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Principales grupos de
bacilos y cocos gramnegativos exigentes
M. Torres
Neisserias
El gnero Neisseria comprende dos especies patgenas para el hombre; siendo ste el nico
reservorio conocido: N. meningitidis y N. gonorrhoeae. Otras especies de Neisseria no patgenas,
se encuentran habitualmente formando parte de la flora normal de la orofaringe. La familia
Neisseriaceae comprende varios gneros: Neisseria, Moraxella, Acinetobacter y otros.
Moraxella catarrhalis (antes denominada Branhamella catarrhalis), inicialmente incluido en
esta familia ha sido actualmente reclasificada como un subgnero de Moraxella. Las tcnicas
de identificacin de este germen son similares a las de la familia Neisseriaceae. Su crecimiento
en medios simples a temperatura de 22 C, su incapacidad de fermentar hidratos de carbono
y la produccin de una desoxirribonucleasa (DNAasa) permiten su identificacin. Un gran
porcentaje de cepas producen -lactamasas. Este germen ha sido implicado en los ltimos
aos como agente de diversas enfermedades infecciosas, entre ellas otitis media en nios,
exacerbacin de bronquitis crnica y neumona, sobre todo en pacientes con enfermedad
respiratoria subyacente.
El gnero Acinetobacter est compuesto por cocobacilos Gram negativos, oxidasa negativos,
no exigentes. Forman colonias lisas, blancas o grisceas, a veces hemolticas, similares a las
de las enterobacterias. Los miembros de este gnero habitan en el agua y el suelo, y tambin
forman parte de la flora normal humana de la piel. Estos sitios suelen ser el reservorio de la
bacteria en hospitales y causar brotes, en los que el germen se comporta como oportunista.
Suelen ser resistentes a mltiples antibiticos y en general afectan a pacientes portadores de
tubos endotraqueales, sondas, catteres, etc.
Morfologa
Las bacterias del gnero Neisseria son cocos Gram negativos, inmviles, que se agrupan
en pares en diplococos, cuya forma se ha comparado a granos de caf. El citoplasma y la
ultraestructura son muy similares en N. meningitidis y N. gonorrhoeae y comparten 80% de
sus secuencias de bases del ADN. Aunque son Gram negativas, contienen endotoxinas, y
ultraestructuralmente tienen una pared celular tpica de las bacterias Gram negativas, se
parecen a los cocos pigenos en su patogenicidad y su sensibilidad intrnseca a la penicilina.
Ambas especies pueden colonizar las mucosas sin causar sntomas. La enfermedad causada
por N. gonorrhoeae es, en general, localizada, en cambio N. meningitidis produce enfermedad
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grave, diseminada, muchas veces fatal. Esto podra deberse a que N. meningitidis presenta una
cpsula polisacrida bien definida. Ambas especies poseen fimbrias o pili, las cuales han sido
relacionadas con la virulencia.
Metabolismo
Son aerobios, y las especies patgenas son exigentes desde el punto de vista de sus requerimientos nutricionales (agar sangre o agar chocolate), de temperatura (crecen a 37 C pero
no a 22 C) y atmosfricos (atmsfera con 5 a 7 % de CO2). Son oxidasa positivos. Estos
requerimientos de cultivo, as como el patrn de utilizacin de distintos azcares (en especial
glucosa, maltosa, sacarosa, lactosa y fructosa) se utilizan para diferenciar las distintas especies
de Neisserias (tabla 1)
Tabla 1.
N. meningitidis
N. gonorrhoeae
N. lactamica
N. sicca
N. mucosa
N. subava
N. avescens
M. catarrhalis
glucosa
+
+
+
+
+
+
-
maltosa
+
+
+
+
+
-
sacarosa
+
+
V
-
Lactosa
+
-
DNAasa
+
Neisseria meningitidis
Este germen causa principalmente meningitis, meningococemia y ms raramente otros
cuadros clnicos.
ESTRUCTURA ANTIGNICA
La presencia de cpsula esta asociada a la virulencia. Las cepas que colonizan las membranas
mucosas sin producir enfermedad en general no son capsuladas. Sobre la base de diferencias
antignicas del polisacrido capsular se han identificado al menos trece serogrupos. Estos son:
A, B, C, D, 29E, H, I, K, L, W135, X, Y, y Z. Estos antgenos capsulares pueden ser puestos
en evidencia por distintas tcnicas (aglutinacin de partculas de ltex o contrainmunoelectroforesis), ya sea en una cepa aislada, o directamente en el liquido cefalorraqudeo.
La mayora de las enfermedades invasivas son producidas por los serogrupos A, B, C, W135
e Y. Han sido descritas epidemias de meningitis causadas por el serogrupo A, mientras que los
grupos B y C causan fundamentalmente enfermedad en forma espordica o endmica.
La estructura de estos polisacridos ha sido extensamente estudiada y se conoce para la
mayora de los serogrupos. La identificacin y purificacin de estos antgenos ha dado como
resultado la produccin de vacunas efectivas para los serogrupos A, C, Y y W135.
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Polisacrido capsular
Parece ser el mayor factor que contribuye a la virulencia. La presencia de cpsula le confiere a
la bacteria la capacidad de sobrevivir en el torrente sanguneo ya que esta impide la fagocitosis; slo cuando el paciente ha desarrollado anticuerpos anticapsulares especficos la bacteria
puede ser opsonizada, esto es lisada con la colaboracin del sistema del complemento.
Endotoxina
Bsicamente es similar a otros LPS en su estructura. Se caracteriza por ser un LPS fuertemente
inductor del fenmeno de Shwartzman-Sanarelli, con una potencia notablemente superior
a la del LPS de otros Gram negativos. Durante el crecimiento de N. meningitidis se liberan al
medio grandes cantidades de LPS que daan al endotelio, causando una importante respuesta
inflamatoria y necrosis vascular.
Proteasa de IgA
Es producida por todos los serogrupos y liberada al medio; es una endopeptidasa con una
gran afinidad por la IgA humana.
Sustancias quelantes del hierro
El hierro es esencial para el metabolismo de la bacteria y ella compite con el husped por l,
por medio de estos factores.
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Pili
Como es sabido son filamentos proteicos pequeos, que se extienden desde la superficie de
la bacteria y cuyo papel es fundamental en la patogenia ya que median la adherencia a las
superficies mucosas. Aunque han sido menos estudiados que los pili de N. gonorrhoeae, seran similares en cuanto a su estructura. Median la adherencia de N. menigitidis a la mucosa
nasofarngea y son importantes en la determinacin del estado de portador. Tambin ha sido
postulado que intervendran en traspasar la barrera hematoenceflica e interactuar con las
meninges. Las bases moleculares de estas interacciones no han sido an del todo aclaradas,
pero parece tratarse de una interaccin con un receptor especfico tanto en lo anatmico
(epitelio nasal anterior) como para la especie humana.
