CUANTIFICACIN DE CIDOS NUCLEICOS

La espectrofotometra UV/Visible nos permite confirmar que contamos con cantidad suficiente de cidos
nuclecos (DNA/RNA) de calidad adecuada antes de llevar a cabo ensayos de PCR cuantitativa en tiempo
real (QRTPCR), anlisis de SNPS (Polimorfismos de nucletido nico) o la secuenciacin automtica de
muestras de DNA de plsmidos, csmidos, productos de PCR
La principal ventaja de trabajar con el espectrofotmetro NanoDrop ND1000 es que la medida se lleva a
cabo a partir de 1 1,5 l de muestra sin ayuda de ningn tipo de cubeta ya que la muestra se pipetea
directamente sobre la superficie de medida. El rango de medida para muestras de DNA es de 2-3700
ng/l y para RNA de 2-3000 ng/l.
El Servicio tambin cuanta con un fluormetro (Qubit) que permite, mediante la utilizacin de sondas
fluorescentes, cuantificar de forma altamente especfica muestras de DNA, RNA o protenas. El Servicio
dispone de diferentes kits en funcin del tipo de muestra y su concentracin:
Kit

Rango

dsDNA HS assay

20 pg/l 100 ng/l

dsDNA BR assay

100 pg/l 1000 ng/l

dsRNA HS assay

250 pg/l 100 ng/l

dsRNA BR assay

1 ng/l 1000 ng/l

Cmo traer las muestras al Servicio:

Traer 3 l de RNA DNA (10 -2000 ng/l) en tubos de 1.5 ml
Para que el ensayo se lleve a cabo los usuarios del IIBm debern indicar en el Servicio de Genmica el
nmero de pedido del mismo tras solicitar el anlisis a travs de la web del Servicio de Compras y
Almacn. No se llevaran a cabo los ensayos para los que no se haya realizado el pedido correspondiente.
Cuando las muestras estn cuantificadas se enviar al solicitante una hoja excell con informacin relativa
a la concentracin, ratios 260/280, 260/230

SERVICIO DE GENOMICA DEL IIBm (SQP)

Elaborado por Gemma Rodrguez- Tarduchy. Responsable del SQP. Fecha: 16/07/14. Rev: 01