7- Ligamiento y recombinacin

en haploides
Reino: Fungi
Divisiones: Chytridiomycota, Zygomycota, Glomeromycota,
Basidiomycota, Ascomycota

Basidiomicetes : las clsicas setas y hongos con sombrero (champion =
mushroom). Producen basidios con basidiosporas.
Ascomycetes: levaduras y mohos. Producen ascas con ascosporas.
Algas unicelulares que forman esporas equivalentes

S. cerevisiae: levadura del pan
Aspergillus indulans: moho verde del pan
Ustilago hordei: tizn de la cebada
Neurospora crassa: moho rojo del pan

Hongos ascomicetos
Estos organismos son nicos porque se puede analizar meiosis individuales,
permitiendo estudiar aspectos bsicos de la gentica de la meiosis (un proceso
central de la biologa de los eucariotas)
Cartografiar los centrmeros como si fuesen loci
Investigar la posibilidad de interferencia de cromtida
Examinar los mecanismos de entrecruzamiento

2n
n n
n n n n
Ciclo haploide: hongos
Meiosis
Esporas
sexuales
Clulas
haploides
3
3
Ciclo biolgico de Neurospora crassa
conidiosporas
ascosporas
4
4
Ciclo biolgico
Sordaria: ascas octosporas ordenadas
Micelio: cuerpo sobre superficie; hifa :parte
area donde se desarrollan las esporas
Haploides: anlisis de meiosis individuales
Basidiomicetes (champion) Ascomicetes (levaduras y mohos)
no ordenadas
lineales
ttradas
ctadas
ttradas ctadas
Ventajas: haploides (fenotipo = genotipo)
eucariotas!
econmicos (gran nmero en poco espacio)
Laboratorio: cultivo en medios sintticos (+ agar)
morfologa de las colonias,
resistencia a frmacos, auxotrofas
Nos permiten:
Cartografiar los centrmeros como si fuesen loci
Investigar la posibilidad de interferencia de cromtida
Examinar los mecanismos de entrecruzamiento

Sordaria: octadas lineales
Neurospora: octadas lineales, tiene 7 pares de cromosomas
Sordaria fimicola pertenece al orden Sphaeriales de la division
Ascomicetes.
Se lo utiliza a menudo en trabajos de laboratorio de estudios de
hongos por poseer atributos de inters:
1. Crece muy bien en cultivos nutritivos de agar (extracto de malta,
agar dextrosa papa) y puede crecer y fructificar en una semana.

2. El cuerpo fructfero es fototrfico y se dirige hacia la luz
incidente.
3. Sordaria es naturalmente auxtrofo (= nutricionalmente
dependiente) . Requiere biotina para crecer y crecer sobre medio
mnimo + biotina pero no fructificar a menos que tenga disponible
tiamina. Biotina y Tiamina pertenece al complejo B. Sordaria, por lo
tanto, es dependiente de ciertas vitaminas de fuentes externas, debe
obtener esto del medio ambiente.

Ascas
ordenadas
o lineales



Sordaria fimicola
Neurospora crassa

4
4
Ascas ordenadas o lineales:
Un gen
Sin entrecruzamiento:
patrn de segregacin
en la primera divisin meitica
(patrn SPD) o patrn M
I

Las esporas se ordenan segn su centrmero!
El centrmero siempre segrega en la 1ra division!
Con entrecruzamiento:
patrn de segregacin
en la segunda divisin meitica
(patrn SSD) o patrn M
II

M
I

M
II

M
II

Cuando no se produce sobrecruzamiento, cada una de las 8 esporas lleva una hlice
de ADN del parental original, 4 de un cromosoma homlogo y cuatro del otro. Si cada
juego de 4 hlices permanecen juntas, la ttrada se denomina directa (segregacin
4:4). Si existe algn proceso de sobrecruzamiento, se altera el orden y dependiendo
de la orientacin de los husos en Anafase II pueden aparecer segregaciones distintas
(2:2:2:2; y 2:4:2) que se denominan ttradas inversas.
Cuatro tipos de ascas con patrn M
II

aparecen con la misma frecuencia
2 : 2 : 2 : 2
2 : 4 :2
Por la union al azar de las fibras del huso a los centrmeros, que iran hacia
arriba o hacia abajo
Patrn M
II
Patrn M
I
Un sobrecruzamiento -> 1/2 parentales ( P ) y
1/2 recombinantes ( R )
Clculo de la distancia
de un gen al centrmero
Una cepa de Neurospora que necesita metionina (m)
fue cruzada con una de tipo comn (+) con los
resultados que se muestran. Calcular la distancia
entre este gen (m) y el centrmero.

6 ++ mm ++ mm
5 mm ++ ++ mm
6 mm ++ mm ++
7 ++ mm mm ++
40 mm mm ++ ++
36 ++ ++ mm mm
clculo de la distancia
de un gen al centrmero
Calcular la distancia entre este gen (m) y el centrmero.
6 ++ mm ++ mm
5 mm ++ ++ mm
6 mm ++ mm ++
7 ++ mm mm ++
40 mm mm ++ ++
36 ++ ++ mm mm
Ascas totales: 6+5+6+7+40+36 = 100
Ascas MI: 40+36 = 76
Ascas MII: 6+5+6+7 = 24
distancia gen m-centrmero:
(1/2 X 24)/ 100] X 100 = 12 um
um = FR = (1/2 M
II
) / total] X 100
ascas lineales:
dos genes
Ascas ordenadas o lineales:
Dos genes
1. Ligados o no
2. Distancia entre ellos
3. Brazo cromosmico
3a. distancia gen-centrmero
3b. patrones M
II

