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Proyecto Fin de carrera Diseo de una planta piloto para la produccin de bioetanol Anexo 7

ANEXO 7

BIORREACTORES


7.1 Aspectos bsicos de los biorreactores

El equipo donde se realiza el proceso se denomina biorreactor o fermentador.
El mismo provee todos los servicios que son necesarios para el cultivo, tales como
mezclado, termostatizacin, suministro de oxgeno, entradas para adicin de nutrientes,
control del pH, etc. Por otra parte, cuando se habla de sistemas de cultivo o, tambin,
mtodos de cultivo, se hace referencia al modo de operar del biorreactor, esto es en
forma continua, discontinua o semicontinua.

Para un componente cualquiera del cultivo, incluida la biomasa, se puede plantear el
siguiente balance de materia en el biorreactor.

Velocidad de Acumulacin = Velocidad de Ingreso Velocidad de Salida + Velocidad
de Formacin Velocidad de Consumo

Segn sea el modo de operacin, es decir, continuo, discontinuo o semi-continuo, se
tendrn unos trminos de la ecuacin u otros, as se plantearn los balances del proceso.


7.2 Seleccin del biorreactor

La utilizacin de clulas libres o inmovilizadas en transformaciones qumicas es un rea
de gran inters industrial por sus enormes posibilidades industriales.
Es frecuente el uso de columnas de relleno, reactores continuos provistos de sistemas de
agitacin, de lecho fijo y tambin reactores de lecho fluidizado.

Los criterios tomados para la seleccin y forma de operacin son los siguientes:

Dificultad de retener a los microorganismos en el interior del reactor.
Dificultad de reutilizacin de las clulas usadas.
Dificultad en mantener la actividad de los microorganismos durante largos
periodos de operacin.
Formacin de espumas
Control del proceso global mediante los fenmenos de transferencia.
Efectos electrostticos.
Obturacin del sistema con la consiguiente dificultad en el mantenimiento del
flujo de reactantes.

En el diseo del reactor se deben de tener en cuenta las siguientes indicaciones:

Seleccin del mejor tipo de reactor para obtener una cantidad determinada de
producto deseado.
Determinar el tamao ptimo del reactor o del sistema de reaccin.
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Establecimiento del mejor mtodo de operacin: fijar las variables de operacin
(presin, temperatura, pH, composicin de la alimentacin, caudales) del
reactor.

En el caso ha estudio el diseo del reactor no se basara en escoger un tipo y un tamao
determinado ya que el reactor ya existe, sin embargo s se podrn disear las
condiciones de operacin y formas de trabajar. Se fijarn los parmetros como la
temperatura, pH, concentracin de la corriente de alimentacin, el modo de operar, en
continuo, semicontinuo o discontinuo. Adems de fijar los caudales y el suministro de
oxgeno.

Se debe de tener en cuenta la existencia de reactores biolgicos de alta tecnologa que
haran aumentar el rendimiento y disminuir los costes de forma muy importante. Al usar
un reactor sencillo y si adems se opera en discontinuo la eficiencia global del sistema
es bastante menor que si se usan reactores de procesos avanzados.

Pero tambin la inversin es menor como la complejidad en los procesos
convencionales.
Slo decir que en este estudio se comparar el modo de operar en continuo,
semicontinuo y en discontinuo usando un mismo reactor, de tanque agitado.

Los datos necesarios para el diseo del reactor son los siguientes:

Termodinmica de la reaccin.
Cintica del proceso en las condiciones experimentales que pueden ser de
inters.
Datos fsicos-qumicos de las sustancias que intervienen en el sistema para el
intervalo de condiciones en que se espera operar.
Produccin necesaria.

Tambin se ha de tener en cuenta la posibilidad de corrosin existente, aqu entra el
material de construccin del reactor.

Los datos cinticos que normalmente provienen de un estudio realizado a escala de
laboratorio, que indicarn con bastante exactitud el efecto de las variables sobre la
velocidad de la reaccin, no dan informacin sobre ciertos problemas a resolver a escala
industrial, como por ejemplo los fenmenos de transferencia de materia, variacin en la
concentracin de las impurezas en el reciclado, distribucin real de la temperatura
dentro del reactor y un largo etc que no son ms que todas las variables que de una
forma u otra influyen en el sistema de reaccin.
Por este motivo es necesario contar con la informacin obtenida de una planta piloto
que servir para demostrar o verificar la ecuacin cintica desarrollada a escala de
laboratorio.


7.3 Objetivos y diseo de un fermentador

Los objetivos que se marcan en la fermentacin estn relacionados con la optimizacin
de la produccin de un producto especfico generando el menor gasto energtico
posible. A continuacin se presentan de forma ms precisa tales metas.
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Obtener alto rendimiento en el producto deseado. Es decir, conseguir la mxima
conversin de la materia prima y una alta selectividad para evitar el desarrollo
de reacciones secundarias sin inters industrial.
Alcanzar alta productividad global que es funcin de la velocidad a la que
transcurre el proceso.
Obtener la mxima concentracin de producto y as disminuir los costes de
separacin.

Se han de tener en cuenta una serie de factores a la hora de disear el reactor.
Existen grandes avances en las tcnicas de fermentacin. Los procesos convencionales
en la produccin de etanol son de menor eficacia que los procesos altamente
tecnolgicos. Pero estos ltimos tambin son ms costosos.

La eficacia de los procesos de fermentacin generalmente est limitada por causas como
una baja productividad debido a una operacin discontinua, o problemas de inhibicin
por sustrato o producto. Tambin se ve restringida por una baja concentracin celular. Y
las limitaciones por transferencia de materia condicionan de manera considerable la
eficacia global, sobretodo si se usan biocatalizadores inmovilizados.

Cuando se plantea el problema de la eleccin del reactor se debe estudiar cul de estos
parmetros influye ms en el proceso.
Por ello dependiendo de qu factor hace aumentar ms el rendimiento del proceso
convendr operar con un tipo de reactor u otro, sea de mezcla perfecta, flujo pistn, o
estableciendo un modo de operar, continuo, discontinuo, con recirculacin

Para mantener la concentracin de sustrato por debajo del nivel en que se da la
inhibicin y al mismo tiempo conseguir la concentracin ptima de sustrato para que se
d un proceso efectivo conviene el uso de reactores de mezcla completa.

Cuando se requiere minimizar los efectos provocados por la inhibicin causada por el
producto se plantean dos estrategias diferentes: eliminacin del producto obtenido a
medida que se est formando; o sino conseguir una configuracin del sistema de
reaccin en cuyo modelo de flujo tenga un comportamiento prximo al de flujo en
pistn.

Cuando lo que se desea es aumentar la concentracin celular en el reactor se acude a los
mecanismos anteriormente descritos, es decir a la inmovilizacin de las clulas. Adems
de esta manera de aumentar la concentracin de biomasa se puede recurrir a la
recirculacin celular.
En la prctica se suele recurrir de forma ms habitual a la recirculacin.

