Manual Muestras Microbiologia

HOSPITAL GENERAL
UNIVERSITARIO DE ELCHE

MANUAL DE TOMA DE MUESTRAS

Rev. Fecha Hojas/s Causa del cambio
0 3/98

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4/06

Realizado por:
Dr. Juan Carlos Rodrguez
Dra. Montserrat Ruiz
Dra. Pilar Lpez
Fdo.:

Revisado/Aprobado por:
Dra. Gloria Royo
Fdo.:

Fecha:
INDICE
INTRODUCCIN. ........................................................................................... 10
Introduccin. ................................................................................................ 11
Objetivo del manual. .................................................................................. 12
CONCEPTOS GENERALES. .......................................................................... 13
Normas bsicas generales. ........................................................................ 14
Volante de peticin. ................................................................................... 14
Obtencin de la muestra. ......................................................................... 15
Recogida de la muestra. ........................................................................... 15
Transporte. .................................................................................................... 15
Horario de recepcin de muestras y telfonos de contacto. ............. 16
Establecimiento de prioridades. ............................................................... 16
Criterio de rechazo de muestras. ............................................................. 17
UROCULTIVOS. .............................................................................................. 18
Introduccin. ................................................................................................ 19
Cultivo de bacterias: orina obtenida por miccin media. .................. 20
- Obtencin de la muestra. ....................................................................... 20
- Conservacin y transporte. ..................................................................... 21
- Observaciones. ......................................................................................... 21
Cultivo de bacterias: orina de pacientes con catter permanente. 22
- Conservacin y transporte. .................................................................... 23
- Observaciones. ......................................................................................... 23
Cultivo de bacterias: orina vesical. .......................................................... 23
- Indicaciones . ............................................................................................ 23
Cultivo de micobacterias: orina. .............................................................. 23
- Observaciones. ......................................................................................... 23
- Criterios de rechazo de las muestras. .................................................... 23
COPROCULTIVOS. ........................................................................................ 25
Introduccin. ................................................................................................ 26
Cultivo de bacterias: heces . ................................................................... 26
- Observaciones . ........................................................................................ 27
Cultivo de bacterias: hisopos rectales. .................................................... 27
- Observaciones . ........................................................................................ 28
Estudio virolgico: heces. .......................................................................... 28
- Criterio de rechazo de las muestras. ..................................................... 29
PARASITOS INTESTINALES. ............................................................................ 30
Estudio parasitolgico: heces. .................................................................. 31
Estudio parasitolgico: aspirado duodenal. ........................................... 32
Estudio parasitolgico: oxiuros (prueba de Graham). .......................... 32
- Criterios de rechazo de las muestras. .................................................... 33
TRACTO GENITAL FEMENINO. ..................................................................... 34
Introduccin. ................................................................................................ 35
Exudados vaginales. ................................................................................... 35
- Criterios de rechazo. ................................................................................ 36
- Observaciones. ......................................................................................... 36
Exudados cervicales. ................................................................................... 37
- Observaciones. ......................................................................................... 39
TRACTO GENITAL MASCULINO. .................................................................. 40
Exudados uretrales. ..................................................................................... 41
- Observaciones. ......................................................................................... 42
Muestras para el diagnstico de prostatitis. ........................................... 42
- Observaciones. ......................................................................................... 44
HEMOCULTIVOS. .......................................................................................... 45
Hemocultivos. ............................................................................................... 46
- Introduccin. .............................................................................................. 46
- Observaciones. ......................................................................................... 48
CATTERES. .................................................................................................... 50
Catteres intravasculares. ......................................................................... 51
- Introduccin. .............................................................................................. 51
Otros catteres y drenajes. ........................................................................ 52
SISTEMA OCULAR. ........................................................................................ 53
Exudados conjuntivales. ............................................................................. 54
- Introduccin. .............................................................................................. 54
Raspados corneales. .................................................................................. 55
- Introduccin. .............................................................................................. 55
Lente de contacto: lente intraocular. ..................................................... 56
- Introduccin. .............................................................................................. 56
TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR. ............................................................ 57
Odo externo: exudado tico. .................................................................. 58
- Introduccin. .............................................................................................. 58
Odo medio: exudado tico. .................................................................... 59
- Introduccin. .............................................................................................. 59
Exudado faringo-amigdalino. ................................................................... 60
- Introduccin. .............................................................................................. 60
- Observaciones. ......................................................................................... 61
Exudados nasofaringeos. ........................................................................... 61
- Introduccin. .............................................................................................. 61
- Observaciones. ......................................................................................... 62
Exudados de senos paranasales. ............................................................. 62
- Introduccin. .............................................................................................. 62
Exudado de la cavidad oral. .................................................................... 63
- Introduccin. .............................................................................................. 63
TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR. ............................................................. 64
Introduccin. ................................................................................................ 65
Esputo. ........................................................................................................... 65
Broncoaspirado. .......................................................................................... 67
Lavado broncoalveolar. ............................................................................ 68
Cepillado bronquial mediante catter telescopado. .......................... 69
LIQUIDOS ORGANICOS. .............................................................................. 71
Liquido cefalorraqudeo. ........................................................................... 72
- Observaciones. ......................................................................................... 73
Otros lquidos orgnicos estriles. ............................................................. 74
- Observaciones . ........................................................................................ 76
PIEL Y TEJIDOS BLANDOS. ............................................................................ 77
Ulceras y heridas superficiales. .................................................................. 78
- Observaciones. ......................................................................................... 79
lceras crnicas. ......................................................................................... 79
- Introduccin. .............................................................................................. 79
- Observaciones. ......................................................................................... 80
Exantemas. ................................................................................................... 81
- Introduccin. .............................................................................................. 81
Abscesos cerrados. ..................................................................................... 81
- Introduccin. .............................................................................................. 81
- Observaciones. ......................................................................................... 83
Fstulas y tractos. .......................................................................................... 83
- Introduccin. .............................................................................................. 83
- Conservacin y transporte. ...................................................................... 83
- Observaciones. ......................................................................................... 83
MICOSIS CUTNEAS. .................................................................................... 84
Recogida de muestras para estudio de hongos. .................................. 85
- Introduccin. .............................................................................................. 85
SEROLOGIA INFECCIOSA. ........................................................................... 88
Serologa infecciosa. .................................................................................. 89
- Introduccin. .............................................................................................. 89
- Procesamiento en el laboratorio. ........................................................... 90
MICROBIOLOGIA MOLECULAR INFECCIOSA. .......................................... 91
Microbiologia molecular infecciosa. ....................................................... 92
- Introduccin. .............................................................................................. 92
- Procesamiento en el laboratorio. ........................................................... 93
BIBLIOGRAFA. .............................................................................................. 94
ANEXOS. ........................................................................................................ 96

INTRODUCCIN

INTRODUCCIN
El diagnstico de las enfermedades infecciosas se basa en el estudio de los
sntomas y signos clnicos, as como en la demostracin de la presencia de su
agente productor, de sus productos o de la respuesta del sistema inmune frente a
dicho agente. El diagnstico clnico es, en algunos casos bastante demostrativo
pero, en la gran mayora de los casos, el diagnstico es difcil y necesita el apoyo
del laboratorio. Es bien conocido que, un mismo microorganismo, puede dar una
gran variedad de cuadros clnicos, en una o varias localizaciones, y que la
sensibilidad a los antimicrobianos de un microorganismo es variada, dependiendo
de los mecanismos de resistencia que haya desarrollado cada aislado. Por todo
ello, la confirmacin de la etiologa de un proceso infeccioso, as como la ayuda
para su tratamiento es una informacin necesaria aportada por el laboratorio de
Microbiologa.
Toda la informacin diagnstica que el laboratorio de Microbiologa puede
proporcionar, depende de la calidad de la muestra recibida. El trmino calidad
incluye la seleccin apropiada de la muestra, la recogida y su transporte al
laboratorio. Por ello, una muestra mal tomada, escasa o mal transportada,
determinar un posible fallo en la recuperacin de los agentes patgenos, que
puede inducir a errores diagnsticos, e incluso a un tratamiento inadecuado del
enfermo. Este hecho debe ser bien conocido por las personas que realizan las
tomas en clnicas, centros de salud, salas y consultas hospitalarias, lo que hace
necesaria la preparacin continuada de dicho personal sanitario, al que hay que
concienciar del coste econmico intil, as como de los errores en los resultados
obtenidos de una determinacin microbiolgica realizada a partir de una
muestra inadecuada.
La calidad de un laboratorio depende, en gran medida, de factores relativos a
la recogida de muestras, y a su procesamiento inicial. As pues, se consideran
indicadores del nivel de calidad en cuanto a la fase preanaltica: el nmero de
muestras rechazadas, las muestras aceptadas contaminadas, la solicitud de
determinaciones repetida en un perodo corto de tiempo, la adecuacin de las
peticiones a las muestras enviadas, etc.
Es imprescindible que la comunicacin entre los microbilogos y los clnicos sea
muy fluida y que est claramente definido y asumido por todos, que el clnico
DEBE preguntar al microbilogo para asesorarse sobre las muestras y tcnicas ms
tiles para el diagnstico de la enfermedad que padece el paciente y que el
microbilogo DEBE comunicarse con los clnicos, no slo como asesor, sino
preguntando sobre aqullas cuestiones que le van a permitir realizar un
diagnstico ms adecuado y rechazando las peticiones que no son rentables
desde el punto de vista del diagnstico microbiolgico.
OBJETIVO DEL MANUAL
El objetivo de este manual es hacer recomendaciones sobre cuales son las
muestras ms adecuadas para el diagnstico microbiolgico, su forma de
recogida, transporte y conservacin, reseando el material necesario, la tcnica
de obtencin, el volumen, el nmero y el modo de transporte de cada una de
ellas, segn las distintas localizaciones y caractersticas especiales de aqullas o
de los microorganismos a investigar.
Este manual no pretende ser exhaustivo, tan solo trata de ayudar al clnico y al
personal de enfermera en la labor de eleccin, obtencin y manejo de las
muestras ms adecuadas para los procesos infecciosos ms frecuentes.
CONCEPTOS GENERALES

