
4. Para evitar que la muestra se seque y lograr una adecuada conservacin, en algunos casos es
necesario utilizar medios de transporte.
5. Para la recoleccin de cualquier otro tipo de muestra, utilizar material limpio y seco.
6. Los envases utilizados para el envo de muestras deben ser en lo posible irrompibles, hermticos
y de dimensiones adecuadas; el tiempo entre la obtencin de la muestra y su llegada al
laboratorio no debera ser superior a 24 horas.
Identificacin de las Muestras:
La identificacin de las muestras es de primordial importancia para el laboratorio y deben estar
acompaadas de la siguiente informacin:
Nombre, direccin y telfono (fax) del Mdico Veterinario.
Nombre, direccin y telfono (fax) del propietario.
Nombre de la explotacin pecuaria.
Ubicacin completa
Especie, raza, sexo y edad del animal.
Identificacin o nombre del animal.
Nmero(#) de animales en la explotacin.
Porcentaje de morbilidad y mortalidad.
Signos y sntomas.
Tiempo de evolucin de la enfermedad.
Tratamiento efectuado.
Vacunas aplicadas (nmero y fecha).
En caso de necropsia, descripcin de hallazgos macro.
Tipos de muestras, fecha y hora de la toma.
Sistema de conservacin utilizado.
Observaciones.

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MANEJO DE MUESTRAS PARA BACTERIOLOGA
El xito y valor final de examinar una muestra clnica en el laboratorio de bacteriologa, depende
inicialmente del cuidado ejercido en la seleccin, recoleccin y envo de la muestra.
La muestra seleccionada debe ser la que sea ms probable de contener el agente causal y se debe
hacer un esfuerzo para evitar su contaminacin con organismos del medio ambiente.
Muestras para cultivo bacteriolgico
Tejidos y rganos: En lo posible, su tamao debe ser mnimo de 3 x 3 cm, colocadas en bolsas
individuales de polietileno u otros recipientes estriles. Tambin es posible esterilizar los frascos o tubos
de ensayo, ponindolos a hervir con sus tapas, por espacio de 30 minutos.
Porciones de intestino deben enviarse con los extremos atados o empacados individualmente.
Isopos: Son la forma preferida para enviar muestras de secreciones (nasal, farngea, ocular, cutnea,
cervical, vaginal, etc.), exudados, contenido de abscesos, etc. introducidos en medio de transporte
adecuado (medios de transporte) y enviados en refrigeracin.
Heces: Las muestras fecales deben ser recolectadas directamente del recto del animal para evitar
contaminacin, puestas en un envase hermtico y enviadas en refrigeracin. Se debe evitar el envo de
excretas expuestas a medio ambiente.
En caso de animales grandes, la muestra puede ser enviada dentro del mismo guante plstico que se
utilice para su recoleccin.
Leche: Las muestras se deben recolectar aspticamente en envases estriles con tapa de rosca. Se
debe esperar resultados negativos si estas de toman durante el tratamiento. Las muestras se deber
refrigerar inmediatamente y enviadas al laboratorio lo antes posible.
Orina: Se utiliza un recipiente estril; el sondeo vesical es la forma ideal para evitar la contaminacin, en
su defecto, la miccin espontnea es la tcnica aconsejable. La muestra debe enviarse al laboratorio en
refrigeracin.
Cerebro: Ponga la mitad del cerebro en una funda de polietileno y enve al laboratorio en refrigeracin.
Enfermedades que requieren consideraciones especiales:
Antrax (Carbn bacteridiano): Isopos con punta de algodn empapados con sangre de la lesin o de
sangre tomada de la vena superficial de la oreja son la muestra ms aconsejada. En porcinos, los isopos
se aplicarn a los exudados y a la superficie del ndulo hemorrgico cortado. Se debe alertar al
laboratorio de la posibilidad de Antrax.
Pierna negra (Carbn sintomtico), Edema maligno: Se debe mandar una muestra de tejido afectado
fresco, ya que otra especie de Clostridium que no es causa activa de la enfermedad, invade los tejidos
rpidamente desde el intestino del animal muerto. Es de mucha ayuda si se incluyen con la muestra, 2
placas portaobjetos con frotis del rea afectada.
Metritis equina contagiosa: Isopos tomados del crvix, uretra, fosa clitorial de la yegua y fosa uretral de
los caballos deben ser enviados al laboratorio en medio de transporte (Bacteriolgico no entrico).
Enterotoxemia clostridial: Algunos gramos de contenido intestinal fresco o un segmento de intestino
lesionado atado por sus extremos deben ser enviados al laboratorio en refrigeracin.

