BIOTECNOLOGA E INGENIERA GENTICA 1

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BIOTECNOLOGA E INGENIERA GENTICA



I. BIOTECNOLOGA
A. Concepto La biotecnologa se puede definir como el uso de organismos vivos o de compuestos obtenidos de or-
ganismos vivos para obtener productos de valor para el hombre. Los agentes biolgicos empleados son esencial-
mente microorganismos (bacterias actinomicetes y eubacterias, levaduras y mohos), clulas animales y vegeta-
les y enzimas.
B. Biotecnologa aplicada a la industria alimentara
1. Fermentacin alcohlica
La fermentacin alcohlica es realizada principalmente por las levaduras. La ms importante es Saccharomy-
ces cerevisiae, que se emplea en la fabricacin de vino, cerveza, alcoholes industriales y pan.
En la fermentacin alcohlica los azcares se oxidan hasta ser convertidos en piruvato en un proceso seme-
jante a la gluclisis. Despus el piruvato se decarboxila y se convierte en acetaldehdo que posteriormente se
reduce a et anol.
El vino se obtiene de la fermentacin alcohlica de los azcares presentes en el zumo de uva.
La cerveza se elabora a partir de cereales (principalmente cebada, aunque tambin se utiliza maz y arroz)
que contienen almidn en sus granos. Como el almidn no fermenta directamente, se hace germinar las semi-
llas, lo que hace que produzcan amilasas que degradarn el almidn a glucosa.
Otras bebidas alcohlicas se obtienen de la destilacin del alcohol obtenido por fermentacin de diversos pro-
ductos.
En la fabricacin del pan las levaduras fermentan los azcares presentes en la harina de trigo, lo que produce
alcohol etlico y burbujas de CO
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que provocan un aumento del volumen de la masa y le dan el aspecto espon-
joso caracterstico. La coccin elimina el alcohol y destruye las clulas de levadura.
2. Fermentacin lctica
La fermentacin lctica es realizada principalmente por las bacterias lcticas (Streptococcus termophilus, Lac-
tobacillus bulgricus, Leuconostoc ) presentes de forma natural en la leche. El agriamiento natural de la le-
che se ha usado tradicionalmente para su conservacin, ya que el descenso del pH debido a la formacin de
lactato durante la fermentacin de azcares protege a los alimentos del deterioro causado por otras bacterias.
Este proceso se utiliza en la elaboracin de derivados lcteos (queso, yogur, cuajada, mantequilla, etc.).
En la fermentacin lctica, el piruvato obtenido en la gluclisis se reduce a lactato. Si el producto final es solo
lactato, la fermentacin se denomina homolctica. Si se producen adems otros compuestos, como el acetal-
dehdo o el etanol, la fermentacin es heterolctica.
3. Fermentacin actica
Las bacterias del cido actico (como Acetobacter y Gluconobacter) convierten el etanol en cido actico en la
elaboracin del vinagre.
C. Biotecnologa aplicada a la industria farmacutica
1. Produccin de antibiticos
Los antibiticos son sustancias producidas de forma natural por ciertos microorganismos (mohos, eubacterias
y actinomicetes) que inhiben el crecimiento de otros microorganismos. Del gran nmero de antibiticos descu-
biertos (unos 5.500) poco ms de un centenar son obtenidos industrialmente.
Algunos antibiticos deben ser modificados antes de ser utilizados para evitar sus efectos txicos.
Las actinobacterias del gnero Streptomyces producen antibiticos como la estreptomicina, eritromicina, tetra-
ciclina, Los hongos del genero Penicillium producen penicilinas, los primeros antibit icos descubiertos, y
otros hongos del gnero Cephalosporium producen los antibiticos denominados -lactmicos o cefalospori-
nas.
2. Produccin industrial de vacunas y sueros
La vacunacin se basa en la capacidad de memoria del sistema inmunitario. Inoculando el agente patgeno
desprovisto de su virulencia, o fragmentos del mismo que contengan antgenos adecuados, el organismo no
llega a padecer la enfermedad, pero produce anticuerpos y clulas de memoria que actan en caso de que se
produzca un contacto con el microorganismo patgeno (inmunidad artificial activa).
La utilizacin del microorganismos vivos como agente inmungeno entraa ciertos riesgos por lo que la bio-
tecnologa se ha esmerado en encontrar procedimientos que garanticen la inactivacin de los patgenos y la
produccin industrial de vacunas, lo que ha permitido erradicar ciertas enfermedades que anteriormente pro-
vocaban estragos en las poblaciones.
En la actualidad la obtencin de vacunas se realiza por medio de tcnicas de ingeniera gentica.
3. Produccin de otras sustancias
Otras sustancias, como hormonas (insulina, hormona del crecimiento, hormonas esterodicas), algunos facto-
res de coagulacin sangunea o ciertos enzimas utilizados en frmacos se obtienen tambin a partir de culti-
vos de microorganismos en los que se ha insertado, mediante procedimientos de ingeniera gentica, los ge-
nes que interesan.
D. Biotecnologa y medio ambiente
Los procedimientos conocidos como biorremediacin emplean los microorganismos como lucha contra la
contaminacin y el deterioro del medio ambiente.


