Los productos recombinantes son expresados usualmente en microorganismos,

principalmente bacterias y levaduras para alcanzar altos rendimientos debido la

alta velocidad de crecimiento de estos.
Saccharomyces cerevisiae, la levadura de panaderos o de fabricantes de cerveza, est en la lista de
microorganismos Generalmente Reconocidos Como Seguros ya que carece de endotoxinas detectables y
por su largo historial de uso en alimentos y farmacuticos.
Este es un microorganismo clave en laboratorio e industria ya que puede sintetizar una variedad de
protenas fngicas y mamferas que pueden ser problemticas al producirlas en bacterias.
Al contrario de sistemas husped bacterianos, S. cerevisiae es ms tolerante a bajos pH, altas
concentraciones de azcar y etanol, y altas presiones osmticas, lo cual la hace adecuada para
fermentaciones industriales.
Finalmente, la expresin en levaduras puede permitir una liberacin extracelular natural de protenas por
un sistema de secrecin que es similar a eucariotas superiores, lo que hace que estos productos
biolgicamente activos secretados sean ms fciles de recuperar que los producidos por bacterias
recombinantes. Adems, el nivel de las protenas endgenas secretadas es slo de un 0,5%-1,0%; por lo
tanto, la purificacin y recuperacin de la protena deseada es ms simplificada.
-----------La utilizacin de varias fuentes de carbono por la levadura Saccharomyces cerevisiae requiere un complejo
patrn de regulacin de genes. En general, los genes necesarios para la utilizacin de una cierta fuente de
carbono son reprimidos cuando un sustrato ms favorable est disponible.
Desde que los sustratos fermentables tales como glucosa son metabolizados ms fcilmente que los
azucares alternativos (galactosa), se puede observar una jerarqua de fuentes de carbono utilizadas con
xito.
---Esta levadura puede crecer en galactosa como nica fuente de carbono. La galactosa es transportada a la
clula por una galactosa permeasa y es convertida a glucosa-1-fosfato por la accin secuencial de tres
enzimas, galactoquinasa, a-D-galactosa-1-fosfato uridil-transferasa, y uridina difosfoglucosa-4epimerasa.
------Sin embargo la accin de estas tres enzimas es reprimida al crecer la levadura en glucosa.
Si las levaduras se dejan creciendo en glucosa y luego son cambiadas a galactosa, GAL1, GAL7, y
GAL10 se inducen coordinadamente hasta 1000 veces al nivel de la transcripcin.
--Las bases para la induccin por galactosa han sido descritas antes de la represin (Figura 1):
1. La protena GAL2 permite entrada de galactosa a levadura.
2. GAL4p se une a los promotores del gen GAL y activan la transcripcin.
3. GAL80p inhibe la habilidad de la GAL4p de activar la transcripcin al
unirse a su dominio de activacion transcripcional (UAS).
4. Un inductor producido desde galactosa, junto a GAL3p, inhiben la
funcion del GAL80p.
Las bases para la represin de la expresin de genes GAL por glucosa se volvieron claras ms tarde. El
crecimiento en glucosa inhibe la funcin del Gal4p en tres vas distintas (Figura 1).

Primero, la glucosa reduce el nivel de inductor funcional en la clula por:

(i)
(ii)
(iii)

reprimir la transcripcin de la galactosa permeasa codificada por GAL2,

inactivar las molculas de permeasa preexistentes (posiblemente por protelisis), y
reprimir la transcripcin de GAL3. La reduccin resultante en los niveles del inductor funcional
reduce la funcin de Gal4p al incrementar la actividad del Gal80p.

Segundo, el crecimiento en glucosa causa que la protena Mig1 reprima la expresin de GAL4. Los bajos
niveles de Gal4p resultantes llevan a una menor transcripcin de genes GAL.
Tercero, a travs de una secuencia de represin corriente-arriba (URS, upstream repression sequence) en el
promotor GAL1 media la inhibicin de la funcin de Gal4p, nuevamente va el represor Mig1p.
Estos tres mecanismos juntos son responsables de la represin ms de 1000 veces de la expresin del gen
GAL durante el crecimiento en glucosa.