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Paratuberculosis (Enfermedad de Johne's): Una muestra fecal se toma del recto del animal (2 gr
aprox.) para ser enviada al laboratorio. El tejido preferido para el diagnstico de la enfermedad es la
unin ileocecal y los ndulos linfticos de la zona. No se debe usar refrigeracin ni preservantes qumicos
durante el envo de la muestra fecal, sin embargo, las muestras de tejido deber ser congeladas o
refrigeradas para su envo.
Micoplasmosis: Los micoplasmas son sensibles a temperaturas clidas, consecuentemente los lquidos
corporales y tejidos deben ser congelados inmediatamente despus de recolectados y enviados al
laboratorio en estas condiciones. Isopos secos no tienen ninguna utilidad.
Disentera porcina: Unos 15 cm de colon (espiral) del animal deben ser recolectados, refrigerados y
mantenidos a 4oC durante su transporte al laboratorio.
Campilobacteriosis (Vibriosis): Las muestras (lavados prepuciales, contenido estomacal fetal y moco
cervical) se deben recolectar de manera asptica y ser enviadas al laboratorio inmediatamente en
condiciones de refrigeracin. Alternativamente, las muestras pueden ser congeladas con hielo seco y
enviadas al laboratorio.
En porcinos deben tomarse 20 cm de leon lesionado y enviarse al laboratorio en refrigeracin lo ms
rpido posible. El agente causal puede ser visualizado tiendo un raspado de mucosa con coloracin
alcohol-cido-resistente modificada.
Brucelosis: Placenta, contenido estomacal de fetos abortados, ndulos linfticos mamarios y leche son
las muestras requeridas para el aislamiento de la Brucella. Las muestras deben enviarse al laboratorio en
refrigeracin.
Cultivos Micticos:
Micosis superficiales: Raspados cutneos del borde de una lesin activa y pelo son las muestras
preferidas para el aislamiento de dermatofitos. Deben ser enviados al laboratorio en un tubo estril
tapado con algodn, un vial o sobre de celofn. Los hongos saprofticos frecuentemente proliferan si las
muestras son enviadas en medio de cultivo.
Micosis profundas: Las muestras (Tejidos y rganos) deben ser enviadas en condiciones semejantes a
las de bacteriologa.
Muestras de alimentos: Granos forrajeros, balanceados o cama deben ser enviados en bolsas de papel
al laboratorio, si existe demora para su envo debe refrigerarse.
Hemocultivo: En la mayora de infecciones, tres a cuatro muestras de sangre (2 a 5 ml) tomadas en un
perodo de 24 horas, deben enviarse tanto para cultivo aerobio como anaerobio. El 90% de los cultivos
positivos se obtendrn con este nmero; animales con infeccin severa y bajo quimioterapia pueden
requerir ms muestras. Estas deben ser recolectadas en botellas con 50 ml de medio de cultivo; en
animales pequeos 20 ml son suficientes.
Si la sangre se coloca inmediatamente en medio de cultivo no debe usarse anticoagulante; en caso
contrario, el uso de SPS en ms recomendable (no se recomienda el uso de citrato y oxalato). Una vez
recolectada la muestra, debe ser inoculada en la botella e incubada a 37oC. Nunca refrigere la muestra
una vez inoculada en la botella.

