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IDENTIFICACION DEL GENERO NEISSERIA

Características del género Neisseria

El género Neisseria incluye bacterias con morfología de diplococcos Gram-negativos con una
reacción positiva a las pruebas de oxidasa y catalasa. Conjuntamente con los géneros Moraxella
(incluyendo Branhamella catarrhalis, actualmente Moraxella catarrhalis), y Kingella conforman la
familia Neisseriaceae. Algunas de las características que permiten diferenciar entre los géneros de la
familia Neisseriaceae se muestran en el cuadro 3.

En el género Neisseria, el cual tiene la mayor importancia clínica dentro de la familia


Neisseriaceae, se incluyen las siguientes especies:

• N. gonorrhoeae
• N. meningitidis
• N. lactamica
• N. cinerea
• N. polysaccharea
• N. subflava
• N. sicca
• N. mucosa

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• N. elongata
• N. flavescens
IDENTIFICACION DEL GENERO NEISSERIA

Cuadro 3. Características diferenciales de los géneros de la familia Neisseriaceae.

Características
Género
Morfología celular Catalasa Ácido a partir de glucosa Oxidasa

Neisseria Diplococos¹ + + V3
Branhamella2 Diplococos + – +
Kíngella Cocobacilos + – +
Moraxella Bacilos + – +

¹ N. elongata tiene forma bacilar.


² Actualmente la especie B. catarrhalis se incluye en el género Moraxella.
³ La producción de ácido depende de cada una de las especies del género.

Los diplococos Gram negativos del género Neisseria se asemejan a granos de café y
algunos producen cápsula. Las especies de Neisseria se caracterizan por ser de
metabolismo aerobio y el crecimiento de las especies patógenas se ve favorecido mediante
incubación en una atmósfera altamente húmeda y enriquecida a 5-8% de CO2.

Su temperatura de crecimiento es óptima entre los 35-37oC y tienen requerimientos


nutricionales complejos. Algunas especies son capaces de degradar unos pocos
carbohidratos, mientras que otras son completamente incapaces de hacerlo, mientras que las
especies saprófitas, especialmente, producen pigmentos carotenoides.

Las especies patógenas primarias para el ser humano son N. gonorrhoeae y N.


meningitidis. N. gonorrhoeae es nutricionalmente mucho más exigente que N. meningitidis,
de manera tal que puede crecer únicamente en medios enriquecidos como agar chocolate,
pero no puede crecer en agar sangre, mientras que N. meningitidis puede crecer tanto en
agar sangre como en agar chocolate.

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N. gonorrhoeae es el agente etiológico de la gonorrea, una enfermedad de transmisión
sexual. N. gonorrhoeae es un patógeno humano obligatorio y no hay reservorios animares.
N. gonorrhoeae es una bacteria altamente sensible a la desecación y cambios de
temperatura, por lo que la infección se presenta al haber contacto íntimo y prolongado de
mucosas y secreciones.

El periodo de incubación de la infección varía de de 2 a 7 días. Posterior a este


período, en hombres se presenta una descarga purulenta abundante, disuria y si no se da
tratamiento pueden presentarse complicaciones como epididimitis y prostatitis.

En más del 50% de las mujeres se puede presentar una infección asintomática o con
sólo un aumento de las secreciones vaginales. En las infecciones sintomáticas hay un
aumento de secreción vaginal, disuria, dolor abdominal y alteraciones menstruales.

Las muestras clínicas de origen genital deben ser inoculadas en medios


enriquecidos pero selectivos, como el agar Thayer-Martin modificado (MTM) o el agar
Martin-Lewis (ML), que contienen cuatro antibióticos que ayudan a suprimir el crecimiento
de bacterias contaminantes: vancomicina (MTM, 3 μg/ml; ML, 4 μg/ml), colistina (7.5 μg/ml),
lactato de trimetoprim (5 μg/ml) y un agente antifúngico (MTM, nistatina, 13.5 μg/ml; ML.
anisomicina,20 μg/ml).

Las colonias de N. gonorrhoeae a las 24 horas de incubación son pequeñas, de 0.5 a 1.0
mm de diámetro, generan una coloración blanca-grisácea y son levantadas y brillantes.

• N. meningitidis es agente etiológico de bacteremia y meningitis epidémica.


