TINCION EN BACTERIAS

Se coloca sobre un portaobjetos las bacterias fijadas por calor o secadas de

algn otro modo, y se tien con cristal violeta , despus se aade una solucin
yodada, que acta como mordiente, y luego se realiza un lavado con acetona y
agua. Despus se cubre con un colorante de contraste, safranina, para teir de
rojo a las clulas que no se hayan teido de cristal violeta. ( pocedimiento 10
min)
Las bacterias grampositivas se tien de color purpura, el colorante queda
atrapado en la capa de peptidoglucano.
Las bacterias gramnegativas presentan una capa delgada de peptidoglucano
por lo cual no puede retener el colorante cristal violeta y al teirse con un
colorante de contraste se tien de rojo.
Micobacterias y micoplasmas no se pueden diferenciar mediante la tincin de
Gram, si no con acidorresistencia.

BACTERIAS GRAMPOSITIVAS
Una bacteria grampositiva posee una pared celular gruesa que, consta de
varias capas y est formada principalmente por peptidoglucano (150 a 500 A)
que rodea la membrana citoplsmica. El peptidoglucano es un exoesqueleto en
forma de malla con una funcin semejante a la del exoesqueleto de los
insectos. Sin embargo, y a diferencia de esta ltima estructura, el
peptidoglucano de la clula es lo suficientemente poroso como para permitir la
difusin de los metabolitos a la membrana plasmtica
BACTERIAS G RAM NEGATIVAS
Las paredes celulares gramnegativas son ms complejas (tanto desde el punto
de vista estructural como qumico) que las de las clulas grampositivas (vase
figura 3-2). Desde el punto de vis- ta estructural, una pared celular
gramnegativa contiene dos capas situadas en el exterior de la membrana
citoplsmica. In- mediatamente por fuera de la membrana citoplsmica se
encuentra una delgada capa de peptidoglucano que representa tan slo un 5%
a 10% del peso de la pared celular. Adems, la pared celular gramnegativa no
contiene cidos teicoicos ni lipoteicoicos. En la parte externa de la capa de
peptidoglucano se halla la membrana externa, la cual es exclusiva de las
bacterias gramnegativas. La zona comprendida entre la superficie externa de
la membrana citoplsmica y la superficie interna de la membrana externa se
conoce como espacio periplsmico. Este espacio es un compartimento que
contiene diversas enzimas hidrolticas importantes para la degradacin y
metabolizacin por la clula de las macromolculas de gran tamao.

Habitualmente, estas enzimas son proteasas, fosfatasas, lipasas, nucleasas y

enzimas metabolizadoras de hidratos de carbono.