PATOGENIA
Frente a un cuadro clnico compatible con meningitis se deber realizar una puncin lumbar
para obtener datos de la composicin citoqumica del liquido cefalorraqudeo (LCR) y para
estudio microbiolgico. Debe recordarse la labilidad de los grmenes que causan meningitis y
transportar la muestra de inmediato al laboratorio. Una vez en el laboratorio de bacteriologa,
el LCR ser sometido a examen directo, cultivo y deteccin de antgenos capsulares de los
distintos agentes de meningitis.
El examen directo con coloracin de Gram es sencillo y rpido. Permite una orientacin
inicial de la teraputica siempre y cuando lo realice un tcnico experimentado. El cultivo se
realizara en agar sangre, agar chocolate y medios de enriquecimiento; deben recordarse los
requerimientos de atmsfera del germen. A las colonias sospechosas se les realiza coloracin
de Gram, prueba de oxidasa y pruebas para determinar la utilizacin de azcares. El laboratorio
puede adems realizar la determinacin del serogrupo mediante antisueros especficos.
SUSCEPTIBILIDAD A LOS ANTIBITICOS
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Neisseria gonorrhoeae
Descrito en 1879 por Neisser en pus uretral, es el agente etiolgico de la gonorrea. Comparte
las caractersticas del gnero en cuanto a la morfologa celular. Para aislarlo de mucosas que
presentan flora normal (por ejemplo uretra anterior o cuello uterino) se requiere de medios
especiales como agar chocolate y antibiticos para inhibir otras bacterias. Existen diversos
suplementos de antibiticos, el ms conocido es el medio de Thayer-Martin que contiene
vancomicina, colistina y nistatina. El resto de los requerimientos de temperatura, humedad y
atmsfera, as como las propiedades bioqumicas utilizadas para su identificacin son similares
a los de N. meningitidis.
CARACTERSTICAS COLONIALES
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Se dispone de varios mtodos para caracterizar cepas de N. gonorrhoeae con fines epidemiolgicos. Los ms desarrollados son los mtodos serolgicos y la auxotipificacin que pueden
usarse por separado o en combinacin. Tambin los perfiles de resistencia a antimicrobianos se
utilizan con fines epidemiolgicos. Los mtodos serolgicos se basan en diferencias en antgenos
de superficie como protena I o pili, y en general se realizan por tcnicas de coaglutinacin.
Auxotipificacin
Por el crecimiento de N. gonorrhoeae en medios de cultivo qumicamente definidos se han
podido conocer las necesidades de ciertos factores de crecimiento, y sobre estas bases se han
definido los llamados auxotipos. Estas son caractersticas estables de una determinada cepa que
se utilizan como marcadores en estudios sobre virulencia, capacidad invasiva y sensibilidad a
antimicrobianos. Se ha observado que algunas cepas precisan para su desarrollo la presencia
de arginina, hipoxantina y uracilo, lo que se denomina auxotipo AHU o bien Arg-Hyx-Ura.
En general este auxotipo se corresponde con cepas muy sensibles a la penicilina y a la vez muy
resistentes a la accin bactericida del suero humano normal, dando muchas veces infecciones
diseminadas (bacteriemia).
Antgenos de superficie y determinantes de patogenicidad
Por tcnicas de electroforesis en gel de poliacrilamida se separan diversas protenas de superficie de N. gonorrhoeae.
Pili: son apndices que emergen como proyecciones desde la superficie de la bacteria.
Estn constituidos por subunidades proteicas o pilina. Su funcin es mediar la adherencia
de la bacteria a las clulas del husped, especialmente a las microvellosidades del epitelio
columnar. Tambin le confieren al germen una mayor resistencia a la fagocitosis. N. gonorrhoeae puede variar de fase, es decir, presentar alternativamente formas con pili o sin
ellos; en un proceso estrechamente regulado desde el punto de vista gentico. Adems de
esta variacin de fases, los pili pueden presentar una importante variacin antignica, esto
es, cambios antignicos en la protena de los pili expresada. La variacin antignica est
determinada por la insercin o delecin de unos pocos residuos de aminocidos y ocurre
a nivel del extremo carboxi terminal de la pilina. Este proceso tambin est controlado en
el cromosoma bacteriano, por diversos genes. La porcin variable, terminal, de la pilina
es justamente el blanco de la respuesta inmunitaria por lo que la variacin antignica a
ese nivel representa un mecanismo de escape para evadir las defensas del husped. Por su
papel fundamental en la patogenia, los pili han sido objeto de mltiples investigaciones
como candidatos al desarrollo de vacunas; pero su extremo grado de variabilidad antignica
ha hecho perder el entusiasmo en una vacuna de este tipo.
Protena I: la mayor de las protenas de membrana externa, tiene funcin de porina,
formando un canal hidroflico a travs de ella. Es posible que tambin intervenga en
la fagocitosis, paso importante en la patogenia de la gonorrea. A diferencia de otras
protenas de membrana externa de este germen, esta es expresada en forma constante,
por lo que ha sido utilizada como sistema para tipificar cepas. Existen dos subclases de
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protena I, denominadas IA y IB. Cada una de ellas tiene decenas de variantes, lo que
define serovariedades. Como respuesta a la infeccin se producen anticuerpos opsonizantes anti-protena I en suero y secreciones. Estos anticuerpos pueden ser protectores si
la reinfeccin es causada por una cepa con la misma serovariedad de protena I. Por otra
parte, se sabe que las cepas portadoras de protena I subclase A se asocian ms a menudo
con enfermedad diseminada y mayor resistencia al poder bactericida del suero humano,
en tanto que las cepas IB tienden a producir enfermedad localizada (uretritis, cervicitis)
y a ser resistentes a los antibiticos.
Protena II: es una familia de protenas de membrana externa, que manifiestan una extensa
variacin antignica de cepa a cepa e incluso dentro de una misma cepa. Esta protena
no siempre es expresada por la bacteria, cuando est presente, le otorga la capacidad de
formar colonias opacas in vitro. Desde el punto de vista funcional, su presencia aumenta
la capacidad de adherencia a clulas epiteliales y a neutrfilos.
Protena III: a diferencia de las anteriores es estable en su composicin. Existen protenas
similares en N. meningitidis y en otras bacterias. Es una protena poco inmunognica y
tiene la capacidad de bloquear anticuerpos dirigidos contra otros antgenos de superficie.