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1. Tratamiento de residuos
En la depuracin de aguas residuales se combinan procesos fsico-qumicos con tratamientos microbianos pa-
ra eliminar la materia orgnica y las sustancias txicas presentes en el agua antes de devolverla a los ros.
El compostaje consiste en la descomposicin biolgica de residuos orgnicos y desechos (urbanos o agrco-
las) o de fangos resultantes de la depuracin de aguas residuales. En este proceso, las bacterias descompo-
nen los compuestos orgnicos y producen un abono denominado compost.
2. Eliminacin de mareas negras
Existen diversos microorganismos, entre los que podemos destacar las bacterias del gnero Pseudomonas,
que son capaces de descomponer el petrleo por lo que pueden ser empleados en la eliminacin de mareas
negras. Existen microorganismos capaces de degradar otras muchas sustancias txicas contaminantes.
3. Produccin de compuestos biodegradables
Algunas bacterias almacenan sus reservas de carbono en forma de compuestos llamados polibetahidroxialca-
nos o polihidroxialcanoatos (PHA) que son polisteres, es decir, verdaderos plsticos (bioplsticos), con la
ventaja de que, a diferencia de los plsticos obtenidos a partir del petrleo son biodegradables.
E. Biotecnologa aplicada a industrias agropecuarias
Durante la primera guerra mundial se emplearon microorganismos (Saccharomyces cerevisiae) como fuente de
protenas para consumo humano (protena unicelular). En la actualidad la protena unicelular se emplea para
enriquecer los piensos para el ganado por su alto contenido en protenas, vitaminas y otros elementos esenciales
para el organismo.
Los insecticidas qumicos tradicionales tienen el inconveniente de que pueden acumularse en los vegetales y ser
ingeridos posteriormente por el hombre con los consiguientes perjuicios para su salud. La bacteria Bacillus
turingensis produce una protena, no txica para el hombre, que se acumula en sus esporas y acta como
insecticida natural (insecticida biolgico).
La aplicacin de la ingeniera gentica ha permitido la obtencin de plantas y animales transgnicos,
portadores de genes exgenos de utilidad, con, entre otras, las siguientes finalidades: obtencin de plantas
resistentes a herbicidas, obtencin de plantas resistentes a los insectos, proteccin frente a infecciones
microbianas y vricas o la mejora de los productos.