NORMAS BSICAS GENERALES
Son muchas las consideraciones generales que deben guiar la recogida y
envo de muestras microbiolgicas, con criterio didctico, ya que muchas de ellas
son simultneas, podemos dividirlas en los siguientes apartados: volante o vale de
peticin, obtencin de la muestra, recogida de la misma y transporte.
Volante de peticin.
Cada muestra deber ir acompaada de un volante de peticin, que deber
ser legible y estar correcta y completamente cumplimentado.
El volante de peticin para las determinaciones microbiolgicas debe ser
exclusivo para el laboratorio de Microbiologa, no siendo apropiado el uso de
volantes comunes con otras especialidades, ya que esto conlleva errores y
retrasos en el procesamiento de las muestras, la imposibilidad de realizar
comprobaciones a partir del original y deficiencias en su archivo.
Todo volante o vale de peticin deber poseer las cinco reas siguientes:
1. Filiacin y datos administrativos, donde se debe especificar el nombre y
apellidos, sexo y edad del paciente, el mdico solicitante (incluyendo nmero de
colegiado) y el centro, servicio, o consulta al que pertenezca, as como cualquier
otro dato de identificacin, como el nmero de cama, el SIP y/o el nmero de
historia clnica. Debe constar el servicio de destino cuando sea distinto del de
origen.
2. Datos clnicos, como fecha del comienzo de la enfermedad, diagnstico
clnico de presuncin, estado inmunitario del paciente, etc. Todos estos datos son
de gran inters para orientar las tcnicas que hay que realizar.
3. Datos de la muestra, como fecha de obtencin, naturaleza del producto y
exacta localizacin de la toma, as como el procedimiento de extraccin, o si se
ha realizado alguna tcnica especial ( puncin transtraqueal, vesical, etc.).
4. Teraputica seguida, antimicrobianos, que se han administrado y tiempo
desde la ltima toma o inyeccin. El ideal es que todas las muestras se tomarn
antes de empezar un tratamiento antibitico.
5. rea para la solicitud, indicando claramente el tipo o tipos de
determinaciones requeridas, y en caso de que se desee la bsqueda de un
microorganismo determinado, ste se resear (M. tuberculosis, micoplasma,
etc.).
6. Etiquetado: es imprescindible pegar en cada volante y sus copias una
etiqueta identificativa generada por ordenador.
Es recomendable que las muestras estn en el laboratorio de Microbiologa lo
antes posible para iniciar su procesamiento.
Obtencin de la muestra.
En lneas generales, es necesario que la muestra:
Se obtenga del sitio exacto de la lesin y siguiendo las precauciones
universales
Se recoja con las mximas condiciones de asepsia, para evitar la
contaminacin
Nunca se ponga en contacto con antispticos o desinfectante
Se tome lo antes posible
Sea recogida preferentemente por aspiracin, en lugar de tomada con
hisopos
Se tome en cantidad adecuada, para facilitar el estudio detallado
Se recoja antes de la instauracin del tratamiento antibitico. Cuando no sea
posible, se obtendr justo antes de la administracin del antimicrobiano, o tras
48 horas de su retirada, indicndolo en el volante de peticin.
Sea identificada con las etiquetas correspondientes, o en su defecto, debe ser
correctamente rotulada, con los datos del paciente, el lugar anatmico de
procedencia de la muestra, la fecha y el servicio solicitante. La identificacin
debe ser adherida al frasco y no a los tapones.
Recogida de la muestra.
Cada tipo de muestra requiere un material estril para su recogida y
transporte. Aunque ste se estudia con detenimiento en cada uno de los
apartados correspondientes, en el anexo I se recogen los principales envases,
contenedores, hisopos, tubos, etc, de uso en el laboratorio de Microbiologa.
Transporte.
Todas las muestras debern ser enviadas lo ms rpidamente posible al
laboratorio, preferentemente antes de dos horas. La mayora de los
microorganismos, salvo excepciones, resisten bien las temperaturas bajas, por lo
que los productos pueden mantenerse en la nevera hasta su envo al laboratorio.
En todos los casos, la forma de envo de la muestra debe evitar el vertido (y
posible contaminacin) del contenido, por lo que el recipiente debe cerrarse con
seguridad.
Es obligatorio que las muestras sean transportadas en nevera y en recipientes
homologados de contencin biolgica. En caso de envos mltiples, el vertido de
una de las muestras implicar el rechazo de todas ellas. Siempre quedarn claras
la identidad de la muestra, de la persona a quien pertenece, y los servicios
solicitante y receptor
Cuando la viabilidad de los microorganismos es muy escasa o la posibilidad de
desecacin de la muestra es grande (favorecindose la destruccin bacteriana),
se usarn medios de transporte especficos. Se trata de medios, tales como los de
Stuart o Amies, que no son nutritivos, sino que preservan las bacterias existentes,
sobre todo si son escasas, a la vez que impiden el crecimiento exagerado de otra
flora bacteriana no deseada. Estos medios existentes en el comercio pueden ser
para bacterias aerobias o anaerobias, y aunque pueden conseguir
supervivencias de hasta 24 horas a temperatura ambiente, debern enviarse
tambin lo ms rpidamente posible al laboratorio.
Horario de recepcin de muestras en el laboratorio y telfonos de contacto
El horario del laboratorio de Microbiologa es:
De lunes a viernes: 8-22 h
Sbados: 8-15 h.
Telfonos de contacto: 966679048/493
Establecimiento de prioridades
Debe quedar claramente establecido qu muestras se consideran urgentes,
cules son de procesamiento rutinario y cules electivas. Las muestras
urgentes son aquellas que necesitan un procesamiento urgente o una pronta
respuesta (en la mayora de los casos con informes preliminares va telefnica) y
procedan en su mayora del servicio de Urgencias o Unidades Crticas. Las
muestras rutinarias son aqullas que tienen un procesamiento especfico bien
protocolizado y que corresponden a la mayora de muestras que se envan desde
los centros de salud y desde las consultas externas (ejemplo: orina para cultivo,
heces para cultivo...), en las que la peticin corresponde con un tipo de
determinacin microbiolgica muy clara. Las muestras electivas son aqullas
que se envan al laboratorio y que necesitan de la interpretacin del
microbilogo para orientar su procesamiento.
Todas las llamadas telefnicas sobre informacin de resultados microbiolgicos
deben quedar reflejadas en el Libro de llamadas externas, donde deber
anotarse la fecha, la persona que la realiza, el motivo de la llamada y el servicio y
la persona que atiende y que por tanto se responsabiliza de su actuacin
posterior.
Criterios de rechazo de muestras
Los criterios de rechazo de muestras para estudio microbiolgico son
fundamentales para prevenir el informe de datos con escaso o nulo valor (o
incluso motivo de confusin) para el diagnstico y el tratamiento del paciente, as
como aqullas que por sus condiciones (derramamiento...) puedan atentar
contra la seguridad biolgica del personal del laboratorio.
El rechazo de una muestra por parte del laboratorio no debe ser interpretado
como una negativa a establecer un diagnstico, ni como una dejacin de
funciones por parte del laboratorio, ni tiene finalidad recriminatoria para el
solicitante; sino como una simple peticin de una nueva muestra que aportar
informacin de mayor relevancia clnica para el diagnstico y el tratamiento de
los pacientes. De hecho, a no ser que el contenedor est roto y/o la muestra se
haya derramado, la muestra debe mantenerse en el laboratorio hasta que se
haya notificado al mdico peticionario la incidencia.
Los criterios de rechazo son:
Muestra no etiquetada o etiquetada de forma que puede llevar a confusin
Transporte inadecuado
Tiempo excesivo desde la obtencin de la muestra
Contenedor inadecuado
Contenedor no estril
Contenedor roto o muestra derramada
Muestras con contaminacin orofarngea evidente
Contaminacin exgena obvia
Muestras duplicadas tomadas a la vez
Muestras recogidas en el mismo da con la misma peticin (excepto sangre
para cultivo)
Muestras no adecuadas para la peticin realizada
Cantidad insuficiente para el estudio solicitado
Toda muestra biolgica previamente manipulada, o en caso de suero, cuando
no sea tubo primario.
UROCULTIVO

INTRODUCCIN
Las infecciones del tracto urinario (ITU) son las ms frecuentes solamente
superadas por las del tracto respiratorio. Son ms prevalentes y recurrentes en la
mujer, y su incidencia aumenta con la edad.
El cultivo de orina establece el diagnstico etiolgico de certeza de una
infeccin urinaria tanto sintomtica como asintomtica (bacteriuria asintomtica)
en pacientes con riesgo de infeccin. Permite a su vez la realizacin de estudios
de sensibilidad.
La piuria, junto con la bacteriuria, es un dato muy importante para el
diagnstico de ITU, ya que est presente en la mayora de los casos. Una
excepcin es la bacteriuria asintomtica en la que la piuria puede estar ausente.
Existen varios factores que determinan la epidemiologa de la infeccin
urinaria, entre ellos destacan la edad, determinadas enfermedades, cateterismos
u otros tipos de instrumentacin del tracto genitourinario. Estos han de tenerse
siempre en cuenta a la hora de interpretar los urocultivos.
Los agentes etiolgicos predominantes son las enterobacterias siendo E.coli la
causa ms importante. Otros microorganismos que con frecuencia producen
infeccin de orina son Enterococcus faecalis, Proteus mirabilis, Klebsiella
pneumoniae, Staphylococcus saprophyticus, etc.
Indicaciones del urocultivo:
No todas las ITU requieren la prctica sistemtica del urocultivo. En el primer
episodio de cistitis no complicada en mujeres jvenes no se recomienda la
practica del urocultivo aconsejndose tratamiento antibitico emprico segn
epidemiologa y resistencias en ese medio.
Se debe realizar urocultivo en los siguientes casos:
Sospecha de pielonefritis
Sospecha de ITU en neonatos, lactantes y nios
Sospecha de ITU en varones
ITU recurrente en mujeres
Sospecha de ITU complicada en mujeres: anomalas estructurales y funcionales
del tracto urinario, cuerpo extrao en el tracto urinario, manipulacin urolgica
reciente, estados de inmunodepresin y tratamientos antibiticos prolongados
Sospecha de ITU en portadores de sonda permanente
Sospecha de sepsis de origen urinario
Bacteriemia de origen desconocido
Obstruccin del tracto urinario
Despus de retirar una cateterizacin
Como control de tratamiento en todos los casos anteriores
Como screening en 1
er
trimestre del embarazo (16 semanas)
Antes de instrumentalizacin o ciruga de vas urinarias
CULTIVO DE BACTERIAS: ORINA OBTENIDA POR MICCIN MEDIA
Obtencin de la muestra
La muestra idnea es la primera miccin de la maana en pacientes adultos y
no sondados, ya que permite la multiplicacin de bacterias durante la noche.
1. Material necesario
Gasas estriles.
Jabn neutro.
Recipiente de boca ancha con tapa de rosca hermtico y estril.
Bolsas de plstico o colectores estriles para nios.
2. Tcnica
2.1. Tcnica para mujeres
La paciente debe quitarse la ropa interior.
Se lavar las manos cuidadosamente con agua y jabn, las enjuagar con
agua y las secar con una toalla limpia.
Se separarn los labios mayores y menores, y los mantendr separados en todo
momento hasta que se haya recogido la orina.
Con una gasa enjabonada se lava bien la vulva pasndola de delante hacia
atrs.
Enjuagar cuidadosamente con agua para eliminar los restos de jabn.
Se indicar a la paciente que orine desechando los 20-25 primeros mililitros,
tras lo cual y sin interrumpir la miccin, se recoger la orina media en el
recipiente, desechando la ltima parte.
El frasco debe sujetarse para que no tome contacto con pierna, vulva o ropa
del paciente. Los dedos no deben tocar el borde del frasco o su superficie
interior.
2.2. Tcnica para hombres
Lavado de las manos con agua y jabn.
Retraer completamente el prepucio, que se mantendr as en todo momento,
hasta que se haya recogido la orina.
Limpiar el glande con jabn neutro.
Eliminar los restos de jabn enjuagndolo con agua.
Se pedir al paciente que orine desechando los primeros 20-25 mililitros para,
sin interrumpir la miccin, recoger la orina media en el recipiente estril,
despreciando la ltima parte.
3. Tcnica para nios
En nios y nias mayores la orina se recoge de forma similar a los adultos.
En nios y nias ms pequeos, la orina se recoger en colectores o bolsas
estriles especialmente diseadas para ellos
Debe realizarse un lavado cuidadoso de los genitales y del rea donde
colocar la bolsa de plstico o el colector.
Se debe vigilar la bolsa cada 30 minutos y tan pronto como el nio haya
orinado, debe retirarse y enviarse al laboratorio para su procesamiento.
Si la miccin no se ha realizado en una hora, se repite la operacin colocando
una nueva bolsa.
3. Volumen mnimo
Es suficiente un volumen de orina de 1-10 ml ( ver Tabla n 1).
Conservacin y transporte
La orina debe llegar al laboratorio en el plazo de una hora. Si no es posible,
mantener a 4 C durante un tiempo mximo de 24 horas o utilizar un medio de
transporte.
Observaciones
Para la investigacin de anaerobios es necesario que la orina se obtenga por
puncin suprapbica.
Cuando se sospecha la presencia de hongos, virus y parsitos ver Tabla 1.

Tabla 1: Recomendaciones sobre el volumen de orina
Determinacin Volumen Comentarios
BACTERIAS 1-10 ml Primera orina de la maana.
HONGOS >20 ml Primera orina de la maana.
MICOBACTERIAS >20 ml
Primera orina de la maana 3
das consecutivos.
ANAEROBIOS 1 ml
Aspirado suprapbico, enviar
inmediatamente o usar sistema
de transporte de anaerobios .
VIRUS 10-15 ml
Primera orina de la maana,
enviar con hielo y transportar al
laboratorio inmediatamente.
PARASITOS

>50 ml
En caso de sospecha de
Schistosoma, debe tomarse
despus de hacer un ejercicio
moderado, como subir y bajar
escaleras durante 10 minutos

CULTIVO DE BACTERIAS: ORINA DE PACIENTES CON CATTER PERMANENTE
Gasas.
Alcohol 70 C o solucin yodada.
Jeringa o aguja estril.
Recipiente estril.
2. Tcnica
Se limpiar el catter con una gasa humedecida en alcohol o solucin
yodada.
Dejamos secar unos minutos.
Pinchar directamente con aguja estril el catter por la zona desinfectada,
aspirando entre 3-5 ml.
Puede enviarse en la jeringa o pasar la orina a un recipiente estril.
Si no puede llevarse al laboratorio, se debe refrigerar a 4C.
Observaciones
Como regla general se considera que la muestra de sonda vesical no es una
muestra adecuada para estudio microbiolgico y que est justificado rechazar su
procesamiento.
CULTIVO DE BACTERIAS: ORINA VESICAL
Indicaciones
Evidencia clnica del cuadro urinario con recuentos bajos o nulos.
Neonatos y lactantes.
Cateterizacin contraindicada o dificil.
Bsqueda de anaerobios.
Urocultivos repetidos con dos o ms bacterias.
Es la orina obtenida por puncin suprapbica o por cistoscopia. Requiere un
buen conocimiento de la tcnica y de las precauciones que hay que adoptar,
con rigurosa asepsia, descartando problemas de hemostasia y con la vejiga
palpable y previa desinfeccin y anestesia local.
Se punciona la vejiga a 1,5 cm de la snfisis pubiana, en la lnea media,
estando el paciente en decbito supino.
Se aspira el contenido vesical con una jeringa de 10 ml. con una aguja larga
(calibre 19).
Enviar al laboratorio lo antes posible en la misma jeringa de la extraccin, tras
expulsar el aire de su interior y con la aguja pinchada en un tapn de goma
estril.
Indicar en el volante la procedencia de la muestra o tcnica empleada para
su recogida (dato importante a la hora de valorar el recuento de colonias).
CULTIVO DE MICOBACTERIAS: ORINA
Envase estril de al menos 20 ml de capacidad, de boca ancha y cierre
hermtico.
2. Tcnica
Deben mantenerse las normas generales correspondientes a la obtencin de
muestras para el cultivo
Recogida por miccin estril de la primera orina de la maana.
En cada miccin se recoge toda la orina desechando en el WC slo los
primeros mililitros.
3. Nmero de muestras y volumen mnimo
3 muestras obtenidas en das consecutivos.
>20 ml.
Conservacin y transporte.
Envo inmediato al laboratorio.
Si no es posible, conservar a 4C.
Observaciones.
Lavado minucioso de los genitales como se indica en el apartado de toma de
muestras para cultivo de bacterias.
Es recomendable suspender cualquier tratamiento antimicrobiano de 3 a 5
das antes de la toma.
CRITERIOS DE RECHAZO DE MUESTRAS
Muestra no identificada correctamente: Las muestras de orina que no lleguen
al laboratorio correctamente identificadas y sea imposible averiguar el
paciente a que pertenecen sern excluidas. Se informar al servicio
responsable de la peticin y se desechar la muestra.
Muestra en contenedor NO estril.
Muestra no adecuada: Catteres de Foley (sonda vesical), orina obtenida por
miccin espontnea o de catter para cultivo de anaerobios. Se informar
igualmente al servicio responsable de la peticin y se desechar la muestra.
Muestras que no hayan llegado al laboratorio en 2 horas desde su recogida y
no hayan sido correctamente conservadas en nevera a 4 C. Se informar
igualmente al servicio responsable de la peticin y se desechar la muestra.
Slo en el caso de que la muestra lleve conservante, el cultivo podr retrasarse
hasta 24 horas.