Su papel en la patogenia no se comprende an. La protena III tiene funciones de porina
(al igual que la protena I) que permite el ingreso a la bacteria de nutrientes de bajo peso
molecular por difusin.
Adhesinas: se ha postulado la presencia de otras molculas con capacidad de adhesin,
distintas de los pili, pero no han sido bien caracterizadas todava.
Protenas reguladoras del hierro: son una familia de protenas que le permiten a la bacteria adquirir el hierro del husped; por lo tanto, la presencia de este tipo de protenas
representa una ventaja para su supervivencia.
Proteasa de IgA: esta protena cliva la inmunoglobulina A1 humana en la regin bisagra,
con lo que la inactiva. Se especula que este sera un mecanismo importante para inactivar
la Ig A secretoria.
Lipooligosacrido (LOS): al igual que en otros grmenes Gram negativos acta como
endotoxina pero carece de las largas cadenas de polisacridos que se encuentran en las
enterobacterias. Median la mayora de los efectos txicos observables en los modelos
experimentales. Como los pili, el LOS presenta variaciones entre diversas cepas y en
pasajes sucesivos de una misma cepa.
Plsmidos: la mayora de las cepas presentan un plsmido de 2,6 megadaltons de funcin
no conocida (plsmido crptico). Se han identificado al menos cinco plsmidos diferentes
que codifican -lactamasas y que se caracterizan por diferencias en su peso molecular.
Tambin se ha descrito un plsmido conjugativo que media la resistencia de alto nivel a
la tetraciclina (tet M).
El germen se disemina de persona a persona por contacto directo y estrecho con secreciones
infectadas, habitualmente contacto sexual. Afecta en forma selectiva al epitelio no cornificado.
La vaginitis no es una manifestacin de la gonorrea en la mujer en edad genital activa, pero
s en la etapa prepuberal o posmenopusica.
No est del todo aclarado cmo el germen asciende por la va genital, se ha postulado
que esto estara favorecido por contracciones uretrales y uterinas, o tal vez vehiculizados por
el esperma. Las mucosas producen IgA secretoria que podra ser clivada por la proteasa. Una
vez que entra en contacto con la mucosa se producen una serie de complejas interacciones
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moleculares que finalmente determinan la invasin de esas clulas. Dado que se trata de un
patgeno exclusivamente humano hay pocos modelos experimentales animales que permitan
aclarar detalles de la patogenia de la enfermedad. Los estudios han sido realizados principalmente en cultivo de tejidos (explantes). Por ejemplo cultivos de trompas de Falopio han
sido usados para estudiar la colonizacin. Dos tipos de clulas epiteliales se encuentran en
este rgano: clulas ciliadas y no ciliadas. Cuando el germen es incubado en estos explantes,
ocurren una serie de eventos:
Adhesin a clulas no ciliadas
El primer paso en la infeccin es la colonizacin del epitelio columnar. Al igual que otras
bacterias, en el proceso de adherencia e invasin intervendran fenmenos de polimerizacin
de molculas de actina. Algunos componentes de superficie de N. gonorrhoeae estn involucrados en estas etapas iniciales. Los pilis median la adhesin inicial (no estrecha o distante)
a las clulas epiteliales. Cepas mutantes que carecen de ellos, an son capaces de invadir las
clulas epiteliales, por lo que en esta etapa, seguramente intervienen adems otros factores.
La familia de protenas de membrana externa P.II (o tambin OPA, por opacidad) parecen
mediar, al menos en parte, una segunda etapa de adherencia ntima, y contribuir a la invasin.
Las protenas de membrana externa llamadas P.I parecen impedir la unin fagolisosmica en
los polimorfonucleares y reducir su metabolismo oxidativo, por lo que determina la capacidad
de ciertas cepas de sobrevivir (al menos un pequeo porcentaje de bacterias) dentro de los
fagocitos.
Endocitosis del germen, disminucin progresiva del movimiento ciliar y prdida
de las cilias de las clulas adyacentes, causada por el lipooligosacrido
Las clulas no ciliadas engloban a las bacterias por medio de seudpodos. Esta fagocitosis,
llevada a cabo por fagocitos no profesionales se conoce como endocitosis dirigida por el
parsito. Las clulas ciliadas mueren y son selectivamente eliminadas de la superficie del
epitelio. Esta etapa no requiere de la presencia del germen intacto y puede ser reproducida
solamente con el LOS o fragmentos de peptidoglicano. El LOS desencadena la respuesta
inflamatoria, con gran liberacin de factor de necrosis tumoral (TNF), el cual a su vez
determina la escarificacin del epitelio de las trompas de Falopio. Probablemente el LOS sea
el responsable de la mayora de los sntomas de la gonorrea. Esta molcula contribuye a la
resistencia al suero y a una mayor capacidad de producir enfermedad sistmica (probablemente
debido a una menor capacidad de activar el complemento).
Transporte de la bacteria a travs de la clula epitelial
Las bacterias son transportadas en una vacuola de endocitosis, dentro de la cual an pueden
replicarse y se acentan los procesos de citotoxicidad determinados por el LOS. Dentro de
la vacuola el germen se halla protegido de los macrfagos, de los anticuerpos y de los antimicrobianos.
Liberacin del germen al espacio subepitelial
Las bacterias son transportadas hacia el sector basal de la clula, las vacuolas se fusionan con
la membrana basal y descargan los grmenes en el tejido conectivo subepitelial. All causan
inflamacin local como consecuencia de lo cual, se produce un exudado, rico en polimorfonucleares y que contiene numerosas bacterias intra y extracelulares. Eventualmente ingresan
a los vasos sanguneos para dar la forma diseminada de la enfermedad.
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de plata (cred) en la conjuntiva de todos los recin nacidos u otros compuestos antimicrobianos.
Enfermedad gonoccica diseminada
Es complicacin que se registra con una frecuencia menor al 1% de los casos de gonorrea.
Es ms frecuente en mujeres y, como ya se mencion, es causada por cepas pertenecientes
al auxotipo AHU. Las manifestaciones incluyen monoartritis, tenosinovitis, fiebre y lesiones
de piel (mculas o pstulas, hemorrgicas o necrticas) que afectan sobre todo extremidades y son debidas a arteritis sptica. Ms raramente se produce meningitis, pericarditis o
endocarditis.
Portadores asintomticos
Un porcentaje no desdeable de individuos que entran en contacto con N. gonorrhoeae,
especialmente mujeres, desarrollan una infeccin asintomtica. Como se comprender estos
portadores asintomticos representan un reservorio importante de la enfermedad.
