223 ISSN 0326-2383

Lat. Am. J. Pharm. 22 (3): 223-9 (2003)

Recibido el 6 de enero de 2003
Aceptado el 26 de mayo de 2003
Trabajos originales
PALABRAS CLAVE: Cromatografa, Estabilidad, RP-18, Secnidazol, Tabletas recubiertas.
KEY WORDS: Chromatographic, RP-18, Secnidazole, Stability, Coated tablets.
* Autor a quien debe enviarse la correspondencia. E-mail: cirovera@infomed.sld.cu
Estudio de Estabilidad de Tabletas
Recubiertas de Secnidazol (500 mg)
Antonio D. MOYA MIRABAL
1
, Eduardo A. RODRGUEZ-LEYES
2
*,
Tania MRQUEZ CONDE
1
, Bertha LPEZ PELEZ
1
& Iverlis DAZ POLANCO
1
1
Centro de Investigacin y Desarrollo de Medicamentos (CIDEM).
Ave 26, N 1605, Nuevo Vedado, CP 10600, La Habana, Cuba.
2
Centro de Productos Naturales, CNIC. Ave. 25 y 158, N 15202, Playa, AP 1614, La Habana, Cuba.
RESUMEN. Se realiz el estudio de estabilidad de secnidazol tabletas recubiertas de 500 mg, de produc-
cin nacional, y se determin la fecha de vencimiento mediante el mtodo de vida de estante. Para cuantifi-
car el principio activo se emple la cromatografa lquida de alta eficacia. En la tcnica, debidamente vali-
dada, se emple una columna de fase reversa RP-18, una mezcla metanol-agua (50:50, v/v) y detector ul-
travioleta con longitud de onda fijada a 320 nm. Se analiz el efecto de la humedad sobre la estabilidad del
frmaco, mediante la colocacin de muestras en hidrostatos con humedades controladas de 75, 84 y 92%.
El cumplimiento de los parmetros de calidad establecidos para este medicamento, tales como caractersti-
cas organolpticas, identificacin y valoracin del principio activo y el ensayo de disolucin, despus de
transcurridos 6, 12 y 30 meses, infieren que la formulacin desarrollada es estable en el perodo de tiempo
estudiado. El estudio de la influencia de la humedad demostr que la ganancia en peso fue inferior al 2,2%
y que la exposicin a elevados porcentajes de humedad relativa, durante 30 das, no afecta la estabilidad
del producto.
SUMMARY. Stability study of Secnidazole 500 mg coated tablets. Stability testing for secnidazole 500 mg
coated tablets of national production was performed and the expiration date was determined by the shelf life
method. A validate high-performance liquid chromatographic method for secnidazole quantification was used.
Chromatography was carried out on a RP-18 column with a methanol-water (50:50, v/v) mixture as mobile phase
and wavelength fixed at 320 nm on the UV detector. The effect of the humidity over the medicine stability was
analysed by means of the placement of samples in hydrostats with controlled humidity of 75, 84 and 92%.
Organoleptic characteristics, secnidazole identification, determination, dissolution assay and the others quality
parameters established were fulfilled during stability testing. The developed formulation was stable 30 months
after its manufacture. Study of the humidity influence showed a weight gain lower to 2.2% and proved that
tablets stability was not affected under high percents of relative humidity.
INTRODUCCIN
El secnidazol pertenece a la fam ilia de los 5-
nitroim idazoles y responde al nom bre qum ico
de ,2-dim etil-5-nitro-1H -im idazol-1-etanol; sus
propiedades son sim ilares a las de otras drogas
de su grupo, pero con un m ayor tiem po de vida
m edia en plasm a
1,2
. Este com puesto se em plea
con eficacia en el tratam iento de la giardiasis, la
am ebiasis y la trichom oniasis vaginal
3,4
. Algu-
nos autores plantean que este m edicam ento
presenta una actividad citoltica, que se ejerce
por un cam bio de la inform acin gentica del
AD N por m edio de la reduccin del grupo nitro,
pero hasta el m om ento el m ecanism o a travs
del cual ejerce su accin antiparasitaria no ha si-
do dilucidado totalm ente
3,4
. Su eleccin en la
terapia contra los protozoarios resulta ventajosa,
pues aunque no tiene un efecto tan potente co-
m o el ornidazol, el tratam iento es corto y eficaz.