Cuando existen limitaciones por transferencia de materia pueden darse dos caso, una se
refera al aporte de sustrato en sistemas inmovilizados y la difusin del oxgeno. Otra
slo comprendera la mejora de la transferencia del oxgeno. En este caso slo se tendr
en cuenta fenmenos de transferencia de oxgeno. Y esta transferencia, como ya se
explicar ms adelante, aumenta con el uso de un buen sistema de dispersin de gas
(boquillas, difusores) haciendo aumentar el rea interfacial o sino a travs de las
modificaciones precisas en el sistema de agitacin, es decir, modelando la potencia a
aportar para una buen contacto entre las clulas y el oxgeno disuelto.
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En el caso expuesto en este proyecto las clulas no quedaran fijas, es decir que sern
libres en el movimiento, las limitaciones por transferencia de sustrato sern
despreciables ya que microorganismos y nutrientes e mezclaran homogneamente
gracias a un sistema de agitacin. Adems la difusin de oxgeno mejorar.
El problema reside en la reutilizacin de la biomasa, para ello, se recircular la materia
celular as se aumentar la concentracin de la misma.
Existir un aporte de oxgeno exterior a travs de un difusor y con compresor.
7.4 Anlisis de costes

Los costes ms importantes en un proceso de fermentacin son la materias primas, los
costes de capital (procesos de produccin y separacin) y los servicios y suministros
(electricidad, agua,)

El aprovisionamiento y la preparacin del sustrato estn en funcin de la materia prima
escogida para la produccin del mismo producto. En el caso del etanol, el uso de
almidn de maz genera un coste del 54% sobre los costes totales respecto al 42% que
genera la caa de azcar cuando se usa para la produccin del etanol.
La reduccin del precio de la materia prima o una mejora en el aprovechamiento de sta
conlleva a una reduccin de los costes globales del proceso.

Las unidades de fermentacin influyen de forma decisiva en los costes globales ya que
el proceso de destilacin presenta los costes ms altos.
Se ha de tener en cuenta que el desarrollo tecnolgico promueve el aumento de la
produccin y para ello se construyen equipos que permiten aumentar la concentracin
celular.
Las tcnicas utilizadas son la inmovilizacin, floculacin, uso de reactores de
membranas... Todo esto se refiere a la estrategia de la reutilizacin de la materia prima.
Tambin se aumenta la produccin mediante un modo de operar eficaz, como el
continuo o el Fed-Bach, es decir, el semicontinuo. Estos aspectos entran en la estrategia
de la alimentacin.

Los microorganismos toman el carbono y la energa necesaria del medio acuoso en
donde habitan. Pero a medida que avanza el proceso este medio se hace ms hostil ya
que la concentracin de etanol aumenta y tiene efectos altamente inhibidores en la
actividad de tales clulas. Por ello es necesaria la instalacin de equipos de separacin
de alta eficacia. Lo cual conlleva a un aumento de costes de capital.

Los costes referidos al suministro de energa o gasto de agua de la red son los
soportados en operaciones de agitacin y de calefaccin del reactor. Tambin el vapor
de agua es considerado un coste ya que su generacin se hace a travs de calentamiento
mediante aporte de electricidad y el gasto de agua.
Estos costes son los relativos a la agitacin, calefaccin y esterilizacin. Adems de los
sistemas de bombeo de agua y aire.

La recuperacin del producto tambin representa un elevado coste de operacin,
sobretodo si se usa la destilacin.
Por ello se est comenzando a usar otras tcnicas ms econmicas como la
ultrafiltracin, la smosis inversa, la adsorcin o la extraccin. Estos mtodos de
separacin se desarrollarn ms adelante.
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7.5 Balances de materia y energa

En el diseo y anlisis de un reactor biolgico es necesario conocer la cintica del
proceso y el balance de materia y energa aplicado al sistema. Adems hay que contar
con la variacin de las propiedades de la biomasa segn avanza el proceso, ya que se
distinguen diversas fases segn la concentracin de sustrato, oxgeno y producto.

Para el desarrollo de un modelo dinmico del sistema se recurren las ecuaciones de la
conservacin de la masa y de la energa.

Balance de materia

) ( ) ( ) Re ( ) ( a FlujoSalid da FlujoEntra accion Por Generacin n Acumulaci + =

Esta ecuacin se aplica para cada componente del sistema, es decir, para los
microorganismos, para el sustrato y para el etanol.
Las limitaciones por transferencia se considerarn en principio despreciables y que estas
slo tomarn valor cuando se trate de procesos entre diferentes fases.

La ecuacin puede tomar la siguiente forma:

) (
) (
is s ie e i
i
C Q C Q r V
dt
V C d
+ =



El primer trmino de la ecuacin indica la variacin de la concentracin de un
componente i respecto del tiempo. Este trmino representa la acumulacin.
El segundo trmino se refiere a la generacin del componente i debido a la reaccin
bioqumica del sistema. El tercero es la aportacin del componente i a travs del flujo
neto convectivo de materia, es decir, la diferencia entre la entrada y la salida.

Esta ecuacin se simplifica segn los modelos de reactor al cual se refiere.

Balance de energa

q T T C Q r V H
dt
C T V d
e S P i
P
+ + =

) ( ) (
) (



Donde el primer trmino se refiere a la acumulacin de energa en el sistema, el
segundo es el que indica la generacin de energa por reaccin bioqumica y el tercero a
la diferencia de entalpa entre la entrada y la salida del sistema. El cuarto es el caudal de
calor suministrado o retirado del sistema desde fuera.

En los procesos de fermentacin la transferencia de calor es sencilla y no presenta
complicacin alguna.
Las reacciones biolgicas que se dan no generan mucho calor.
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Debe de existir un dispositivo de intercambio de calor para elevar as la temperatura de
operacin y llegar a la ptima. Estos equipos suelen ser sencillos. El diseo de stos se
desarrollar en un apartado posterior.

Las ecuaciones de balance de materia y energa se darn para los distintos componentes
del sistema.



7.6 Reactores de tanque agitado

Los reactores de tanque agitado son un tipo de reactores donde se consigue
homogenizar la mezcla contenida en l, haciendo que todas las variables, concentracin,
temperatura, pH, presin sean iguales para cualquier punto del medio contenido en el
tanque. La concentracin final, o de salida debe ser igual a la concentracin de la
mezcla de dentro del reactor.




Fig. 33 Reactor de mezcla perfecta



En la figura 33 se puede ver el funcionamiento del tanque agitado.
El aire se inyecta por la parte inferior del tanque y es distribuido por una corona que
posee pequeos orificios espaciados regularmente.

El chorro de aire que sale de cada orificio es golpeado por las paletas de la turbina
inferior generndose de este modo miles de pequeas burbujas de aire, desde las cuales
difunde el 0
2
hacia el seno del lquido. El sistema de agitacin se completa con cuatro o
seis deflectores que tienen por finalidad cortar o romper el movimiento circular que
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imprimen las turbinas al lquido, generando de este modo mayor turbulencia y mejor
mezclado. El tanque est rodeado por una camisa por la que circula agua, lo que permite
controlar la temperatura. Para tanques mayores que 1000 2000 litros este sistema ya
no es eficiente y es reemplazado por un serpentn que circula adyacente a la pared
interior del tanque. Debe tenerse en cuenta que a medida que es mayor el volumen de
cultivo tambin lo es la cantidad de calor generado por lo que se hace necesario una
mayor rea de refrigeracin. Los tanques son de acero inoxidable y estn pulidos a fin
de facilitar la limpieza y posterior esterilizacin. El aire que ingresa al biorreactor debe
estar estril, lo que se consigue hacindolo pasar por un filtro cuyo dimetro de poro es
de 0,45 micrones, que impide el paso de microorganismos y esporos.
Es el tipo de reactor ms empleado a escala industrial y ser el que se utilice para la
produccin del etanol.

