ISSN 1900-8260

Diciembre de 2010 N. 10 Pp 120-125 Publicada en lnea por la Asociacin Colombiana de Facultades de Ingeniera -ACOFI- www.acofi.edu.co
Enviado: 30/04/2009 Aprobado: 31/05/2010
PRODUCCIN DE BIOETANOL A PARTIR DE
LA FERMENTACIN ALCOHLICA DE JARABES
GLUCOSADOS DERIVADOS DE CSCARAS DE
NARANJA Y PIA
Lesly P. Tejeda, Candelaria Tejada, ngel Villabona, Mario R. Alvear, Carlos R. Castillo, Daniela L. Henao, Wilfredo Marimn,
Natali Madariaga, Arnulfo Tarn
Universidad de Cartagena, Cartagena de Indias, (Colombia)
Resumen
El objetivo de este trabajo fue obtener bioetanol a partir de cscaras de naranja (Citrus sinensis) y pia
(Anans sativus). Se determin el contenido de azcares reductores de los materiales lignocelulsicos.
Mediante un pretratamiento fsico se redujo el tamao de las muestras y, la remocin de lignina se realiz
con hidrxido de sodio y sulfato de calcio. La hidrlisis cida se llev a cabo con cido sulfrico al 5%
a 125C y 15 psi para obtener un jarabe azucarado. Este jarabe fue fermentado con Saccharomyces cere-
visiae en un reactor con agitacin durante 7 horas. El etanol obtenido fue separado por microdestilacin.
Se determin el contenido de etanol por cromatografa de gases y se encontr, fnalmente, que con las
cscaras de naranja se obtuvo mayor contenido de etanol, 8.4 mg/g, que con las cscaras de pia, 1.0 mg/g.
Palabras clave: Etanol, biomasa lignocelulsica, cscaras de naranja, cscaras de pia, hidrlisis cida
Abstract
The aim of this study was to obtain bioethanol from shells of orange (Citrus sinensis) and pineapple (Ana-
nas sativus). Reducing sugars was determined in lignocellulosic materials. Through a physical pretreatment
samples size was reduced and removal of lignin was done with sodium hydroxide and calcium sulfate. The
acid hydrolysis was carried out with sulfuric acid to 5% at 125 C and 15 psi to produce sugary syrup. This
syrup was fermented with Saccharomyces cerevisiae in a reactor with agitation for 7 hours. The ethanol
was obtained separately by microdistillation. Ethanol content was determined by gas chromatography and
it was found that orange shells produced higher ethanol content, 8.4 mg /g than pineapple shells, 1.0 mg /g.
Keywords: Bioethanol, lignocellulosic biomass, orange shells, pineapple shells, acid hydrolysis
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Produccin de bioetanol a partir de la fermentacin alcohlica de jarabes glucosados derivados de cscaras de naranja y pia
Introduccin
Las tcnicas actuales de produccin de etanol a
partir de cereales y caa de azcar presentan el
problema de la seguridad alimentaria. De igual
forma, la produccin de etanol carburante por
medio de estas materias primas no ha llenado
las expectativas con respecto a la disminucin
de gases invernaderos y de aumento en la pro-
duccin de energa con respecto a la gastada.
Por otro lado, segn Uyazn & Gil (2003), en
el mundo se producen aproximadamente 1600
millones de toneladas por ao de residuos
slidos, los cuales generan graves problemas,
no slo por el deterioro progresivo del medio
ambiente, sino tambin desde el punto de vista
econmico puesto que los costos de recolec-
cin, transporte y disposicin fnal son cada
vez mayores.
En el caso de Colombia, las cifras del Ministerio
de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorial
indican que en un da el pas produce 27300 tone-
ladas de basura de las cuales el 65% son residuos
orgnicos. Por estas razones, se est impulsando
el estudio de la produccin de bioetanol de ter-
cera generacin, el cual es producido a partir de
biomasa lignocelulsica residual, compuesta de
acuerdo con Olsson & Hahn-Hiigerdl (1996) por
dos polmeros de carbohidratos, la celulosa (35-
50%) y la hemicelulosa (15-25%), y un polmero
fenlico, la lignina (20-25%).
El bioetanol de tercera generacin se puede ob-
tener a partir de jarabes glucosados producidos
en la hidrlisis de residuos lignocelulsicos.