COPROCULTIVO

INTRODUCCIN
La diarrea es el proceso que se acompaa de la eliminacin frecuente de
heces, disminucin de su consistencia o ambas cosas. El nmero de
microorganismos implicados en cuadros entricos ha aumentado mucho en los
ltimos aos.
Ante la sospecha de un cuadro de infeccin gastrointestinal debe hacerse
una detallada historia clnica y un correcto estudio microbiolgico.
Los antecedentes epidemiolgicos (edad, historia reciente de viajes, aparicin
espordica o como parte de un brote, tipo de alimento sospechoso, perodo de
incubacin), la existencia de factores predisponentes (SIDA, inmunosupresin), la
presencia de signos y sntomas clnicos (fiebre, dolor abdominal, manifestacin de
nauseas y vmitos) y el tipo de diarrea (acuosa, mucosa o sanguinolenta) pueden
orientar acerca del microorganismo implicado. No obstante, el diagnstico
etiolgico definitivo se debe obtener mediante pruebas de laboratorio.
Los agentes etiolgicos ms frecuentes en nuestro medio son
Salmonella spp
Campylobacter spp
Shigella spp
Yersinia spp.
Aeromonas spp.
Rotavirus y adenovirus
Otros agentes etiolgicos que pueden identificarse asociados a determinadas
situaciones clnicas y/o epidemiolgicas son:
Clostridium difficile
Vibrio spp.
Escherichia coli enterohemorrgico (O157: H7)
CULTIVO DE BACTERIAS: HECES
Recipiente de boca ancha para recoger las heces (tipo orinal o similar). No es
necesario que est estril, slo es preciso que est limpio.
Recipiente estril de boca ancha y cierre hermtico para enviar la muestra, si
es posible con cucharilla o, facultativamente, a criterio del laboratorio,
escobilln con medio de transporte de Cary Blair.
2. Tcnica
Si son formadas o pastosas, se seleccionan zonas donde haya sangre, moco o
pus.
El volumen mnimo es de 1-2 g de heces formadas o pastosas y de 5-10 ml de
heces lquidas.
Si el procesamiento se retrasa ms de dos horas, se debe mantener en
refrigeracin a 4C para evitar el sobrecrecimiento de la flora normal que
puede enmascarar o destruir a los enteropatgenos. Sin embargo, el fro
puede afectar la viabilidad de Shigella spp, por lo que en caso de sospecha
clnica de infeccin por este patgeno, la muestra debe procesarse lo ms
pronto posible y debe mantenerse a temperatura ambiente.
Observaciones
Las muestras para coprocultivo, debern tomarse antes de la administracin
de antimicrobianos o agentes antidiarricos.
Indicar siempre el juicio diagnstico de presuncin y la edad del paciente.
Solicitar las investigaciones especiales explcitamente (C. difficile, Vibrio spp. E.
coli enterohemorrgico (O157: H7), etc.), acompaada de datos clnicos y
epidemiolgicos.
Si con la primera muestra no se detecta la presencia de enteropatgenos, es
necesario enviar en los das siguientes, dos muestras adicionales.
CULTIVO DE BACTERIAS: HISOPOS RECTALES
Hisopos rectales con medio de transporte.
Guantes.
2. Tcnica
En general debe desaconsejarse su uso, aunque hay que recurrir a l si no se
puede disponer de heces, como en neonatos o adultos debilitados.
Se ha demostrado eficaz en el aislamiento de Neisseria gonorrhoeae,
Campylobacter spp., Shigella spp. y en portadores anales de Streptococcus
agalactiae.
No es vlido para la bsqueda de antgenos.
Para realizar la toma se introduce el hisopo sobrepasando un poco el esfnter
anal y se rota para hacer la toma de las criptas anales, dejar 10 a 30 segundos
para que se absorban los microorganismos y retirar.
Una vez realizado se introduce en un medio de transporte.
Se introducen inmediatamente en medio de transporte adecuado, pues as se
protege a las bacterias de la desecacin.
Se enva rpidamente al laboratorio.
Observaciones
Son vlidas las referentes a las heces.
Son muestras inadecuadas los hisopos rectales secos, sin medio de transporte
ESTUDIO VIROLGICO: HECES
1. Material necesario.
Recipiente estril de boca ancha y cierre hermtico para enviar la muestra, si
es posible con cucharilla
2. Tcnica
Se seguir el mismo procedimiento que para cultivo bacteriolgico.
3. Volumen mnimo.
Si las heces son formadas o pastosas, para cultivo de virus se aconseja un
mnimo de 3 a 6 gr de heces.
Si las heces son lquidas: 5-10ml.
Es preferible enviar las muestras para estudio virolgico sin medio de cultivo,
pues ste diluye la partculas virales disminuyendo la sensibilidad.
Si el envo se retrasa mucho, es necesario utilizar un medio de transporte para
virus. Se enviarn en recipientes colocados en hielo.
CRITERIOS DE RECHAZO DE MUESTRAS
Muestras no identificadas correctamente
Heces transportadas inadecuadamente
Heces contaminadas con orina o agua
Heces recogidas con papel higinico, ya que contiene sales de bario que
inhiben el crecimiento de enteropatgenos
Heces que no han sido refrigeradas despus de 2 horas post-emisin
Varios coprocultivos del mismo da
Torundas secas o sin medio de transporte
PARSITOS INTESTINALES

ESTUDIO PARASITOLGICO: HECES
Recipiente (orinal o similar) lo ms amplio posible.
Recipiente estril de boca ancha, a ser posible con cucharilla, con o sin
conservante.
2. Tcnica
En los tres das previos al estudio parasitolgico, el enfermo seguir una dieta
en la que no podr tomar: medicamentos, papilla de bario, patatas, verduras,
legumbres y frutas, pan tostado, pastas, arroz, huevos, hgado y sesos.
En algunos casos es preferible y necesario administrar un purgante, con el fin
de aumentar la posibilidad del hallazgo de parsitos. Ser un purgante salino,
como sulfato de sodio o fosfato y carbonato de sodio; no deben usarse
aceites minerales o compuestos de bismuto o magnesio, ya que las gotas o
cristales procedentes de ellos pueden enmascarar los parsitos o confundirse
con trofozotos.
Con una cucharilla se recoger una pequea cantidad de heces recin
emitidas y se enviarn en un recipiente estril con tapa de rosca.
Cuando macroscpicamente se hayan visto formas compatibles con parsitos
en el ano o en las heces, se recogern en el recipiente y se aadir una
pequea cantidad de suero fisiolgico.
3. Volumen mnimo
Es suficiente un volumen de 2-4 g. de heces.
Un estudio parasitolgico completo debe constar de tres muestras recogidas
en das sucesivos, ya que la eliminacin de parsitos puede ser intermitente.
Las muestras lquidas deben ser procesadas inmediatamente, puesto que los
trofozoitos de algunos parsitos se deterioran rpidamente. Esto es
fundamental en el diagnstico de las diarreas por Entamoeba histolytica ya
que es imprescindible procesar las muestras en menos de 30 minutos.
La muestra no lquida pueden mantenerse a temperatura ambiente o a +4C.
Si se observan parsitos de forma macroscpica (gusanos adultos o anillos de
tenias), deben enviarse al laboratorio a temperatura ambiente en solucin
fisiolgica.
ESTUDIO PARASITOLGICO: ASPIRADO DUODENAL
Ser la muestra adecuada para la bsqueda de Giardia intestinalis,
Strongyloides stercolaris, y Ascaris lumbricoides cuando los exmenes de heces
hayan sido repetidamente negativos.
Recipientes estriles de boca ancha, tubo de tapn de rosca, tubo de vaco.
Medio de transporte para parsitos.
Solucin salina.
2. Tcnica
Introducir el tubo a travs de la boca hasta alcanzar el duodeno y aspirar.
Para la bsqueda de G. intestinalis es necesario llegar a la tercera porcin del
duodeno.
Como mtodo alternativo, existe la posibilidad de la cpsula duodenal
(entero-test).
3. Volumen mnimo
De 0,5 a 3 ml de aspirado duodenal.
En un recipiente estril de boca ancha, tubo de vaco o tubo de tapn de
rosca, si se enva y procesa rpidamente.
Fijado en PVA o formalina al 5% si hay demora en el transporte o
procesamiento.
Mantener las muestras a temperatura ambiente.
ESTUDIO PARASITOLGICO: INVESTIGACIN DE OXIUROS (PRUEBA DE GRAHAM)
En la parasitacin por Enterobius vermicularis. no se buscarn los huevos en las
heces sino en los mrgenes del ano, que es donde la hembra va a depositarlos
Se utiliza un pedazo de celofn transparente.
Por la maana, antes de levantarse el paciente, se separan las nalgas y se
hace presin hacia ambos mrgenes, para que en la cara engomada
queden adheridos los huevos. La cinta adhesiva se coloca sobre un
portaobjetos con la cara engomada hacia el cristal, y se enva al laboratorio
en un sobre o envuelto en varias capas de papel (Figura 1).
Mantener a temperatura ambiente hasta su envo al laboratorio de
Microbiologa
CRITERIOS DE RECHAZO DE LAS MUESTRAS
Muestras no identificadas correctamente
Heces transportadas inadecuadamente
Heces contaminadas con orina o agua
Ms de una muestra tomada el mismo da
Torundas

Figura 1: Tcnica de Graham

TRACTO GENITAL FEMENINO

INTRODUCCIN
Las muestras genitales se obtienen de zonas altamente colonizadas por flora
comensal por lo que la seleccin de las muestras y los mtodos de obtencin son
crticos .
El estudio de anaerobios debe limitarse a ciertas muestras, las muestras
habituales (exudados vaginales, cervicales etc.) no son validas.
Tipo de muestras: Exudados vaginales, Exudados cervicales, Exudados
uretrales, Exudados rectales, Endometrio.
EXUDADOS VAGINALES
Muchos de los agentes productores de infecciones genitales (vaginitis,
cervicitis, uretritis.) en la mujer tienen un rea especifica donde la rentabilidad
diagnstica es mayor.
Las muestras para investigacin de Virus herpes simple (VHS) y Papilomavirus
(VPH) necesitan de protocolos y material especifico.
Los principales microorganismos productores de infecciones vaginales en la
mujer son los siguientes

Vagintis:
Frecuentes Raros
Cndida spp
Trichomonas vaginalis

Infec. polimicrobianas
(Vaginosis bacteriana)
Gardnerella vaginalis

Virus herpes simple (VHS)
Papilomavirus (VPH)

Camilla ginecolgica.
Espculo estril
Torundas de alginato clcico o Dracon, con medio de transporte
2. Tcnica
Explicar a la paciente la exploracin a realizar
Colocar a la paciente en posicin ginecolgica e introducir un espculo "sin
lubricante" (utilizar agua templada si es necesario).
Recoger la muestra, bajo visin directa, con una torunda, hacindola rotar
durante unos segundos sobre la zona con mayor exudado, o en su defecto,
del fondo del saco vaginal posterior.
Repetir la operacin con la segunda torunda.
3. Nmero de muestras
Se obtendrn al menos dos torundas, una destinada al estudio microscpico y
el resto para los cultivos.
Para cultivo de micoplasma/ureaplasma y/o clamidias obtener muestras
complementarias con las torundas apropiadas.
El envo de la muestra debe ser inmediato, siempre que sea posible.
Cuando la muestra NO pueda procesarse antes de 15 minutos, debern
emplearse torundas con medio de transporte tipo Stuart-Amies, que se
mantendrn a temperatura ambiente, o preferentemente, en estufa 35-37C
hasta su procesamiento. En todo caso la siembra se realizar antes de 3-6
horas.
Criterios de rechazo
No son validos las torundas secas sin medios de transporte.
Muestras de ms de 1 horas a partir de la hora de obtencin sin medio de
transporte adecuado.
Observaciones
Los exudados vaginales no son muestras adecuada para la investigacin de
Neisseria gonorrhoeae.
Si se sospecha infeccin por Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis
Mycoplasma hominis o Ureaplasma urealtycum, las muestras mas adecuadas
son el exudado endocervical.
Si se sospecha una vaginosis bacteriana es imprescindible realizar en el
momento de la misma, la determinacin de pH vaginal, la produccin de
aminas voltiles por la adicin de KOH al 10% y observar caractersticas del
flujo, todos estos datos consignarn en el volante.
La investigacin de Streptococcus agalactiae o Listeria monocytogenes slo
se realizara con peticin especifica y motivada
No deben utilizarse en los das previos a la recogida de la muestra, soluciones
antispticas vaginales, vulos ni pomadas.
EXUDADOS CERVICALES
Los exudados cervicales son las muestras ms adecuadas cuando se sospecha
infeccin por N. gonorrhoeae y C. trachomatis.
Los principales microorganismos productores de infecciones cervicales
(cervicitis) en la mujer son los siguientes:

Frecuentes Menos frecuentes Raros
C. trachomatis
N. gonorrhoreae
Virus herpes simple (VHS)
Papilomavirus (VPH)
T. vaginalis
C. albicans
U. urealyticum

Camilla ginecolgica.
Espculo estril.
Torundas secas sin medio de transporte (para limpieza de exocrvix).
Torundas de alginato clcico o Dracon con medio de transporte tipo Stuart-
Amies.
Torundas con medios de transporte especficos para micoplasmas y clamidias
(consultar con el Laboratorio de Microbiologa).
2. Tcnica.
Con la paciente en posicin ginecolgica se introduce suavemente el
espculo sin lubricar (o lubricado con agua templada).
Limpiar el exocrvix de secreciones vaginales, con una torunda seca.
Comprimir cuidadosamente el crvix con las palas del espculo e introducir
una torunda en el canal endocervical con un suave movimiento de rotacin.
Se repetir la operacin con las diferentes torundas.
3. Nmero de muestras y volumen
Debern recogerse dos torundas, una destinada al examen microscpico y
otra al cultivo.
Para investigacin de Mycoplasma y Chlamydia se recoger con las torundas
correspondientes, con medio de transporte especfico.
4. Etiquetado
Incluir en la etiqueta el tipo de muestra y los datos del paciente
Indicar el diagnostico de sospecha

El envo de la muestra debe ser inmediato, siempre que sea posible.
Cuando la muestra NO pueda procesarse antes de 15 minutos, debern
emplearse torundas con medio de transporte tipo Stuart-Amies, que se
mantendrn a temperatura ambiente, o preferentemente, en estufa 35-37C
hasta su procesamiento. En todo caso la siembra se realizar antes de 3-6
horas.
No puede garantizarse la viabilidad de Neisseria gonorrhoeae transcurridas 6-8
horas.
No son validas las torundas secas sin medios de transporte
Demora de ms de 1 hora a partir de la hora de obtencin de la muestra sin
medio de transporte adecuado.
Observaciones
Debe evitarse el uso de torundas de algodn ya que contienen cidos grasos
instaurados que pueden inhibir el crecimiento de Neisseria gonorrhoeae.

TRACTO GENITAL MASCULINO

EXUDADOS URETRALES
Las muestras genitales se obtienen de zonas altamente colonizada por flora
comensal por lo que la seleccin de las muestras y los mtodos de obtencin son
crticos. La supuracin espontnea no es una muestra valida por el alto numero
de comensales y las dificultades de la interpretacin de los cultivos. Los agentes
productores de infecciones genitales en el hombre tienen un rea especifica (2-3
cm en el interior de la uretra) donde la rentabilidad es mayor.
Los principales microorganismos productores de uretritis son los siguientes:

N. gonorrhoreae
C. trachomatis
U. urealyticum
Bacilos gramnegativos
T. vaginalis
M. genitalium

Torunda uretrales finas, de alginato clcico o Dracon con medios de
transporte tipo Stuart-Amies.
Gasas estriles.
Asa de siembra de platino.
Torunda y medio de transporte especial para C. trachomatis (consultar con el
Laboratorio de Microbiologa)
2. Tcnica
Cuando exista exudado franco puede recogerse con una torunda o con un
asa de siembra de platino/ iridio. El exudado puede estimularse exprimiendo la
uretra. Cuando no se obtenga exudado se introducir una torunda
suavemente con un movimiento de rotacin hasta penetrar unos 2 cm. dentro
de la uretra (3-5 cm para investigacin de C. Trachomatis torunda especial).
Repetir la operacin con una segunda y una tercera torunda.
Debern enviarse tres torundas, una destinada al examen microscpico otra
para cultivo y otras para la investigacin de clamidia/micoplasma.
No refrigerar las muestras, especialmente si se sospecha N.gonorrhoeae.
El transporte debe ser inmediato.
Cuando no puedan procesarse las muestras antes de 15 minutos, se utilizarn
torundas con medio de transporte Stuart-Amies que se mantendrn a
temperatura ambiente o preferentemente en estufa a 35-37C.
Las muestras se procesarn siempre que se pueda antes de 3 horas, y como
mximo en un plazo de 6-12 horas.
No son validos las torundas secas sin medios de transporte
Muestras de ms de 1 hora a partir de la hora de obtencin sin medio de
transporte adecuado
Observaciones
La muestra ha de recogerse preferentemente antes de la primera miccin de
la maana. Si es imposible, esperar al menos una hora tras la ltima miccin
para recogerla.

MUESTRAS PARA EL DIAGNSTICO DE PROSTATITIS CRONICA(TCNICA DE MEARES-
STAMEY)
La obtencin de muestras de secreciones prostticas obtenidas tras masaje
esta indicado en el diagnostico de las prostatitis crnicas y se deben acompaar
de muestras de orina pre- y postmasaje. El masaje prosttico est
contraindicado el los casos de prostatitis aguda.
Los principales microorganismos productores de prostatitis son los siguientes:

E. coli
Otras enterobacterias
Enterococcus spp.
S. aureus
N. gonorrhoreae; H. influenzae
M. tuberculosis; C. trachomatis
U. urealyticum; T. vaginalis

Se preparar el mismo material que para un urocultivo y cuatro contenedores
estriles que debern ir identificados de la siguiente forma:
- "F-1" o "Frasco-1" (primera orina).
- "F-2" o "Frasco-2" (miccin media premasaje).
- "F-3" o "Frasco-3" (masaje prosttico).
- "F-4" o "Frasco-4" (orina post-masaje).
2. Tcnica
Retraer el prepucio y limpiar el meato y el glande igual que para un urocultivo.
Pedir al paciente que orine, recogiendo los primeros 10 ml. en el primer
contenedor "F-1".
Recoger los siguientes 10 ml. en el segundo contenedor "F-2". Esta porcin
corresponde a la "miccin media".
Interrumpir la miccin antes de que se haya vaciado totalmente la vejiga
Hacer un masaje prosttico y recoger el fluido en el tercer contenedor ("F-3"
masaje prosttico). Si no se produce fluido, presionar la uretra en su totalidad
30 segundos. Tras el masaje, acabar saliendo fluido prosttico por el meato.
Finalmente se pedir al paciente que orine y se recogern los 10 ml. primeros
de orina en un cuarto recipiente ("F-4" orina postmasaje).
Frasco 1: 10 ml.
Frasco 2: l0 ml.
Frasco 3: Toda la muestra que se obtenga.
Frasco 4: 10 ml.
Incluir en cada uno de los frascos etiquetas con informacin del paciente y el
nmero de frasco.
Las muestras debern procesarse antes de 1 hora. Para perodos ms
prolongados se debern mantener en nevera a 4C hasta un mximo de 24
horas.
Las muestras de semen no son adecuadas para cultivo, al estar
sistemticamente contaminadas, y los resultados obtenidos no son
representativos de los microorganismos aislados en prstata.
Observaciones
Se realizarn cultivos cuantitativos.
Cuando el nmero de bacterias del frasco-1 es mayor que el del frasco-2 y
frasco-4, se considera que las bacterias son de origen uretral.
Cuando el nmero de bacterias de los frascos 3 y 4 es, por lo menos, 10 veces
superior al de los frascos 1 y 2, se atribuye a colonizacin prosttica.

HEMOCULTIVOS

HEMOCULTIVOS
Introduccin
La sangre de los individuos sanos es estril. En el caso de infecciones graves o
en complicaciones de una infeccin primaria puede haber una afluencia de
bacterias al torrente sanguneo. Esta afluencia puede ser eliminada en un periodo
de tiempo corto, minutos u horas, o bien persistir cuando existe una infeccin
masiva o est presente un foco intravascular infectado. BACTERIEMIA o FUNGEMIA
son los trminos empleados para designar la presencia de bacterias u hongos en
el torrente sanguneo.
La entrada de grmenes en el torrente sanguneo se produce desde:
Un foco primario, va linftica (abscesos, colangitis, neumona, etc.)
Infecciones intravasculares- (endocarditis)
Infecciones por manipulaciones mdicas (catteres, agujas, prtesis, etc.)
Siempre que exista una sospecha de bacteriemia, debe realizarse un cultivo
de sangre ya que es la nica forma de establecer el diagnstico etiolgico y
permite un tratamiento ms eficaz.
Las principales indicaciones para realizar un hemocultivo son:
Fiebre alta, aunque en ancianos y nios puede existir una bacteriemia con
hipotermia y deterioro general.
Shock no explicado.
Infecciones localizadas (neumonas, pielonefritis, meningitis).
Leucopenia, leucocitosis o trombopenia no hematolgica.
Microorganismos mas frecuentes:
Se puede encontrar cualquier tipo de microorganismo patgeno.
Microorganismos habituales de piel como estafilococos coagulasa negativos,
corynebacterias, estreptococos alfa hemolticos, etc. aislados en un solo frasco
seriado pueden ser considerados como probable contaminacin durante la
extraccin o la manipulacin del hemocultivo.
Solamente en el caso de ser aislados en ms de un frasco y en pacientes
inmunodeprimidos, portadores de catteres, prtesis, hemodializados, etc. se
podrn valorar como infeccin dependiendo del historial clnico del paciente.
1. Situaciones a tener en cuenta
Efectuar siempre la extraccin antes de iniciar la terapia antibitica; en
pacientes en los que ya se haya iniciado el tratamiento antibitico y en los
que no se considere conveniente retirarlo, deber realizarse la extraccin justo
antes de la administracin de una dosis.
En bacteriemias intermitentes debe realizarse cuando el paciente tiene
escalofrios o durante el pico febril.
En bacteriemias continuas de origen intravascular, en cualquier momento.
En sepsis agudas y en pacientes en situacin crtica se considerar como un
procedimiento de urgencia.
Frascos de hemocultivo .
Garrote de goma.
Jeringas y agujas de puncin IV o sistema de vacio.
Gasas estriles.
Guantes estriles.
Alcohol etlico o isoproplico al 70%
Solucin yodada.
3. Tcnica de obtencin
Explicar al paciente el procedimiento bsico de la extraccin.
Lavado de manos y utilizacin de guantes estriles
Retirar los tapones externos de los frascos
Desinfectar los tapones de goma con alcohol iodado o con iodforo, dejar
secar al menos un minuto.
Localizar por palpacin la vena que se va a puncionar. Debe de utilizarse una
vena distinta para cada extraccin.
Desinfectar con alcohol la zona de unos 10 cm de dimetro, repetir el paso
anterior con alcohol iodado, dejar secar durante un minuto.
Extraer la sangre sin tocar el campo desinfectado, si fuese necesario palpar la
vena, deber desinfectarse la zona nuevamente y los dedos.
Introducir la sangre en los frascos evitando que entre aire en el frasco
anaerobio, mover los frascos para que la sangre se mezcle con el medio de
cultivo.
4. Numero de muestras y volumen mnimo
Siempre se deben realizar un mnimo de 2 extracciones y es preferible realizar
3, con un intervalo de una hora, si existe gran urgencia de iniciar el tratamiento
puede acortarse hasta 15 a 30 minutos entre ellas.
En adultos cada extraccin debe de llevar dos frascos, aerobio (frasco de
tapn azul) y anaerobio (frasco de tapn rojo).
En nios pequeos en que no se pueden obtener volmenes grandes de
sangre es suficiente una cantidad de 1-5 ml que se introduce en un solo frasco
aerobio.
En caso de sepsis o endocarditis subagudas las extracciones se reparten en 24
horas y si al da siguiente son negativos, se realizan tres nuevos hemocultivos.
La cantidad de sangre a introducir en cada frasco es de 5-10 ml en adultos por
frasco y 1-5 ml en los nios.
Como norma general es adecuado que la sangre mantenga una proporcin
1/10 con el medio de cultivo. Es decir si el frasco tiene 80 ml de medio de
cultivo, como es nuestro caso, introducir 8 ml de sangre.
En neonatos o lactantes, de 0,5 a 1ml en frasco aerobio.
5. Etiquetado
Los frascos de hemocultivo deben de ir etiquetados de forma correcta, si se
remiten todas las extracciones al mismo tiempo al laboratorio debe indicarse si
es 1, 2 3 extraccin en cada frasco.
El transporte debe de ser inmediato o en el menor tiempo posible.
Cuando lleguen al Laboratorio de Microbiologa, mantener a temperatura
ambiente. NUNCA DEBEN DE REFRIGERARSE.
Se aplicarn los criterios generales de rechazo de muestras.
Observaciones
Se deber incluir en la peticin la mxima informacin clnica. En el caso de
sospecha de determinados organismos (Brucella spp, Neisseria meningtidis,
hongos, micobacterias, etc.), indicadlo en el volante para que el laboratorio
de Microbiologa aplique las tcnicas necesarias.
Cuando no haya venas accesibles puede realizarse la extraccin de sangre
arterial.
No son adecuadas las muestras procedentes de catter, solamente en el caso
de que se sospeche infeccin del propio catter, se recomienda tomas del
brazo opuesto y del brazo del catter, para saber si es intra o extraluminal.