Se puede operar de tres formas: de forma discontinua, discontinuo alimentado (fed-
Bach) y de forma continua.
Las dos primeras maneras de operar dan procesos no estacionarios de periodos cortos.
La operacin en continuo trabaja ene estado estacionario exceptuado los periodos de
arranque y parada del reactor, en algunas desestabilizaciones que puedan darse.


7.7 Sistemas de cultivo en discontinuo (Batch)

El ms tradicional y ms usado es el reactor discontinuo. Se emplea usualmente en la
industria farmacutica, alimentaria y biotecnolgica.
Al ser el tiempo de operacin corto en relacin con el continuo, se puede asegura de
forma fcil las condiciones aspticas durante todo el proceso de reaccin.
Las principales desventajas son: la prdida de rendimiento debido a los periodos de
arranque y parada, la falta de homogeneidad del producto obtenido en cargas
consecutivas y la dificultad de implementacin de esquemas de integracin energtica.

Estos tipos de reactores operan con una baja concentracin celular, sobretodo en el
instante inicial donde los microorganismos permanecen en fase latente. Y por este
motivo se ha de controlar la concentracin de nutrientes en el sustrato ya que sino se
poda ralentizar el proceso de fermentacin.

Adems el proceso global es ms lento que si se operase de forma continua ya que al no
haber retirada de producto ni aporte de nutrientes, en los instantes finales del proceso las
condiciones del medio son hostiles, alta concentracin de etanol y baja concentracin de
nutrientes. Al darse fenmenos de inhibicin la fermentacin tarde en completarse.

En un reactor biolgico discontinuo el caldo de nutrientes y la cepa se introducen
conjuntamente en el instante inicial. A partir de ese momento no existen corrientes de
entrada ni salida del reactor. Slo habr entrada y salida de gases (oxgeno, dixido de
carbono) y se adicionar antiespumantes y reguladores del pH.

El reactor se mezclar de forma completa siendo as la concentracin de cada
componente en un determinado tiempo es constante con la posicin dentro del reactor.
Al finalizar el proceso, cuando se ha llegado a una conversin fijada, la concentracin a
la salida de cada componente ser la misma en el interior del reactor.

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El balance de materia se ve modificado ya que los trminos de entrada y salida se
anulan.

) Re ( ) ( accin Por Generacin n Acumulaci =

La ecuacin de balance para el crecimiento microbiano ser:

X
r V
dt
X V d
=
) (

Como el volumen del reactor es constante, integrando la ecuacin se haya el tiempo
necesario para lograr un determinado crecimiento celular.

=
X
Xe
X
r
dX
t
Cuando el balance se aplica al sustrato y el volumen permanece constante se tiene el
siguiente tiempo de fermentacin para obtener una determinada conversin:

+
=
S
Se
SP SX
r r
dS
t

La velocidad de consumo de sustrato depende de la velocidad de crecimiento de
biomasa y de la velocidad de produccin del etanol. Es decir, el sustrato se emplear
para producir ms microorganismos y adems para la obtencin del producto.
La ecuacin tiene signo negativo para indicar que el sustrato desaparece con el tiempo.

Aplicando el balance para el producto se tiene la siguiente ecuacin que representa el
tiempo de operacin necesario para producir una cantidad determinada de producto.

=
P
Pe
P
r
dP
t

Si se supone una cintica tipo Monod las ecuaciones anteriores quedan de la siguiente
forma:

S K
X S
dt
dX
X r
S
m
X
+

= = =



Sabiendo que
dS
dX
Y
S
X
= y multiplicando su inversa a ambos lados de la ecuacin
anterior, se tiene:
S K
X S
Y dt
dS
r
S
m
S
X
S
+

= =
1
ec.*
Asumiendo que el rendimiento de sustrato en biomasa permanece constante en la zona
de aplicacin se tiene:

S Y X S Y X
S
X e
S
X e
+ = +
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Esta ecuacin permite evaluar el crecimiento de biomasa en funcin al consumo de
sustrato.

Si se expresa X en funcin de S y se integra la ecuacin * se obtiene el tiempo de
fermentacin necesario para reducir la concentracin de sustrato a un determinado
valor, fijado por el diseador.
t S Y X
S
S
Ln Y K
X
S S Y X
Ln K S Y X
e
S
X e m
e S
X S
e
e
S
X e
S e
S
X e
+ =
+
+ + ) ( )
) (
( )) ( (


Se ha de tener en cuenta que no todas las clulas se encuentran en la misma fase de su
crecimiento. Si se considera que slo las clulas viables (X
v
) generan otras clulas
muertas (X
d
) segn una cintica de primer orden, se tiene:

V d
d
X k
dt
dX
=
La concentracin de clulas viables viene dada por la ecuacin:

V d V
V
X k X
dt
dX
=

Y el crecimiento de la poblacin celular se podr expresar as:

dt
X X d
X
dt
dX
d V
V
T
) ( +
= =

En la etapa exponencial del crecimiento la velocidad especfica es constante, entonces la
concentracin de clulas viables se podr calcular para todo instante de tiempo, dentro
de tal periodo exponencial, a travs de la siguiente igualdad:

( ) t K
V V
d m
e X X

=

0



7.8 Sistemas de cultivo en discontinuo alimentado (fed-batch)

En los reactores semi-continuos es sustrato es alimentado en cargas sucesivas y el
producto no se retira hasta finalizar el proceso. Esto indica que el volumen del medio de
reaccin va variando conforme avanza el proceso.
Esta manera de operar hace posible el control de la concentracin de nutrientes en el
medio, y as se da una mejora en el rendimiento respecto al modo de operar del reactor
discontinuo.
La variacin de la adicin de sustrato puede estar condicionada por una estrategia que
haga aumentar la produccin del etanol o tomando como criterio la medida de diferentes
variables como la concentracin de producto, sustrato, el pH, el oxgeno disuelto
El control de la concentracin de sustrato, siendo ste limitante, resulta de inters para
los casos en que se quiere controlar el crecimiento celular o para la obtencin de
producto dependiente de una determinada concentracin de sustrato.
Se suele usar para la produccin de levaduras de pan y antibiticos.
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Es sustrato se va aadiendo a medida que se va consumiendo y se mantiene su
concentracin en valores que permitan alcanzar velocidades de reaccin aceptables,
buscando un equilibrio entre el aumento de velocidad por incremento de concentracin
de nutrientes y disminucin causada por la inhibicin del etanol.
La adicin del sustrato puede efectuarse en forma cclica o en continuo.

Balance de materia resultante:

ie e i
i
C Q r V
dt
V C d
+ =
) (


Si se considera que la densidad del fluido en el reactor y en la corriente de entrada son
iguales, esto ocurre as cuando la densidad celular no es muy elevada, se puede decir
que en sistemas con alimentacin continua el caudal alimentado es igual a la variacin
de volumen con el tiempo, y se puede expresar de la siguiente forma:

e
Q
dt
dV
=

ie e i i
i
C Q r V
dt
dV
C
dt
dC
V + = +

ie e i e i
i
C Q r V Q C
dt
dC
V + = +

) (
i ie
e
i
i
C C
V
Q
r
dt
dC
+ =

Aplicando la ecuacin para la biomasa se tiene:

=
V
Q
dt
dX
e


Y para el sustrato:

=
S
X
e
e
Y
S S
V
Q
dt
dS 1
) (

7.9 Reactor continuo de tanque agitado

En general los reactores continuos de tanque agitado son equipos cilndricos con un
sistema mecnico de homogenizacin, como la agitacin donde se garantiza que la
composicin es la misma en cualquier punto del reactor. Son llamados quimiostatos.