DIAGNSTICO MICROBIOLGICO
El examen directo de las secreciones uretrales con coloracin de Gram es muy sensible y
especfico para el diagnstico de uretritis gonoccica. Permite observar un exudado con
abundantes polimorfonucleares y diplococos Gram negativos intra y extraleucocitarios. Su
valor es menor en otras localizaciones.
El cultivo es indispensable para realizar las pruebas bioqumicas de identificacin y estudios
de susceptibilidad. La inoculacin en medios de cultivo, una vez obtenida la muestra, debe
hacerse en forma inmediata o utilizar medios de transporte que aseguren la viabilidad del
germen. Las muestras provenientes de las mucosas debern ser sembradas en medios selectivos
ya mencionados, para inhibir la flora normal. Las muestras de sectores del organismo habitualmente estriles (sangre, lquido sinovial, etc.) son sembradas en agar chocolate. Una vez
obtenidas las colonias se identifican por su morfologa con la coloracin de Gram, reaccin
positiva de oxidasa y utilizacin de azcares.
SENSIBILIDAD A LOS ANTIMICROBIANOS
Si bien la penicilina fue la droga de eleccin para el tratamiento de la gonorrea por muchos
aos, en el momento actual, la alta prevalencia de cepas resistentes determina que esta droga
no pueda ser utilizada para el tratamiento emprico de la enfermedad. La resistencia a los
antimicrobianos puede deberse a mltiples mecanismos y ser:
plasmdica: debida a la presencia de -lactamasas en especial tipo TEM 1. Este tipo de
resistencia puede ser detectada en el laboratorio por tcnicas rpidas como por ejemplo
mediante el uso de una cefalosporina cromgenica. La resistencia a la tetraciclina tambin
es codificada por un plsmido (tet M).
cromosmica: que puede deberse tanto a una disminucin de la afinidad de las protenas
fijadoras de penicilina (PBP) por la droga, como a una alteracin en la permeabilidad de las
porinas de la membrana externa de la bacteria. Esta resistencia requiere de otros estudios
de susceptibilidad para ser detectada. Una cepa puede combinar ms de un mecanismo de
resistencia. Tambin ha sido descrita la resistencia cromosmica para otras drogas, como
por ejemplo tetraciclinas y espectinomicina.
Las drogas recomendadas en el momento actual son ceftriaxona, azitromicina y ciprofloxacina, aunque ya se han comunicado resistencias, al menos in vitro.
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Para el tratamiento, adems de la susceptibilidad del germen, se deben considerar factores tales como sitio anatmico afectado, presencia de complicaciones y posibilidad de otros
patgenos asociados. Los planes teraputicos recomendados para cada caso se tratarn en
otro captulo.
PROFILAXIS Y POSIBLES CANDIDATOS AL DESARROLLO DE VACUNAS
Muchos de los antgenos de superficie antes mencionados resultan atractivos para desarrollar
vacunas que prevengan la adherencia y colonizacin de las clulas epiteliales del husped.
Desde hace tiempo se sabe que los pacientes que padecen gonorrea pueden experimentar
reinfecciones y que una infeccin pasada determina una respuesta inmune vigorosa (sobre todo
de anticuerpos), pero que no confiere proteccin frente a nuevas infecciones. Tanto los pilis
como otras protenas de superficie se hallan regulados por complejos mecanismos genticos
que, como ya se dijo, le otorgan a la bacteria la posibilidad de controlar la presencia o ausencia
de esas molculas (variacin de fases), o controlar su composicin (variacin gentica). La
razn por la que una persona no desarrolla una respuesta protectora a la reinfeccin probablemente sea que N. gonorrhoeae es capaz de variar sus antgenos de superficie, especialmente
la pilina. Para el caso de esta protena la bacteria tiene un repertorio antignico que puede
ser tan grande como un milln de variantes antignicas diferentes.
Actualmente se trata de buscar antgenos de superficie altamente conservados. El desarrollo de una vacuna contra gonorrea probablemente sea uno de los mayores desafos que
enfrentan los investigadores. En tanto no se disponga de una vacuna los esfuerzos para prevenir
la enfermedad deben basarse en:
diagnstico precoz y tratamiento adecuado;
notificacin de los contactos; debe recordarse que se trata de una enfermedad de denuncia
obligatoria al Ministerio de Salud Pblica;
promover, a nivel de salud pblica, la educacin que lleve a modificaciones en las conductas sexuales;
uso de colirio en todo recin nacido para prevenir la enfermedad ocular (obligatorio por
ley).
Haemophilus
Los miembros del gnero Haemophilus son bacilos Gram negativos, pequeos y pleomrficos.
Integran la flora normal de las mucosas del aparato respiratorio superior. La mayora de las
especies son no patgenas o oportunistas, aunque algunas de esas especies son patgenos
primarios como H. influenzae, H. aegyptius y H. ducreyi.
Haemophilus influenzae es la especie tipo y puede causar enfermedades graves, invasivas. En
esta especie existen cepas capsuladas y no capsuladas. El antgeno capsular permite distinguir
seis serotipos que se designan con letras de la a hasta la f. Antes que se dispusiera de una
vacuna eficaz, H. influenzae serotipo b era una de las causas ms importantes de meningitis
y neumona bacteriana en nios.
CLASIFICACIN
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factor X es la protoporfirina IX para grmenes que poseen una enzima quelante del hierro
(como H. influenzae), o la hemina para grmenes que no la poseen (como H. aegyptius). Los
microorganismos que requieren de factor V no crecen en agar sangre convencional. El factor
V puede ser agregado al medio o proporcionado por otro microorganismo que crezca en su
proximidad (por ej. una colonia de Staphylococcus). Este crecimiento alrededor de una colonia
que le proporciona factores de crecimiento se denomina satelitismo y no es exclusivo de
Haemophilus, sino tambin de ciertos Streptococcus.
IDENTIFICACIN
Haemophilus influenzae
MECANISMOS DE VIRULENCIA
H. influenzae es una bacteria muy adaptada al ser humano. Desde los primeros meses de vida
puede ser encontrada colonizando las mucosas del tracto respiratorio superior; en general se
trata de cepas no capsuladas o de serotipos distintos del b.
La enfermedad por H. influenzae tipo b es desarrollada slo por un pequeo porcentaje
de nios que entran en contacto con enfermos o portadores. La inmunidad natural frente al
serotipo b se adquiere a medida que aumenta la edad. Muchas bacterias de la flora normal
poseen eptopes que reaccionan en forma cruzada con el antgeno capsular b.
