2013

Factores que afectan a la actividad enzimtica

Departamento de Ensayos Biotecnolgicos

Pedro Agulleiro I.E.S A SARDIEIRA 01/01/2013

Factores que afectan a la actividad enzimtica

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1. HIPTESIS DE TRABAJO.
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Como influye la concentracin de sustrato sobre la velocidad de reaccin . Sabiendo que la reaccin que tiene el sustrato con la enzima es estequiometrica , lo indicios que tenemos antes de experimentar nada es que va tener un crecimiento proporcional a la cantidad de sustrato , asi hasta conseguir el punto desaturacin , que ya ser cuando se estabilice la velocidad de reaccin ,dando igual que aadamos mas sustrato ya que no influir en la reaccin. Como influye la variacin de pH sobre la velocidad de reaccin. Teniendo en cuenta que cuando las enzimas estn prximas a un pH optimo esto favorece de manera que la velocidad de reacccion aumente , siendo as viceversa , cuando se aleja decae la velocidad , siendo de esta manera como influye el pH . 2. PROTOCOLO EMPLEADO. Lo que haremos para poder ver como influye estos factores sobre la actividad enzimtica ser modificando la variable de la cantidad de sustrato a aadir y el pH. Simplemente en 5 tubos de ensayos en los que al variar el pH, tendremos que aadir la misma cantidad de sustrato y de enzima . En el caso de observar la influencia de la cantidad de sustrato simplemente mantendremos constante la cantidad de enzimas y el pH de cada tubo . Influencia del sustrato 5 tubos --- Cada uno de ellos a pH 7 y la misma cantidad enzimtica. Aadiremos las siguientes cantidades : 0.5g ; 1.0g ; 2.0g ; 4.0g ; 8.0g respectivamente

Influencia del pH 5 tubos---- Cada uno de ellos con la misma cantidad de sustrato en nuestro caso 0.5 g y la misma cantidad enzimtica Cada tubo tendr pH distintos siendo los siguientes : 3 ; 5 ; 7 ; 9; 11;

3. RESULTADOS EXPRESADOS GRFICAMENTE.

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En esta grafica observamos la influencia del sustrato aadido a un mismo pH.

En esta grafica observamos la influencia del pH con la misma cantidad enzimtica y de sustrato.

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4. DESCRIPCIN DE LA RELACIN ENTRE LA CONCENTRACIN DE SUSTRATO Y LA VELOCIDAD INICIAL DE UNA REACCIN CATALIZADA ENZIMTICAMENTE.

Esta cuestin es explicada segn la ecuacin de Michaelis y Menten:

En este esquema, k 1 , k 2 y k 3 son las constantes cinticas individuales de cada proceso.

Segn esto, podemos afirmar que:

v 1 = k 1 [E] [S]

[E]=Concentracin de Enzima

v 2 = k 2 [ES]

[S]=Concentracin de Sustrato

v 3 = k 3 [ES]

[ES]=Complejo Enzima-Sustrato v=Velocidad de la reaccin

Cuando [S] 0 es pequea, la velocidad inicial es directamente proporcional a la concentracin de sustrato (relacin lineal). A altas [S] 0 , el enzima se encuentra saturado por el sustrato, y la velocidad ya no depende de [S] 0 . En este punto, la velocidad es mxima (V max ).

5. CUL ES LA VELOCIDAD MXIMA PARA ESTE ENZIMA A pH 7? PODRAMOS OBTENER UN VALOR MAYOR? CMO PODRAS COMPROBARLO? Respecto a los resultados obtenidos, alcanza su mxima velocidad a un pH=7 y 4.0 g de sustrato , a partir de esa cantidad ya estara saturado observndolo que no aumenta la velocidad de reaccin por ms que aumentemos la cantidad de sustrato. Viendo los resultados que obtenemos respecto a la cantidad de sustrato y pH, nos dara que a partir de 350 molculas ya no habra ms crecimiento.

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6. EXPLICACIN DEL POR QU LA VELOCIDAD MXIMA DE REACCIN NO SE PUEDE ALCANZAR PARA VALORES BAJOS DE [S] 0 . No podremos alcanzar la velocidad mxima de reaccin para valores bajos de [S]0. Ya que la velocidad de reaccin ser directamente proporcional a la cantidad de sustrato , siendo asi que catalizara poca cantidad de producto . Siendo el caso en el que una cierta cantidad optima de sustrato permite alcanzar el mayor rendimiendo de la reaccin . [E]=Concentracin de Enzima [S]=Concentracin de Sustrato [ES]=Complejo Enzima-Sustrato v=Velocidad de la reaccin

7. QU INDICA LA FORMA DE CADA CURVA EN EL GRFICO DEL NIVEL DE pH? QU INDICAN LOS DATOS SOBRE EL NIVEL DE pH IDEAL PARA ESTA REACCIN ENZIMTICA? QU PASA CUANDO EL VALOR VA POR DEBAJO O POR ENCIMA DEL pH PTIMO? Lo que podemos observar en cada grafica es como nos indica su curva la existencia de un pH optimo en el que la velocidad de la reaccin cataliza la enzima mxima. Es decir por ecima o por debajo de ese pH optimo disminuir el rendimiento de la reaccin , dando lugar a producir un producto menor.

8. FUERON LAS HIPTESIS PLANTEADAS RECHAZADAS? No. Despues de realizar el ensayo experimental se verifico las hiptesis planteadas: Influencia de la concentracin de sustrato sobre la velocidad de reaccin . Con mayor concentracin de sustrato , aumentara la velocidad de reaccin ( da lugar a mayor cantidad de producto) hasta que la enzima consigue su punto desaturacion donde no puede catalizar mas por mucho sustrato que se le aada, y en ese punto se mantendr constante . Influencia del pH sobre la velocidad de reaccin. Existe un pH optimo para las enzimas donde cataliza su mximo rendimiento. Siendo as que dentro de pH opitmo , su velocidad ira en aumento siempre que este cerca de este pH pero cuando se aleje de este dicho pH ira en des aument,

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