La forma de operar continua indica que existe una corriente de entrada y otra de salida
de tal modo que el volumen de lquido en el interior del reactor permanece constante.
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Las ventajas ms importantes en la operacin en continuo es el aumento de la
productividad donde se ahorran costes de capital, la reduccin de los costes de
operacin, es decir, la mano de obra y la energa y el logro del control del proceso.
Estas ventajas se hacen ms evidentes en procesos a gran escala.

Si se considera que el sustrato es el componente limitante se puede decir que la
velocidad volumtrica de crecimiento es X y si la operacin se da en rgimen
estacionario, obviando los periodos de arranques y parada, la acumulacin se hace cero.
Adems haciendo los caudales de entrada y de salida iguales el balance de materia que
se tiene es el que se desarrolla ahora, aplicado a la biomasa:

0 ) ( = + X X Q r V
e X


Segn el modelo de Monod:

=
X
r
Y sabiendo que el tiempo de residencia es:
Q
V
=
Y que la inversa del tiempo de residencia es la velocidad de dilucin, entonces la
ecuacin anterior se puede expresar de la siguiente manera:
) ( ) (
1
e e
X X D X X = =


Reordenando:
= ) ( D X D
e


En la mayora de los casos la alimentacin al reactor es estril, es decir, su
concentracin de biomasa a la entrada es nula, X
e
= 0.
Segn esto se obtiene:
D =
Es decir, la velocidad de crecimiento especfica es igual a la de dilucin.

Si se aplica el balance de materia al producto se puede obtener el valor de la
productividad global, es decir, la velocidad con que se genera el producto, en funcin
del caudal de operacin y del producto obtenido:

) (
e P
P P D r =

Normalmente la concentracin de producto en la corriente de alimentacin de sustrato
suele ser nula, P
e
= 0.

Se sabe que
molX g
molP g
o oMicrobian Crecimient
oducido oducto
X
P
Y
X
P
/
/ Pr Pr
= =

=

= =
X
P P
Y P D r
Esta ecuacin relaciona la productividad global con la velocidad especfica de
crecimiento.

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Aplicando el balance para el sustrato, considerando que la velocidad de consumo del
sustrato es igual a la suma de la velocidad de crecimiento celular y de produccin de
etanol, y si adems se introducen los conceptos de rendimientos anteriormente
expuestos, se tiene la siguiente ecuacin de balance:

) (
e
S
P
P
S
X
X
S
S S D
Y
r
Y
r
r =

+ =




1. Modelo de Monod para el quimiostato

Si se considera que el crecimiento celular sigue una cintica tipo Monod se puede
modelizar el comportamiento de un quimiostato en rgimen estacionario (Acumulacin
nula)

Biomasa (X)

0
) (
=

+ X D
S K
S
X D
S
e



Sustrato (S)

0
) (
) ( =

+


S
P
P
S
S
X
m
e
Y
r X
S K Y
X S
S S D


Producto (P)

0
) (
) ( =
+

+ X
S K
S
Y P P D
S
m
X
P e



Las variables X, S y P definen el estado del proceso.
D, S
e
, P
e
y X
e
son variables que se fijan desde el exterior, en el caso de P
e
y X
e
sus
valores se suelen anular ya que se decide que a la entrada del caudal de alimentacin la
concentracin de microorganismo y etanol sean nulas.

m
, K
s
, Y
X/S
e Y
P/S
son parmetros cinticos y estequiomtricos caractersticos del
proceso. Es decir, se pueden encontrar tabulados dadas unas condiciones de operacin
precisas.

Con todo esto, las ecuaciones anteriores se pueden resolver si los valores a la entrada de
producto y de clulas son cero (alimentacin estril), y con ello se obtienen las
siguientes expresiones:

=
D
K D
S Y X
m
S
e
S
X

ec.1

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D
K D
S
m
S



D
X Y
P
X
P

=



V
Q
D =
Siendo X, S y P las concentraciones de biomasa, sustrato y producto en el interior del
reactor.


Fig. 34 Cultivo continuo. Concentracin de biomasa y de sustrato limitante en estado estacionario a
distintos valores de D. Parmetros:
m
= 1 h
-1
, Y

x/s
= 0,5, K
s
= 0,05 g/l S
1
= 5 g/l

Para caudales bajos la velocidad de dilucin (D) tiende a cero y como consecuencia la
concentracin de sustrato en el interior del equipo se hace muy pequea (S0). Por lo
contrario la concentracin de biomasa aumenta hacindose mxima.

A medida que aumenta la velocidad de dilucin (D) la concentracin de sustrato en el
reactor va aumentado, esto se traduce en una menor conversin del sustrato.

Cuando la velocidad de dilucin se iguala a la velocidad especfica de crecimiento de
las clulas (D =
m
) se da un fenmeno importante: el lavado del reactor. En este punto
el flujo de biomasa hacia el exterior (DX) es mayor al flujo aportado por el crecimiento
celular (X) ya que <
m
. Y por tanto se produce un descenso considerable en la
concentracin de biomasa en el reactor. Atendiendo a la ecuacin de balance para la
biomasa se tendra un valor infinitsimo de microorganismos. La concentracin celular
sera prcticamente nula.
Tambin la concentracin del producto sera muy pequea ya que la velocidad de
dilucin es mxima.

En este caso, si los rendimientos Y
X/S
e Y
P/S
son constantes, la evolucin de la
concentracin de biomasa y de producto son similares y sus curvas paralelas.
Operar cerca de las condiciones de lavado es beneficioso ya que la productividad se
hace mxima, pero a la vez es arriesgado ya que cualquier cambio en las variables del
proceso (temperatura, concentracin de entrada de sustrato, caudales) pueden llevar a
la fatalidad, es decir, al lavado del reactor y hacer as la concentracin de biomasa nula.
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Proyecto Fin de carrera Diseo de una planta piloto para la produccin de bioetanol Anexo 7

Es decir, operando en un punto prximo al crtico se consigue mxima productividad
celular y de producto.
Igualando a cero el valor de la concentracin de biomasa en el reactor, en la ec. 1 se
puede calcular el valor crtico de D, el cual no debe superar:
e S
e
m C
S K
S
D
+
=

Para controlar que la velocidad de dilucin no llegue al valor crtico se ha de cumplir en
todo punto del reactor D <
m
.