DP
TT
TT
TT DP
DNP
ab
ab
++
++
ab
ab
++
++
ab
a+
++
+b
a+
ab
+b
++
ab
a+
+b
++
a+
a+
+b
+b
1. Ligados o no
1a. DP vs DNP
No ligados (segregacin independiente) : DP DNP
Ligados: DP >>> DNP ( 10
2
o 10
3
veces mayor)
a
a+ b+
b
no ligados
DP
TT
TT
TT DP
DNP
ligados
1b. Frecuencia
de recombinantes
FR 50% -> no ligados
(segregacin independiente)

FR < 50% -> ligados
Clase I II III
Tipo de
Ttrada
Paterna (DP) No Paterna
(DNP)
Tetratipos
(TT)

Genotipos
Presentes
++
++
ab
ab
A+
A+
+b
+b
++
a+
+b
ab

Nmero de
Ttradas


43

43

14


Figure 5-21 Copyright 2006 Pearson Prentice Hall, Inc.
Clase I II III
Tipo de
Ttrada
Paterna (DP) No Paterna
(DNP)
Tetratipos
(TT)

Genotipos
Presentes
++
++
ab
ab
A+
A+
+b
+b
++
a+
+b
ab

Nmero de
Ttradas


43

43

14

64 6 30
2. Distancia entre dos genes

um = FR = (1/2TT + DNP) / total] X 100
DP
TT
TT
TT DP
DNP
ab
ab
++
++
ab
ab
++
++
ab
a+
++
+b
a+
ab
+b
++
ab
a+
+b
++
a+
a+
+b
+b
3. Brazo cromosmico

3a. distancia gen-centrmero
- lo ya visto:
um = FR = (1/2 M
II
) / total] X 100

3b. patrones M
II
- mismo brazo cromosmico:
las ascas con patrn M
II
para el gen ms cercano
al centrmero, mayoritariamente presentan
el mismo M
II
para el gen ms alejado
- diferente brazo cromosmico:
no se cumple lo anterior

el mismo M
II

para b que para a
porque estn en el mismo
brazo cromosmico
Una cepa doble mutante de Neuropora crassa que produca
ascosporas blancas (ws) tena contextura frgil y delicada (del),
se cruz con una cepa normal y se obtuvieron los siguientes
tipos y frecuencias de ttradas:
ws del

ws del

+ +

+ +
ws +

ws +

+ del

+ del
ws del

ws +

+ del

+ +
ws del

+ del

ws +

+ +
ws del

+ +

ws del

+ +
ws +

+ del

ws +

+ del
ws del

+ +

+ del

ws +
94 19 64 10 18 3 6
1. Ligados o independientes?
2. Si ligados, calcular la distancia gentica entre ellos.
3. Posicin relativa respecto al centrmero.
4. Si ligados, en el mismo o distinto brazo cromosmico?
5. Determinar el origen ms sencillo de cada una de las ttradas.
DP
TT
TT
TT DP
DNP
wsdel
wsdel
++
++
wsdel
ws+
++
+del
ws+
wsdel
+del
++
wsdel
ws +
+ del
++
ws+
ws+
+del
+del
wsdel
wsdel
++
++
ws del

ws del

+ +

+ +
ws +

ws +

+ del

+ del
ws del

ws +

+ del

+ +
ws del

+ del

ws +

+ +
ws del

+ +

ws del

+ +
ws +

+ del

ws +

+ del
ws del

+ +

+ del

ws +
94 19 64 10 18 3 6
1. Ligados o independientes?


DP DNP TT TT TT DP DNP
-> ligados DP >> DNP
DP: 94 + 18 = 112; DNP: 19 + 3 = 22

-> genes ligados

ws del

ws del

+ +

+ +
ws +

ws +

+ del

+ del
ws del

ws +

+ del

+ +
ws del

+ del

ws +

+ +
ws del

+ +

ws del

+ +
ws +

+ del

ws +

+ del
ws del

+ +

+ del

ws +
94 19 64 10 18 3 6
2. Si ligados, calcular la distancia gentica entre ellos.
um = FR = (1/2TT + DNP) / total] X 100
distancia ws-del =
(1/2 64+10+6) + 19+3) / 94+19+64+10+18+3+6] X 100 =
(1/2 80) + 22) / 214 ] X 100 = 28,972 um
DP DNP TT TT TT DP DNP
ws del

ws del

+ +

+ +
ws +

ws +

+ del

+ del
ws del

ws +

+ del

+ +
ws del

+ del

ws +

+ +
ws del

+ +

ws del

+ +
ws +

+ del

ws +

+ del
ws del

+ +

+ del

ws +
94 19 64 10 18 3 6
3. Posicin relativa respecto al centrmero.
um = FR = (1/2 M
II
) / total] X 100=

4. Si ligados, en el mismo o distinto brazo cromosmico?

-> considerar patrones M I y M II
para ws y del de manera independiente
Patrn M
II
Patrn M
I
el mismo M
II

Para w que para del
porque estn en el mismo
brazo cromosmico
ws del

ws del

+ +

+ +
ws +

ws +

+ del

+ del
ws del

ws +

+ del

+ +
ws del

+ del

ws +

+ +
ws del

+ +

ws del

+ +
ws +

+ del

ws +

+ del
ws del

+ +

+ del

ws +
94 19 64 10 18 3 6
DP
TT
TT
TT DP
DNP
5. Determinar el origen ms sencillo de cada una de las ttradas.
considerando
la posicin
del centrmero
Ascas desordenadas
mismo anlisis que ordenadas
(sin importar el orden),
excepto que no se puede determinar
distancia de un gen al centrmero!