Una de las principales fuentes de la cual se
puede obtener jarabe glucosado son las cscaras
de frutas que en su gran mayora son considera-
das biomasas desvalorizadas. En las industrias
de la Costa Caribe colombiana, frutas como
la naranja y la pia, tienen gran infuencia en
el mercado, pero sus cscaras son desechadas,
desaprovechando el valor que stas tienen y
adems que el uso de este subproducto agrcola
se limita a la alimentacin de ganado bovino.
Segn Rincn, et al. (2005), las cscaras de
naranja representan aproximadamente del 45 al
60% del peso de la fruta. El bioetanol obtenido
por fermentacin de estas materias primas que
contienen hidratos de carbono, se adapta par-
ticularmente bien para sustituir a la gasolina
en los motores de encendido por chispa. La
produccin de etanol combustible a partir de
material lignocelulsico se ha convertido en una
alternativa interesante en la utilizacin de este
tipo de residuos que podran abrir nuevos mer-
cados para su revalorizacin. En la produccin
de bioetanol partir de material lignocelulsico
tienen lugar varios procesos fsicos, qumicos
y biolgicos como son: reduccin de tamao,
remocin de lignina, hidrlisis cida, fermen-
tacin y destilacin, segn lo reportan Teubner,
et al. (1999).
El tema del etanol lignocelulsico ha sido in-
vestigado ampliamente a nivel internacional.
En Japn, Sugimoto, et al. (2008) han desa-
rrollado un proceso para el pretratamiento de
la biomasa lignocelulsica con ozono para el
rompimiento de las molculas de lignocelulosa,
con buenos resultados. En Espaa en el Centro
de investigaciones Energticas, Medioambien-
tales y Tecnolgicas, CIEMAT, Oliva (2003)
se optimiz la explosin por vapor de bioma-
sa de madera chopo sobre Kluyveromyces
marxianus en un proceso de sacarifcacin
y fermentacin simultneas, con distintos tra-
tamientos de destoxifcacin: neutralizacin,
evaporacin, procesos de oxidacin avanzada
y aplicacin de zeolitas. En Suecia, Lindstedt
(2003) reporta el montaje de una planta piloto
para obtener etanol a partir de residuos de la
madera. Se desarroll una hidrlisis cida con
cido sulfrico y dixido de azufre en dos
etapas seguida de una etapa para hidrlisis
enzimtica. En Estados Unidos, Zhang, et al.
(2007) usaron cido fosfrico concentrado
como solvente no voltil para la celulosa, un
solvente orgnico altamente voltil (acetona)
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y agua. Durante el fraccionamiento se logr
separar cido actico, lignina, hemicelulosa
y celulosa amorfa, la cual fue hidrolizada a
glucosa y fermentada hasta etanol. En Mxico,
Garca, et al. (2005) en la Universidad de Que-
rtaro, investigaron la hidrlisis de derivados
de la industria papelera, residuos agrcolas, y
municipales con fnes de obtener etanol. Como
resultados han logrado el diseo y montaje de
un reactor para la hidrlisis de estos residuos.
En Venezuela, Aguilar & Canizales (2005) de la
Universidad Veracruzana lograron la obtencin
de azcares fermentables a partir de residuos
lignocelulsicos de la industria cervecera
mediante hidrlisis cida y desarrollaron un
modelo cintico. En la Universidad de Zuila
(Venezuela), Ferrer, et al. (2002) han estudiado
la cintica de la hidrlisis cida del bagacillo de
caa para obtener azcares reductores. El mejor
resultado se consigui con cido sulfrico al
6% y 4 horas de reaccin. Adicionalmente, han
realizado la hidrlisis cida de la pulpa de caf
con cido sulfrico.
A nivel nacional se destaca que en Bogot,
Urbaneja, et al. (1997), en la Universidad
Nacional de Colombia, se realiz a escala pi-
loto la hidrlisis cida del bagazo de la caa
de azcar con cido sulfrico, se analizaron
variables como porcentaje de slidos en el
bagazo, temperatura y tiempo de reaccin y
se obtuvieron los mejores resultados a 50C
y bajos porcentajes de slidos. En Medelln,
en la Universidad EAFIT, Meja et al. (2007)
reportan la hidrlisis cida y enzimtica a resi-
duos del mango comn, se obtuvieron mejores
resultados con la hidrlisis cida usando cido
sulfrico en proporcin de 0.5%. En la Univer-
sidad Nacional de Colombia, Monsalve, et al.