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Cultivos anaerobios: La muestra es obtenida aspirando con una jeringa sin introducir aire en sta; el
contenido de la jeringa es entonces transferido a un frasco con medio de transporte anaerobio.
Condiciones clnicas que sugieren una infeccin por anaerobios:
Exudados mal olientes, infecciones profundas causadas por la penetracin de una mucosa o piel, tejido
necrtico, gangrena o formacin de una pseudomembrana, gas en el tejido o exudado, endocarditis con
hemocultivo negativo, infeccin asociada con una condicin maligna u otra enfermedad que produce
destruccin de tejido y afecta la circulacin, heridas causadas por mordedura, abscesos o infecciones
que no responden a terapia con gentamicina u otros aminoglucsidos, pleuritis sptica, neumona por
aspiracin, fracturas asociadas con trauma grave de tejidos, infecciones asociadas con cirugas del
sistema gastrointestinal, procesos spticos como el piometra.
Muestras adecuadas para cultivo anaerobio:
Lquidos corporales normalmente estriles (pleural, peritoneal, LCR, bilis, lquido articular), muestras
quirrgicas de lugares normalmente estriles, muestras de abscesos y aspirados de heridas profundas,
aspirados trans-traqueales, sangre recolectada apropiadamente.
Muestras no adecuadas para cultivo anaerobio:
Saliva, muestras cervicales o vaginales, heces, Exudados traqueales, nasotraqueales y farngeos,
efluentes de ileostoma y colestoma, piel y exudados de heridas superficiales, muestras de orina excepto
las obtenidas por puncin.
Anlisis de agua: Una muestra de agua (50 ml aprox) sin preservativos debe ser enviada al laboratorio
en un frasco estril en condiciones de refrigeracin.
EMPAQUE Y SISTEMA DE ENVO DE MUESTRAS
Considerando que las muestras biolgicas son potencialmente infecciosas, se recomienda el transporte
de manera adecuada y responsable, para lo cual se deben seguir las siguientes recomendaciones
mnimas:
Como medio ideal de conservacin, se utiliza la refrigeracin con hielo natural, hielo seco o gel
refrigerante en fundas hermticas.
La totalidad de las muestras recolectadas deben enviarse utilizando un sistema de empaque de doble
caja:
La caja interna, preferentemente debe ser de un material aislante de temperatura externa, siendo las ms
recomendadas las cajas de espumaflex (icopor) por su bajo peso y fcil manipulacin.
Las muestras debern ser enviadas en recipientes individuales y bien identificadas. Entre cada funda,
frasco o recipiente se coloca un material que amortige los golpes, mantenga fija las muestras y absorba
humedad; puede usarse tambin espumaflex para este fin.

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La informacin bsica que acompaa las muestras se enva debidamente protegida, dentro de un sobre y
en funda plstica, entre la caja interna y la externa.
La caja externa se cierra de tal manera que todas las esquinas y/o tapas queden selladas con cinta
adhesiva (aumente la resistencia de la caja y garantiza el aislamiento de las muestras).
Si las condiciones lo permiten, envolver la caja externa con papel de empaque, sellar con cinta adhesiva
y colocar con letra grande y clara: !Manjese con cuidado, Material biolgico refrigerado!.
Igualmente, pero de manera menos relevante anotar la direccin del laboratorio.
MEDIOS DE TRANSPORTE
AMIES: Muestras para estudios bacteriolgicos de: heridas, exudados y secreciones, isopos en general (
garganta, conjuntiva, nariz, oido, etc.)
AMIES con Carbn: Secreciones vaginales, hisopos de cervix, uretra, fosa clitorial de yeguas, fosa
uretral de caballos.
CARY-BLAIR: Muestras para estudios bacteriolgicos de heces.
Tioglicolato sdico: Muestras para bsqueda de bacterias anaerobias .(Clostridium), tejidos necrticos,
gangrena o pseudomembranas.
Formol al 10%: Para conservacin de huevos de parsitos de muestras que tardan ms de 2 horas en
llegar al laboratorio.
Formol al 10% amortiguado: Para muestras de rganos y tejidos para estudio patolgico.
RECIPIENTES SEGN TIPO DE MUESTRAS PARA CULTIVO
Sangre: En botella de hemocultivo / en tubo estril con anticoagulante (SPS)
Otros (LCR, articulares, pleurales, etc): En tubo estril / en medio de cultivo (BHI Caldo) / en jeringa
estril con aguja sellada (caucho o corcho)
Orina: Frasco estril en refrigeracin
Leche: Tubo estril en refrigeracin
Tejidos y rganos: Frasco estril en refrigeracin / solucin estril de glicerina al 50% en solucin salina
Coprocultivos: Isopo de heces en recipiente (tubo) con medio de CARY-BLAIR.
TCNICAS PARA LA RECOLECCIN DE LECHE
Para Estudio Bacteriolgico:
Lavar, enjuagar y secar la ubre,
Con una solucin de alcohol al 70% desinfectarse las manos,
Con la misma solucin y utilizando algodn desinfectar los pezones. Dejar secar (2 min),
Ordear recogiendo 3 ml aproximadamente, en un recipiente estril sin tocar los bordes, tomando
proporcionalmente de todos los cuartos,
En casos de que la infeccin est plenamente localizada en uno de los cuartos, o se requiera localizar el
cuarto afectado, siguiendo las mismas recomendaciones, tomar 2 a 3 ml de leche del cuarto afectado, o
de cada uno por separado,

