INTRODUCCION

Los Micrococcus son clulas bacterianas esfricas de dimetro comprendido

entre 0,5 y 3 micrmetros que tpicamente aparecen dispuestas en
ttradas.

Son Gram

positivas,

aerobias

estrictas.

Estas

bacterias

generalmente son organismos saprofticos, estn presentes normalmente e n

la micro flora cutnea, productos lcteos, agua y suelo. El
g n e r o e s r a r a m e n t e asociado con enfermedades, aunque actualmente
se

cataloga

como

patgeno

oportunista, particularmente

en pacientes

con inmunodeficiencia, tales como enfermos de VIH. en los que puede producir
infecciones pulmonares y en raras ocasiones bacteriemia recurrente, Shock
sptico, endocartidis o neumona .La

importancia

del

estudio

de

los

micrococos en alimentos nos permite conocer que algunas desdoblan

las protenas con produccin de cidos. Por esta capacidad
Proteolticaactan contaminantes de alimentos crnicos, otras especies
toleran
concentraciones
elevadas de sal, tambin son capaces de crecer en
s a l m u e r a s , O t r a s p r o d u c e n pigmentaciones

coloraciones

anormales en la superficie de los alimentos, afectando su calidad, por ejemplo

M. luteus
produce un pigmento amarillo, mientras que
M. roseus
produce un pigmento
rosado.Los Micrococcos son aerobios estrictos y termorresistentes. Du
rante la maduracindesciende su nmero. Elaboran proteasas y lipasas
extracelulares que actan durante la maduracin de algunos quesos. Los
micrococcos son dbilmente fermentadores, forman parte de la flora
inocua que contamina la leche cruda, tiene poca actividad enzimtico por lo
tanto son de muy poca importancia como agentes adulteradores en
leche. Sin embargo por ser la flora ms a b u n d a n t e e n l e c h e c r u d a
y

tener

cierta

capacidad

proteo

ltica

pueden

s e r constantes de alteraciones en leche pasteurizadas mal almacenada.

llegar

- 1.- ESTUDIO DE BACTERIAS DEL GENERO MICROCOCCUS

2.- PROBLEMA:
a. Cmo identifico las bacterias del tipo Micrococos?
b.En que alimentos podemos encontrar y que enfermedades pueden causar
3.- OBJETIVOS:
a. Conocer y comprender las caractersticas de las bacterias del gnero
Micrococos y todos los aspectos relacionados.
b. Determinar mtodos y tcnicas para su identificacin en muestra de queso
artesanal.
4.- MARCO TERICO:4.1.- ASPECTOS GENERALES
4.1.1.- GENERO MICROCOCCUS
Los Micrococos son clulas bacterianas esfricas de dimetro comprendido
entre 0,5 y 3micrmetros que tpicamente aparecen dispuestas en ttradas.
Son Gram positivas,aerobias estrictas. Taxonmicamente pertenecen a:
Dominio:BacteriaFilo:ActinobacteriaClase:
ActinobacteridaeOrden:

ActinobacteriaSubclase:

ActinomycetalesSuborden:

MicrococcineaeFamilia:

MicrococcaceaeGnero: MicrococcusEspecies: M. Antarcticu, M.

luteus, M. lylae, M. Mucilaginosis, M. roseus Micrococcus tiene una gruesa
pared celular que puede abarcar el 50% del materialcelular. Su genoma es rico
en guanina y citosina (65 al 75%). A menudo contienen plsmidos que
proporcionan al organismo caractersticas tiles.Estas bacterias generalmente
son organismos saprofticos, estn presentes normalmenteen la microflora
cutnea, productos lcteos, agua y suelo. El gnero es raramenteasociado con
enfermedades,