(2006) obtuvieron etanol a partir de cscaras de
banano y almidn de yuca mediante hidrlisis
cida con cido sulfrico y fermentacin con
Saccharomyces cerevisiae y Zymomonas mo-
bilis. Se obtuvieron concentraciones cercanas
al 8% de etanol.
Metodologa
Materias primas usadas
La naranja (Citrus sinensis) es una especie
subtropical y en Colombia se destina exclusi-
vamente al mercado en fresco. En la ciudad de
Cartagena de Indias (Colombia), las cscaras de
naranja son desechadas en grandes cantidades
en hoteles, restaurantes y ventas estacionarias
de jugos. A su vez, en el departamento de Bo-
lvar (Colombia), existen dos despulpadoras de
frutas y una industria de vino de naranja, que
dentro de los residuos que generan, se incluyen
las cscaras de naranja. Por su parte la pia
(Anans sativus) es el fruto tropical mejor po-
sicionado ya que su comercializacin se orienta
a los principales pases desarrollados. La com-
posicin en porcentaje de una pia tpica de la
variedad Cayena lisa es: Pulpa (33%), corazn
(6%), cscara (41%) y corona (20%). Al igual
que las cscaras de naranja, las cscaras de
pia son desechadas en hoteles, restaurantes y
despulpadoras de frutas.
Caracterizacin del material
Las materias primas fueron caracterizadas
para determinar el porcentaje de humedad y
de azucares reductores presentes; para ello se
realiz el mtodo bsico reportado por Acosta
(2007) para la humedad y mtodo volumtrico
de Fehling para la determinacin de hidratos
de carbono.
Eliminacin de Lignina
La cscaras de pia y naranja se redujeron
a un tamao de partcula aproximado de 2.0
mm, teniendo presente la separacin de los
restos de pulpa. Se pesaron muestras de 50 gr
y se realiz la eliminacin de lignina, sumer-
giendo las muestras en una solucin de NaOH
0.1N durante 15 minutos. Posteriormente se
adicion sulfato de calcio y se dej en repo-
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Produccin de bioetanol a partir de la fermentacin alcohlica de jarabes glucosados derivados de cscaras de naranja y pia
so por 3 horas de acuerdo a lo reportado por
Hoyos & Prez (2005). Por ltimo, se separ
el material particulado de la solucin por
decantacin.
Hidrlisis
La hidrlisis cida se llev a cabo, adicionando
50 ml de cido sulfrico al 5% por cada 100
gramos de cscara de fruta, a una temperatura
de 125C y 15 psi, regulada por medio de un
autoclave, durante 15 minutos, como lo repor-
tan Sun & Cheng (2002). Luego los jarabes
obtenidos se separaron de los componentes
que precipitaron, por centrifugacin. Se deter-
min el contenido de azcares en los jarabes
obtenidos.
Fermentacin
Despus de la hidrlisis, se ajust el pH a
4,5 5,0 con NaOH 5 N, y como nutrientes
se utiliz 0,25 % de fosfato (NH4)3PO4,
nitrgeno y se inocul con 0,1 % P/V de le-
vadura activa seca comercial (Saccharomyces
cerevisiae) disuelta en un poco del jarabe
como lo reportan Cuadrado & Vlez (2006).
La fermentacin se realiz en erlenmeyers de
250 ml, con un volumen efectivo de trabajo
de aproximadamente 50 ml en anaerobiosis
a 30C y 200 rpm, en agitadores orbitales
Nouva II, por 5 horas, segn Ruz & Arias
(1997), controlando el pH y la temperatura
de la fermentacin alcohlica. Se tomaron
muestras cada 90 minutos durante 7 horas y
posteriormente a las 24 horas.
Destilacin simple
El proceso se llev a cabo calentando hasta
100C en un bao mara la solucin contenida
en un picnmetro conectado a un condensa-
dor.
El proceso completo se describe en la grfca 1.
Grfca 1. Diagrama del procedimiento metodolgico
Resultados y discusin
La caracterizacin de las cscaras de pia y na-
ranja se reporta en la tabla 1. De acuerdo con las
determinaciones realizadas, las cscaras de naranja
presentaron menor contenido de humedad y mayor
contenido de azcares reductores, por lo tanto se
explica que durante la hidrlisis cida se obtuviera
un jarabe glucosado con mayor contenido de az-
cares, 80 g/l comparado con las cscaras de pia
que alcanzaron una concentracin de 45 g/l.