A dem s, no ocasiona efectos secundarios tan
drsticos en com paracin con el m etronidazol y
otros im idazoles
3-9
.
224
Moya Mirabal, A.D., E.A. Rodrguez-Leyes, T. Mrquez Conde, B. Lpez Pelez & I. Daz Polanco
D e m anera general, los nitroim idazoles son
estables en m edio cido; aunque en m edio bsi-
co pueden form ar sales coloreadas y otros pro-
ductos de reaccin, en dependencia de los sus-
tituyentes presentes en el anillo im idazlico
10
.
En la literatura no est reportado, hasta la fecha,
ningn producto de degradacin para el secni-
dazol. Estudios de fotodegradacin realizados
con los nitroim idazoles, entre los que se inclu-
yeron algunos antiparasitarios com o el ornida-
zol, el m etronidazol y el tinidazol; dem ostraron
que la descom posicin fotoqum ica de estos
com puestos, cuando se encuentran en estado
slido, obedece a una reaccin de prim er orden
y que su estabilidad va a estar afectada por los
sustituyentes presentes en las posiciones N (1) y
C(5) del anillo im idazlico
11
. El ornidazol es un
ejem plo de lo planteado anteriorm ente, pues en
m edio bsico la -halohidrina del N (1) form a
un epxido, que posteriorm ente se transform a
en un diol
12
. El secnidazol, a diferencia de ste,
presenta en el N (1) un grupo 2-hidroxipropilo,
que le confiere m ayor estabilidad en m edio b-
sico. Aunque su higroscopicidad
13
es un factor
que puede afectar la estabilidad de la form a far-
m acutica slida que lo contenga, este inconve-
niente se puede evitar en el caso de las tabletas
m ediante el em pleo de un sistem a de recubri-
m iento apropiado.
En Cuba el D epartam ento de Form as Farm a-
cuticas del Centro de Investigacin y D esarro-
llo de M edicam entos (CID EM ) desarroll table-
tas recubiertas de secnidazol con dosificacin
de 500 m g. Para conocer el tiem po de vida til
y las condiciones ptim as de alm acenam iento
para esta form ulacin, nos trazam os com o obje-
tivo estudiar su estabilidad, por el m todo vida
de estante.
MATERIAL Y MTODOS
Para la realizacin del estudio se em plearon
m uestras de secnidazol tabletas recubiertas de
500 m g tom adas de tres lotes rotulados com o:
5001-0, 5002-0 y 5003-0, los cuales fueron ela-
borados en el D epartam ento de Form as Farm a-
cuticas del CID EM y envasados en frascos de
polietileno de baja densidad. El lote 5003-0 y su
correspondiente placebo se utilizaron en la vali-
dacin del m todo crom atogrfico em pleado en
la valoracin del principio activo. El lote 5002-0
fue seleccionado para estudiar la influencia de
la hum edad sobre los parm etros de calidad.
Com o sustancia de referencia se em ple secni-
dazol m ateria prim a, lote Farchem ia 940004/1
debidam ente certificada en el CID EM .
Valoracin del principio activo por
cromatografa lquida de alta eficacia
(CLAE)
La CLAE se desarroll en un crom atgrafo l-
quido K nauer, acoplado a un detector de longi-
tud de onda variable, con un inyector Rheodine.
Para el anlisis de las m uestras se utiliz una co-
lum na crom atogrfica Lichrospher RP-18 (250 x
4 m m ) de 10 m . Se acondicion el crom atgra-
fo em pleando una fase m vil de com posicin
m etanol-agua (50:50, v/v) y con velocidad de
flujo = 1,0 m L/m in; el volum en de inyeccin fue
de 20 L. D etector con sensibilidad 0,08 U .F.S. y
longitud de onda fijada a 320 nm .