El valor de D que maximiza la productividad es el siguiente:

+
=
5 , 0
1
e S
S
m m
S K
K
D
2. Rgimen no estacionario

Si se opera en rgimen transitorio, el trmino de acumulacin se ha de incluir en las
ecuaciones de balance y se tendr un sistema de ecuaciones diferenciales como el que se
presenta a continuacin:

Para la biomasa (X):
= ) ( X X D
dt
dX
e

Para el sustrato (S):

=
S
P
PX
S
X
e
Y
r
Y
X S S D
dt
dS
) (
Para el producto:
X r P P D
dt
dP
PX e
= ) (


7.10 Reactores continuos de tanque agitado conectados en serie

La asociacin de reactores de tanque agitado conectados en serie es ventajosa cuando la
cintica del proceso biolgico es inicialmente autocataltica y su comportamiento
posterior cambia a estado estacionario hasta terminar en la fase de la muerte celular.
Tambin resulta interesante su uso en los casos en donde el producto acta como
inhibidor.
La configuracin en cascada permite una mejor aireacin adems de la variacin de las
condiciones en etapas sucesivas.

El primer reactor de una configuracin en serie, es similar al reactor que opera de forma
continua en solitario.
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Proyecto Fin de carrera Diseo de una planta piloto para la produccin de bioetanol Anexo 7


Fig. 35 Reactores mezcla perfecta en serie

La concentracin de sustrato a la entrada del segundo reactor, S
1
, considerando que la
alimentacin al primer reactor estuviese exenta de etanol y de microorganismos, se
calcula igual que en el reactor de tanque agitado solitario:
0 = =
e e
P X

1
1
1
D
K D
S
m
S



La concentracin de biomasa en la corriente de entrada al segundo reactor, X
1
, se
calcula de igual manera que cuando se tena un solo reactor:

=
1
1
1
1
D
K D
S Y X
m
S
e
S
X



D
1
es la nueva velocidad de dilucin del segundo reactor.
Si los volmenes de todos los reactores son iguales, como el caudal permanece
constante se cumplira que todas las velocidades de dilucin son similares.

Realizando un balance de materia den el segundo reactor, incluyendo el trmino de
acumulacin, es decir, haciendo el balance en rgimen transitorio se tiene:
) (
2 1 2 2 2
2
2
X X Q V
dt
dX
V + =
Y si se considera que se opera en rgimen estacionario, el trmino de acumulacin se
anulara y se podra despejar la concentracin celular en el interior del segundo reactor:
2 2
1 2
2

=
D
X D
X
Si el rendimiento en el segundo tanque permanece constante de la anterior ecuacin se
puede obtener la concentracin de sustrato en el segundo reactor:
) (
2 2
1 2
1 2
2

+

=
D Y
X
S S
S
X


Si se asume que el microorganismo sigue una cintica de Monod se puede determinar la
concentracin de sustrato en el segundo reactor a travs de las condiciones de operacin
hidrulica (D
1
, D
2
), en funcin de la temperatura, la cual afecta sobre los coeficientes
cinticos (, K
s
) y segn la concentracin de entrada de nutrientes al primer reactor (S
e
)
As se llega a una ecuacin de segundo grado con dos soluciones, donde una ser la real.

Proyecto Fin de carrera Biorreactores Pgina 15

Proyecto Fin de carrera Diseo de una planta piloto para la produccin de bioetanol Anexo 7

1
2
2 1
2 2
1
2 1
2
2 2
) (
D
K D D
S S K D
D
K D D
S D
m
S
e S
S
m



Otra manera de expresar la concentracin de biomasa en el segundo reactor es a travs
del concepto de rendimiento celular, si ste permanece constante de reactor a reactor.
) (
2 2
S S Y X
e
S
X
=

Este procedimiento se puede extender para un nmero N de reactores en serie.

Si se considera que en el proceso de fermentacin se puede caracterizar por una sola
variable, como lo es la concentracin de sustrato o de biomasa, a partir de los datos
cinticos de productividad de etanol resultado a partir de la operacin en un reactor
discontinuo de tanque agitado, se podra obtener el nmero de etapas necesarias para
alcanzar una determinada conversin de materias primas.

El mtodo usado sera grfico y sencillo.
Se trata de trazar una recta de pendiente la velocidad de dilucin (D) a partir del valor
inicial de concentracin de sustrato (S
e
), esta recta cortar a la curva cintica de la
generacin de producto o crecimiento microbiano. En el punto en donde corta indicar
la concentracin de salida de sustrato (S
1
) del primer reactor, se hallar trazando una
recta vertical hacia abajo.

Si se supone que el tamao de todos los reactores en serie son iguales, D = constante,
entonces las rectas de operacin sern paralelas. A partir de S
1
se traza una recta de
pendiente D y se haya la concentracin se sustrato a la salida del segundo reactor, y as
sucesivamente hasta llegar a agotar tal concentracin y dar con la conversin requerida.
De esta forma se calcula el nmero de reactores necesarios para llegar a una
determinada eficacia.


Fig. 36 Nmero de etapas de reaccin

Se ha de tener en cuenta que al suponer un solo componente limitante se est
simplificando de manera muy considerable ya que en muchos procesos la productividad
y el propio crecimiento celular depende de una infinidad de variables y factores.

Este mtodo slo pretende dar un valor aproximado del nmero de etapas, es slo una
estimacin para el diseo preliminar.
El diseo definitivo del proceso debe estar basado en experimentos en laboratorio y en
planta piloto.



Proyecto Fin de carrera Biorreactores Pgina 16

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7.11 Reactores continuos de tanque agitado con recirculacin celular

Esta configuracin conlleva la adicin de un equipo de separacin, ya que para
aumentar la concentracin celular reutilizndola se deber de separar previamente una
vez que sale del reactor.
Una parte de la corriente de salida del reactor se introduce en un equipo de separacin
de biomasa, como puede ser un centrifugador, una columna de decantacin, a travs de
ultrafiltracin, o cualquier operacin de separacin que sea apropiada.
La concentracin celular del reactor se puede controlar a travs del caudal de purga de
microorganismos.



Fig. 37 Reactor de mezcla completa con recirculacin

El balance de materia para la biomasa es el que sigue:
X Q Q X Q X Q V X
dt
dX
V
R e R R e e
+ + + = ) ( ) (
e
Q Q =

Normalmente se cumple la siguiente desigualdad:
R R e e
X Q X Q <<
Ya que la concentracin de microorganismos de la corriente de entrada suele ser nula
porque la alimentacin es estril.
Si se expresa el caudal de recirculacin en funcin de la tasa de recirculacin y se
supone que el rgimen de circulacin es el estacionario, la ecuacin de balance queda de
la siguiente manera:
e R
Q R Q =
X R Q X Q R V X
e R e
+ = ) 1 ( 0
Si se divide entre el volumen (V) todos los trminos de la ecuacin y sabiendo que la
velocidad de dilucin es
V
Q
D
e
= , de la ecuacin anterior se tiene:


=
1 1
X
X
R
D
R


Y la concentracin de biomasa en el reactor es la siguiente:

+

=
R D D
X D R
X
R


Proyecto Fin de carrera Biorreactores Pgina 17

Proyecto Fin de carrera Diseo de una planta piloto para la produccin de bioetanol Anexo 7

Como se ve, la concentracin celular en el interior del tanque se puede variar segn la
tasa de recirculacin. Tambin depende de la velocidad de dilucin y de la eficacia del
sistema empleado para la operacin de separacin de la biomasa.