aunque

actualmente

se

cataloga

como

patgeno

oportunista, particularmente en pacientes con inmunodeficiencia, tales como

enfermos de VIH en los - no arroj ningn L

que puede producir infecciones pulmonares y en raras ocasiones bacteriemia

recurrente,Shock sptico, endocartidis o neumona.Tambin a veces se encuentran
contaminando alimentos. La mayora de las especies queabundan en los
alimentos son aerobias, no son patgenas (desprovistas de coagulasa
yhemolisina) y catalasa positivas.La importancia de los micrococos en alimentos se debe a
las siguientes caractersticas:
Algunas especies desdoblan las protenas con produccin de cidos.
Por estacapacidad proteoltica actan como contaminantes de alimentos crnicos.
Otras especies toleran concentraciones elevadas de sal, son capaces de
crecer enlas salmueras.
L a m a y o r a s o n m e s f i l o s . A l g u n a s e s p e c i e s s o n t e r m o d r i c a
s , r e s i s t e n a l tratamiento comercial que se aplica a la leche (
M. varians
). Algunos micrococosson psicrofilas y son capaces de crecer a temperaturas
prximas o inferiores a los10C.
Otras producen pigmentaciones y coloraciones anormales en la superficie de
losalimentos, afectando su calidad, por ejemplo
M. luteus
produce un pigmento amarillo, mientras que
M. roseus
produce un pigmento rosado.
Micrococcus en pescados refrigerados y congelados
Las especies de peces capturadas en mares y aguas tropicales y
templadas presentan bacterias del Genero Micrococcus a nivel de branquias
e intestinos.M . l u t e u s f o r m a p a r t e d e l a m i c r o f l o r a d e l p e s c a d o , y
s e l e c o n s i d e r a u n p o t e n c i a l contaminante ambiental y que en algunas
ocasiones puede causar infecciones. Sobrevivea bajas temperaturas y
comienza su proliferacin despus de 9 das de almacenamiento,siendo capaz
de producir diferentes enzimas descarboxilasas productoras de cadaverina
y putrescina que causan la descomposicin del pescado mantenido en congelacin
4.1.2- DIAGNSTICO MICROBIOLOGICOA.COLORACIN GRAM: Cocos Gram positivos, dispuestas en ttradas
B.- MEDIOS DE CULTIVO PARA SU AISLAMIENTO E IDENTIFICACION:

B.1.- Medio de cultivo AGAR SANGRE: Crece bien en agar sangre, tras 48h
deincubacin en aerobiosis, forma colonias que miden aproximadamente 1 2
mm dedimetro y tienen un aspecto mate. No produce hemlisis (hemlisis
gamma ) AGAR SANGRE
Es un medio enriquecido, constituido por una combinacin de un medio
base (agar nutritivo) mas el agregado de 5 % de sangre ovina, tambin puede
usarse

sangre

humana.El

agar

sangre

aporta

muchos

factores

de

enriquecimiento. Frmula (en gramos por litro) del medio base: Infusin de
msculo de corazn 375.0Peptona 10.0Cloruro de sodio 5.0Agar 15.0PH final:
7.3 0.2
PREPARACION DEL MEDIO BASE: Suspender 40 g del polvo del medio base
en un litro de agua destilada. Mezclar muy bien hasta obtener una suspensin
homognea. Calentar en bao Mara con agitacin frecuente hasta disolver
muy bien el polvo. Esterilizar 20 minutos a 121C.
PREPARACION DEL AGAR SANGRE: Enfriar a 45 C el medio base y agregar
en forma asptica un 5% de sangre estril desfibrando (a temperatura
ambiente). Homogenizar bien para mezclar la sangre con la media base y
distribuir en placas. Caractersticas del medio Medio base: color mbar. Medio
base ms 5% de sangre de carnero: color rojo cereza.
FUNDAMENTO La infusin de msculo de corazn y la peptona, otorgan al
medio de cultivo un alto valor nutritivo, que permite el crecimiento de una gran
variedad de microorganismos, an de aquellos nutricionalmente exigentes. El
cloruro de sodio mantiene el balance osmtico. El agregado de sangre al medio
de cultivo, en concentracin de 5 %, aporta nutrientes para el crecimiento
bacteriano, y permite detectar la capacidad hemoltica de losmicroorganismos
patgenos. Observando los halos hemolticos alrededor de las coloniasse
determina el tipo de hemlisis que posee:

alrededor de la colonia.
bacterias sintetizan una hemolisina
que origina lisis total de los glbulos rojos, formndose una zona transparente
alrededor de la colonia.

poca importancia patgena).

2.- Medio de cultivo AGAR MANITOL SALADO: Los Micrococcus crecen
bien en este medio. Forman colonias rojas, relativamente grandes, elevadas,