Tabla 1. Caracterizacin de las cscaras de frutas
Cscaras %Humedad % Azcares
Naranja 69.35 2.788
Pia 84.07 0.883
En el estudio de la hidrlisis cida con cscaras
de banano, Monsalve, et al. (2006), bajo las
mismas condiciones de estudio se reportaron
jarabes con contenido de azcares de 20 g/l,
en comparacin, las cscaras de pia y naranja
ofrecen mejor resultado.
Durante la fermentacin de los jarabes glucosa-
dos se realiz la determinacin de los porcentajes
de etanol por cromatografa de gases a diferentes
intervalos de tiempo, como se muestra en la
grfca 2. Se observa una mayor produccin de
etanol para las cscaras de naranja con respecto a
las cscaras de pia en un tiempo de 24 horas. La
fermentacin de las cscaras de pia se complet
en 5 horas aproximadamente.
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Grfca 2. Seguimiento de la fermentacin
La determinacin final de etanol y metanol
obtenido se muestra en la Tabla 2. El contenido
de etanol fue considerablemente mayor que con
las cscaras de pia. Adicionalmente, con las
cscaras de naranja, no se obtuvo metanol, lo
cual es ventajoso porque disminuye los costos
de separacin.
Tabla 2. Mediciones de etanol y metanol
Cscaras Etanol (mg/L)
Metanol
(mg/L)
Naranja 13981 0
Pia 1225 38
Al realizar el balance de masa, se estableci
que la produccin de etanol a partir de cscaras
de frutas es de poco rendimiento debido a que
se requieren grandes pesos de estos residuos. A
partir de las cscaras de naranja se obtuvo 8,4
mg de etanol por cada gramo de cscaras y a
partir de las de pia, 1,0 mg de etanol por cada
gramo de cscaras.
Conclusiones
Se pudo observar que las cscaras de naranja
son las de mejor comportamiento; poseen un
mayor porcentaje de azcares reductores y por
consiguiente sus jarabes glucosados produjeron
mayor contenido de etanol.
El rendimiento en la obtencin de etanol a
partir de cscaras de pia y naranja es bajo, sin
embargo, teniendo en cuenta que las cscaras
son un residuo no aprovechado y de alta pro-
duccin en los sectores hotelero e industrial, a
gran escala puede constituirse en una alternativa
de inters.
Referencias
Acosta, A. (2007). Manual de procedimientos del labo-
ratorio de Bromatologa de la Facultad de Ciencias
Qumicas y Farmacuticas de la Universidad de
Cartagena. Cartagena, Colombia.
Aguilar, N. & Canizales, M. (2005). Residuo Lignocelul-
sico Cervecero, una nueva materia prima. Universi-
dad Veracruzana. Revista Cerveza y Malta.168, pp.
37-41. Consultado el 15 de Agosto de 2008 en http://
dialnet.unirioja.es
Cuadrado, B. & Vlez, M. (2006). Prctica N 1. Obtencin
de vino de frutas. Gua de Prcticas de Microbiologa
Industrial. Universidad de Cartagena. Cartagena,
Colombia.
Ferrer, J. R., Pez, G., Arenas de Moreno, L., Chandler,
C., Mrmol, Z. & Sandoval, L. (2002). Cintica de
la hidrlisis cida del bagacillo de caa de azcar.
Universidad de Zulia. Revista Facultad de Agrono-
ma, 19, (1), pp. 23-33.
Garca, L., Pless, R. & Gonzalez, E. (2005). Diseo de
un proceso para la hidrlisis de residuos lignocelu-
lsicos. Universidad Tecnolgica San Juan del Ro,
Quertaro. Consultado el 18 de Noviembre de 2008
en http://www.cicataqro.ipn.mx
Hoyos, L. & Prez, Y. (2005). Pretratamiento del Material
Lignocelulsico de la planta de banano y su fruto
para la produccin de jarabe. Universidad Nacional
de Colombia Sede Medelln, Colombia.
Lindstedt, J. (2003). Alcohol production from lignocellu-
losic feedstock. BioAlcohol Foundation Sweden,
Fachtagung. Consultado el 11 de Enero de 2009 en
http://www.fv-sonnenenergie.de.pdf
Meja, L. F., Martnez, H. A., Betancourt, J. E., & Cas-
trilln, C. E., (2007). Aprovechamiento del residuo
agroindustrial del mango comn (Mangifera indica
L.) en la obtencin de azcares fermentables. Inge-
niera y Ciencia, 3, (6), pp. 41-62.