Com o referencia se em ple una disolucin
de secnidazol sustancia de referencia de 50
g/m L. Para preparar la disolucin de ensayo se
tom aleatoriam ente 20 tabletas y se pesaron. Se
calcul el peso prom edio y se trituraron hasta
form ar un polvo fino. Se pes una cantidad de
polvo equivalente a 100 m g de principio activo
y se transfiri a un volum trico de 100 m L, se
adicion 50 m L de m etanol y se agit durante
20 m in en la zaranda, posteriorm ente se llev a
volum en con m etanol y se agit. Se filtr una
porcin de la disolucin anterior y se desecha-
ron los prim eros 20 m L del filtrado. Se tom
una alcuota de 5 m L del filtrado y se diluy 100
veces con fase m vil.
Antes de iniciar los estudios de estabilidad,
fue necesario dem ostrar que este m todo cum -
pla con parm etros tales com o: especificidad,
linealidad del sistem a y del m todo, exactitud y
precisin. Para dem ostrar la especificidad, se
procedi a degradar las tabletas y el placebo en
m edio cido (cido clorhdrico 1 m ol/L), bsico
(hidrxido de sodio 1 m ol/L) y oxidante (per-
xido de hidrgeno al 5% ). La degradacin se
efectu en tubos cerrados, los cuales se coloca-
ron en una estufa con tem peratura controlada a
80 C, durante 7 das. Se com par el crom atro-
gram a del principio activo con el crom atogram a
del placebo, y con los crom atogram as de las ta-
bletas y los placebos, degradados en dichos m e-
dios
14-17
.
Se com prob la linealidad del sistem a entre
10 y 100 g/m L. Se calcul el factor de respues-
ta y su coeficiente de variacin (CVf). Adem s,
se determ in la recta de regresin lineal y su
correspondiente coeficiente de correlacin (r).
Se realizaron las pruebas de significacin esta-
dstica de la varianza de la pendiente y de pro-
porcionalidad.
En el estudio de exactitud se analizaron pla-
cebos cargados con diferentes cantidades de
225
acta farmacutica bonaerense - vol. 22 n 3 - ao 2003
secnidazol, que representaron el 60, 80, 100,
120, y 140% de la concentracin terica del
principio activo en la tableta segn la form ula-
cin propuesta. Se aplicaron las pruebas de
Cochran y t de Student, com o criterios de eva-
luacin para determ inar s el factor concentra-
cin influa en la variabilidad de los resultados y
si no existan diferencias significativas entre la
recuperacin m edia y el 100% terico. Se grafi-
c la concentracin terica versus la prctica, se
obtuvo la recta de m ejor ajuste y los lm ites de
confianza para la pendiente y el intercepto.
En el estudio de precisin se com prob la
repetibilidad para cada analista, determ inndose
el coeficiente de variacin (CV) para las 6 rpli-
cas ensayadas por cada uno. Por otra parte en
el estudio de reproducibilidad se determ in el
CV global, em pleando para ello los resultados
obtenidos por am bos analistas, en das diferen-
tes y en un m ism o equipo; adem s, se realiz
un anova-m anova de una va, para dem ostrar
que no existan diferencias significativas entre
los resultados de uno y otro.
Los resultados obtenidos fueron procesados
con ayuda del program a Statgraphics versin 2.1
para W indow s.
Estudio de estabilidad
Se realiz por el m todo de vida de estante.
Las m uestras fueron alm acenadas bajo las condi-
ciones correspondientes a la zona clim tica IV,
dentro de la cual se encuentra Cuba
18,19
. Los
parm etros de calidad establecidos para este
m edicam ento fueron determ inados al inicio del
experim ento y con posterioridad, a los 6, 12 y
30 m eses.
El estudio de la influencia de la hum edad so-
bre la estabilidad del frm aco se desarroll colo-
cando m uestras del lote seleccionado en dife-
rentes hidrostatos a (30 2) C, en los cuales se
m antuvieron las tabletas con un 84, 92 y 98% de
hum edad relativa (H R). Se m antuvo un chequeo
del increm ento en peso hasta los 30 das, al ca-
bo de los cuales se determ inaron los parm etros
de calidad que rigieron el estudio.