cupuliformes y opacas, de consistencia cremosa, a las 18-24 horas de

incubacin a 35-37 C, en aerobiosis. No fermentan el manitol. AGAR
MANITOL SALADO Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el
aislamiento y diferenciacin de estafilococos, donde tambin desarrolla
especies del Genero Micrococus, a partir demuestras clnicas, alimentos,
productos cosmticos y otros materiales de importancia sanitaria. Frmula (en
gramos por litro) del medio base: Extracto de carne 1.0Pluripeptona10.0DManitol 10.0Cloruro de sodio75.0Agar15.0Rojo de fenol 0.025PH final: 7.4 0.2
PREPARACION DEL MEDIO: Suspender 111 g de polvo por litro de agua
destilada. Mezclar muy bien hasta obtener una suspensin homognea.
Calentar en bao Mara con agitacin frecuente hasta disolver muy bien el
polvo. Esterilizar 15 minutos a 121C. Distribuir en placas. Caractersticas del
medio: Medio preparado: color rojo FUNDAMENTO Se trata de un medio
altamente selectivo debido a su alta concentracin salina. En el medio de
cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, constituyen la fuente de
carbono,nitrgeno, vitaminas y minerales, el manitol es el hidratode carbono
fermentable, el cloruro de sodio (que se encuentra en alta concentracin) es el
agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora acompaante, y el rojo fenol
es el indicador de pH. Las bacterias que crecen en un medio con alta
concentracin de sal y fermentan el manitol, producen cidos, con lo que se
modifica el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo a amarillo. Los
estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no fermentar
el manitol. Los estafilococos coagulasa positiva (S.aureus) fermentan el manitol
acidificando el medio, las colonias son amarillas, rodeadas de una zona del
mismo color amarillo. Los estafilococos coagulasa negativos (S.epidermidis) y
los Micrococcus no fermentan el manitol, presentan colonias rojas rodeadas de
una zona del mismo color rojo o prpura (muchas veces se lesconfunde y se
recurre a pruebas de diferenciacin bioqumica)

FUNDAMENTO
Los cidos formados por degradacin oxidativa de la glucosa son sumamente dbiles
y para su deteccin se requiere un medio de oxido fermentacin mas sensible,
como el deHugh y Leifson (medio OF).
C.4.- Prueba de utilizacin de la Glucosa en el medio Hugh y Leifson (medio
OF):
El medio debe colocarse en tubo y estar en plano semi-inclinado, presentando
pico deflauta.1.Se requieren dos tubos para la prueba, inoculados con el
organismo desconocido con un asa de siembra de punta recta que atraviese
el medio hasta llegar al fondo del tubo.2.Cubrir un tubo de cada par con una
capa de un cm de aceite mineral, y el otro tubo dejar abierto expuesto al
aire.3.Incubar ambos tubos a 35C durante 48 horas.
Interpretacin:

La produccin de acido por metabolismo oxidativo se detecta

e n e l m e d i o p o r l a aparicin de color amarillo. En el caso de organismos
exudativos la produccin de color se puede notar primero cerca de la
superficie del medio, en caso de los organismos fermentativos la acidez
se produce en el fondo del tubo. El siguiente cuadro indica
lasreacciones:En tubo abierto Tubo cubierto Tipo de metabolismo
Acida Alcalina oxidativo (Amarillo) (Verde)Acida Acida fermentativo(Amarillo)
En este medio de oxidacin-fermentacin HughL e i f s o n ( O F ) l a s e s p e c i e s d e Micrococcus producen acido solo en el
tubo abierto (utilizacin oxidativa), en tanto queel S.epidermidis produce acido
en ambos tubos, abierto y cerrado, debido a su capacidadde fermentar hidratos
de carbono.
D.- CARACTERSTICAS BIOQUMICAS:
D.1.- Son catalasa positiva.
La catalasa es una enzima que descompone el perxido de hidrogeno (H2O2) en oxigeno
agua. El perxido de hidrogeno se forma como uno de los productos finales del
metabolismo o x i d a t i v o a e r b i c o d e l o s h i d r a t o s d e C a r b o n o . S i
s e d e j a a c u m u l a r , e l p e r x i d o d e hidrogeno es letal para las
clulas bacterianas. La catalasa transforma al peroxido de hidrogeno en
agua y oxigeno.
H202 H2O + O2 (burbujas de gas)Catalasa10
Prueba de la Catalasa en lmina portaobjeto.
1.Con un asa de siembra de punta recta transferir una pequea cantidad del
centro deuna colonia bien aislada a la superficie de una lamina portaobjeto.
2.Aadir 1 a 2 gotas de perxido de hidrogeno al 3%.
3.Realizar la lectura.
Interpretacin:
La rpida aparicin y produccin sostenida de burbujas de gas oefervescencia indica una
reaccin positiva.Se puede usar como control positivo una cepa
de Staphylococcus aureus y como controlnegativo a Streptococccus ssp.
D.2.- Son no fermentadores de glucosa.
Test de Fermentacin de Glucosa
Este permite diferenciar al gnero Micrococcus de
l g n e r o Staphylococcus ya que este ltimo da esta prueba positiva.
Staphylococcus aureus
: F e r m e n t a g l u c o s a , s e p r o d u c e a c i d e z ( m e d i o a m a r i l l o ) . Microco
ccus spp. : No fermenta glucosa (medio rojo-naranja)Los micrococos son
bacterias gram positivas que necesitan oxgeno para vivir. Son clulas
esfricas que a menudo se encuentran solas o por pares. Se dividen
tpicamente en ms de un plano, produciendo ttradas, paquetes cbicos

irregulares de cuatro clulas. No forman esporas y muchas de ellas no son mviles.