El germen ingresa por el epitelio de la va area superior; la bacteria tiene la capacidad
de invadirlo. Una vez all, dependiendo de factores del husped y probablemente de su
virulencia, puede producir enfermedades confinadas a las mucosas, o no invasivas, o bien
enfermedades invasivas, graves. En la submucosa se produce una respuesta inflamatoria que
a nivel del rbol respiratorio da como resultado bronquitis o neumona. En algunos nios la
bacteria invade la laringe causando inflamacin y edema de las distintas estructuras, comprometiendo la va area, lo que se denomina epiglotitis. La meningitis es el resultado de la
invasin del torrente circulatorio y del espacio subaracnoideo. Los grmenes sobreviven en
la sangre en tanto no aparezcan anticuerpos anticapsulares especficos. Estos anticuerpos son
opsoninas y hacen que la bacteria sea destruida por macrfagos. Los individuos que carecen
303
PROFILAXIS, VACUNAS
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de ribosil ribosa fosfato) conjugado a protena (por ej. toxoide diftrico o tetnico). Se administran integradas al esquema de vacunacin a los 2, 4 y 6 meses, y al ao de edad.
A los contactos susceptibles (nios menores de 4 aos, no vacunados) de pacientes con
meningitis, se debe administrar quimioprofilaxis para prevenir la aparicin de casos secundarios. En este caso la droga utilizada es rifampicina.
Persiste el problema de hallar una vacuna para cepas de Haemophilus distintas al serotipo
b, que causan enfermedades muy frecuentes, como otitis o sinusitis.
Haemophilus aegyptius
Tradicionalmente asociado a conjuntivitis aguda en pases de clima clido, en los aos 80
fue sindicado como el agente de una nueva entidad, la fiebre purprica brasilera. Esta es una
enfermedad grave que afecta sobre todo a nios y que cursa con conjuntivitis, fiebre, petequias, prpura, shock y muerte, hasta en el 70% de los casos. Las cepas responsables de este
cuadro clnico se distinguen de otras de la misma especie por la presencia de ciertas protenas
de membrana externa y perfiles plasmdicos.
Haemophilus ducreyi
Es el agente del chancro blando, enfermedad de transmisin sexual que cursa con lcera
genital no indurada y adenopatas inguinales. No se observa en nuestro pas.
Bordetella
El gnero Bordetella comprende tres especies. B. pertussis es el agente de la tos convulsa o
pertusis; B. parapertussis y B. bronchiseptica causan enfermedad con menor frecuencia.
Bordetella pertussis
MORFOLOGA Y METABOLISMO
Son bacilos Gram negativos cortos, ocasionalmente presentan formas filamentosas, y son
capsulados. Presentan grnulos metacromticos bipolares al ser teidos con azul de toluidina. Son exigentes, especialmente en cultivos de aislamiento inicial; su desarrollo se logra en
medios suplementados con agar sangre, papa, glicerol y carbn activado (Bordet Gengou).
Para el aislamiento a partir de muestras clnicas se agrega penicilina para inhibir la flora orofarngea. Como otros grmenes exigentes, son muy sensibles a las temperaturas extremas y a
la desecacin. La incubacin se lleva a cabo a 35 C durante 3 a 7 das en ambiente hmedo,
luego de lo cual las colonias se hacen visibles presentando un aspecto de gotas de mercurio. La hemlisis es caracterstica de las cepas virulentas. Es un germen aerobio estricto. No
requiere de factores V ni X. Desde el punto de vista metablico son relativamente inactivos:
no fermentan prcticamente azcares, no reducen nitratos, no producen indol, no poseen
ureasa ni utilizan el citrato como fuente nica de carbono.
VARIACIN DE FASES
Las cepas recin aisladas, virulentas, producen colonias lisas o en fase I, que al ser sometidas
a sucesivos pasajes in vitro experimentan variacin de fase hacia formas no virulentas (fases
II y III) o avirulentas, no productoras de toxina y rugosas (fase IV).
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PATOGENIA
La patogenia de la tos convulsa no ha sido an bien aclarada; las investigaciones en esta rea,
destinadas al desarrollo de una nueva vacuna, han llevado al conocimiento de diversos factores
de virulencia tales como: toxina de Pertussis, adenilato ciclasa extracelular, hemaglutinina
filamentosa, toxina dermonecrtica, citotoxina traqueal y hemolisina.
Adherencia
B. pertussis se caracteriza por una predileccin por el epitelio respiratorio ciliado, produce
mltiples adhesinas que median la unin a los cultivos a clulas de mamferos y que le permiten adherirse de forma especfica al epitelio respiratorio. De stas las ms estudiadas son:
la fitohemaglutinina (hemaglutinina filamentosa o Fha) y la toxina de Pertussis.
Fitohemaglutinina (Fha): es una protena de alto peso molecular que forma estructuras
filamentosas en la superficie de las clulas; aunque carecen de la organizacin de los pilis. Su
nombre deriva de que aglutinan eritrocitos. Esta hemaglutinina se une a residuos de galactosa
de glucolpidos sulfatados. Las clulas ciliadas presentan en sus membranas grandes niveles
de estas sustancias, denominadas sulftidos y esto puede explicar en parte la preferencia de
B. pertussis en adherirse a ellas.
Toxina de Pertussis (Ptx): tambin llamada factor promotor de linfocitosis, esta toxina puede
actuar como toxina y como adhesina. La Ptx es una protena (exotoxina) hexamrica,
pequeas cantidades de ella pueden ser liberadas al medio, pero la mayora permanece
unida a la superficie bacteriana. Esta toxina es sin duda el mayor factor de virulencia. Es
una protena del tipo A-B cuya estructura hexamrica es similar a la de la toxina del clera
(aunque no idntica), con una subunidad enzimtica (S1) y 5 subunidades de unin (S2,
S3, dos copias de S4 y S5). La subunidad S1 cataliza (al igual que la toxina colrica) la
ribosilacin del ADP de la clula del husped a nivel de una protena G, lo que determina
finalmente un aumento del nivel del AMP cclico. Esta aumenta los niveles de Gi activado.
La protena Gi pertenece a una familia de protenas que regulan la actividad de la adenilato ciclasa de la clula eucariota. A diferencia de la toxina colrica, que actuando sobre
la protena Gs estimula la adenilato ciclasa, la toxina de Pertussis inhibe la desactivacin
de la adenilato ciclasa una vez que esta ha sido estimulada, actuando sobre Gi. Como se
nota, a pesar de las similitudes estructurales con la toxina colrica, los cuadros clnicos que
producen estas enfermedades son muy diferentes; lo que probablemente se vincule con
el hecho de que estas bacterias tienen especificidad por distintos tipos de clulas. Ptx es
responsable del aumento de las secreciones respiratorias y la produccin exagerada de mucus
que se observa en la tos convulsa. Tambin se la ha responsabilizado de la encefalopata que
puede ser vista en los casos de enfermedad severa. Esta toxina puede adems sensibilizar a
la histamina, activar a las clulas de los islotes del pncreas y causar la tos paroxstica que
se ve en las primeras etapas de la enfermedad.