El ensayo de disolucin se efectu en un di-
solutor Erw eka, m odelo D T6R y bajo las si-
guientes condiciones: m edio de disolucin H Cl
0,1 m ol/L (900 m L), (37 0,5) C de tem peratu-
ra, velocidad rotacional 100 rpm , sistem a de agi-
tacin II (paletas) y 60 m in de duracin. Las de-
term inaciones cuantitativas se realizaron en un
espectrofotm etro U V /V IS Pye U nicam 8720
em pleando un m todo espectrofotom trico vali-
dado con anterioridad, segn los criterios esta-
blecidos en la literatura internacional
14-17,20-23
.
Figura 1. Crom atogram as del patrn de secnidazol
(A, tr = 3,46 m in) y el placebo (B).
Todos los reactivos y disolventes em pleados
fueron de calidad crom atogrfica (Laboratorios
M erck, Alem ania).
RESULTADOS Y DISCUSIN
Tcnica por CLAE para valorar el principio
activo:
En el estudio de la especificidad se obtuvie-
ron los crom atogram as del patrn y del placebo
(Figura 1); donde se aprecia que el placebo no
presenta ningn pico que coincida con el tiem -
po de retencin (tr) de la sustancia de referen-
cia; esto dem uestra que los excipientes em plea-
dos en la form ulacin no interfieren en la cuan-
tificacin del principio activo.
Los estudios de degradacin en m edio cido
m ostraron un pico con el m ism o tr y un rea
bajo la curva (ABC) sim ilar al patrn de referen-
cia (Figuras 2A y 2B), o sea, no se degrad el
principio activo, por lo que podem os afirm ar
que la m olcula es resistente frente a los cidos.
Este resultado era de esperarse si se tiene en
cuenta que los im idazoles son estables frente a
agentes hidrolticos, donde m uestran un equili-
brio tautom rico a travs de la form acin de va-
rias estructuras resonantes
10,24
.
En m edio bsico se observ la aparicin de
una coloracin rojiza indicativa de un proceso
de degradacin. En la Figura 3B se m uestra el
crom atogram a obtenido, donde se aprecia el pi-
226
Moya Mirabal, A.D., E.A. Rodrguez-Leyes, T. Mrquez Conde, B. Lpez Pelez & I. Daz Polanco
co de un producto de degradacin que no inter-
fiere en la cuantificacin del secnidazol, y una
dism inucin en el ABC y la altura del pico de
este ltim o. El com portam iento observado se
debe probablem ente a la form acin de com -
puestos con un m ayor nm ero de insaturacio-
Figura 2. Especificidad del m todo. Crom atogram a
del patrn de secnidazol (A). Crom atogram as de la
tableta (B) y el placebo (C), degradados en m edio
cido.
Figura 3. Especificidad del m todo. Crom atogram a del patrn de secnidazol (A). Crom atogram as de la tableta y
el placebo degradados, en m edio bsico (By C) y en m edio oxidante (Dy E). El pico 2 corresponde a un pro-
ducto de degradacin (tr = 2,03 m in).
nes, producto de la reaccin del grupo nitro en
m edio alcalino, con la subsiguiente form acin
de derivados nitrogenados tales com o azo y
azoxi derivados
10,24,25
.
En m edio oxidante se observ una dism inu-
cin del ABC del pico del secnidazol, pero no
apareci ninguna seal que interfiriera a 320 nm
(Figura 3D ). La dism inucin en la concentracin
de analito, despus de haberse som etido a la
accin del perxido de hidrgeno, se debe pro-
bablem ente a la apertura del anillo, proceso que
puede ocurrirle a los heterociclos nitrogenados
en m edio oxidante
10
.
Los crom atogram as obtenidos a partir de las
m uestras de placebo degradado no m ostraron
ninguna seal en la zona de trabajo (Figuras 2C,
3C y 3E). Finalm ente, podem os plantear que el
m todo diseado es especfico y puede ser em -
pleado com o parte del control de calidad y en
los estudios de estabilidad.