La ventaja principal de este modo de operar es que se puede llegar a velocidades de
dilucin mayores sin sobrepasar los lmites de lavado.
La concentracin celular en la corriente de recirculacin siempre ser mayor que la
existente en el interior del reactor, es decir se cumple la siguiente desigualdad con el
consecuente efecto:
> <

> > D
X
X
R
X
X
X X
R R
R
1 1 1 1
Al ser D > implica que se puede operar a velocidades de dilucin mayores que la
especfica de crecimiento, as los caudales de operacin pueden ser mayores y hacen
aumentar la productividad global volumtrica del sistema.
Adems de evitar los riesgos derivados por la operacin prxima al punto crtico donde
cualquier inestabilidad del sistema provocaba el lavado del reactor.

Balance para el sustrato

V r S Q S Q S Q
dt
dS
V
S R R e e
+ =
0

Como:

+ = + =
S
P
P
S
X
SP SX S
Y
r
Y
X r r r


Supuesto rgimen estacionario, la acumulacin es cero.
0 ) 1 ( ) ( =

+ + +
S
P
P
S
X
e R e e
Y
r
Y
X V S R Q S R S Q



S R
S S S = =
Si se divide la anterior ecuacin entre VX

S
P
P
S
X
e
Y
r
Y X
S S
D + =



Di si se aplica el balance de materia para el producto resulta:

V r P Q P Q
dt
dP
V
P
=
0 0 0

Si se considera que se est en estado estacionario, adems de tener en cuenta que la
separacin de la corriente de salida en dos no influye sobre la concentracin, se tiene:
P P
R
=
Dividiendo entre VX,
0 ) ( = + X r P P D
P e

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Tiempo de retencin celular (
C
): Se define como la relacin entre el contenido de
biomasa en el reactor (VX) y la salida neta de biomasa del sistema, que es la produccin
neta (salida + purga entrada)
e e S S W W
C
X Q X Q X Q
X V
+

=

Normalmente la alimentacin es estril y entonces se da la siguiente desigualdad:

1 <<
e e
X Q
Y si la eficacia del equipo separador es buena, se cumple:


W W S S
X Q X Q <<
Entonces el tiempo de retencin celular se puede definir como:


W W
C
X Q
X V

=

El tiempo de residencia en el reactor se expresa como la siguiente ecuacin:
) 1 (
0
R Q
V
Q
V
e
+
= =

7.12 Aeracin, agitacin y esterilizacin

La escala de distancias celular es muy diferente de la escala en un reactor biolgico, ya
que las distancias entre las clulas, nutrientes y productos (metabolitos) son mucho
mayores.
Por esta razn los fenmenos de transporte de materia toman tanta importancia estos
tipos de procesos, hasta afectar a la velocidad global del proceso ms an que la
velocidad de reaccin.

Los fenmenos de transporte cobran ms importancia si se trabaja con clulas
inmovilizadas que si se usan clulas libres, ya que en el primer caso la difusin de
metabolitos, productos y oxgeno se ve limitada por el soporte de inmovilizacin.

De todas formas, en todo proceso se deben considerar los efectos de los fenmenos de
transporte ya que al existir ms de una fase en el sistema, se ha de estudiar la
transferencia de materia entre ellas y sus limitaciones.

Se ha de tener en cuenta los problemas de transporte de materia, cantidad de
movimiento y energa a la hora de aumentar la eficacia de un sistema.
En los cultivos aerobios se ha de suministrar oxgeno y esto conlleva una buena
transferencia de materia entre las fases para conseguir una buena aeracin y aumentar el
crecimiento celular.

La agitacin en los reactores de mezcla completa son los responsables del transporte de
cantidad de movimiento.
Y la esterilizacin trmica es un caso de transmisin trmica.
Proyecto Fin de carrera Biorreactores Pgina 19

Proyecto Fin de carrera Diseo de una planta piloto para la produccin de bioetanol Anexo 7


Adems si se quiere llevar al reactor a una temperatura comprendida entre 30 y 37 C,
que es la ptima para la fermentacin de la glucosa, se necesitar un sistema de
calentamiento.
Si usamos un sistema indirecto, como el paso de agua por la camisa del reactor a una
temperatura tal que haga que el interior est dentro del anterior rango de temperaturas,
se deber considerar fenmenos de transferencia de calor entre las paredes del reactor
con el agua circulante de la camisa.

Se pueden comparar las productividades mximas de ambas clulas mediante el uso de
glucosa como fuente de carbn:
En el caso de la levadura se obtiene 82 g/lh de etanol, y para la bacteria 120 g/lh.
Adems tambin se ha comprobado que la velocidad de formacin de etanol es 2,9
veces mayor, medida en g/gh.
Y tambin la velocidad de toma de glucosa es superior en el caso de la bacteria.

Se debe decir que la bacteria de tipo Zymomonas mobilis tampoco es capaz de sintetizar
los azcares de cinco carbonos.
Esto no es problema ya que se puede usar la ingeniera biomolecular para cambiar el
metabolismo de tales microorganismos y hacerlos ms eficientes.


Aeracin

Debido a la baja solubilidad del oxgeno en el medio de cultivo, en los procesos
aerobios se necesita de una buena aeracin.
La concentracin de saturacin de oxgeno en condiciones normales de cultivo es de
aproximadamente unos 10 mg/l, una concentracin baja e insuficiente para abastecer a
un cultivo aerobio.
Por ello se debe suministrar oxgeno de forma continua al reactor y as asegurar la
actividad celular. Este oxgeno debe transferirse desde la fase gas hasta la fase lquida, y
en esta ltima ser utilizado por los microorganismos que se encuentran en el medio.
La fase gas es la burbuja de aire que va ascendiendo por el reactor, ya que la corriente
de aire introducida a ste se deber de hacer por la parte inferior, as recorrer todo el
reactor y se asegurar la transferencia a la fase lquida, que ser la disolucin en el
medio de cultivo.

La ecuacin bsica que describe este fenmeno de transferencia de materia ser la
siguiente:
) (
2 i L L O
C C k N = [5]

Donde No
2
es la densidad de flujo de oxgeno entre fases, (moles/s m
2
)
C
L

es la concentracin de oxgeno en la fase lquida (moles/l)
C
i
es la concentracin de oxgeno en la interfase (moles/l)
k
L
es un coeficiente individual de transferencia de materia entre fases.

La ecuacin 5 se puede escribir usando un coeficiente de transferencia de materia global
y as sustituir la concentracin de oxgeno en la interfase por la concentracin de
oxgeno en el equilibrio, es decir, la concentracin de saturacin del oxgeno.
El resultado es el siguiente:
Proyecto Fin de carrera Biorreactores Pgina 20

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) (
* '
2
C C a K N
L L O
= (ec.2)

Siendo K
L
un coeficiente de transferencia global,
a es la relacin entre el rea interfacial y el volumen de reactor (m
2
interfase/m
3
reactor)
C
*
es la concentracin de oxgeno en la fase lquida correspondiente a la saturacin.

El uso de coeficientes globales tiene su razn en que as se evita el clculo de la
concentracin de oxgeno en la interfase, ya que esto es difcil de hallar. Sin embargo no
es difcil calcular la concentracin de oxgeno en el equilibrio.

Para calcular el consumo de oxgeno por parte de la biomasa se usa el concepto de
velocidad especfica de consumo de oxgeno, que es el oxgeno consumido por unidad
de biomasa y de tiempo.