CATTERES

CATTERES INTRAVASCULARES
Introduccin
Un 80% de las bacteriemias nosocomiales se relacionan con la presencia de
catteres. Su estudio bacteriolgico permitira filiar el origen de gran parte de las
bacteriemias.
Microorganismos mas frecuentes:
Los microorganismos ms frecuentes causantes de la colonizacin e infeccin
del catter son: S. epidermidis, S. aureus, Candida spp, enterobacterias y
Acinetobacter spp.
Guantes de goma estriles
Gasas estriles
Pinzas y tijeras estriles
Recipiente estril con tapa de rosca
Alcohol iodado al 2% o un iodforo al 10%
2. Tcnica
Lavado de manos y utilizacin de guantes estriles.
Desinfectar con alcohol una zona de piel de unos 10 cm correspondiente a la
zona de entrada del catter. Hacerlo de forma circular comenzando por el
centro.
Repetir la misma operacin, pero con el alcohol iodado o iodforo, dejando
que se seque un minuto.
Retirar el catter con la mxima asepsia, una vez extrado, con la ayuda de las
pinzas y las tijeras estriles cortar 3-4 cm de la porcin intravascular e
introducirlo en el recipiente estril.
La muestra deber enviarse al laboratorio en un periodo inferior a 30 minutos.
Cuando esto no sea posible conservar en nevera a 4C.
OTROS CATTERES Y DRENAJES
Son muestras que no se procesan habitualmente. En casos especiales, se
recomienda contactar con el servicio de Microbiologa, antes de remitirlas.

SISTEMA OCULAR

EXUDADOS CONJUNTIVALES
Introduccin
Las muestras conjuntivales estn indicadas para filiar la etiologa de las
conjuntivitis infecciosas en las que mayoritariamente se observan signos
inflamatorios a este nivel. La etiologa ms habitual es bacteriana o vrica.
Los cultivos conjuntivales preoperatorios no estn indicados porque el nmero
y microorganismos de la conjuntiva normal varan diariamente.
Torundas de alginato clcico o Dacron con medio de transporte Stuart-Amies.
Suero salino estril.
Medio de transporte para Chlamydia y virus, si procede (consultar con el
laboratorio de Microbiologa).
2. Tcnica
Debe obtenerse la muestra antes de la instilacin de los analgsicos locales,
colirios o antibiticos.
Con una torunda mojada en un suero fisiolgico frotar sobre la conjuntiva
tarsal inferior y el frnix.
Para la investigacin de Chlamydia trachomatis, everter el prpado y frotar
con una torunda especial la superficie conjuntival.
Deber utilizarse una torunda para cada ojo.
El transporte deber ser inmediato. Cuando no sea posible, se utilizaran hisopos
con medio de transporte tipo Stuart-Amies, que se mantendr a temperatura
ambiente. Para Chlamydia o virus se utilizar medio de transporte especfico.
Conservacin y Transporte
Es especialmente importante remitir la muestra inmediatamente al Laboratorio
de microbiologa.
Si hay demora, mantenerla en estufa 35-37C.
RASPADOS CORNEALES.
Introduccin
Los raspados conrneales estn indicados en las queratitis y lceras corneales.
Su toma la debe realizar el especialista de oftalmologa.
Esptula de platino flexible de Kimura.
Anestsico local (clorhidrato de propacana al 0,5%).
Portas limpios con crculos marcados.
Vaso de Koplin con metanol al 95% o fijacin por calor.
Medios de transporte y/o cultivo especfico
2. Tcnica
Instilar uno o dos gotas de anestsico. Preferentemente se utilizar clorhidrato
de propacana, ya que es el anestsico local que inhibe menos el crecimiento
bacteriano.
Raspar suavemente con la esptula de Kimura la conjuntiva tarsal inferior, sin
inducir el sangrado.
Realizar el raspado de mltiples reas de ulceracin.
Es importante que cada raspado se inocule directamente en el medio de
cultivo, por lo que se avisar previamente al Servicio de Microbiologa Clnica
que desplazar al personal y/o material necesario para ello.
Los medios de cultivo inoculados sern transportados inmediatamente al
laboratorio de microbiologa.
LENTES DE CONTACTO - LENTE INTRAOCULAR
Introduccin
Ante la sospecha de infeccin ocular producida por una lente de contacto se
remitir la lente completa y se complementar con un raspado corneal de la
lcera.
Obtencin de muestras
Tubo o tarro estril.
2. Tcnica
Remitir la lente y/o cuerpo extrao.
Las soluciones de las lentes de contacto se debe enviar en la mayor cantidad
posible.
Si la lente de contacto ha provocado una lcera, la realizacin de raspado
corneal con esptula estril es indispensable. La muestra se debe tomar del
lecho y borde de la lcera previa limpieza de la lesin.
Enviar inmediatamente al Laboratorio de Microbiologa.
Mientras tanto mantener placas y tubos inoculados en estufa 35-37C.
TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR

ODO EXTERNO: EXUDADO TICO
Introduccin
Los exudados ticos estn indicados en las otitis externas. Los principales
agentes causales son bacterias y hongos.
Torundas de algodn o esptulas.
Un antisptico suave (ej. Cloruro de Benzalconio al 1/100)
2. Tcnica
Limpieza del odo externo con un antisptico suave. Se tomar la muestra
mediante frotis con torunda, raspado o aspiracin del fluido en caso de
abscesos.
Se obtendr la muestra del borde activo y el exudado o las secreciones de las
zonas profundas.
Una torunda para cada odo.
Si las muestras no pueden enviarse inmediatamente se emplearn medios de
transporte para bacterias tipo Stuart-Amies, que se mantendrn a temperatura
ambiente.
No se aceptarn estas muestras para el diagnstico de la otitis media. Suele
tratarse de muestras de mala calidad y en ningn caso resultan
representativas de los microorganismos existentes en odo medio.
ODO MEDIO: EXUDADO TICO
Introduccin
La muestra ms adecuada es el aspirado del odo medio, obtenida por
timpanocentesis. No conviene usar escobilln, pues habitualmente se contamina
con la flora normal del odo externo, haciendo la interpretacin de resultados
difcil y confusa.
El de una miringocentesis (Timpanocentesis).
Torundas estriles.
Contenedor estril.
Medio de transporte para anaerobios.
Povidona iodada al 10%.
2. Tcnica
a) Timpanocentesis:
Debe obtener la muestra un especialista en O.R.L. o personal entrenado para
ello.
Se limpiar el canal auditivo externo con una torunda impregnada en
Povidona iodada.
Se puncionar el tmpano a travs de un otoscopio estril.
La muestra se enviar en un contenedor estril. Cuando sea escasa se tomar
con torunda, aunque no es lo ms recomendable.
Si se desea la investigacin de anaerobios, se enviar el fluido en un medio de
transporte especfico.
Las muestras en torunda no sirven para cultivo de anaerobios.
b) Muestras con tmpano roto:
Tras la limpieza del canal externo se tomar la muestra con torunda a travs
de un otoscopio estril.
Estas muestras no son vlidas para anaerobios.
El fluido suele colonizarse con flora de CAE, con lo que la interpretacin de los
resultados es siempre complicada.
Se intentar obtener la mayor cantidad de exudado posible.
El transporte deber ser inmediato.
Cuando exista demora se utilizar un medio de transporte.
EXUDADO FARINGO-AMIGDALINO
Introduccin
Es la muestra adecuada en caso de faringo-amigdalitis. Se investigar sobre
todo la presencia de estreptococos hemolticos.
Depresor lingual.
Torunda de algodn con medio de transporte
2. Tcnica
Con la ayuda de un depresor lingual, bajo visin directa, se tocar con la
torunda en todas las partes con exudado, membranas o inflamacin. Se
deben frotar las criptas tonsilares y la faringe posterior. No tocar nunca la
mucosa oral, lengua o vula.
Slo una torunda.
No requiere medidas especiales para su transporte y conservacin (
temperatura ambiente ).
Observaciones
Se investigar rutinariamente la presencia de S. pyogenes.
En las sospechas de difteria debern mandarse porciones de membrana, una
torunda farngea, y una torunda nasofarngea por va pernasal.
EXUDADOS NASOFARINGEOS
Introduccin
Es la muestra indicada para la investigacin de Bordetella pertussis,
Mycoplasma pneumoniae, Corynebacterium diphteriae y virus respiratorios o para
la deteccin de portadores de Staphylococcus aureus o Neisseria meningitidis.
Torundas flexibles de alginato clcico.
Para aspirados: Tubo aspirador de Tefln o jeringa y catter.
2. Tcnica
Frotis:
pasar la torunda a travs de la nariz suavemente, hasta llegar a la nasofaringe.
Hay que mantener la torunda cerca del septum y suelo de la fosa.
Rotar la torunda y extraerla.
Aspirado:
Aspirar el moco, pasando el tubo de tefln o un catter conectado a una
jeringa por va pernasal, de igual forma que la torunda.
Se obtendr una muestra.
Remitir lo antes posible al laboratorio de Microbiologa.
Las muestras deben procesarse antes de 2 horas, conservar a t ambiente.
Observaciones
Los microorganismos encontrados en fosa nasal no tienen por que ser los
mismos que se aslan en el seno en caso de sinusitis, por lo que los cultivos de
exudados nasales no sirven para el diagnstico etiolgicos de las sinusitis y no
pueden sustituir nunca a la puncin del seno.
EXUDADOS DE SENOS PARANASALES
Introduccin
La muestra se obtendr por puncin-aspiracin, y la realizar el especialista en
O.R.L. o personal especializado en dicha tcnica.
Povidona iodada al 10%.
Contenedor estril.
Medio de transporte para anaerobios.
Material quirrgico de O.R.L.
2. Tcnica
Desinfectar el lugar de la puncin con povidona iodada.
Introducir una aguja en el antrum maxilar por debajo del cornete inferior, o en
el seno frontal por debajo del marco supraorbital del ojo.
Aspirar el lquido del seno. Cuando no se obtenga lquido, instilar 1 ml. de suero
salino estril y aspirarlo nuevamente.
Inyectar una parte de la muestra en un medio de transporte para anaerobios y
enviar el resto en un contenedor estril o en la propia jeringa.
Se intentar obtener al menos 1 ml. de muestra.
Enviar inmediatamente al laboratorio o utilizar un medio de transporte.
EXUDADOS DE CAVIDAD ORAL
Introduccin
Esta muestra se emplea habitualmente para el diagnstico de candidiasis y de
la "Angina de Vincent".
Torundas de algodn sin medio de transporte.
Portas limpios.
2. Tcnica
Se pedir al paciente que se enjuague la boca con agua.
Tras enjuagar la boca, frotar o raspar las lesiones con una esptula o con una
torunda y hacer una extensin sobre un porta.
1 extensin en porta + 1 torunda.
Se repetir la toma con una segunda torunda para cultivo (slo para la
investigacin de Candida albicans).
No requiere medidas especiales para su transporte y conservacin.

TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR

INTRODUCCIN
Una muestra de esputo bien recogida puede ser muy til para establecer el
diagnstico etiolgico de una infeccin del tracto respiratorio inferior (neumona,
bronquitis, tuberculosis pulmonar, etc.).
En ocasiones el paciente no consigue expectorar, por lo que puede ser
necesario inducir el esputo mediante nebulizadores o realizar un estudio
broncoscpico para obtener secreciones del tracto respiratorio inferior.
Es importante una cuidadosa recoleccin de las muestras, ya que es muy fcil
la contaminacin con flora orofarngea, lo que hara que los resultados sean
clnicamente irrelevantes.
La calidad de las muestras se debe establecer por examen microscpico
directo. Una muestra recogida de forma adecuada contiene un mnimo de
clulas epiteliales escamosas y un nmero significativo de leucocitos
polimorfonucleares.
Indicaciones:
Se debe solicitar estudio microbiolgico de esputo en pacientes con sospecha
de bronquitis o neumona bacteriana.
Cuando el diagnstico clnico y/o radiolgico sea de neumona atpica, o
las circunstancias epidemiolgicas hagan probable un determinado
patgeno, este hecho debe ser expresado en el volante de peticin. Ello
permite incluir tcnicas para la bsqueda de Legionella spp, (que requiere
medios de cultivo selectivos) o los distintos virus respiratorios.
El estudio microbiolgico del esputo est tambin indicado ante toda
sospecha de tuberculosis pulmonar.
Las muestras broncoscpicas deben ser obtenidas de pacientes graves que no
expectoran o cuando los resultados del esputo no son significativos o de fcil
interpretacin. En cualquier caso, la indicacin de la broncoscopia debe
establecerla siempre el especialista.
ESPUTO
Si el esputo contiene gran proporcin de saliva, no constituye una muestra
representativa de la situacin existente en el tracto respiratorio inferior por su
mezcla con secreciones procedentes de todo el tracto traqueo-bronquial y con
la flora saprofita de la orofaringe.
La presencia en la muestra de gran nmero de clulas epiteliales indica
contaminacin con flora orofarngea, por lo que estas muestras no deben ser
cultivadas, excepto para cultivo de Legionella spp.
Por lo tanto:
Se debe instruir correctamente al paciente para reducir el nmero de muestras
inadecuadas.
La muestra mejor es la obtenida de la primera expectoracin de la maana.
Todos las muestras del tracto respiratorio inferior deben manejarse con las
precauciones necesarias para trabajar con Mycobacterium tuberculosis.
Las muestras de esputo no son tiles para el cultivo de anaerobios.
Una muestra nica, recogida adecuadamente, suele ser suficiente para el
diagnstico de infeccin bacteriana del tracto respiratorio inferior.
Para el estudio de micobacterias (diagnstico de tuberculosis) es conveniente
obtener 2 3 de muestras de das diferentes. Si el paciente no est ingresado,
puede mantener las muestras en la nevera hasta obtenerlas todas, y llevarlas a
la vez al laboratorio.
Frasco estril de boca ancha y tapn de rosca.
Suero fisiolgico estril y nebulizador (slo para esputo inducido).
2. Tcnica
Instruir al paciente sobre la diferencia entre expectoracin (esputo) y saliva.
Hacer que el paciente se enjuague la boca con agua. Para pacientes con
dentaduras postizas, stas deben ser quitadas primero.
Explicar al paciente que debe obtener un esputo tras una expectoracin
profunda, preferentemente la primera de la maana.
Recoger el esputo directamente en el contenedor (frasco estril), y tapar bien
con el tapn de rosca.
Si el paciente no consigue expectorar espontneamente puede inducirse el
esputo con nebulizaciones de suero fisiolgico estril (15 ml en 10 minutos),
(esputo inducido), siendo til adems realizar un drenaje postural o fisioterapia
respiratoria.
Rotular el frasco con los datos del paciente.
Transportar la muestra rpidamente al laboratorio de microbiologa.
Si el transporte no puede hacerse de forma inmediata (retraso de ms de 2
horas) la muestra debe mantenerse refrigerada (nunca congelada!).
Criterios de rechazo.
Muestra no identificada o incorrectamente rotulada (los datos de la muestra
no son coincidentes con los del volante de peticin).
Muestra conservada de modo inapropiado o excesivo tiempo en el transporte.
Contenedor inapropiado, contenedor roto, mal cerrado o con signos de
contaminacin externa (muestra derramada).
Muestras duplicadas (excepto para estudio de micobacterias).
BRONCOASPIRADO
Su obtencin es a travs de un broncoscopio, por lo que es una muestra ms
representativa que el esputo del tracto respiratorio inferior.
El rea afectada del pulmn puede ser directamente accesible.
En ocasiones los lavados bronquiales estn excesivamente diluidos, por lo que
son preferibles los cepillados bronquiales.
Los broncoaspirados contienen tambin flora saprofita de la orofaringe,
aunque en menor grado que el esputo, por lo que no son tiles para el cultivo de
anaerobios.
Lidocana (2%) (preferentemente), para anestesia.
Solucin salina o lactato de Ringer.
Fibrobroncoscopio.
Contenedor tipo Lukens.
Jeringa de 20 ml.
Lubricante.
2. Tcnica
A realizar por un especialista debidamente entrenado.
Rotular con la informacin del paciente.
Indicar el procedimento de obtencin realizado.
Transportar rpidamente al laboratorio de microbiologa.
Estas muestras no deben ser refrigeradas.
La inhibicin de las bacterias por la solucin anestsica puede ser un
problema, por lo que es muy importante procesar rpidamente estas muestras
para cultivo.
Las muestras broncoscpicas tienen la consideracin de muestras invasivas y
por tanto no pueden ser rechazadas sin consultar previamente con el mdico
responsable de su obtencin a fin de subsanar, en lo posible, el motivo del
rechazo. Si esto fuera imposible, la muestra debe procesarse anotando el
problema en el informe y avisando de las posibles consecuencias que ello
pudiera haber tenido en la interpretacin de los resultados.
LAVADO BRONCOALVEOLAR
Igual que el broncoaspirado se obtiene a travs de un broncoscopio.
Consiste en el lavado de un segmento pulmonar, previo anclado del
broncoscopio, introduciendo de 20 a 50 ml de suero fisiolgico estril.
Es til sobre todo en procesos pulmonares intersticiales. Constituye la mejor
muestra para deteccin de P. jiroveci.
Los resultados de los cultivos cuantitativos suelen ser ms tiles para
interpretar los resultados.
Fibrobroncoscopio.
Contenedor tipo Lukens.
Jeringa de 50 ml.
Lubricante.
2. Tcnica
Mediante broncoscopia, hecha por un especialista debidamente entrenado.
Indicar el procedimento de obtencin realizado.
por tanto no pueden ser rechazadas sin contactar previamente con el mdico
CEPILLADO BRONQUIAL MEDIANTE CATTER TELESCOPADO
Consiste en un cepillado de la mucosa bronquial del lbulo afectado a travs
de un fibrobroncoscopio, usando un cepillo telescopado protegido por un doble
catter ocluido distalmente.
Permite evitar la contaminacin con flora de las vas altas, por lo que la
muestra obtenida es til para el cultivo de anaerobios.
Los resultados de los cultivos cuantitativos suelen ser ms tiles para interpretar
los resultados.
Fibrobroncoscopio.
Catter telescopado.
Tubo con 1 ml de suero salino estril.
Lubricante.
2. Tcnica
Mediante broncoscopia hecha por un especialista debidamente entrenado.
Enviar al laboratorio de microbiologa el cepillo en un tubo que contenga 1 ml
de suero fisiolgico estril.
Indicar el procedimiento de obtencin realizado.
Conservacin y transporte:
por tanto no pueden ser rechazadas sin consultar previamente con el mdico
LQUIDOS ORGNICOS

LQUIDO CEFALORRAQUDEO
El procesamiento del LCR representa un problema particularmente difcil para
el laboratorio, ya que los organismos que causan meningitis son diversos (incluyen
bacterias, micobacterias, hongos y virus) y lbiles (ej. S. pneumoniae, N.
meningitidis y H. influenzae). Una demora o una mala conservacin de la muestra
puede condicionar un diagnstico errneo.
El lquido cefalorraqudeo (LCR) es la muestra de eleccin para realizar el
diagnstico etiolgico de meningitis infecciosa.
La muestra debe recogerse utilizando una tcnica estrictamente asptica. En
caso de que sea posible, el paciente debera estar en ayunas.
Batea
Guantes estriles
Desinfectante cutneo (tintura de yodo al 2 %)
Paos estriles
Novocana (0.5 a 1 %), aguja y jeringa
Dos agujas de puncin lumbar de pequeo calibre (20-22)
Manmetro de agua
Tres tubos estriles con tapn de rosca de 10 ml.
2.Tcnica
Asegurarse de que el paciente estar inmvil durante el procedimiento.
Sujetarlo si es necesario.
Explicarle que es inevitable cierto dolor. La anestesia local alcanza raramente
las meninges, y el dolor se produce cuando la aguja llega a la duramadre y
tira del tejido conectivo que rodea las vrtebras.
Mantener al paciente con la espalda arqueada de manera que la cabeza
casi alcance las rodillas.
Desinfectar la piel a lo largo de una lnea que una las dos crestas ilacas.
Con jeringa y aguja, introducir bajo la piel una pequea cantidad de
anestsico local, hasta que se haga un pequeo botn subcutneo. Dejar
pasar unos instantes para que el anestsico acte.
Introducir la aguja de puncin lumbar. La insercin ser en el espacio entre L3-
L4, L4-L5 o L5-S1. Al llegar al espacio subaracnoideo, retirar el estilete interior.
Tan pronto como el lquido empieza a gotear, sabemos que la punta de la
aguja se encuentra en el espacio subaracnoideo.
Medir en este momento la presin del LCR.
Recoger el lquido en los tubos estriles con tapn de rosca.
Etiquetar adecuadamente los tubos que contienen la muestra.
Bajo ningn concepto la muestra debe ser refrigerada. Si no se dispone de
estufa a 35-37C , se mantendr a temperatura ambiente hasta su envo al
laboratorio. Slo los tubos para cultivo de virus se deben refrigerar a +4 grados.
La muestra debe ser enviada al laboratorio lo antes posible desde el momento
de su obtencin. Si el laboratorio est cerrado, la muestra se debe dejar en
estufa a 35-37C (salvo en el caso de que se desee cultivo de virus).
La muestra se rechazar si se recibe en un recipiente no estril o siempre que
conste que se ha manipulado previamente en condiciones inadecuadas.
Observaciones
La muestra se recoger, preferentemente, antes de instaurar cualquier
teraputica antibitica.
Se debe recoger una cantidad adecuada del LCR para asegurar la
recuperacin del organismo infectante. Generalmente, los organismos se
encuentran en concentraciones de 10
4
a 10
7
organismos por mililitro de LCR,
por lo que resultan adecuados de 1 a 2 ml para cultivo convencional. En caso
de sospechar una meningitis por micobacterias o por hongos, se deber
obtener una cantidad mayor de LCR (2 o ms ml. en cada caso), ya que la
concentracin de microorganismos es inferior. En el caso de que se desee
procesamiento para diagnstico de virus, la cantidad ser de al menos 1 ml.
Si se recibe una cantidad de muestra inferior a la necesaria para realizar todas
las pruebas solicitadas, el microbilogo debe contactar con el peticionario
para determinar las pruebas que se van a realizar. Si a pesar de la escasa
cantidad se siguen pidiendo las mismas pruebas, stas se deben realizar, pero
advirtiendo que el volumen recibido es inadecuado.
Si la extraccin de la muestra se ha realizado en un solo tubo y se solicitan
pruebas para distintos laboratorios, ser imprescindible remitirlo en primer lugar
al laboratorio de Microbiologa, para evitar su contaminacin. Si hay ms de
una muestra, Microbiologa puede recibir cualquiera de ellas, aunque
contenga sangre, ya que sta no interfiere en el cultivo.
En el caso de que se sospeche una meningitis bacteriana, es muy importante
extraer tambin hemocultivos.
Ciertas poblaciones peditricas llevan derivaciones ventriculares para el
drenaje del exceso de LCR. Es importante que estas muestras se etiqueten
como Lquido de derivacin ventricular y no Lquido Cefalorraqudeo, ya
que aislamientos que podran considerarse contaminantes si se hubieran
obtenido de puncin lumbar pueden ser serios patgenos en infecciones de la
derivacin ventricular.
OTROS LIQUIDOS ORGNICOS ESTRILES
El resto de los lquidos orgnicos estriles incluyen lquido abdominal
(peritoneal, paracentesis, ascitis, dilisis), amnitico, pleural, pericrdico y sinovial.
Estos lquidos orgnicos se cultivan para determinar el agente etiolgico
cuando existe sospecha de infeccin en sus correspondientes localizaciones
anatmicas (cavidad abdominal, cavidad pleural, cavidad pericrdica o
articulacin).
La muestra debe recogerse utilizando una tcnica estrictamente asptica. Lo
ms habitual es que la muestra se deba recoger mediante aspiracin
percutnea, en cuyo caso se exponen a continuacin los materiales necesarios y
el procedimiento utilizado.
Batea
Guantes estriles
Desinfectante cutneo (tintura de yodo al 2 %)
Paos estriles
Novocana (0.5 a 1 %), aguja y jeringa de 5 ml.
Aguja y jeringa para obtencin de la muestra.
Tubo o bote estril con tapn de rosca. Capacidad segn la cantidad que se
prevea obtener.
2.Tcnica
Asegurarse de que el paciente estar inmvil durante el procedimiento.
Sujetarlo si es necesario.
Desinfectar la piel en la zona en la que se va a hacer la puncin.
Con jeringa y aguja, introducir bajo la piel una pequea cantidad de
anestsico local, hasta que se haga un pequeo botn subcutneo. Dejar
pasar unos instantes para que el anestsico acte.
Introducir la aguja de toma de muestra. Aspirar y recoger la cantidad
requerida de muestra.
Recoger el lquido en el recipiente estril o en la misma jeringa.
- Lquido pleural: la muestra debe recogerse mediante aspiracin percutnea
en condiciones de asepsia, colocndola en un tubo limpio y estril.
- Lquido peritoneal: las muestras se recogen mediante aspiracin percutnea
en condiciones de asepsia, o en el curso de una laparotoma, colocndolas
en un tubo limpio y estril. Es conveniente coger una cantidad superior a 10 ml.
- Lquido de dilisis peritoneal: el lquido de dilisis se drena directamente desde
el abdomen del paciente a bolsas, que se deben transportar enteras al
laboratorio tan pronto como sea posible.
- Lquido sinovial, pericrdico y otros: la muestra se recoge por aspiracin
percutnea asptica y se transporta en un contenedor limpio y estril.
- Lquido amnitico: el lquido se recoge mediante amniocentesis, en el curso de
una cesrea o mediante aspiracin con un catter transcervical intrauterino, y
debe transportarse en un contenedor limpio y estril.
Etiquetar adecuadamente el recipiente que contiene la muestra.
La muestra debe ser enviada al laboratorio lo antes posible desde el momento
de su obtencin.
- Lquido pleural, peritoneal, dilisis peritoneal, sinovial, amnitico y otros: si va a
haber retraso en el transporte o en el procesamiento, la muestra se introducir
en estufa a 35-37C. Si no se dispone de estufa mantener a temperatura
ambiente.
- Lquido pericrdico: si va a haber retraso en el transporte o en el
procesamiento, es importante que la muestra se mantenga en frigorfico a +4
C.
La muestra se rechazar si se recibe en un recipiente no estril o siempre que
conste que se ha manejado en condiciones inadecuadas.
Observaciones
Las muestras se recogern siempre antes de instaurar cualquier teraputica
antibitica. No existe una situacin tan urgente que impida tomar la muestra
antes de iniciar el tratamiento.
El volumen mnimo para estudio bacteriano rutinario es de 1 ml, si bien es
preferible una cantidad superior. En el caso de que se requiera investigacin
de M. tuberculosis o de hongos, se enviar un volumen superior a los 10 ml.
En el caso de que sea necesario prevenir la coagulacin de alguno de estos
lquidos, se usar heparina sin conservantes; otros anticoagulantes pueden
resultar antibacterianos.
Si se usa para el transporte la jeringuilla utilizada en la toma de la muestra, se
deber sustituir la aguja por una estril tapada con el correspondiente
protector.
Los recipientes adecuados son tubos o botes estriles con tapn de rosca, sin
conservantes.
Los frascos de hemocultivo como sistema de envo de este tipo de muestras
deben ser siempre ADICIONALES, y no el nico sistema utilizado, ya que en este
caso eliminamos la posibilidad de hacer tinciones u otras pruebas, que
pueden resultar de gran utilidad para orientar el diagnstico. Por otra parte, no
hay que olvidar que las infecciones polimicrobianas en cavidad pleural o
abdominal son frecuentes, por lo que, si usamos frasco de hemocultivo
solamente, un organismo puede crecer sobre los dems, enmascarando su
presencia.
Siempre que sea posible se debe evitar el uso de escobillones.
Las muestras se enviarn inmediatamente al laboratorio, y en caso de que sea
imposible o se prevea una demora del procesamiento (muestras tomadas por
la tarde, noche o fin de semana), se mantendrn a temperatura ambiente. Se
mantendrn en frigorfico cuando se solicite procesamiento para hongos o
micobacterias.
Los frascos de hemocultivo se debern mantener en estufa a 35-37C, y si no es
posible, a temperatura ambiente.
Si se recibe una cantidad de muestra inferior a la necesaria para realizar todas
las pruebas solicitadas, el microbilogo debe contactar con el peticionario
para determinar las pruebas que se van a realizar. Si a pesar de la escasa
cantidad se siguen pidiendo las mismas pruebas, stas se deben realizar, pero
advirtiendo que el volumen recibido es inadecuado.
PIEL Y TEJIDOS BLANDOS