En el estudio de la linealidad del sistem a, el
CVf fue 1,23% , valor inferior al lm ite estableci-
do de 5% . La curva de calibracin respondi a
la ecuacin y = 46 025,7x + 7 351,2, con r supe-
rior a 0,99 (0,999). La prueba de significacin
estadstica de la varianza de la pendiente de-
m ostr que la m ism a tiene un 95% de probabili-
dad de ser distinta de cero; a su vez, los lm ites
de confianza del intercepto incluyeron al cero.
El sistem a es lineal en el intervalo de concentra-
ciones estudiado
14-17,20-23
.
227
acta farmacutica bonaerense - vol. 22 n 3 - ao 2003
D urante el estudio de la exactitud y com o
resultado de la prueba de Cochran, se obtuvo
un valor prctico de 0,4630 inferior al tabulado
de 0,6838, lo que significa que el factor concen-
tracin no est relacionado con la variabilidad
de los resultados. Al aplicar la prueba t de Stu-
dent a los resultados expresados com o porcen-
taje de recobro, se obtuvo un valor prctico pa-
ra t de 2,07, inferior al valor terico de 2,14; es-
to dem uestra que la exactitud del m todo es co-
rrecta. La recta obtenida al graficar la concentra-
cin terica versus la prctica fue y = 1,01x +
0,056, y su r = 0,998 (r > 0,99). Los lm ites de
Da Analista
X
D. E.
C.V. C.V.
(%) (%) Global (%)
1
1 98,61 0,332 0,34
2 98,78 0,317 0,32
0,71
2
1 99,60 0,993 0,99
2 99,16 0,607 0,61
Tabla 1. Estudio de la precisin del m todo.
confianza para la pendiente y el intercepto in-
cluyeron al uno y al cero respectivam ente. El
m todo es lineal y exacto en el intervalo estu-
diado
14-17,20-23
.
Al estudiar la precisin, el coeficiente de va-
riacin para cada analista y el global fueron in-
feriores al 2% (Tabla 1), lm ite establecido para
los m todos crom atogrficos. La prueba de ano-
va-m anova result no significativa para un 95%
de confianza; por lo tanto, no existen diferen-
cias significativas entre los resultados obtenidos
por am bos analistas, y la precisin es buena
14-
17,20-23
.
Estudio de estabilidad
En el desarrollo de este estudio se utiliz el
m todo de vida de estante, puesto que la apli-
cacin de la ecuacin de Arrhenius a los estu-
dios de estabilidad acelerada frecuentem ente no
es vlida para form as farm acuticas slidas, de-
bido a que estas constituyen un sistem a hetero-
gneo en el cual los factores am bientales tales
com o la luz, la hum edad, la tem peratura y el ai-
re no influyen uniform em ente
26
.
En las Tablas 2 y 3 se m uestran los resulta-
dos obtenidos al inicio y durante el estudio. Co-
m o se aprecia, los indicadores de calidad para
los 3 lotes se m antienen dentro de los lm ites
establecidos, en un perodo de tiem po corres-
pondiente a 30 m eses.
Al estudiar la influencia de la hum edad so-
bre la estabilidad del frm aco, se observ que el
increm ento en peso para los tres niveles de hu-
m edad estudiados fue inferior al 2,2% (Figura
Lotes 5001-0 5002-0 5003-0 Lmites
Caractersticas
Responde Responde Responde
Tabletas biconvexas
organolpticas de color crem a
El tiem po de retencin
Identificacin Responde Responde Responde de la m uestra y la referencia
coinciden en 5%
Valoracin
101,67 104,38 99,71
90,0 -110,0%
(% ) (450-550 m g/ tableta)
U niform idad 101,67 101,84 99,71 85,0-115,0%
de dosis (% ) D .E. = 2,00% D .E. = 2,35% D .E. =1,83% (425-575 m g/ tableta)
D isolucin 102,42 89,35 109,61 N o debe ser m enor de 75%
(% ) 105,70 107,16 106,06 (Q +5% en 60 m inutos)
102,72 107,47 81,37
102,42 108,08 100,71
87,57 105,01 91,23
88,35 101,15 109,00
Tabla 2. Resultados de los parm etros de calidad iniciales de las tabletas recubiertas de Secnidazol 500 m g.