Para un rgimen estacionario se ha de cumplir la siguiente ecuacin:
Os O
XQ N =
'
2
(ec.3)
Es decir que las velocidades de transferencia de oxgeno y el consumo de ste son
iguales.
X es la concentracin celular (moles biomasa/l) y Q
O2
es la velocidad de consumo del
oxgeno (moles O
2
/moles biomasa s).
Como
2
/
O
X
O X
Q
Y

= entonces la ec.3 quedara de la siguiente forma:
X
Y
C C a K
O X
X
L L
/
*
) (

= (ec.4)
Esta ecuacin es muy importante ya que relaciona la capacidad del reactor de
transferencia de oxgeno con la velocidad de crecimiento celular como consecuencia
directa.
Por ello es de vital importancia hallar el coeficiente global de transferencia. Su valor
indicar la eficacia de aeracin.
La determinacin del coeficiente ha de ser experimental y se ha de llevar a cabo en unas
condiciones determinadas del cultivo. Su valor depender fuertemente de las
condiciones de operacin, sobre todo influir el rgimen de circulacin dentro del
reactor.

La determinacin del coeficiente global de transferencia se hace a partir de un sencillo
balance de oxgeno:

2
*
) (
O L
XQ C C a K
dt
dc
=

Donde el primer trmino corresponde a la acumulacin, el segundo al flujo de oxgeno
hacia la fase gas y el tercero al consumo por parte de los microorganismos.

La obtencin del coeficiente se hace usualmente a travs de mtodos directos durante el
proceso de fermentacin.
El balance de oxgeno podra escribirse de la siguiente forma:

Proyecto Fin de carrera Biorreactores Pgina 21

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2 O S S E E
VXQ C Q C Q
dt
dc
V =

V es el volumen del reactor, Q
E/S
son los caudales de gas (aire u oxgeno) a la entrada y
a la salida respectivamente, C
E/S
son las concentraciones de oxgeno en los caudales de
entrada y salida respectivamente.

El trmino correspondiente a la acumulacin se anula cuando el reactor llega a rgimen
estacionario. Es decir, todo lo que entra sale o se consume.
Entonces en estado estacionario tenemos la siguiente ecuacin:

2 O S S E E
VXQ C Q C Q = (ec. 6)

Combinando las ecuaciones 3 y 6 y considerando que el caudal permanece constante,
Q = Q
E
= Q
S
se tiene lo siguiente:

) (
) (
*
C C
C C
V
Q
a K
S E
L

=

Mediante el uso de analizadores de gases se puede medir la concentracin del oxgeno
en el caudal del gas.

Para los casos en que el volumen del reactor sea grande se ha de considerar cambios
importantes de la concentracin de saturacin del oxgeno a diferentes alturas, como los
dos extremos del reactor. Se tendrn en cuenta las concentraciones de saturacin en la
superficie y en el fondo del reactor, ya que debido a las diferencias importantes de
presin provocadas por la columna de lquido puede existir bastante variacin.
Por eso, para el gradiente (C
*
- C) se tomar el valor de la media logartmica.

Los parmetros que afectan al coeficiente de transferencia de materia son todos aquellos
que son capaces de modificar la velocidad global de transferencia, ya sea mejorando las
condiciones de circulacin o el rea efectiva de transporte.

El caudal de aire suministrado al reactor comprende valores de entre 0,5 y 1,5
volmenes de aire por volmenes de reactor y minuto.
La velocidad superficial de una burbuja de aire es el caudal de gas dividido entre el rea
transversal del reactor, si se aumenta mucho el caudal, esta velocidad ser mayor y
como consecuencia el tiempo de residencia de tales burbujas de aire en el tanque ser
menor e insuficiente para conseguir una buena aeracin.
Por este motivo, el caudal de aire suministrado tambin influye en el coeficiente de
transferencia de oxgeno ya que al aumentarlo disminuye el tiempo de residencia y con
ello tambin lo hace la transferencia de oxgeno.

Adems hay que tener en cuenta que si aumenta mucho la velocidad de burbujeo se
puede producir la cavitacin del sistema mecnico de agitacin, en el caso en que lo
hubiese.

Para mejorar considerablemente la transferencia del oxgeno a la fase lquida se acude a
sistemas con agitacin.
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La agitacin aumenta el rea de transferencia por la aparicin de burbujas de pequeo
tamao que se dispersan por el lquido aumentando as su tiempo de residencia en el
reactor.
Con una buena agitacin se llega al rgimen turbulento y as se disminuye el grosor de
la pelcula lquida en la interfase gas-lquido y se favorece la difusin del oxgeno. sta
deja de ser una difusin molecular para pasar a ser una difusin turbulenta, mucho ms
eficaz.

El grado de agitacin est relacionado con la potencia consumida expresada por unidad
de volumen de reactor.

Existen correlaciones para tanques agitados que permiten estimar el valor del
coeficiente de transferencia segn el tamao del reactor y de las caractersticas del
medio de cultivo. Estos dependen de los valores de la viscosidad.

La siguiente correlacin presentada por Blanch y Clark para medios de baja viscosidad:
y
s
x
L
V
V
Pg
a K ) ( 610 , 2
2
=
Pg = potencia absorbida en un sistema aerado (W)
V = volumen de lquido en el tanque (m
3
)
V
s
= velocidad superficial del gas (m/s)
x = coeficiente de valor 0,4 -0,7 para dispersiones claras y medios turbios
respectivamente
y = coeficiente de valor 0,5-0,2 para dispersiones claras y turbias respectivamente.
K
L
a (s
-1
)

El valor de Pg/V est dentro del rango 500-10000 w/m
3
.

Para medios viscosos se tiene una correlacin ms compleja, donde el clculo se hace
mediante nmeros adimensionales y entra en juego el dimetro del impulsor, la tensin
superficial, la velocidad de agitacin y la difusividad del oxgeno.


32 , 0 19 , 0 2 5 , 1 2 6 , 0 5 , 0
2 2
2
) ( ) ( ) ( ) ( ) ( 06 , 0
s ap
s ap
o
ap
o
L
DN
g
DN N D
D D
aD K

=

D = dimetro del impulsor
D
O2
= Difusividad del oxgeno

ap
= Viscosidad aparente

s
= velocidad superficial del gas
= tensin superficial
N = velocidad de agitacin
= Densidad del lquido
g = gravedad

Adems del grado de agitacin y de la velocidad superficial de la burbuja de gas,
existen otros factores que afectan al coeficiente de transferencia tales como la
viscosidad, la existencia de espumas y de antiespumantes.

Proyecto Fin de carrera Biorreactores Pgina 23

Proyecto Fin de carrera Diseo de una planta piloto para la produccin de bioetanol Anexo 7

La viscosidad del medio va variando conforme avanza el proceso de fermentacin,
hacindose ms viscosa y dificultando la transferencia, sobretodo si se da la formacin
de agregados de la biomasa. As el medio puede dejar de tener un comportamiento
newtoniano.

Un alto grado de agitacin y aeracin suele producir espumas. Las espumas se forman a
causa de la presencia de molculas con propiedades tensoactivas (pptidos)
Las espumas reducen la transferencia de oxgeno por dos causas:
Las burbujas pueden ser atrapadas por las espumas y ser recirculadas de tal forma que
se aumenta el tiempo de residencia considerablemente. Esto a primera vista podra
parecer beneficioso pero al aumentar demasiado el tiempo de permanencia en el sistema
se tiene burbujas con muy bajo contenido de oxgeno, son burbujas agotadas.
Adems su acumulacin entre la superficie del lquido y la fase gaseosa acta como una
barrera fsica para el paso de molculas de oxgeno de una fase a otra.