125
Copyright 2010 Asociacin Colombiana de Facultades de Ingeniera
Produccin de bioetanol a partir de la fermentacin alcohlica de jarabes glucosados derivados de cscaras de naranja y pia
Monsalve, J., Medina, V. & Ruz, A. (2006). Produccin
de etanol a partir de la cscara de banano y de almi-
dn de yuca. Dyna Revista Facultad de Minas, 73,
(150), pp. 21-27.
Oliva, J. (2003). Efecto de los productos de degradacin
originados en la explosin por vapor de biomasa de
chopo sobre Kluyveromyces marxianus. Centro
de investigaciones Energticas, Medioambientales
y Tecnolgicas, CIEMAT. Madrid, Espaa.
Olsson, L. & Hahn-Hiigerdl, B. (1996). Fermentation of
lignocellulosic hydrolysates for ethanol produc-
tion. Enzyme and Microbial Technology. 18, pp.
312-331.
Rincn, A., Vsquez, M. & Padilla, F. (2005). Composi-
cin qumica y compuestos bioactivos de las harinas
de cscaras de naranja (Citrus sinensis), mandarina
(Citrus reticulata) y toronja (Citrus paradisi) culti-
vadas en Venezuela. Unidad de Anlisis de alimen-
tos, Facultad de Farmacia, Universidad Central de
Venezuela.
Ruiz, A. & Arias, E. (1997). Fermentacin Alcohlica
de Muclago de Caf con Levaduras. Universidad
Nacional de Colombia Sede Medelln, Colombia.
Sugimoto, T., Magara, K. & Hosoya, S. (2008). Ozone
Pretreatment for Ethanol Production Using Ligno-
cellulosic Materials. Forestry and Forest Products
Research Institute. 20 January. Consultado el 15 de
Diciembre de 2008 en http://www.biomass-asia-
workshop.jp
Sun, Y. & Cheng, J. (2002). Hydrolysis of lignocellulosic
materials for ethanol production. A review. Biore-
source Technol. Vol. 83, pp. 111.
Teubner, C., Gysin, H., Levin, H., Hansen, H., Schnfelt,
S., Ehlert, W. & Lechtaler, W. (1999). El gran libro de
los frutos exticos. Grupo ngel Rey (Import, Export
& Marketing). Editorial Everest, pp. 21-27.
Urbaneja, G., Ferrer, J., Pez, G., Arenas de Moreno, L.,
Colina, G. & Sandoval, Luis. (1997). Hidrlisis
cida y caracterizacin de carbohidratos de la pulpa
de caf. Universidad Nacional. Revista Facultad de
Agronoma. Vol. 14, pp. 265-275.
Uyazn, A. & Gil, I. (2003). Simulacin de la Deshi-
dratacin de Etanol Azeotrpico por Destilacin
Extractiva. Tesis Universidad Nacional de Colombia,
Bogot, Colombia.
Zhang, YHP., Ding, SY., Mielenz, J.R., Cui, JB., Elan-
der, R.T., Laser, M., Himmel, M.E., McMillan, J.R. &
Lynd, L.R. (2007). Fractionating Recalcitrant Ligno-
cellulose at Modest Reaction Conditions. Biotechno-
logy and Bioengineering. 97, Vol. 2, pp. 214-223.
Los puntos de vista expresados en este artculo no refejan necesariamente la opinin de la
Asociacin Colombiana de Facultades de Ingeniera.
Sobre los autores
Lesly P. Tejeda Bentez
Ingeniera Qumica, Magister en Ingeniera Ambien-
tal, Candidata a Magister en Ingeniera Mecnica,
Docente del Programa de Ingeniera Qumica de la
Universidad de Cartagena
lptbenitez@gmail.com
Candelaria Tejada Tovar
Ingeniera Qumica, Especialista en Qumica Anal-
tica, Magister en Educacin, Docente del Programa
de Ingeniera Qumica de la Universidad de Carta-
gena
ngel Villabona Ortiz
Ingeniero Qumico, Especialista en Ingeniera Sani-
taria, Docente del Programa de Ingeniera Civil de
la Universidad de Cartagena
Arnulfo Tarn Dunoyer
Qumico Farmaceuta, Magister en Biotecnologa,
Docente del Programa de Ingeniera de Alimentos
de la Universidad de Cartagena
Mario R. Alvear, Carlos R. Castillo, Daniela L. Henao,
Wilfredo Marimn, Natali Madariaga
Estudiantes de Ingeniera Qumica de la Universidad
de Cartagena