Los micrococos son aerobios estrictos o facultativos. Respiran
utilizando al
oxgenocomo aceptor final de electrones. Sintetizan unos pigmentos r
espiratorios llamadoscitocromos y una clase de quinonas ta mbin
implicadas en la respiracin, llamadas menaquinonas. Muchas especies
metabolizan azcares, como por ejemplo la glucosa queso oxida a acetato o
totalmente a CO
O. Metabolizan la glucosa por la va de la hexosa mono fosfato, en lugar
de la va de Embden-Meyerhof usada por las eucariotas y muchas bacterias
hetertrofas. Algunas especies tambin oxidan compuestos orgnicos ms
pequeos, como piruvato, acetato lactato, succinato y glutamato mediante el
ciclo de Krebs
tpico de las mitocondrias. Algunos
micrococos pueden crecer en ambientes
hipersalinos con porcentajes de sal en el agua de
5 % ( e l a g u a s d e m a r t i e n e aproximadamente 3.4%). Todos
descomponen el perxido de hidrgeno mediante la enzima catalasa. El
gnero
Micrococcuss
Tiene varias especies, algunas de ellas con movimiento
M.luteus
se caracteriza por la produccin de un pigmento amarrillo y
M. Roseus
p o r l a d e u n o rojizo. La pared celular de
M. Luteus
se caracteriza por contener unidades peptdicas de L-lisina. Las bacterias
pertenecientes a este gnero tienen sistemas multienzimticos
det r a n s p o r t e d e e l e c t r o n e s l i g a d o s a l a m e m b r a n a c e l u l a r , e s t
o s s i s t e m a s c o n t i e n e n citocromos a, b y c y pigmentos carotenoides
amarrillos y rojizos. La temperatura ptima para muchas especies de
Micrococcus
es de unos 30 C.
Micrococcus roseus
tiene gran parecido con
M. radiodurans
. Algunos bacterilogos consideran que
M. radiodurans
es simplemente una cepas de
M roseus
, puesto que susADN poseen similares proporciones de guanina y citosina y tienen
pigmentos parecidos y otras caractersticas bioqumicas en comn. Sin
embargo, la composicin de la pared

USOS INDUSTRIALES:
Por su versatilidad metablica algunas especies del Genero
Micrococcus tienen la capacidad de utilizar un extenso rango de substratos.
Pueden tambin realizar la biodegradacin de muchos otros contaminantes
ambientales y de esta manera participar en la conservacin del ecosistema.
Son sintetizadores de largas cadenas (C21-C34) dehidrocarbonos alifticos
utilizados para la produccin de aceites lubricantes.
5.en sustancias salinas.
6.- IDENTIFICACION Y MUESTREO DE ALIMENTOS PARA
ANALISISIDENTIFICACION DE MICROCOCCUS EN QUESO ARTESANAL
No obstante que Micrococcus normalmente convive en armona con el
husped humano o animal, formando parte de su flora sin causar dao, su
importancia radica porque algunas especies producen pigmentaciones y
coloraciones anormales en la superficie de los alimentos, afectando su calidad
CONCLUSIONES:
La bacteria aislada a partir de la muestra de queso artesanal se trata del
Gnero Micrococcus.Tanto en el medio de aislamiento como en los medios de
diferenciacin bioqumica el comportamiento de la bacteria que se aisl indica
que se trata del genero Micrococcus.
9.- BIBLIOGRAFA: http://www.slideshare.net/pedritopacheco/micrococcus. Greenblat, C.L.,
Baum, J., Klein, B.Y., Nachshon, S., Koltunov, V., Cano, R.J., (2004).Luteus del micrococo.
Ecologa microbiana
48 : 120127. http://www.cepis.org.pe/bvsaidis/resisoli/iii131.pdf .http://sisbib.unmsm.edu.pe/BVRevistas/ciencia/v01_n2/flavonoides.htm.http://www
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