II. IDEAS BSICAS DE LAS TCNICAS DE ADN RECOMBINANTE
A. Concepto La ingeniera gentica es el conjunto de tcnicas que permiten manipular el genoma de un ser vivo.
B. Clonacin de genes
Un clon de genes es un conjunto de genes idnticos procedentes de un gen concreto. La obtencin de un clon de
genes comprende las siguientes etapas:
Obtencin del fragmento de ADN que contiene el gen que se va a clonar.
Insercin de dicho gen en una molcula de ADN apropiada que sirve como vehculo o vector de clonacin.
Introduccin del vector de clonacin en una clula de otro organismo (clula hospedadora).
Deteccin del gen clonado para comprobar que se encuentra y se expresa en la clula hospedadora.
Multiplicacin de la clula hospedadora para obtener un nmero elevado de copias del gen.
En los dos primeros pasos juegan un papel esencial los enzimas (endonucleasas) de restriccin que reconocen
secuencias determinadas de nucletidos y producen cortes asimtricos que generan extremos cohesivos o
pegajosos (con secuencias complementarias de nucletidos).
Los principales vectores de clonacin son los plsmidos (pequeas molculas de ADN circular presentes en la
mayora de las bacterias y que pueden replicarse con independencia del cromosoma bacteriano) y el genoma de
ciertos virus como los bacterifagos.
Las clulas hospedadoras suelen ser bacterias (no patgenas) ya que poseen un crecimiento rpido, pueden
incorporar ADN del medio (transformacin) y es fcil y econmico cultivarlas. Entre ellas podemos destacar como
una de las ms utilizadas Escherichia coli.
El vector de clonacin suele llevar otros genes, denominados marcadores, que facilitan la deteccin del gen que
se quiere clonar. Estos genes pueden ser por ejemplo responsables de la resistencia a ciertos antibiticos o
genes de bioluminiscencia.
Otra tcnica empleada en ingeniera gentica es la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) que permite
obtener mltiples copias de un fragmento especfico de ADN a partir de un nmero muy pequeo de molculas
(amplificacin). Esta tcnica se puede emplear para clonar genes, en estudios evolutivos, histricos o
arqueolgicos o en medicina forense e investigaciones policiales.
C. Aplicaciones de la ingenera gentica
1. Aplicaciones mdicas
Algunas hormonas (insulina, hormona del crecimiento) y protenas sanguneas (p.e. factores de coagulacin)
de inters en medicina se obtenan anteriormente directamente a partir de tejidos de animales, ahora se obtie-
nen mediante las tcnicas del ADN recombinante.
Algunas vacunas, como la de la hepatitis B, se obtienen actualmente tambin por ingeniera gentica, consi-
guindose una eficacia mayor que con las obtenidas por los procedimientos tradicionales, ya que al clonar so-
lo los genes de ciertas protenas que actan como determinantes antignicos se elimina el riesgo de contraer
la enfermedad por la vacunacin (no se emplea el microorganismo completo).
Tradicionalmente era necesario aislar el agente causante de una enfermedad y cultivarlo para poder identifi-
carlo. Actualmente se emplean otras tcnicas de diagnstico como las tcnicas de inmunodiagnstico, basa-
das en la especificidad de las reacciones antgeno-anticuerpo, o las tcnicas moleculares basadas en la locali-
zacin de fragmentos del genoma caractersticos y exclusivos del patgeno.
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La terapia gnica consiste en la introduccin en el organismo de los genes responsables de la sntesis de mo-
lculas que no es capaz de sintetizar o que sintetiza de forma defectuosa. Actualmente se estn ensayando
dos tipos de vectores para introducir el gen el organismo: virus modificados y liposomas (microesferas forma-
das por lpidos).
2. Aplicaciones en agricultura y ganadera
La manipulacin gentica de las especies de inters agrcola y ganadero ha permitido la obtencin de orga-
nismos transgnicos: organismos desarrollados a partir de una clula en la que se ha introducido ADN proce-
dente de otro ser vivo.
Por este procedimiento se han conseguido plantas que contienen genes de resistencia a plagas, herbicidas y
a la sequa. Los animales transgnicos se utilizan para producir protenas humanas que pueden ser utilizadas
en el tratamiento de determinadas enfermedades o como fuente de rganos para trasplantes (xenotrasplan-
tes).
3. Significado e importancia del Proyecto Genoma Humano.
Gracias al esfuerzo conjunto de la investigacin pblica (consorcio pblico Proyecto Genoma Humano) y pri-
vada (Celera Genomics) se han conseguido localizar y secuenciar todos los genes que constituyen el genoma
de los humanos y algunos otros organismos. Aunque queda mucho por investigar ya se han obtenido algunos
datos sorprendentes:
El genoma humano tiene entre 30.00 y 40.000 genes y no los 100.000 que se pensaba.
La mayor parte del ADN son secuencias repetitivas (ADN basura) que se han ido incorporando a lo largo de
la evolucin como consecuencia de duplicaciones, translocaciones y recombinaciones con virus.
La diferencia con otras especies es menor que la esperada.
Ahora es necesario conocer dnde comienza y termina cada gen y cul es el efecto de su expresin.
Las posibles aplicaciones del conocimiento completo del genoma humano son:
Deteccin precoz y prevencin de enfermedades de origen gentico.
Terapia gnica.
Conocimiento sobre la evolucin humana y las migraciones de las poblaciones humanas a lo largo de la his-
toria.
Etc.


Declaracin universal de la UNESCO sobre el genoma humano y los derechos humanos

El 11 de Noviembre de 1997, los 186 Estados miembros de la
UNESCO aprobaron por unanimidad y aclamacin en la 29 Confe-
rencia General la Declaracin Universal sobre el Genoma Humano y
los Derechos Humanos.

