Aplicaciones Ultravioleta

visible
Anlisis Cuantitativo.
1. Determinacion directa
2. Determinacion mezclas
Estudio de reacciones

Cualitativo

Anlisis cuantitativo

Calculo de la concentracin por interpolacin en recta calibrado

Adicin standard
CM

CM
+C1

CM
+C2

Ejemplo

CM
+C3

CM
+C4

Calculo de la concentracin
adicin estandard
Lento y tedioso:
(curva de calibrado para todas las
muestras)

Puede usarse una adicin

simple si la muestra es
conocida:
A1 = b(Cmuestra)
A2 = b(Cmuestra + Cadicion)

A1
A2

C muestra
C muestra + C aadida

CMuestra =

A1C aadido
(A2 ! A1 )

Mezclas
Espectros no superpuestos
A
N

!1

Medidas a 1 para M y 2 para N

!2

Espectros superpuestos
parcialmente
M+N
A
M

!1

!2

La eleccin de es funcin del grado

de superposicin

Espectros completamente
superpuestos
M+N

N
M

!1

!2

A1 = M1 b CM + N1 b CN
A2 = M2 b CM + N2 b CN

(a 1)
(a 2)

Mezclas
Ejemplo . Una muestra de dos compuestos , X and Y, necesita ser analizada.
Se sabe que la max para el compuesto X es 632 nm, y max para el
compuesto Y es 447 nm.
A partir d Standards preparados para X e Y y a partir de la curva de
calibrado se obtienen los siguientes valores de

Las absorbancias a las dos longitudes de onda obtenidas para una muestra
son:
A632 =0.771 y A447 = 0.815. cual ser la concentracin de los dos
compuestos?

mezclas
En lugar de medir A, M y N solamente a dos longitudes de onda, se
miden estas magnitudes a varias longitudes de onda

!
A
i = C + Ni C
! b M ! Mi N
Mi
Ai

! Mi b

pendiente=CN
CM =ordenada origen

!
Ni
!
Mi

Amez/eper

Ejemplo mezcla
0,002
0,0018
0,0016
0,0014
0,0012
0,001
0,0008
0,0006
0,0004
0,0002
0

y = 0,0001x

Serie1
Lineal (Serie1)

10

20

edicro/eper

!! ,nm

MnO 4 266
288
320
350
360

0,042
0,082
0,168
0,125
0,056

Cr2 O720,41
0,283
0,158
0,318
0,181

Mezcla
0,766
0,571
0,422
0,672
0,366

e,per

e,dicro

e,dicro/e,p Ame/eman
er

420

7660

18,2380952

0,00182381

820

5710

6,96341463

0,00069634

1680

4220

2,51190476

0,00025119

1250

6720

560

3660

5,376
6,53571429

0,0005376
0,00065357

C=
0,0001
0,0001
4,33681E-19

per

pendiente
intersecion

0,002
0,0018
0,0016
0,0014
0,0012

y = 0,0001x

Hoja excell

Resolucin con Mathcad

Se forma una matriz de datos X-Y para analizarla donde :
X es Absorbanciapatron2/Absorbancia patron1 e
Y es Absorbancia Mezcla/ Absorbancia patron1
(X coordenada 1 column, Y coordenada en la 2 columna):

+,
X := data 0

+,
Y := data 1

Number of data points:

n := rows ( data)

% 0.94
& 2.5
&
data := & 3.23
& 3.45
&
' 9.76

)
)
6.5 )
6.96 )
)
18.23 *

n=5

Standard deviation:

n
n" 1

SD ( x) := stdev ( x) !

X-Coordinates

Y-Coordinates

Mean

mean ( X) = 3.976

mean ( Y) = 7.9

Median

median ( X) = 3.23

median ( Y) = 6.5

Standard dev.

SD ( X) = 3.379

SD ( Y) = 6.028

Variance

SD ( X) = 11.421

Regression Statistics

b0 := intercept ( X , Y)

b0 = 0.808

Slope

b1 := slope ( X , Y)

b1 = 1.784

Correlation coeff.

corr ( X , Y) = 1
corr ( X , Y) = 1

Covariance

cvar ( X , Y) = 16.298

Plots

intersepcion es C1

19
0
15.2

11.4

s
b
A

7.6

!0

0
0

6
x

Abs patron2/Abs patron1

Default range for plot:

19

3.8

$$$$
#
r ( x) := b0 + b1 !x
scale := max r ( X) " Y !1.1
% 0.94 2.51 (

& 2.5
&
Coords := & 3.23
& 3.45
&
' 9.76

1
n
o
r
t
a
p

pendiente C2

R2

5.3

s
b
A
/
a
l
c
z
e
my

SD ( Y) = 36.341

Intercept

2.51 (

)
)
6.5 )
6.96 )
)
18.23 *

5.3

r := 1

+,
x := Coords 0
+,
y := Coords 1

trazo 1

10
10

Valoraciones fotomtricas
La ley de Beer se cumple
Al menos una de las especies debe absorber la Radiacin
A

punto final
punto final

punto final

Volumen

Volumen

Volumen

a
A

A
Punto final
del Cu

A
Punto final
del Bi

punto final

punto final

punto final

vol. de AEDT

Volumen

Volumen

Volumen

Determinacion de constantes de disociacion de cidos

y bases

HA <> A + H

Ka =

H
HA

pK a = pH + log

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

615 nm

punto isosbstico

6
500

600

700

pH

12
13
9
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26

B
ea1

Datos

ea2
908,00

Solucion
Concentracion b
Concentracion a
Concentracion b=(C6*B311 C3*B6)/(E3*B3-C3*D3)

8
7.5
7
6.5

400

A
calculo de pK de un acido
Parametros conocidoos

HA

eb1
352,00

eb2
104,00

1646,00

A,1 mezcla
A,2mezcla
0,47000
0,35000

0,000105
0,000506

Concentracion a=(B6-D3*B9)/B3

datos indicador
C=

5,00E-04
A,485
InH(pH=0)
In(pH=14)
pH=5

K=

pH

2,17002E-06 pK=

A,625
0,45
0,05
0,47

e,485
0,18
0,82
0,35

5,66353685

e,625
908,00
104,00

352,00
1646,00

c := 4! 10

#5

k := 10

#8

k=cnstante
c= concentacion total
x=pH

x := 0 , 0.2 .. 14

CinH( x) :=

$1 + k '
%
# x(
10 )
&

a1 :=

77
4

! 10

Cin( x) :=

a2 := 1.5! 10

3 3
4
a3 := ! 10 a4 := 1.5! 10
4
A1( x) := a1! CinH( x) + a2! Cin( x)
A2( x) := a3! CinH( x) + a4! Cin( x)

CinH<----> Cin +H+

#x
$
10 '
%1 +
(
k )
&

Coeficientes de absorptividad a "1(a1 y a2)y

"2(a3 y a4)

A1=absorbancia a "1
A2= absorbancia a "2
x=

a
i
c
n
a
b
r
o A1( x)
s
b A2( x)
A

A1( x) =
0

.7
0

.2
0

.7
0

0.9

.4
0

.7
0

.6
0

.7
0

.8
0

.7
0

.7
0

.2
1

.7
0

.4
1

.7
0

0.8
0.7
0.6
0.5
0.4

.6
1

.7
0

0.3

.8
1

.7
0

0.2

.7
0

0.1

.
2

.7
0

.4
2

.7
0

.6
2

.7
0

.8
2

.7
0

.7
0

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011121314
x
pH

A2( x) =

Determinacin de la estequiometra de complejos

Mtodo de las variaciones continuas

Se preparan mezclas de diferentes concentraciones de M y L, pero
manteniendo constante la concentracin final
Se representa la absorbancia frente a la fraccion molar de L =L/M+L
.

B
.
C

0.66

xL

Estequiometra variaciones continuas

Mtodo de la relacin molar

Se mantiene constante la concentracin de uno de los componentes

(a menudo, el in metlico) mientras que el otro se hace variar.
Se representa la absorbancia frente a las relaciones molares de L y M:
L/M o M/L
.
ML

1.2

A
1.0
0.8

ML2

0.6
0.4
0.2

[L] /[M]

Determinacin de constantes

Error fotomtrico
La ley de Beer la podemos escribir;
Derivando esta ecuacin
Dividiendo esta ecuacin por la primera
Representando el eror reletivo en c para una incertidumbre relativa en la medida
Frente a la transmitancia se obtiene el error
instrumental que se comete para cada T

Curva de Ringbon
error de mtodo espectrofotomtrico

Se define una nueva unidad

Absortancia
AbsT = 100-%T.
A=bc=-logT ; 10-bc=T
De los datos de la curva de calibrado
se calcula para cada concentracin el
valor de absortancia que se obtiene a
partir de la transmitancia y se
representa en una escala
semilogaritmica la absortancia ( eje de
ordenadas frente a la concentracion
(log c)eje de abscisas.
El error se obtiene de la pendiente en
cada punto de la curva obtenida
Se debe utilizar unicamente aquella
zona de menor error de metodo