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Identificar las muestras correctamente y mantenerlas refrigeradas hasta su llegada al laboratorio.
Para prueba de Ring-Test:
En un tubo de ensayo de 14x100mm con 0,5 ml de formalina al 10% tomar un volumen de 1 a 3 ml de
leche homogneamente mezclada, de acuerdo con las siguiente indicacin de Nmero de animales
ordeados:
No. animales de 2 o ms aos

Volumen de leche

< 200

1 ml

201 - 500

2 ml

501 - 900

3 ml

Si hay ms de 900 cabezas, se recomienda dividir el rebao en grupos menores para recoger la muestra.
Identificar la muestra correctamente y mantenerla refrigerada hasta su llegada al laboratorio.
Tcnica de campo para mastitis (CMT):
La llamada prueba de California Mastitis Test (CMT), es un mtodo de simple aplicacin en el campo que
permite cuantificar la situacin sanitaria del hato con respecto a la mastitis sub-clnica.
Reactivos:
Detergente aninico + Azul de Bromocresol.
Procedimiento:
Lavar, enjuagar y secar la ubre,
Con una solucin de alcohol al 70% desinfectarse las manos.
Con la misma solucin y utilizando algodn desinfectar los pezones, dejar secar (2 min),
Extraer de cada cuarto 3 ml de leche aprox. depositndola en cada una de las copas de la paleta,
Aadir igual volumen de reactivo en cada una de las copas,
Mezclar durante 2 min. mediante una ligera rotacin circular de la paleta mantenida en posicin
horizontal.
Resultados:
Los resultados de la prueba que son aplicables a muestras individuales o muestras a granel de distintas
vacas, se interpretan de la siguiente manera:
Trazas Forma un ligero precipitado que se disuelve mezclndola
1+ Forma gel mucoso
2+ El gel es denso y floculento
3+ El gel es viscoso y pegajoso.
Interpretacin:
- En los primeros chorros de leche procedentes de una sola vaca, una reaccin 1+ se debe clasificar
como sospechosa, mientras que 2+ o ms indican mastitis.
- Una reaccin 1+ con leche a granel procedente de un rebao, sugiere que por lo menos el 20% de las
vacas lactantes tienen mastitis, o que un gran porcentaje de ellas estn cerca al final de su lactancia.
- Observaciones recientes sugieren que los resultados ms seguros se obtienen cuando la prueba se
lleva a cabo con leche extrada 3-5 horas despus del ordeo normal.
Las reacciones que se observan con la CMT con relacin al nmero de clulas somticas es como sigue:

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1+ 40.000 - 1'500.000 clulas/ml
2+ 1'500.000 - 5'000.000 clulas/ml
3+ > 5'000.000 clulas/ml.
TCNICA PARA RECOLECCIN DE HERIDAS ABIERTAS Y EXUDADOS
En heridas abiertas, lo mismo que en exudados y raspados de garganta, los isopos de algodn
previamente esterilizados, son los que ofrecen las mayores ventajas.
En casos de heridas y exudados en contacto con las partes muy sucias del animal, se debe previamente
lavar y secar la zona.
Con un isopo estril, raspar la zona afectada evitando el contacto con cualquier otra parte, introducir
dentro de un tubo estril con 3 ml de medio de transporte no entrico, o a su vez utilizar culturetes para
su transporte.
Mezclar adecuadamente la muestra con el medio de transporte y romper el mango del isopo que ha
estado en contacto con las manos.
Tapar el tubo evitando contaminar su interior.
Identificar y enviar al laboratorio en refrigeracin, si la muestra tardara ms de 2 horas en llegar al
laboratorio.
TCNICAS PARA RECOLECCIN DE ABSCESOS, EDEMAS Y LQUIDO ARTICULAR
Para obtener este tipo de muestras, est indicada la puncin con aguja fina.
Lavar, desinfectar y depilar el sitio de la puncin.
Introducir la aguja en forma perpendicular a la zona de puncin y a la profundidad necesaria de acuerdo
al caso. Recuerde utilizar material estril.
Aspirar la muestra hasta obtener una cantidad suficiente (1 a 2 ml). Cuando la muestra no puede ser
aspirada por lo denso del material, se puede inyectar en el sitio, solucin salina estril.
Pasar la muestra a un tubo estril o bien sellar la punta de la aguja con corcho o tapn de caucho.
Identificar y enviar al laboratorio en refrigeracin si la muestra se tardara ms de 2 horas en llegar al
laboratorio.
TCNICA PARA RECOLECCIN DE ORGANOS Y TEJIDOS
La recoleccin se realiza con asepsia y mximo una hora despus de la muerte del animal.
Evitando tocar el lugar de la lesin a muestrear, cortar trozos de tejido u rgano afectado de un grosor no
menor de 3x3 cm.
Para evitar la contaminacin y sangrado, sin tocar el sitio de la lesin, sellar la muestra flamendola
directamente o utilizando una esptula previamente flameada.
Depositar la muestra en un frasco estril individual de boca ancha.
Identificar y enviar al laboratorio en refrigeracin.

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TCNICA PARA RECOLECCIN DE EXUDADO PREPUCIAL
La obtencin de este tipo de muestras es importante para el diagnstico de las enfermedades infecciosas
que afectan el sistema reproductor del macho.
Depilar, lavar con agua y jabn toda el rea externa, verificando que el orificio externo del prepucio se
mantenga seco.
Introducir una pipeta de plstico conectada a una jeringa que contenga 30 ml de solucin salina estril,
masajear de abajo hacia arriba por espacio de 5 a 15 minutos.
Atar el orificio externo del prepucio con una liga de caucho y aspirar el lavado al interior de la jeringa.
Pasar la muestra a un tubo estril o bien sellar la jeringa con corcho o tapn de caucho.
Identificar y enviar al laboratorio en refrigeracin si la muestra se tardara ms de 2 horas en llegar al
laboratorio.
TCNICA PARA RECOLECCIN DE SEMEN
Cuando se sospecha de problemas de infertilidad en el macho es importante realizar un anlisis de
semen.
Existen tres procedimientos para la obtencin del semen: El uso del electroeyaculador, la estimulacin de
rganos sexuales y la vagina artificial.
La estimulacin manual de los rganos genitales, es la metodologa recomendada para la obtencin del
semen.
Este procedimiento se realiza mediante palpacin rectal estimulando la prstata, las vesculas seminales
y la raz del pene.
Los frascos o tubos utilizados para la recoleccin deben estar esterilizados y no contener ningn
preservante.
Las muestras se conservan en refrigeracin y deben ser procesadas lo ms pronto posible (2 horas).
TCNICA PARA RECOLECCIN DE FETO Y PLACENTA
La recoleccin de este tipo de muestras es importante en los casos de aborto, para investigacin de
brucelosis, leptospirosis, listeriosis, vibriosis, etc.
Placenta:
El procedimiento es similar al utilizado para la recoleccin de rganos.
Utilizando guante protector, tomar porciones frescas que se encuentren dentro de la vagina.
Colocarlas en un frasco estril de boca ancha.
Identificar y enviar al laboratorio en refrigeracin.
Una muestra de sangre de la madre es til, sobre todo si se sospecha de brucelosis o leptospirosis, para
las respectivas pruebas serolgicas.
Feto:
Utilizando guante protector lmpiese de suciedad, estircol y paja.
Colquese el feto completo en un recipiente adecuado (bolsa de polietileno)