• N. meningitidis puede presentar una cápsula de polisacáridos extracelulares, la
cual se ha clasificado en trece diferente serotipos: A, B, C, D, X, Y, Z, W125, 29E,
H, 1, K y L. N. meningitidis coloniza las colonizada la mucosa respiratoria, N.
meningitidis puede alcanzar sangre y generar una meníngococcemia, la cual
puede evolucionar a coagulación intravascular diseminada, choque endotóxico y
necrosis en glándulas suprarrenales, además de un cuadro de meningitis aguda.

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IDENTIFICACION DEL GENERO NEISSERIA

• La infección invasiva por N meningitidis puede provocar rápidamente la muerte del


paciente.

Para el aislamiento de N meningitidis a partir de muestras clínicas como sangre y líquido


cefalorraquídeo se puede utilizar agar sangre y agar chocolate. El crecimiento en agar sangre de un
aislamiento primario de N meningitidis es variable, aunque posteriormente la bacteria puede
adaptarse al medio durante los subcultivos.

Luego del período de incubación bajo las condiciones adecuadas, las colonias de N. meningitidis
son de 1.5 mm de diámetro aproximadamente, redondas, de superficie y borde lisos, con aspecto
húmedo y brillante. Algunas colonias son mucoides por la cápsula dando una coloración que va de
blanco a gris.

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IDENTIFICACION DEL GENERO NEISSERIA

Branhamella (Moraxella) catarrhalis es considerada como parte de la flora normal, aunque se ha


relacionado como agente causante de infecciones pulmonares y de oído medio. Esta es una bacteria
no fastidiosa que crece tanto en agar chocolate como en agar sangre, dando una morfología colonial
similar a las de Neisseria, pero que puede ser fácilmente diferenciada de las especies de Neisseria
mediante la prueba de ADNasa.

Cuadro 4. Características de N. gonorrhoeae, N. meningitidis, M catarrhalis y K denitrificans.

Característica N meningitidis M. catarrhalis K. denitrificans N. gonorrhoeae


Crecimiento en – V1 + +
agar sangre
Morfología colonial Beige a gris, Rosada, Beige a gris, Beige a gris,
en agar chocolate transparente, lisa, opaca, seca, 1- transparente, lisa, transparente, lisa,
1-3 mm 3 mm 1-2 mm 0.5 - 1mm
Ácido a partir de:
Glucosa + – + +
Maltosa – + – –
Lactosa – – – –
Sacarosa – – – –
Fructosa – – – –
Reducción de – – + +
nitratos
ADNasa – + – –
V, variable.
IDENTIFICACION DEL GENERO NEISSERIA

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DIA 1
Neisseria
• • Entrega de cultivos.
• • Describir la morfología colonial.
• • Realizar frotis y tinción de Gram.
• • Describir la morfología microscópica.
• • Sembrar la bacteria en una placa de agar chocolate y en una placa de agar sangre.
• • Incubar las placas por 18-24 horas a 35-37oC en atmósfera con 5-8% CO2.

La susceptibilidad a los antimicrobianos se puede determinar también por la prueba de difusión en


disco u obtenerse las CIM con Etest® (AB Biodisk). Este documento presenta los métodos para las
pruebas de susceptibilidad de N. gonorrhoeae a los antimicrobianos con los antibióticos
recomendados comúnmente por la OMS para el tratamiento primario de la infección: ciprofloxacino,
azitromicina, ceftriaxona,cefixima y espectinomicina [OMS 2001].

DIA 2
Neisseria
1• Describir la morfología colonial.
2• Realizar frotis y tinción de Gram.
3• Describir la morfología microscópica.
4• Realizar la prueba de catalasa.

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5
6• Realizar la prueba de oxidasa.

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FERMENTACION DE CARBOHIDRATOS

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PRUEBA DE LA ENZIMA SUSTRATO

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ESQUEMAS DE IDENTIFICACION

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REFERENCIAS-MÁS INFORMACION:
• Myndi, Perrilla,Manual de Laboratorio para la Identificación y Prueba de Susceptibilidad a los
Antimicrobianos de Patógenos Bacterianos de Importancia para la Salud Pública en el Mundo
en Desarrollo,2002.
• Rojas, Norma, Bacteriología clínica,2006, facultad de microbiología, Universidad de costa rica.

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