Principios bsicos

El primer principio que proclama la Declaracin es el de considerar
al genoma humano como la unidad fundamental de todos los
miembros de la familia humana, reconociendo su dignidad y diversi-
dad y aadiendo que, en un sentido simblico, es el patrimonio de
la humanidad (Art.1).
El trmino patrimonio sugiere en general la posesin de un bien, o
el derecho a algo, por alguien en razn de su nacimiento o de lo que
se recibi de sus antepasados. La expresin patrimonio comn de la
Humanidad tiene un contenido jurdico innegable de manera que -en
palabras de Gros Espiell (1995)- reafirma los derechos sobre su
patrimonio gentico...y la Comunidad Internacional jurdicamente
organizada lo protege, garantiza y asegura que no pueda ser objeto
de ninguna apropiacin por parte de ningn otro individuo o persona
colectiva, llmese Estado, Nacin o Pueblo.
El Artculo 2 de la Declaracin seala el respeto a la dignidad y
derechos del individuo, cualesquiera que sean sus caractersticas
genticas; es decir, no puede haber discriminacin alguna de tipo
racial o individual (enfermedad, discapacidad, etc. de origen genti-
co). Manifiesta adems que los individuos no pueden ser reducidos
a sus caractersticas genticas y deben respetarse su carcter nico
y su diversidad. Esta idea es reafirmada en el Artculo 3 cuando
dice que el genoma humano expresa sus potencialidades de forma
diferente segn el ambiente natural y social en que se desarrolla
cada individuo.
Una de las controversias ms enconadas de la actualidad tiene que
ver con las patentes de los genes humanos. Tengo constancia de
que en las discusiones habidas en la elaboracin de los borradores
de la Declaracin hubo pases que advirtieron que votaran en contra
si se condenaba en ella a dichas patentes. Ante las presiones de
uno y otro signo, la Declaracin ha incluido un Artculo 4 -a mi juicio
un tanto ambiguo, como no poda ser de otra forma- que dice que
el genoma humano en su estado natural (la cursiva es ma) no
puede dar lugar a beneficios econmicos. La cuestin que se
plantea una vez ms es si las secuencias de ADN humano que se
pretende patentar en muchas ocasiones corresponden al estado
natural en que se encuentran en el genoma humano. Aqu podra
recordarse que la Convencin Europea sobre los Derechos Huma-
nos y la Biomedicina, abierto a la firma el 4 de Abril de 1997, tampo-
co se pronunci sobre las patentes de genes humanos, pasndole la
patata caliente a la Directiva del Parlamento Europeo y del Conse-
jo relativa a la proteccin jurdica de las invenciones biotecnolgicas
aprobada finalmente en Julio de 1998.
Es importante sealar tambin que, por presiones de ltima hora, la
Comisin de Expertos gubernamentales de ms de 80 pases -
convocada en Julio de 1997 y que fue la que redact el texto definiti-
vo presentado a la Conferencia General para su aprobacin- decidi
incluir una prohibicin de la clonacin humana en los trminos si-
guientes: Las prcticas que son contrarias a la dignidad humana,
tales como la clonacin con fines de reproduccin de seres huma-
nos, no deben ser permitidas(Art.11). En mi opinin, esta redaccin
condena la obtencin de seres humanos clnicos, pero no condena
la tcnica de clonacin en s cuando se utilice para otros fines,
salvaguardando as su posible utilizacin en algn tipo de experi-
mentacin biomdica. (Ver en esta pgina web el Tema II sobre la
clonacin en humanos).
Aunque una Declaracin Universal debe mantenerse en el marco de
los principios generales sin descender a la particularidad de las
tcnicas concretas, la presin social ante la clonacin de la oveja
Dolly (Febrero 1997) y su pos ible aplicacin a la especie humana,
forz la referencia a la clonacin por aquello de que la omisin
podra haber sido interpretada como que la UNESCO autoriza lo que
no prohibe explcitamente. La misma interpretacin podra darse a la
referencia que hace la Declaracin en el Artculo 24 sobre las reco-
mendaciones y advertencias que el CIB de la UNESCO debe hacer
a su Conferencia General en particular en cuanto a la identificacin
de las prcticas que pudieran ser contrarias a la dignidad humana,
tales como las intervenciones sobre la lnea germinal, en clara
alusin a la terapia gnica germinal, por ejemplo.