228
Moya Mirabal, A.D., E.A. Rodrguez-Leyes, T. Mrquez Conde, B. Lpez Pelez & I. Daz Polanco
4). D espus de registrar el increm ento en peso
durante 30 das se determ inaron los parm etros
de calidad, los cuales estuvieron dentro de los l-
m ites establecidos para esta form ulacin (Tabla 4).
El cum plim iento de los parm etros de cali-
dad establecidos para este m edicam ento, duran-
te el tiem po estudiado, dem uestra que esta for-
m ulacin tiene una estabilidad de 30 m eses des-
pus de haberse producido. Elevados niveles de
hum edad relativa no influyeron significativam ente
sobre el increm ento del peso de las tabletas y sus
indicadores de calidad; por lo tanto, se com prob
la efectividad del sistem a de recubrim iento em -
pleado. En casos com o este, donde el principio
activo es higroscpico, el sistem a de recubrim ien-
to evita que se propicien reacciones de hidrlisis
% de Humedad 84 92 98 Lmites
Caractersticas
Responde Responde Responde
Tabletas biconvexas
organolpticas de color crem a
Identificacin Responde Responde Responde
El tiem po de retencin de la m uestra
y la referencia coinciden en 5%
Valoracin (% ) 97,09 97,96 101,13 90,0 -110,0 %
D isolucin 101,42 91,76 101,54 N o debe ser m enor de 75%
(% ) 101,55 94,74 101,88 (Q +5% en 60 m inutos)
98,43 95,63 100,78
97,39 92,07 101,32
102,96 94,12 104,07
98,69 95,25 101,14
Tabla 4. Resultados de los parm etros de calidad del lote 5002-0 som etido a condiciones de hum edad controla-
da, durante 30 das.
Figura 4. Estudio de la influencia de la hum edad so-
bre el increm ento en peso de las tabletas de secnida-
zol de 500 m g.
Tiempo Lote Valoracin (%) Disolucin (%)
6 m eses 5001-0 100,0 83,4 92,5 96,6 100,2 100,4 95,9
5002-0 103,0 101,3 102,3 104,6 102,5 95,3 96,7
5003-0 100,0 96,5 93,1 102,3 100,3 91,2 90,4
12 m eses 5001-0 101,0 100,8 97,5 94,3 88,4 91,6 94,3
5002-0 99,0 100,8 102,2 103,5 104,3 106,7 109,6
5003-0 99,7 100,8 105,8 96,0 93,4 105,2 103,1
30 m eses 5001-0 96,1 92,4 95,7 101,4 90,1 89,6 90,7
5002-0 94,5 95,6 97,1 90,5 86,2 89,5 91,4
5003-0 93,6 92,5 98,6 90,3 88,7 85,4 91,2
Tabla 3. Resultados obtenidos para los parm etros de calidad despus de 6, 12 y 30 m eses de fabricadas las ta-
bletas recubiertas de Secnidazol 500 m g.
229
acta farmacutica bonaerense - vol. 22 n 3 - ao 2003
debido a la absorcin de agua y en consecuen-
cia, que se afecte la estabilidad de la tableta.
CONCLUSIONES
Se desarroll un m todo por CLAE que pue-
de ser em pleado com o parte del control de cali-
dad y de los estudios de estabilidad de las table-
tas recubiertas de secnidazol con dosificacin
de 500 m g. Este m todo es especfico con res-
pecto a los excipientes em pleados en la form u-
lacin, a los productos de degradacin de los
m ism os, y a los productos de degradacin del
principio activo. Adem s, cum ple con los par-
m etros de validacin: linealidad, exactitud y
precisin.