Adenilato ciclasa invasiva: B. pertussis produce una toxina que es capaz de producir AMP
cclico directamente, determinando una desregulacin en la clula del husped. Las cepas
mutantes que carecen de esta toxina son avirulentas, aunque conservan la capacidad
de colonizar las mucosas. Esto indica que esta toxina tiene un importante papel en los
estadios tardos de la enfermedad.
Lipopolisacrido
Este germen es capaz de producir al menos dos tipos de LPS. Las dos molculas difieren a
nivel del lpido A y en porciones de las cadenas de carbohidratos. Al igual que otros LPS,
306
La tos convulsa es una enfermedad que, en pases donde se aplica la vacuna DPT (ver mas
adelante), puede presentarse en forma atpica; por lo tanto se requiere alta sospecha clnica
para establecer el diagnstico. Incluso con cuadros clnicos muy caractersticos otros agentes
infecciosos pueden producir sndromes similares.
Paraclnica
Los estadios tempranos de la enfermedad frecuentemente se asocian con una leucocitosis de
12000 a 20000 por mm3 con 60% de linfocitos. El diagnstico etiolgico definitivo se establece
al aislar el germen del paciente; lo que se logra sobre todo al inicio del perodo catarral. Habitualmente el aislamiento del germen no se realiza en forma rutinaria en laboratorios clnicos
debido a que el diagnstico suele ser tardo, con la aparicin de la tos paroxstica el germen
ya no se asla de las vas respiratorias. La muestra apropiada es la extrada de la nasofaringe.
El aislamiento del germen depende de un cuidadoso transporte y procesamiento en medios
adecuados. Para la identificacin se realizan pruebas bioqumicas y serolgicas, con antisueros
especficos. Para el diagnstico rpido tambin puede utilizarse la inmunofluorescencia directa.
Esta tcnica puede emplearse adems para la identificacin de las cepas aisladas.
307
Eritromicina es la droga de eleccin para el tratamiento de la tos convulsa cuando ste esta
indicado, aunque estudios in vitro indican que el germen es sensible a una amplia gama de
agentes. Los antibiticos, en la segunda etapa de la tos convulsa no modifican los sntomas
ni acortan la enfermedad, solamente disminuiran la diseminacin y el contagio. Esto destaca
la importancia de la profilaxis a travs de la vacunacin.
INMUNIDAD
La proteccin contra nuevas infecciones no se correlaciona bien con los niveles de anticuerpos.
En la inmunidad probablemente estn involucrados adems mecanismos celulares como las
clulas T citotxicas. Apoyan esta teora el hecho de que este tipo de mecanismos se ven
en grmenes con fases de vida intracelular y que B. pertussis es capaz de sobrevivir en ciertas
lneas celulares derivadas de macrfagos. Debido a ello se ha postulado la existencia de una
fase de crecimiento intracelular de este germen que, adems de estos hechos, explicara la
persistencia del mismo en el husped y el establecimiento del estado de portador.
VACUNAS
La vacuna DPT, que se administra a los lactantes, consiste en grmenes enteros muertos, junto
con los toxoides tetnico y diftrico. Ciertos efectos secundarios indeseables de esta vacuna
estn determinados por el componente pertusis y no por los otros (tetnico o diftrico). Estos
efectos secundarios son poco frecuentes, y se los puede agrupar en tres tipos:
Fiebre, malestar general y dolor a nivel del sitio de inyeccin, son los ms frecuentes y se
atribuyen a la reaccin inflamatoria provocada por el lipopolisacrido de la pared celular
y otras sustancias.
Convulsiones en aproximadamente 1 de cada 2000 nios vacunados; por ello la vacuna
no se recomienda para nios con antecedentes de convulsiones.
Con una frecuencia muchsimo menor se producen enfermedades neurolgicas severas,
como encefalopata; tal vez con una tasa de incidencia similar a la de poblaciones no
vacunadas. La morbilidad por la enfermedad prolongada, la necesidad de hospitalizacin
y la posibilidad de secuelas hacen comprender que los riesgos de la inmunizacin son
mucho menores que los asociados a la enfermedad natural.
La vacuna a clulas enteras contiene diversos antgenos Ptx, FHA, LPS, y aglutingenos.
Los nios vacunados con vacunas a clulas enteras muestran un aumento en los niveles de
anticuerpos anti FHA, Ptx, LPS, aglutingenos y protenas de membrana externa. Tambin
se incrementan los ttulos neutralizantes, sobre todo luego de tres dosis. Se han ensayado
diversas vacunas acelulares; una de las ms conocidas es la desarrollada en Japn. Es una
vacuna que contiene diversos antgenos FHA, aglutingenos y toxoide pertusis. Su eficacia
es similar a la vacuna a clulas enteras; alrededor del 78%. No est desprovista de efectos
secundarios, si bien son ms leves. Se necesita adquirir ms conocimientos acerca de eptopes
que puedan ser tiles para desarrollar una vacuna acelular que no tenga efectos indeseables
y cuyo costo permita usarla, aun en pases subdesarrollados.
Brucella
Los integrantes del gnero Brucella producen enfermedad fundamentalmente en animales y
ocasionalmente en humanos. Son parsitos intracelulares facultativos, con poca actividad
metablica. Se han descrito distintas especies que en ciertos casos presentan una adaptacin
308
marcada por los distintos huspedes. Brucella abortus infecta sobre todo a bovinos, B. suis al
ganado porcino, B. melitensis a cabras y B. canis a perros. De estas especies las tres primeras son
transmisibles al hombre, siendo B. abortus y B. suis las que causaran enfermedad en nuestro
medio. En el hombre, la brucelosis se caracteriza por presentar una fase bacterimica aguda,
seguida de una etapa crnica que puede durar aos y que afecta diversos parnquimas.
