MTODO

1. IMPLEMENTACIN DE LOS FILTROS ANAEROBIOS INSTALADOS EN SERIE

2. REALIZACIN DE PRUEBAS HIDRULICAS

3. ESTABILIZACIN DEL SISTEMA

4. EVALUACIN DE LOS PARMETROS DE ESTUDIO

1. IMPLEMENTACIN DE FILTROS
ANAEROBIOS INSTALADOS EN SERIE
Se coloc tres filtros de tubera pvc, los cuales se instalaron en serie
comunicados a travs de mangueras delgadas que permitan la entrada
del flujo de agua de manera ascendente. Se ensambl el equipo con
codos de 90, tee y grifos por los cuales se recogeran las muestras.

2. REALIZACIN DE PRUEBAS
HIDRULICAS

Se realizaron pruebas para establecer el caudal ptimo para el
desarrollo del proyecto. Este no debe ser demasiado alto pues
arrastrara parte del lodo contenido en los filtros alterando as los
resultados en la turbiedad.
El caudal ptimo encontrado fue de 30,8ml /50segundos.
3. ESTABILIZACIN DEL SISTEMA

Se realizaron mediciones
diarias de parmetros de
turbiedad, pH y
temperatura. Esto con el
fin de mantener
condiciones estables para
la posterior toma de
muestras.

En caso los parmetros no
salgan con los resultados
deseados se evaluar la
posible causa de ello.

4.EVALUACIN DE LOS PARMETROS
DE ESTUDIO
ANLISIS DE LA PRESENCIA DE
COLIFORMES FECALES Y E. COLI POR
EL METODO DE FILTRACIN POR
MEMBRANA

Esta tcnica es una manera rpida y
simple de estimar poblaciones
bacterianas en el agua, es
especialmente til al evaluar grandes
volmenes de muestras o al realizar
diariamente muchas pruebas de
coliformes. Los medios a utilizar y las
temperaturas de incubacin
disminuyen el desarrollo de bacterias
no coliformes que afectaran
negativamente el crecimiento de
coliformes fecales.

COLIFORMES FECALES O
TERMOTOLERANTES
Procedimiento
Debido a que se trata de aguas residuales tratadas
es necesario diluir previamente las muestras.
Conectar el kitasato o fuente de vaco y colocar en
su sitio el soporte poroso y embudo de filtracin.
Ensamblar todo el equipo de filtracin colocando la
membrana de 0,45 mm en el soporte con pinza
estril.
Homogeneizar la muestra agitndola vigorosamente
25 veces, con movimientos de arriba abajo.
Verter 100ml de la muestra, en el vaso del filtro y
aplicar vaco, para hacer pasar la muestra a travs
de la membrana.
Cerca a la llama de un mechero, retirar la membrana
con una pinza estril y depositarla en una placa
Petri de 60mm de dimetro, preparada previamente
con 4 ml de agar M-FC.

Rotular cada placa Petri.
Luego de filtrar todas las muestras, enjuagar el
vaso tres veces, con porciones de 20 a 30 ml de
agua destilada, posteriormente autoclavar.
Introducir las placas Petri en bolsas plsticas
cerradas hermticamente.
Incubar las muestras sumergindolas a bao mara
a 44,5 0.2C DURANTE 24 HORAS.
Todas las colonias azules se consideran coliformes
fecales.

Resultado
Se seleccionan aquellas membranas que tienen
entre 20-60 colonias azules.
Para el clculo de coliforme fecal, se emplea la
siguiente frmula:



/100 =

(. )
100

E. COLI
Procedimiento
Debido a que se trata de aguas residuales tratadas es
necesario diluir previamente las muestras.
Conectar el kitasato o fuente de vaco y colocar en su
sitio el soporte poroso y embudo de filtracin.
Ensamblar todo el equipo de filtracin colocando la
membrana de 0,45 mm en el soporte con pinza
estril.
Homogeneizar la muestra agitndola vigorosamente
25 veces, con movimientos de arriba abajo.
Verter 100ml de la muestra, en el vaso del filtro y
aplicar vaco, para hacer pasar la muestra a travs de
la membrana.
Cerca a la llama de un mechero, retirar la membrana
con una pinza estril y depositarla en una placa Petri
de 60mm de dimetro, preparada previamente con 4
ml de agar M-FC.
Rotular cada placa Petri.
Luego de filtrar todas las muestras, enjuagar el vaso
tres veces, con porciones de 20 a 30 ml de agua
destilada, posteriormente autoclavar.
Invertir las placas Petri e incubar a 35C 0.5C,
durante 24 horas.
Retirar las placas Petri de la incubadora y realizar el
recuento de colonias. Las colonias de color oscuro
con brillo metlico son E. coli.

Resultados
Se emplea la siguiente frmula:

. /100
=

(. )
100


5. REDACCIN DE DISCUSIN DE
RESULTADOS

Se tom nota de los resultados y se elaboraron
cuadros y grficas de acuerdo a ello.