Los resultados obtenidos durante el estudio
de estabilidad nos perm iten concluir que la for-
m ulacin secnidazol tabletas recubiertas de 500
m g, desarrollada en el D epartam ento de Form as
Farm acuticas del CID EM , tiene un tiem po de
vida til de 30 m eses cuando se encuentra en-
vasada en frascos de polietileno de baja densi-
dad, y alm acenada bajo las condiciones corres-
pondientes a la zona clim tica IV.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. M artindale (1999) The com plete D rug Refe-
rence(R. Parfitt, ed.), 32 Ed., Pharm aceutical
Press, London
2. The M erck Index (1989), 11. Ed., M erck Ca.
Rahw ay, N .J., U SA.
3. H ardm an, J.G . & L.E. Lim bird (1996) The
Pharm acological Basis of Therapeutics(G ood-
m an, A., L. G oodm an & A. G ilm an, eds.), 9a.
Ed., M cG raw -H ill, N .Y ., pgs. 1043-58.
4. M elndez, E & J. Snchez (1999) Parasitologa
M dica Bsica. Protozoarios, 2. Ed., Edicio-
nes Fundaeduco, Barquisim eto.
5. O m rani, G ., A . Rastegar-Lari & M . K ham seh
(1995) J. Pak. Med. Assoc. 45: 159
6. Cedillo, R. & O . M uoz (1992) J. Med. Micro-
biol. 37: 221-4
7. Q ureshi, H ., R. Bagai, S.R. Zuberi W . Ahm ed &
S. Q ureshi (1994) J. Pak. Med. Assoc. 44: 93-4.
8. M odelo O M S de inform acin sobre prescrip-
cin de m edicam entos (1991) M edicam entos
utilizados en las enferm edades parasitarias,
G inebra, pgs. 3, 6
9. G illis, J.C. & L.R. W isem an (1996) Drugs 51:
621-38.
10. H ofm ann, K . (1953) Im idazole and Its D eriva-
tives, Part I, Interscience Publishers, Inc.,
N .Y ., pgs. 127-35.
11. M arciniec, B., A. Bugaj & W . K edziora (1997)
Pharmazie 52: 220-3
12. Valds, J.R., J.A. M artnez, B. Lpez & C. M art-
nez (1995) Pharma Science 5: 391-5
13. Secnidazol. M onografa de la firm a Rhone-Pou-
lenc (1980) Francia.
14. Castro, M ., S. G ascn, M . Pujol, J. Sans & L. Vi-
cente (1989) V alidacin de m todos analti-
cos, M onografa AEFI, H ew lett Packard.
15. Fernndez, A. (1995) Validacin de tcnicas
analticas, D epartam ento de Estabilidad, CI-
D EM .
16. Food and D rug Adm inistration (1987) G uideli-
ne for Subm itting Sam ples and Analytical D ata
for M ethod Validation, U SA.
17. G reen, C. (2000) J. Validation Technol. 6: 622-
33
18. ICH H arm onized Tripartite G uideline (1993)
Stability testing of new drug substance and
products, U SA- U E- Japan.
19. ICH H arm onized Tripartite G uideline (1996)
Extension of the International Tripartite G ui-
deline for Stability testing of new drug subs-
tance and products to countries of Clim ate Zo-
ne III and IV, U SA- U E-Japan.
20. U nited States Pharm acopoeia 24 (2000), N atio-
nal Publishing, Philadelphia, pgs. 2149-52.
21. H uber, L. (1998) Validation of analytical m et-
hods. Review and strategy, L.C.G .C. Interna-
tional, pgs. 96-105.
22. Jenke, D .R. (1996)J. Liq. Chrom. Rel. Techonol.
19: 737-57.
23. Jenke, D .R. (1996) J. Liq. Chrom. Rel. Techonol.
19: 183-9.
24. W ade, J.R. (1987) O rganic Chem istry, Prenti-
ce-H all, Inc., pgs. 923, 1322.
25. Parker, J. & J. Vaughan (1955) A m odern ap-
proach to organic chem istry, Ed. Revoluciona-
ria, pgs. 122, 601-13.
26. Trum an, K .G ., R.A. Lyons & M .S.H . Colem an
(1995) Drug Dev. Ind. Pharm. 21: 1429-37