Se basa en la bsqueda de los microorganismos patgenos u oportunistas
causantes de infeccin de piel, partes blandas y abscesos. Dadas las
caractersticas de estos tejidos, los cultivos polimicrobianos pueden ser de difcil
interpretacin.
ULCERAS Y HERIDAS SUPERFICIALES
La perdida de continuidad de la piel determina que su flora microbiana la
colonice y posteriormente infecte los tejidos normalmente estriles.
Microorganismos ms frecuentes:
Estafilococos coagulasa negativos
Enterobacterias
Microorganismos nosocomiales.
1.Material necesario
Guantes estriles
Suero fisiolgico o solucin de Ringer lactato
Jeringa y aguja estriles
Torundas con medio de transporte tipo Stuart-Amies
2. Tcnica
Lavar cuidadosamente la superficie de la herida. Recoger el pus mediante
jeringa y aguja, aspirando preferentemente de zonas profundas.
Cuando la muestra sea insuficiente, instilar suero o solucin de Ringer lactato y
aspirarlo nuevamente en la jeringa.
Cuando los procedimientos anteriores no sean factibles, podr utilizarse una
torunda, frotando en las zonas profundas.
Para muestras lquidas se intentar obtener de 1 a 10 ml. En el resto de las
ocasiones la muestra debe ser de suficiente volumen como para poder
procesarla en aerobiosis y anaerobiosis. En el caso de remitir torunda, es
aconsejable enviar dos escobillones.
El transporte de la muestra es determinante en el resultado final. El envo al
laboratorio debe de ser inmediato, o antes de las dos horas de su obtencin.
Se remite en la misma jeringa de la extraccin pero si no puede enviarse de
inmediato se utilizar un vial con medio de transporte anaerobio.
El remitir la muestra mas tardiamente enmascara el verdadero agente causal
por la proliferacin ms rpida de la flora exgena contaminante.
Observaciones
Las muestras recibidas con torunda son de escasa rentabilidad y deben
obtenerse solo en circunstancias muy excepcionales, ya que es un mtodo poco
deseable por recoger menor volumen de muestra y tener mayor riesgo de
contaminacin.
LCERAS CRNICAS
Introduccin
Dado el aumento de la patologa geritrica, las lceras crnicas son ms
frecuentes en este tipo de pacientes, aunque pueden darse a cualquier edad, las
ms frecuentes son las lceras varicosas, las lesiones por presin y el sndrome del
pie diabtico.
Este tipo de lceras suelen ser profundas, por lo que los microorganismos
aislados son muy variables, Staphylococcus aureus es el mas frecuentemente
aislado, seguido de Streptococcus spp, bacilos gramnegativos como Escherichia
coli, Pseudomonas aeruginosa y anaerobios sobre todo Streptococcus y
Bacteroides spp.
1.Material necesario
Guantes estriles
Gasas estriles
Suero fisiolgico o solucin de Ringer lactato
Cureta bistur estriles
Medio de transporte para anaerobios
2. Tcnica
Lavar cuidadosamente la lcera.
La recogida se har de la zona ms profunda, se prefiere el curetaje o
raspado.
Cuando la muestra sea insuficiente, instilar solucin de Ringer lactato y
aspirarlo mediante la jeringa.
En caso de absceso se har aspiracin mediante jeringa o aguja en la zona
central y la interfase entre tejido viable y el absceso.
Cuando los procedimientos anteriores no sean factibles, podr utilizarse una
torunda, frotando en las zonas ms profundas.
La biopsia de la lcera puede ser necesaria cuando se sospecha
degeneracin maligna y debe incluir todo el espesor de la base. Si se
sospecha osteomielitis contigua, la biopsia del hueso debe realizarse.
Para muestras lquidas se intentar obtener de 1 a 10 ml. En el resto de las
ocasiones la muestra debe ser de suficiente volumen como para poder
procesarla en aerobiosis y anaerobiosis. En el caso de remitir torunda, es
aconsejable enviar dos escobillones.
El transporte de la muestra es determinante para el resultado, el aislamiento
del agente causal es inversamente proporcional al tiempo transcurrido entre la
obtencin y el procesamiento. El envo debe ser inmediato o antes de las dos
horas de la obtencin( T ambiente )
Se utilizar la misma jeringa de la extraccin si se enva antes de las dos horas,
si no usar medio de transporte para anaerobios.
Observaciones
La toma se debe de realizar antes de la administracin de antibiticos o tras
un periodo libre de al menos 48 horas.
EXANTEMAS
Introduccin
La toma de muestras en exantemas y heridas superficiales puede superponerse
aunque conviene diferenciar la toma en casos de pstulas, vesculas, petequias y
otras lesiones especficas, ya que puede haber ligeras variaciones.
Gasas estriles
Povidona iodada al 10%
Jeringa estril
Aguja IM
2. Tcnica
Aspirar directamente con jeringa y aguja el contenido de las lesiones. Cuando
no sea suficiente, instilar una pequea cantidad de suero salino estril y
aspirarlo.
ABSCESOS CERRADOS
Introduccin
Los microorganismos causales pueden llegar al parnquima por extensin
directa desde un foco contiguo de infeccin o por va hematgena desde un
foco distante.
Varan en funcin de la localizacin de los mismos. As en colecciones de
origen abdominal suelen ser polimicrobianos con presencia de flora aerobia y/o
anaerobia. En pacientes inmunocomprometidos pueden encontrarse otros
agentes de crecimiento predominante intracelular como Listeria monocytogenes,
Nocardia asteroides o Salmonella spp.
Gasas estriles
Jeringa estril
Aguja IM
2. Tcnica
Desinfectar la piel, limpiando la zona con alcohol, de forma concntrica
comenzando por el centro. Abarcar una zona de unos 10 cm.
Repetir la operacin con Povidona. En pacientes con hipersensibilidad al yodo,
en lugar de Povidona se utilizar alcohol dos veces consecutivas.
Dejar secar al menos 1 minuto para que la Povidona ejerza su accin
antisptica.
Realizar una puncin-aspiracin del absceso con jeringa y aguja.
Desinfectar la superficie de goma del tapn del medio de transporte para
anaerobios con Povidona e inyectar con la misma jeringa, introduciendo una
pequea cantidad de la muestra. Si el medio tiene una coloracin azul
deber desecharse. El resto de la muestra se remitir al laboratorio en la
jeringa o bien en un contenedor estril.
Deber enviarse un volumen de muestra entre 1 y 5 ml.
4. Etiquetado
Deber etiquetarse correctamente tanto el medio de transporte como la
jeringa, en el caso de aspirar de sitios diferentes deber reflejarse
correctamente para su posterior interpretacin.
Transporte y conservacin
Las muestra debern enviarse al laboratorio lo mas pronto posible, antes de
dos horas. Hasta que esto suceda, mantener la muestra y el medio de
transporte a temperatura ambiente.
Observaciones
Es muy importante especificar en el volante de peticin la localizacin del
absceso y el estado inmunitario del paciente con vistas a la bsqueda e
interpretacin de los resultados. La recogida de la muestra con escobilln es
poco deseable, por tener mayor riesgo de contaminacin, y ser poco
representativo.
FSTULAS Y TRACTOS SINUSALES
Introduccin
Los trayectos fistulosos y sinusales suelen estar colonizados por distintos
microorganismos que no estn implicados en la patogenia del proceso por lo que
estas muestras son poco rentables, y los resultados deben evaluarse con
precaucin.
Gasas estriles
Jeringa y aguja
2. Tcnica
Limpiar cuidadosamente la superficie cutanea con alcohol y luego con
Povidona. Aspirar el exudado de la parte profunda de la fstula con jeringa y
aguja.
3. Volumen mnimo
El volumen ptimo para el cultivo es de 1-5 ml
Enviar las muestras al laboratorio antes de dos horas, mantener a temperatura
ambiente en este intervalo.
Observaciones
Estos tipos de muestras son inadecuados para la investigacin de anaerobios.
MICOSIS CUTNEAS