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Envese al laboratorio en refrigeracin. Si se sospecha de infeccin mictica es importante incluir una
muestra de lquido abomasal, tomada de la misma forma como se recolectan abscesos o lquidos
articulares paro enviando la muestra sin refrigerar. Se debe adems recoger una muestra mediante
raspado cutneo del feto, como se describe a continuacin:
Lavar la zona con agua y jabn.
Desinfectar con alcohol al 70%.
Dejar secar por 2 min. al ambiente.
Con una hoja de bistur, o una placa portaobjetos, raspar la zona afectada.
Si hubieren pelos afectados, stos tambin deben arrancarse desde su raz, con la ayuda de pinzas.
Enviar la muestra al laboratorio (en caja de petri, sobres de papel o entre dos placas portaobjetos). Sin
refrigerar.
TCNICA PARA RECOLECCIN DE SECRECIN VAGINAL
Las infecciones uterinas (Piometra, Endometritis), as como las infecciones localizadas, se manifiestan
con la presencia de secrecin.
Introducir en el canal vaginal un espculo estril.
Con un isopo estril, realizar barrido del contenido o secrecin vaginal.
Mezclar la muestra con el medio de transporte adecuado y romper el mango del isopo para eliminar la
parte que ha estado en contacto con la mano.
Identificar y enviar la muestra al laboratorio.
TCNICAS PARA RECOLECCIN DE MUESTRAS DE SANGRE
Para la coleccin de sangre debe tenerse en cuenta el sitio de puncin y el calibre de la aguja a utilizar
para cada especie (puncin y calibre).
Consideraciones generales para la toma de muestras de sangre:
Evitar colocar el visel de la aguja hacia abajo pues imposibilita el paso de sangre.
No usar agujas hmedas ya que se hemolizan los glbulos rojos.
Evitar usar el anticoagulante en solucin pues se diluye la sangre.
El no retirar la aguja de la jeringa antes de llenar el tubo donde se depositar la sangre, provoca la
ruptura de los glbulos rojos (hemlisis).
El no mezclar en forma homognea la sangre con el anticoagulante, ocasiona la formacin de cogulos.
Para la extraccin de sangre puede utilizarse el sistema de tubos al vaco (tipo vacutainer), que
presentan mayor facilidad de uso y garanta en cuanto a la asepsia y preservacin de las muestras; este
sistema manejado en forma adecuada presenta un menor riesgo de hemlisis de las muestras, con
respecto al sistema de extraccin con jeringa.
Para exmenes hematolgicos (Conteo celular, hemoglobina, hematocrito, etc.):
Localizar la vena (ligar si es necesario).
Desinfectar con solucin de alcohol al 70% (Savln 1%).
Dejar secar la piel (2 min.)

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Evitando volver a tocar la zona, puncionar con aguja y jeringa estriles (puncin y calibre).
Extraer 5 ml de sangre, retirar la aguja y pasarla a un tubo que contenga una solucin anticoagulante de
EDTA. (o vacutainer tapa lila).
Mezclar invirtiendo y revirtiendo el tubo (5-7 veces) hasta homogenizar la sangre.
Si es posible realiza frotis por duplicado.
Identificar y enviar la muestra refrigerada (si el tiempo de llegada al laboratorio es mayor de 2 horas).
Frotis sanguneo:
Identificar las placas portaobjetos, con el nmero de la muestra.
Mezcle la sangre invirtiendo y revirtiendo el tubo por 5 a 7 veces.
Colocar una pequea gota de sangre (0.02 ml aprox.) en un extremo de la placa portaobjetos.
Con otra placa portaobjetos de bordes lisos(esmerilada) y formando un ngulo de 35 o extender la gota
en su borde y con un movimiento continuo hacia adelante realizar la extensin (frotis). Las esquinas de
esta placa deben estar cortadas, de manera que el borde que obra la extensin sea algo menor que le
ancho del portaobjeto en que se extiende la sangre.
Dejar secar al medio ambiente (2 min.) y guardar evitando que la superficie del frotis se deteriore.
Para estudio qumico o serolgico:
Tomar la muestra de sangre (10 a 15 ml) y pasarla a un tubo limpio, seco y sin anticoagulante (no utilizar
envases plsticos), teniendo cuidado de dejar deslizar la sangre lentamente por la pared del tubo,
retirando previamente la aguja.
Sin moverlo, dejar el tubo a temperatura ambiente en un ngulo de 30 C o hasta que se forme el coagulo
(30 min.).
Si no es posible separar el suero, identificar y llevar al laboratorio en un tiempo no mayor a 2 horas.
Si el tiempo de llegada al laboratorio fuere mayor de 2 horas, separar el suero de la siguiente manera:
Remover el coagulo utilizando el mango de un escobilln de algodn por el borde del tubo, hasta por lo
menos la mitad de la muestra obtenida.
Hacer girar el mango del escobilln de manera circular por el borde del tubo.
Centrifugar y separar el suero (2.500 rpm por 10 min.)
Pasar los sueros a tubos previamente identificados y enviar al laboratorio en refrigeracin si la muestra se
tarda ms de 2 horas en llegar al laboratorio.
Para estudio bacteriolgico:
Tomar la muestra de sangre (5 a 10 ml) y colocarla en un tubo con anticoagulante; se prefiere el
polyanetosulfonato de sodio (SPS) al 0,05 - 0,25%. El oxalato, citrato y EDTA no se recomiendan por
inhibir el crecimiento de microorganismos(*)
Identificar y enviar al laboratorio.
(*) Si se posee botella de hemocultivo, recolectar la sangre directamente en esta. Todos los
procedimientos mencionados deben realizarse de manera asptica y enviarse evitando contaminar la
muestra.