La formacin de espumas es un fenmeno a evitar ya que reduce la transferencia y
tambin provoca problemas operacionales provocados por la salida de stas por los
conductos de aire.

La adicin de antiespumantes tiene dos efectos contrarios, uno que favorece la
transferencia y otro que la disminuye.
Los antiespumantes son sustancias tensactivas, por esta razn aumentan la superficie
interfacial (a, m
2
/m
3
de fermentador)
Pero tambin disminuye de forma drstica el coeficiente K
L
debido a la acumulacin de
tensoactivos en la interfase.
El efecto global sobre el coeficiente de transferencia K
L
a es normalmente negativo.

Otro factor a tener en cuenta para mejorar la transferencia es el tipo de burbujeador
empleado. ste influir directamente en el tamao de las burbujas y como consecuencia
en el valor del coeficiente de transferencia.

Para resumir los parmetros que ms afectan al valor del coeficiente de transferencia
K
L
a son los siguientes, en orden de importancia:

Agitacin, viscosidad del medio, caudal de gas suministrado, antiespumantes y tipo de
burbujeador.

Se pretende un alto coeficiente para as mejorar la aeracin del cultivo y obtener un alto
rendimiento en el crecimiento celular.

En definitiva hay tres efectos por los cuales una buena aireacin favorece el
rendimiento:

El libre y constante abastecimiento de oxgeno para las clulas en el caldo
nutritivo har aumentar el crecimiento de stas.

La aireacin elimina de forma rpida la presencia del dixido de carbono, ste
an siendo en pequeas concentraciones tiene un gran efecto inhibidor.

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Se consigue mantener en suspensin las clulas por el permanente burbujeo y as
se renueva constantemente la zona de contacto entre ka membrana celular y el
sustrato.

Agitacin

La agitacin se puede definir mediante la relacin existente entre la potencia consumida
por el sistema y las variables de operacin. La potencia absorbida durante la agitacin
de un mecanismo se representa a travs del nmero de potencia N
p
.
Este nmero adimensional depender de si el sistema est aireado o si no lo est.

5 3
D N
P
N
P

=
P = potencia absorbida por el agitador
= densidad del lquido
N = velocidad de agitacin
D = dimetro del impulsor

El nmero de potencia se puede correlacionar con mdulos adimensionales que
describen el movimiento del lquido en el interior del tanque, tales como es el nmero
de Reynolds para la agitacin:

N D
2
Re =
Donde = viscosidad del lquido.

La relacin entre los dos nmero se puede hace usando la curva de potencia, que se
representa genricamente de la siguiente forma:

x
P
b N Re =

Siendo b = constante que depende de la geometra del tanque, x = exponente en funcin
del rgimen de circulacin y tipo de impulsor.

Los tipos de impulsores ms comunes son los siguientes:
La turbina de disco (Rushton), la turbina de palas planas y la hlice.

Segn el rgimen de circulacin se tendr una relacin u otra.
Para Re < 10, Rgimen Laminar, el N
p
disminuye con el Re y la relacin es la que
sigue:
Re
b
N
P
=
Y la potencia suministrada al fluido
3 2
D N b P =

Para 10 < Re < 1000 se tiene una zona de transicin donde la curva que relaciona el N
p

y el Re depende de la geometra del tanque adems de las condiciones de operacin.

Proyecto Fin de carrera Biorreactores Pgina 25

Proyecto Fin de carrera Diseo de una planta piloto para la produccin de bioetanol Anexo 7

En el caso de Re > 10000 el rgimen es turbulento y Re no influye prcticamente nada
sobre el N
p
. Las curvas se hacen planas en ese tramo y la potencia absorbida se calcula
de la siguiente forma:
5 2
D N b P =

La introduccin de aire a un reactor agitado hace disminuir las necesidades de la
potencia suministrada. Esto es a causa de la reduccin de la densidad y de la viscosidad
de la fase lquida sobretodo en la zona ms prxima al impulsor por la presencia de
burbujas de gas.
La agitacin en sistemas aireados se sirve de un parmetro llamado hold-up o
retencin (
g
) de la fase gas, que se define como el cociente entre el volumen de gas en
el reactor y el volumen tota (gas + lquido)
l g
g
g
V V
V
+
=
El fluido es una dispersin de burbujas, as que el lquido tendr una densidad
g
, que es
menor que si no existiesen tales burbujas ().

g
<

Y se relacionan mediante la siguiente ecuacin:

) 1 (
g g
=

La definicin de N
p
queda modificada de la siguiente forma:
5 3
D N
P
N
g
P

=
Donde P
g
es la potencia absorbida por el sistema aireado y
g
la densidad aparente.
Relacionando las ecuaciones anteriores resulta:

) 1 (
g
g g
P
P

= =

Mediante esta ecuacin se calcula la disminucin de potencia debida a la aeracin.
Esta disminucin se ve afectada por todas las variables que alteren el valor de
g
, como
puede ser la velocidad de agitacin, el tamao de burbuja, el tipo de agitador, la tensin
superficial, la viscosidad,

Para estimar las necesidades de potencia en un sistema aireado se hace uso de un
mdulo adimensional llamado mdulo de aireacin (N
a
).
Este mdulo se define como el cociente entre la velocidad superficial del gas y la
velocidad tangencial en el extremo del impulsor.
El valor de Na indica el grado de dispersin de las burbujas alrededor del impulsor.

3
2
ND
Q
ND
D
Q
N
g
g
a
= =

Proyecto Fin de carrera Biorreactores Pgina 26

Proyecto Fin de carrera Diseo de una planta piloto para la produccin de bioetanol Anexo 7

La relacin entre el nmero de potencia y el mdulo de aireacin se obtiene mediante la
existencia de correlaciones empricas para cada tipo de agitador.

Esterilizacin

En todo proceso de fermentacin se requiere la esterilizacin de los equipos a usar para
as evitar la contaminacin biolgica.
La contaminacin biolgica es la invasin de microorganismos extraos, sin inters
industrial, del proceso. Con ello se disminuye la productividad porque se da el
crecimiento celular de la cepa productora tambin del contaminante biolgico.
Adems si se opera en continuo el microorganismo extrao puede desplazar al de
inters.
A parte de estos problemas, el contaminante biolgico puede degradar el producto final
o producir la lisis celular.
Se deben de usar inculos puros, esterilizar el medio de cultivo, el reactor, conductos,
vlvulas, aditivos y corrientes del proceso.
Se debe mantener las condiciones de esterilizacin durante el proceso de operacin.
El proceso de esterilizacin consiste en la eliminacin o destruccin de todos los
microorganismos presentes capaces de competir con el organismo deseado.
Sabiendo las caractersticas especficas del cultivo de inters se pueden encontrar las
condiciones de operacin ms extremas que permitan desarrollarse a este cultivo y no a
ningn otro microorganismo. Se suele jugar con la temperatura y con el pH.
Este procedimiento sera de desinfeccin ms que de esterilizacin.
La esterilizacin puede hacerse mediante calor hmedo o travs de la filtracin.



Proyecto Fin de carrera Biorreactores Pgina 27

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