MORFOLOGA Y METABOLISMO
Son cocobacilos pequeos de 1,2 de longitud, Gram negativos, pero que a veces se tien
de manera irregular. Son aerobios, inmviles y no esporulados. Pueden tener cpsula. Al
igual que otros parsitos intracelulares tienen necesidades nutricionales complejas. Para su
desarrollo se requieren medios enriquecidos, como TSA agar soya-tripticasa con sangre. Son
capnfilas. En medios slidos, las colonias se desarrollan lentamente, hacindose visibles en
3 a 5 das. Las cepas capsuladas dan colonias mucoides que se asocian a la virulencia. In vitro,
con pasajes sucesivos las colonias se tornan rugosas, avirulentas. En medios lquidos pueden
no desarrollar turbidez, por lo que cuando se estudian hemocultivos se recomienda hacer
subcultivos sistemticos a ciegas, por ejemplo, a los 2, 7 y 14 das. El medio de Castaeda
utilizado para el cultivo de Brucella contiene a la vez un medio slido y caldo en el mismo
frasco (bifsico) que permite la observacin directa de las colonias.
Brucella utiliza hidratos de carbono pero no producen grandes cantidades de cido ni gas
como para ser utilizados en su identificacin. Pueden ser oxidasa y catalasa positiva, producir
sulfuro de hidrgeno y reducir nitratos a nitritos. Son sensibles a la accin del calor (mueren
al pasteurizar la leche) y a pH cido.
La diferenciacin entre las especies se hace sobre la base de la especificidad de husped, la
sensibilidad a colorantes, la produccin de sulfhdrico, presencia de ureasa y requerimientos
de CO2. Dentro de cada especie existen biotipos. La identificacin y biotipificacin en general
se reserva a laboratorios de referencia.
HUSPED
Existe cierta especificidad de husped. En estos animales, se ha descrito la presencia de sustancias (una globulina y una lipoprotena) que suprimen el crecimiento de las variantes rugosas y
por lo tanto favorecen la expresin de cepas lisas, virulentas. Los animales resistentes carecen
de estas sustancias, de modo que en ellos ocurre un pasaje hacia formas rugosas.
ESTRUCTURA ANTIGNICA
Si bien cada especie tiene un husped principal, cualquiera de las especies puede infectar gran
variedad de animales y al hombre. La puerta de entrada es a travs de las mucosas o la piel.
Una de las ms comunes es el ingreso a travs del aparato digestivo por la ingestin de leche
no pasteurizada o sus derivados. El contacto de la piel con tejidos de animales infectados o
la inoculacin accidental con vacunas son otros factores que deben ser investigados. Desde
la puerta de entrada y por va linftica, los grmenes llegan al conducto torcico y de all a la
circulacin general que los distribuye por los diferentes rganos. Los sitios ms afectados son
309
el tejido linftico, hgado, bazo, mdula sea y sistema reticuloendotelial. En esos lugares se
producen ndulos granulomatosos que pueden evolucionar a la abscedacin. Ms raramente
ocurre osteomielitis, meningitis o colecistitis. La anatoma patolgica muestra granulomas,
constituidos por clulas epitelioides y clulas gigantes, con zonas de necrosis central y fibrosis
perifrica.
CLNICA
En el ganado Brucella causa placentitis y aborto. Esto se ha vinculado a la presencia en las membranas fetales animales de eritrol, factor de crecimiento para el germen. La placenta humana
no contiene eritrol y el aborto no es parte del cuadro clnico de la brucelosis humana.
Cuadro clnico en el hombre
Las cuatro especies tienden a producir cuadros clnicos de diferente gravedad. As B. canis y
B. abortus causan cuadros ms leves, sin complicaciones supurativas. La infeccin por B. suis
tiende a evolucionar a la cronicidad, con gran produccin de focos de caseum y tendencia a
la supuracin. La infeccin por B. melitensis (Fiebre de Malta) causa cuadros ms graves.
Luego de un perodo de incubacin de una a seis semanas, en forma insidiosa o repentina
se inicia la enfermedad, con fiebre, astenia marcada, mialgias, artralgias, sudoracin, a lo que
se agregan adenopatas, esplenomegalia y, raramente, ictericia. En esta etapa los cultivos son
positivos, si el paciente no ha recibido antibiticos. Los sntomas ceden en semanas o meses
y las lesiones localizadas prosiguen su evolucin. Luego de la etapa aguda puede desarrollarse
una etapa crnica con astenia, artralgias, mialgias y otros sntomas. A veces se producen
complicaciones serias tales como encefalitis, meningitis, neuritis perifrica, espondilitis,
artritis supurativa y endocarditis. En esta etapa los cultivos son negativos y puede ser difcil
establecer el diagnstico. El ttulo de anticuerpos puede ser alto.
DIAGNSTICO
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Dado que se trata de un patgeno intracelular, de lento crecimiento, los test de sensibilidad
in vitro no sirven para predecir la respuesta a los antibiticos. Se utilizan asociaciones de
drogas por perodos prolongados y que sean activas intracelularmente. Los regmenes ms
aceptados incluyen combinaciones de tetraciclina (o doxiciclina) con rifampicina por seis
meses. Otras combinaciones posibles son tetraciclinas ms aminoglucsidos o rifampicina y
trimetoprm, en especial en nios.
EPIDEMIOLOGA, PROFILAXIS Y CONTROL
Es fundamentalmente una zoonosis ocupacional, son patgenos animales y el contagio humano suele ser accidental, por contacto con tejidos, orina o leche de animales infectados.
Las tasas de infeccin del ganado varan en los diferentes pases. La leche no pasteurizada,
sus derivados y la exposicin laboral, son los antecedentes ms frecuentes (veterinarios,
personal de mataderos). Ocasionalmente el contagio ocurre por va area. Los hombres se
ven afectados con ms frecuencia que las mujeres. Cierto porcentaje de infecciones pueden
ser asintomticas.
La profilaxis de la enfermedad se logra a travs de la vacunacin del ganado con cepas
vivas avirulentas. Para el control de la Brucelosis bovina se utiliza una vacuna preparada con
B. abortus, cepa 19, que confiere inmunidad al animal de por vida, y es de bajo costo.
El control de la enfermedad debe estar orientado a evitar la diseminacin, erradicar los
reservorios animales, pasteurizar la leche y disminuir el riesgo laboral.
Helicobacter
En 1982, Marshall y Warren publicaron un trabajo que informaba acerca de la presencia de
bacilos Gram negativos espirilares en biopsias gstricas de pacientes afectados de gastritis.
Originalmente esta bacteria se denomin Campylobacter pyloridis. En 1989 se cre el gnero
Helicobacter que agrupa varias especies, de las cuales 3 son patgenas para el hombre (H.
pylori, H. fennelliae y H. cinaedi). Otras especies se encuentran en animales.