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Para pruebas de coagulacin (TP,TTP):
Tomar 5 ml de sangre y pasarla a un tubo que contiene citrato como anticoagulante (vacutainer tapa
celeste).
Identificar y llevar la muestra al laboratorio inmediatamente.
CUADRO DE PUNCIN Y CALIBRE DE AGUJA
Especie

Sitio de puncin

Calibre/Longitud (pulgadas)

EQUINO

V. Yugular.

14-18 / 2.5-3.0

BOVINO

V. Yugular, coxgea,

14-18 / 2.5-3.0

ventral o subcutnea, abdominal.

OVINO

V. Yugular.

16-18 / 2.5-3.0

CAPRINO

V. Yugular.

16-18 / 2.5-3.0

PORCINO

V. Cava anterior, auricular externa.

19-21 / 1.5-4.0

AVE

Cardaca, V. Radial.

21-27 / 1.0

HAMSTER

Cardaca, Seno retroorbitario.

22-25 / 1.5

CANINO

V. Ceflica. safena.

20-22 / 1.5

FELINO

V. Ceflica, safena.

20-22 / 1.0

CONEJO

Cardaca, V. Yugular, auricular.

19-23 / 2.0

CUYES

Cardaca, seno retroorbitario.

22-25 / 2.5

TCNICAS PARA TOMA DE MUESTRAS DE TEJIDOS (HISTOPATOLOGA)

Al cortar, las muestras deben contener una parte del tejido afectado junto a otra de aspecto normal.
El grosor de la muestra depende del tejido, pero por lo general no debe ser mayor de 0.5 cm.
Colocar la muestra en un frasco que contenga formol al 10% amortiguado a un pH de 7.2 y en un
volumen no menor a 10 veces el tamao de la muestra.
Los recipientes para las muestras deben ser de boca ancha para que puedan salir ntegras y fcilmente.
Las muestras para estudio histolgico nunca deben congelarse.
TCNICAS PARA LA RECOLECCIN DE ORINA
Los anlisis de orina son de gran ayuda para el diagnstico, tanto de enfermedades generalizadas
(septicemias), como de enfermedades localizadas en el tracto genitourinario (pielonefritis, candidiasis,
tricomoniasis, etc)
Existen dos mtodos utilizados para la recoleccin de orina:
Durante la miccin espontnea:
Esta tcnica es aplicable solamente para los machos (mtodo de Beson).
Atar una bolsa, de hule o caucho, limpia y estril si es para anlisis bacteriolgico, de manera que su
abertura coincida con el orificio uretral. El sistema cuenta con una correa mediante la cual se sujeta y
mantiene fijo.
Despus de la miccin, pasar la muestra a un recipiente limpio y estril.