Absorbancia

concentracio
n ppm

Transmitancia Absortancia

0,1

100

0,15

82,3908741

17,6091259

1,5

0,2

69,8970004

30,1029996

0,4

39,7940009

60,2059991

0,6

22,184875

77,815125

0,8

9,6910013

90,3089987

0,89

5,06099934

94,9390007

8,9

0,9

4,57574906

95,4242509

0,98

0,87739243

99,1226076

9,8

ESPECTROFOTOMETRIA DE DERIVADAS
La primera derivada de un espectro original tambien puede definirse
como la representacin grfica de la pendiente de la curva de absorcin
a cada longitud de onda

dA
para la primera derivada
d!
2
d A
para la segunda derivada
2
d!
A

1 derivada

2 derivada

Ventajas de la
espectrofotometra de derivadas

Medida exacta de max.

Mejor resolucin de los
espectros

En el espectro normal, la estructura fina

puede ser difcil de ver. En estos casos al
emplear la segunda derivada, puesto que los
mximos y mnimos del espectro normal y de
la segunda derivada aparecen prcticamente
a las mismas longitudes de onda y por tanto
la estructura fina del espectro normal se pone
mejor de manifiesto lo que tiene gran
importancia con fines de identificacin, como
criterio de pureza o para control de calidad.

Espectro normal

Determinaciones cuantitativas
en presencia de dos o ms
componentes.

1 derivada

a)

b)

Instrumentacion UV
Los componentes bsicos son:
Fuentes de energa (lmpara)
Seleccionador de longitud de onda (filtros,
monocromadores)
Recipiente porta muestras (cubeta)
Detector
Procesador de seales

Instrumentos
Filtros

- Fotmetros
Fototubos
Monocromadores

Espectrofotmetros
Fototubos o tubos multiplicadores

Fotmetros
fotmetros, son instrumentos sencillos
que permiten medir la intensidad de
radiacin, ya que van provistos de filtros
para seleccionar un rango estrecho de
longitudes de onda, y como detectores,
usan fototubos.

Espectrofotmetros
Los espectrofotmetros, son instrumentos ms
o menos sofisticados que usan
monocromadores para seleccionar estas bandas
estrechas de longitud de onda. El
monocromador permite una variacin continua
al seleccionar las longitudes de onda, y tambin
permite realizar un barrido en una zona amplia
de longitud de onda. Como detectores usan
fototubos o tubos multiplicadores.

Fuente de energa

Una fuente de radiacin ideal debe ser continua en una amplia

zona del espectro, tener una intensidad elevada y que no vare
esta intensidad con la longitud de onda.
Fuentes trmicas :
lmpara de filamento de Wolframio,

Fuentes de descarga elctrica:

Lmpara de H- UV prximo.
Lmpara de H (Deuterio) UV prximo
Lmpara de descarga de Xe : 250 y 600 nm,
Lmpara de arco de Hg se utiliza para el calibrado de instrumentos

Seleccin de
Filtros de absorcin:
absorcin selectiva de que no interesan

Filtros de interferencia
una parte de la radiacin que llega es absorbida y
otra, se refleja

monocromador
dispositivo que genera un haz de radiacin de gran
pureza espectral (anchura de banda estrecha) y que
permite ir variando la de manera continua.

detectores.
elementos que convierten la radiacin en
un flujo de electrones y posteriormente, en
una corriente o voltaje en el circuito de
lectura.
Clulas fotovoltaicas
Fototubos (Tubos fotoemisores)
Tubos fotomultiplicadores

Haz sencillo

Doble Haz en espacio

Doble haz en tiempo

Diodo Array

calibrado del instrumento

Instrumento de haz simple :
Poner un obturador de manera que no llega radiacin
al detector, se ajusta el detector a cero (en unidades
de transmitancia) o mxima (en unidades de
absorbancia).
Con la disolucin del blanco, ajusto a cero la
absorbancia.
Con otra cubeta de disolucin incgnita, mido la
absorbancia.

Si trabajamos a ms de una estas tres

etapas se deben repetir para cada

Calibrado instrumentos de doble haz.

Se pone el blanco en ambas cubetas y se
ajusta a cero la absorbancia.
Se quita la cubeta de la muestra, cerramos este
obturador para ajustar de nuevo a cero la
transmisin o al mximo la absorbancia.
Colocamos la muestra y medimos la
absorbancia.