MORFOLOGA Y METABOLISMO
Este gnero comprende bacilos Gram negativos curvos o espirilares. En cultivos viejos adoptan
forma de bacilos o cocobacilos. Poseen fagelos nicos o mltiples. Se trata de grmenes microaerfilos de lento desarrollo, cuya temperatura ptima de crecimiento es 37 C. Presentan
complejos requerimientos nutricionales y, habitualmente, son aislados en medios ricos con
bases como agar brucella, suplementada con sangre y el agregado de antibiticos para inhibir
otros grmenes que puedan hallarse en la muestra. Las colonias demoran 3 a 4 das en hacerse
visibles. Son catalasa y oxidasa positivos. Helicobacter pylori posee adems una enzima ureasa
que es til para la identificacin y el diagnstico.
HBITAT
Su distribucin es mundial, ha sido aislado en pacientes de pases desarrollados y no desarrollados, tanto en adultos como en nios pequeos. La va de transmisin no ha sido an
determinada, probablemente sea fecal-oral u oral-oral. En los pases en desarrollo la infeccin
se adquiere temprano en la infancia, mientras que en Estados Unidos la edad de adquisicin
es mucho ms tarda. La mayor incidencia de esta infeccin se asocia a malas condiciones
socioeconmicas.
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Bacteriologa
Se realiza a partir de biopsias de mucosa gstrica o duodenal. Dichas biopsias son homogeneizadas y procesadas mediante examen directo y cultivo en medios y condiciones de atmsfera y
temperatura ya analizados. Luego de 4 a 7 das las colonias aisladas son identificadas mediante
microscopa y pruebas de oxidasa, catalasa y test de ureasa rpida. A parir de esos cultivos se
pueden realizar estudios de susceptibilidad a drogas.
La actividad de la enzima ureasa es tan importante que si se coloca un trozo de biopsia
gstrica en caldo urea, la presencia de H. pylori se evidencia por la alcalinizacin del medio
de cultivo en minutos a horas, lo que tambin se utiliza para el diagnstico.
Histologa
El estudio anatomopatolgico de las biopsias ha demostrado ser muy sensible y especfico para
el diagnstico de esta infeccin. Permite visualizar a las bacterias y sirve para determinar el
tipo de lesin histolgica (por ej. gastritis crnica superficial, etc.) y otras lesiones asociadas.
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Al igual que el cultivo tiene la desventaja de ser invasivo ya que se requiere de endoscopa
digestiva para obtener la muestra.
Prueba de la urea marcada con carbono radiactivo
Consiste en administrar al paciente por va oral urea marcada con 13C. De estar presente H.
pylori en el tubo digestivo, la urea es hidrolizada a nivel gstrico por la ureasa liberando CO2
marcado. Este es detectado por tcnicas espiromtricas.
Serologa
La respuesta de anticuerpos puede ser detectada en suero mediante diversas tcnicas, resta
por aclarar el valor de la serologa, en el diagnstico y seguimiento de los pacientes.
TRATAMIENTO
Campylobacter
Es un gnero de bacilos Gram negativos, de forma curva semejante a una gaviota, o de
aspecto espirilar. La especie C. jejuni es la responsable de ms del 95% de los casos de diarrea
por Campylobacter. La importancia de este enteropatgeno se demostr en poca relativamente
reciente, cuando se dispuso de tcnicas y medios de cultivo especiales y se conocieron sus
condiciones de crecimiento. Necesita de medios ricos para crecer, una temperatura ptima
de 42-43 C y un ambiente escaso en oxgeno (microaerfilo).
Es agente comn de diarrea aguda comunitaria (EPEC, Rotavirus, Campylobacter, etc.). En
nios hospitalizados es la causa ms frecuente de diarrea con sangre, despus de Shigella. Se
acompaa en general de fiebre y dolores abdominales. La concentracin de leucocitos fecales
eliminados en estos procesos es menor que en las shigelosis. Igual ocurre para Salmonella o
Yersinia enterocoltica. En algunos casos (0,15%) se produce invasin sistmica y bacteriemia;
esto ocurre en especial en pacientes aosos o inmunocomprometidos.
La infeccin por C. jejuni es actualmente reconocida como un antecedente de riesgo
para el desarrollo del sndrome de Guillain-Barr, una neuropata perifrica que se atribuye a
reacciones inmunopatolgicas por similitud entre los antgenos lipopolisacridos superficiales
de esta bacteria y los del tejido neural.
Las infecciones por este germen predominan en verano, pero se siguen observando en
otoo y ya iniciados los fros. El reservorio de Campylobacter es muy extenso, ya que la mayor
parte de los animales domsticos pueden ser afectados y transmitir la infeccin por sus heces,
o por los alimentos que de ellos se obtienen, si bien la bacteria no se multiplica habitualmente
en los mismos. Es tambin frecuente la transmisin fecal-oral interhumana. La mayor parte
de los infectados excretan el germen durante 4-7 semanas.
Aun se discute la patogenia de la diarrea producida por C. jejuni. Muchas cepas son invasoras de las clulas epiteliales; algunas producen citotoxinas y otras elaboran enterotoxinas
semejantes a las de Vibrio cholerae o de Escherichia coli. Existen otras especies como C. coli,
C. laridis, etc., que han sido asociadas a diarrea en humanos.
Campylobacter puede ser observado en frotis de materias fecales diarreicas teidos con
Gram, si la coloracin de contraste se realiza con fucsina de Ziehl y no con safranina.
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El cultivo se realiza por siembra directa en medios ricos y selectivos, con agregado de
antibiticos, o sin sustancias inhibitorias, si se filtra previamente la muestra a travs de
membranas de 0,45um, que pueden atravesar gracias a su delgadez y gran movilidad, como
ocurre con Leptospira. Se pueden practicar cultivos de enriquecimiento con posterior reaislamiento. Las colonias de Campylobacter aparecen como gotas de agua extendidas sobre la
placa, y su identificacin debe ser confirmada por observacin microscpica de su aspecto
y movilidad, reaccin de catalasa y oxidasa positivas, y otras caractersticas metablicas. Es
posible clasificarlos en serotipos segn sus antgenos superficiales proteicos y lipopolisacridos,
o en genotipos por anlisis de sus cidos nucleicos.
C. jejuni es habitualmente sensible a macrlidos y quinolonas, y resistente a betalactmicos.
Bibliografa
Gorbach SL, Bartlett JG and Blacklow NR, editors Infectious Diseases 2nd. ed. Philadelphia: Saun-
Koneman E. Diagnstico Microbiolgico, Atlas Color y Texto. 5ta. ed. Buenos Aires: Editorial Medica
ders;1998.
Panamericana; 1999.
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