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Identificar y enviar al laboratorio inmediatamente en condiciones de refrigeracin.
En caso de pequeas especies (perros y gatos):
Ejercer presin sobre la vejiga urinaria.
recoger por lo menos 15 ml de orina en un recipiente estril.
Identificar y enviar al laboratorio en refrigeracin.
Sondeo Vesical:
Es mtodo recomendado para obtener muestras de mayor pureza aplicable principalmente en hembras
de la mayora de las especies.
Para evitar infecciones post-muestreo, debe sondearse al animal sin causarle dolor por accin traumtica.
Todo el proceso debe realizarse en condiciones de esterilidad.
La tcnica de una persona capacitada en el manejo del animal.
TCNICAS PARA LA RECOLECCIN DE MUESTRAS DE ECTOPARSITOS
Garrapatas:
Se toma el cuerpo de la garrapata con los dedos ndice y pulgar procurando llevar la ua del pulgar hasta
el aparato de fijacin de la garrapata.
Ejercer ligeras presiones y pequeos movimientos en todos los sentidos hasta que la garrapata se
desprenda (se puede utilizar una pinza de diseccin).
Colocar las garrapatas recolectadas en un frasco con alcohol al 70%.
Rotular y enviar al laboratorio para su identificacin.
Para prueba de resistencia a acaricidas:
Tomar entre 20 a 50 garrapatas adultas de diferentes animales en la hacienda.
Sellar bien el envase, rotular y enviar al laboratorio.
Es indispensables no haber aplicado acaricidas en las 3 semanas previas a la toma de la muestra.
Acaros:
Mtodo del portaobjeto:
Utilizando una gasa embebida en glicerina y sostenida por una pinza, limpiar la zona, separando las
costras poco adheridas y las escamas que se encuentren sobre o al rededor de la lesin que se va a
investigar.
Colocar una gota de glicerina o aceite mineral sobre un portaobjeto.
Hecer un doblez en la piel del animal a nivel del rea sospechosa.
Con la hoja de un bistur raspar la parte superior del doblez varias veces hasta lograr algo de sangrado
en la zona.
Transferir el material raspado a la gota de aceite o glicerina colocada sobre el portaobjeto.
Colocar una laminilla (cubreobjeto) sobre el material a observar, y enviar al laboratorio.
Tomar en cuenta que los raspados deben hacerse cerca de los bordes de las lesiones activas, evitando
incluir costras secas, pelos o lana.

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TCNICAS PARA LA RECOLECCIN DE MUESTRAS PARA VIROLOGA
El diagnstico de las enfermedades virales en trminos generales, puede requerir de suero, exudados
(enfermedades vesiculares) y tejidos con el fin de llevar a cabo pruebas serolgicas, aislamiento del virus
y estudios estructurales.
Las muestras deben ser frescas, tomadas con asepsia, de preferencia durante el perodo agudo de la
enfermedad y no debe aadrseles fijadores o antispticos. Si se demora su llegada al laboratorio, se
deben enviar refrigeradas o congeladas.
Cuando se sospeche de una enfermedad viral, el diagnstico serolgico se comprueba tomando dos
muestras de los mismos animales (sueros pareados) durante el perodo agudo del brote y tres semanas
despus. El resultado positivo(+) con una sola muestra de suero tiene un valor diagnstico muy limitado.
Muestras de tejidos para el diagnstico de algunas enfermedades por el mtodo de
inmunofluorescencia directa:
De acuerdo con el diagnstico presuntivo se pueden tomar muestras de diferentes rganos (con tamao
no mayor de 3x3 cm) y enviarlos al laboratorio en fundas plsticas identificadas y congeladas:
Enfermedad Muestra requerida
Bovinos
Rinotraquetis Infecciosa Bovina (IBR) Trquea, pulmn, Fetal: pulmn,
hgado, rin y placenta.
Diarrea Viral Bovina (BVD) Pulmn, ganglio linftico, bazo,
abomaso. Fetal: Pulmn, rin,
hgado y placenta.
Parainfluenza-3 (PI3) Pulmn.
Virus Corona Intestino grueso, colon espiral.
Parvovirus bovino (BPV) Intestino.
Virus Sincitial Respiratorio Bovino (BRSV) Pulmn, trquea.