RECOGIDA DE MUESTRAS PARA EL ESTUDIO DE HONGOS
Introduccin
El tipo y calidad de la muestra es primordial para el subsiguiente aislamiento e
identificacin del agente etiolgico. La muestra se recoger antes de instaurar el
tratamiento y siempre de la parte activa de la lesin.
Los requisitos son:
Recogida adecuada y asptica.
Transporte rpido al laboratorio (en menos de 2 horas) en recipiente estril.
Otra opcin es la recogida de la muestra en el laboratorio de Microbiologa. Es
importante evitar las contaminaciones.
Antes de la toma es necesario asegurar que no haya sido aplicado ningn
producto antifngico por va local o general, al menos en los cuatro das
precedentes.
Se limpiar la piel con alcohol etlico al 70%
Indicaciones: Sospecha de infeccin fngica.
Obtencin de muestras
Recipiente estril hermtico
Placas de Petri estriles
Lancetas, bistur, esptulas, pinzas de depilar, tijeras, cortauas, tijeras curvas y
finas. Todo el material estar preferiblemente estril.
Cinta de celofn transparente
Portaobjetos
Tubos estriles
Jeringas y agujas estriles
Medio de cultivo apropiados.
2. Tcnica de la obtencin del producto
Segn la zona afectada y el diagnstico clnico el tipo de muestra ser:
- Escamas
- Pelos
- Fragmentos de ua y tejido periungueal
- Mucosas
- lceras
- Biopsias cutneas
2.1. Escamas
Raspar con ayuda de una lanceta, portaobjetos, bistur, sobre todo en la
periferia de la lesin, por el desarrollo centrfugo del hongo a partir del punto
de inoculacin. Si la lesin es pequea se raspa en su totalidad. Las escamas
se hacen caer en una placa de Petri.
En el caso de pitiriasis versicolor, se aplica sobre la lesin un fragmento de
celofn transparente que se fija sobre un portaobjetos.
En caso de lesiones cutneas rezumantes se hace la toma con un escobilln
estril humedecido con solucin salina fisiolgica.
2.2. Pelos
Elegir los pelos parasitados. Los cabellos y/o pelos rotos o contorneados deben
ser arrancados del folculo piloso.
Recoger el material en una placa de Petri estril.
2.3. Fragmentos de ua y tejido periungueal
Micosis ungueales
La toma se realiza en la base de la ua / surco periungueal (en onixis por
Candida), o en la extremidad de la misma, (en onicomicosis por dermatofitos).
Hay que coger las escamas por debajo de las uas introduciendo un bistur o
lanceta en el lecho subungueal anterior, que suele estar despegado,
raspando pacientemente hasta llegar a la zona dolorosa, donde extraeremos
el material de mejor calidad. Posteriormente se cortan con una tijera fina y
curva fragmentos de la ua afectada. El material obtenido se recoge en una
placa de Petri y/o frasco estril.
Perionixis
En caso de lesiones supuradas de perionixis, se extrae el pus mediante presin
y se recoge con un escobilln estril.
2.4. Exudados de mucosas
La toma a nivel de mucosas se realiza por raspado con el borde romo del
bistur, portaobjetos o escobilln estril.
2.5. Exudados de lceras
En las lceras de piel y mucosas, la toma se realiza raspando con bistur los
bordes y fondo de la misma, poniendo especial inters en los bordes, para
obtener escamas drmicas, as como las costras o porciones vegetantes si las
hubiera, ayudndose con las pinzas.
En todas las lesiones ulcerosas o vegetantes es muy til la biopsia que debe
tratarse como se seala posteriormente.
2.6. Biopsia cutneas
La biopsia es uno de los procedimientos ms seguros para el diagnstico de
una micosis. La pieza de biopsia se introduce en un tubo estril con suero
fisiolgico estril o agua glicerinada al 25% estril.
El almacenamiento prolongado puede afectar a la viabilidad del hongo.
Se transporta en contenedor seco, evitando contenedores con medio de
transporte.
Las muestras dermatolgicas se guardaran a 15-30C.
Las biopsias se remiten de inmediato al Laboratorio de Microbiologa. Si el
procesamiento se retrasa ms de dos horas refrigerar la muestra a 4C.
Administracin de antifngicos los das previos a la toma de muestra, ya que
pueden dar lugar a cultivos falsamente negativos.
Toma de muestra mediante escobilln, excepto en perionixis.
Las muestras recogidas, transportadas o almacenadas incorrectamente, ya
que pueden inducir a resultados falsamente negativos o a aislamientos de
dudosa significacin etiolgica.

SEROLOGA INFECCIOSA

SEROLOGA INFECCIOSA
Introduccin
Los mtodos serolgicos permiten determinar el estado inmune del paciente y
el diagnstico de infecciones en aquellos casos en que los microorganismos
implicados son de cultivo dificultoso o no cultivables, mediante la deteccin
tanto de antgenos como de anticuerpos microbianos especficos.
En general, los anticuerpos de la clase IgM aparecen inicialmente durante la
infeccin, su presencia es transitoria e indican infeccin reciente permitiendo el
diagnstico con una nica muestra de suero. Sin embargo, en determinadas
infecciones persisten durante perodos largos por lo que su utilidad debe ser
evaluada para cada agente infeccioso.
Los anticuerpos de la clase IgG aparecen ms tardamente, alcanzando
niveles mximos en suero a las 4-6 semanas despus del inicio de la infeccin y
persistiendo de por vida. El diagnstico de infecciones basado en la
determinacin de IgG requiere el procesamiento de dos sueros en paralelo, uno
tomado en la fase aguda de la enfermedad, preferiblemente dentro de los 5-7
das del inicio de los sntomas, y una segunda muestra durante la convalecencia,
3-4 semanas ms tarde. Un aumento de 4 veces en el ttulo de anticuerpos IgG se
considera evidencia de infeccin reciente.
1. Material
Guantes estriles
Gasas estriles
Tubos de presin negativa estriles
Sistema de toma de sangre para tubos de presin negativa o sistema
tradicional
2. Tcnica
Desinfectar la piel con alcohol
Dejar secar la piel para evitar la produccin de hemlisis en la muestra de
sangre
Extraer la sangre en un tubo seco con gel separador, sin anticoagulantes ni
conservantes.
3. Etiquetado
Se identificarn las muestras con la etiqueta correspondiente.
Dejar los tubos a temperatura ambiente para favorecer la coagulacin hasta
su transporte.
Transportar las muestras al laboratorio refrigeradas el mismo da de la
extraccin. En caso de que se produzca una demora en el envo de muestras
al laboratorio, stas pueden conservarse refrigeradas durante 24-48 horas
Procesamiento en el laboratorio
Centrifugar el tubo con la sangre a 1200 rpm durante 10 minutos y mantener a
4C.
Trabajar siempre que sea posible con tubo primario
Si es posible se guardar una alcuota para seroteca a 70C
MICROBIOLOGA MOLECULAR INFECCIOSA

MICROBIOLOGA MOLECULAR INFECCIOSA
Introduccin
Los mtodos de biologa molecular permiten la deteccin directa del genoma
del microorganismo implicado en el proceso infeccioso bien sea DNA o RNA.
Las tcnicas de biologa molecular estn indicadas para la deteccin de
microorganismos que no pueden cultivarse in vitro o para aquellos de lento
crecimiento, con importantes requerimientos nutricionales o de difcil cultivo, en
cuyo caso los mtodos moleculares mejoran la rapidez, sensibilidad y
especificidad del diagnstico etiolgico.
1. Recomendaciones generales
Es aconsejable obtener y procesar las muestras para biologa molecular con
las mismas precauciones de esterilidad que para las tcnicas de cultivo.
Las muestras de LCR, biopsias, orina, muestras respiratorias se obtendrn
siguiendo los procedimientos indicados en las correspondientes secciones del
manual de toma de muestras en funcin del proceso infeccioso implicado,
mientras que la obtencin de la muestra de sangre difiere segn el
microorganismo implicado y son mencionadas a continuacin.
Indicaciones de las muestras de sangre:
- Plasma para carga viral de VIH, VHC, VHB y, estudio de resistencias de VIH
- Leucocitos de sangre perifrica: PCR de virus y bacterias intracelulares
2. Tcnica
Para la obtencin de plasma, linfocitos o leucocitos de sangre perifrica
Extraer la sangre en un tubo de 10 ml con EDTA y gel separador. Mezclar
invirtiendo el tubo 10-15 veces. La separacin del plasma, linfocitos y
leucocitos debe realizarse en el Laboratorio de Microbiologa antes de las 6
horas de obtener la muestra para evitar su hemlisis.
Las muestras, desde el momento de su obtencin hasta la llegada al
laboratorio (incluido transporte), deben mantenerse refrigeradas. Una vez
recibidas, en caso de no ser procesadas inmediatamente, sern congeladas.
Procesamiento en el laboratorio
Centrifugar el tubo con la sangre a 1200 rpm durante 10 minutos. Con ayuda
de una pipeta de aspiracin estril transferir el plasma a un tubo estril de 1.5-2 ml
con tapn de rosca. Es conveniente obtener varias alcuotas y congelar si es
posible a 70C. No se aconseja conservar las muestras a 20 C durante tiempos
prolongados, mximo 1 ao.

BIBLIOGRAFA
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Recogida, transporte y procesamiento general de muestras en el laboratorio
de Microbiologa. 2 ed. Sociedad Espaola de Microbiologa Clnica. 2003.
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destino al centro nacional de microbiologa. 2002.
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Isenberg HD. Clinical Microbiology Procedures. Handbook 2th ed. ASM Press.
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Clinical Microbiology. 8th ed. ASM Press. Washington D.C. 2003.
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for Microbiology. Washington, D.C. 1998.
Murray PR. Pocket guide to clinical microbiology. 3th ed. American Society
for Microbiology. Washington, D.C. 2004.
Murray PR, Baron EJ, Pfaller MA, Yolken RH. Manual of Clinical Microbiology,
8th ed. American Society for Microbiology. Washington, D.C. 2003.

Orden de 4 de diciembre de 2001 por la que se actualizan las instrucciones
tcnicas para el transporte sin riesgos de mercancas peligrosas por va area.
Suplemento del BOE n 299. de 14 de diciembre de 2001.
Perea J. Enfermedades infecciosas. Ediciones Doyma S.A. Barcelona. 1991.
Pidrola G. Diagnstico de las infecciones. En Microbiologa y Parasitologa
Mdica de Pumarola A, Rodriguez-Torres A, Garca-Rodriguez JA y Pidrola G.
Salvat Eds. Barcelona. 1987:311319.
Stamey T. The diagnosis, localization and classification of urinary infections
p1-51. In TA. Staney (Ed), Pathogenesis and treatment of urinary tract infections,
The Williams and Wilkins Co. Baltimore. 1980.
Summanen P, Baron EJ, Citro EM, Strong C, Wexler HM, Finegold SM.
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Sundquit GK, Eckerbom II, Sjgren VT. Capacity of anaerobic bacteria from
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1979.25:685693.
Symingron DA. Improved transport system for Neisseria gonorrhoeae. 1975.
Vandepitte J, Engbaek K, Piot P, Heuck CG. Mtodos bsicos de laboratorio
en Bacteriologa Clnica. OMS. Ginebra. 1993.
Verger G, LLobet JM, Len C. Infecciones respiratorias. Enfermedades
infecciosas. Ediciones Doyma S.A. Barcelona. 1988.
Washington JA. Laboratory Procedures in Clinical Microbiology. 2th ed.
Springer Verlag. New York. 1985.
Washington JA. Clinical Microbiology. En Infections diseases. Gorbach S.L.,
Bartlett J.C. Blacklow N.R. (eds) 107-126. W.B. Saunders Co. Philadelphia. 1992.

ANEXOS

REFERENCIAS
PRODUCTO REFERENCIA LOCALIZACIN
Transporte anaerobios en
torunda
Portagerm (Biomerieux)
Ref: 42105
Solicitar en el Laboratorio
de Microbiologa
Transporte anaerobios en
muestras lquidas
Portagerm (Biomerieux)
Ref: 41995
de Microbiologa
Torundas para
Chlamydias (hombres)
VIDAS Chlamydia male
Ref: 30527
de Microbiologa
Torundas para
Chlamydias (mujeres)
VIDAS Chlamydia female
Ref: 30528
de Microbiologa
Tubo carga viral (EDTA
con tapn blanco)
BD PPT Vacutainer
Ref: 288217
de Microbiologa
Tubo para serologa
(tapn amarillo)
BD SST Vacutainer
Ref: 367783
Solicitar almacn
Tubo de orina con
conservante
Vccuette Solicitar almacn
Tubo lisis centrifugacin
(adulto)
AISBACT-A Solicitar en el Laboratorio
de Microbiologa
Tubo lisis centrifugacin
(nio)
AISVACT-I Solicitar en el Laboratorio
de Microbiologa
Medios de cultivo para
raspados corneales
Agar sangre, agar
chocolate y Sabureaud
de Microbiologa
Torunda con medio de
transporte
ANALIZER. Cdigo de
almacn: 1923
Solicitar almacn
Medio de transporte de
virus
VIRALPACK. Ref: 80100 Solicitar en el Laboratorio
de Microbiologa
Frascos de hemocultivos
para microorganismos
aerobios y anaerobios
Aerobio (Azul)
Anaerobio (rojo)
Solicitar almacn

CATALOGO DE MATERIAL DE TOMA DE MUESTRAS DE MICROBIOLOGA CLNICA
Frasco estril para obtencin y transporte de muestras
de orina para urinocultivo y tubo de transporte con
conservante

Frasco estril, obtencin de muestras de esputos, etc.

Frasco con cuchara para muestras de heces para
coprocultivo.

Medio de transporte de AMIES para transporte de
muestras purulentas

Tubo de serologa para la extraccin de suero

Tubo de serologa para la extraccin de suero (San
Fermn)

TOMA DE MUESTRAS PARA CULTIVO DE ORINA
Toma de muestras de orina en la mujer
2
3
5
6
1
4
2
3
5
6
1
4
2
3
5
6
1
4

Toma de muestra de orina en el hombre.
2
3
5
6
1
4
2
3
5
6
1
4

RECOGIDA DE MUESTRA PARA DETERMINACION DE CARGA VIRAL
1. EXTRAER LA MUESTRA POR SISTEMA DE VACO, CON EL TUBO VACUTAINER
(REFERENCIA 362795. COD. CONSELLERIA SANIDAD)

PROCEDIMIENTO DE OBTENCIN DE HEMOCULTIVOS

1.- Rotular los frascos (tapn azul y tapn dorado) con las etiquetas del paciente,
indicando si es la 1 o la 2 extraccin
2.- Desinfeccin de los tapones de los frascos con etanol
3.- Seleccionar la vena y desinfectar la zona de venipuncin en crculos
excntricos, primero con etanol (30 segundos), luego con povidona iodada (1
minuto). Dejar secar un minuto
4.- Utilizar guantes estriles para la extraccin de sangre
5.- Inocular en cada frasco: aerobio (color azul) y anaerobio (color dorado) el
volumen adecuado de sangre (8 ml) comenzando por el frasco anaerbico
6.- Agitar suavemente el frasco y enviarlo inmediatamente al servicio de
Microbiologa. En el laboratorio de Microbiologa se deben dejar a temperatura
ambiente.

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