Fijacin

Histotecnologa II

CONCEPTO:Se entiende por fijacin toda manipulacin sobre un ser vivo, o bien sobre parte de l, que tiene por objeto mantener toda su arquitectura tanto estructural como qumica lo ms inalterada posible, de tal forma que sus componentes celulares mantengan las mismas caractersticas que cuando dicho ser o tejido estaban vivos. La fijacin termina cualquier reaccin bioqumica en curso, y puede tambin aumentar la fuerza o la estabilidad mecnica de los tejidos finos tratados.

Interrumpir los procesos de degradacin que aparecen tras la muerte celular Tratando de conservar la arquitectura y composicin tisular Lo ms prxima posible a como se encontraba en el organismo vivo.

Muerte: es el nivel metablico a

partir del cual las clulas que componen esos organismos, no son capaces de recuperar las funciones vitales que le son propias

Autlisis:

autodigestin enzimtica celular, debido a la salida del contenido lisosmico al citoplasma Putrefaccin: efecto ejercido por toxinas y enzimas bacterianas sobre los tejidos (microorganismos de tipo saprfitos)
BACTERIAS

AUTLISIS

Localizacin y naturaleza del tejido Temperatura del ambiente

PANCREAS

TERMMETRO INTESTINO GRUESO

Objetivo de la tcnica histolgica es conseguir la mayor similitud posible entre la imagen real y la imagen equivalente

IMAGEN HISTOLGICA REAL: es la que tiene el tejido cuando aun se encuentra vivo
IMAGEN HISTOLGICA EQUIVALENTE: es la obtenida despus de la manipulacin histolgica que comprende la fijacin, inclusin, corte y coloracin.

Trompa de Falopio

CONSTANCIA: ha de observarse en todos los tejidos idnticos obtenidos de distintos individuos de una misma especie animal REPRODUCTIBILIDAD: en todas las preparaciones histolgicas obtenidas a partir de dichos tejidos, independientemente del proceso de fijacin empleado Las imgenes que no cumplen con los requisitos de constancia y reproductibilidad deben considerarse artefactos inducidos a lo largo de procesamiento histolgico y cambian de una preparacin a otra.

DESGARROS

RETRACCIONES

Diferencia entre la presin osmtica del fijador y la de los tejidos

In vivo el espacio de Bowman es ms estrecho de lo que se ve en los cortes procesados de manera convencional. (H&E, X300).

 Evitar la autolisis debida a las propias enzimas. Proteger el corte o la pieza del ataque bacteriano. Insolubilizar los componentes celulares que se desean estudiar. Preparar a las distintas estructuras para posteriores tratamientos. Evitar la disolucin de determinados compuestos en el fijador. Conservar o provocar determinadas reacciones qumicas. Mantener las propiedades fsicas.

No existe un mtodo universal de fijacin No todos los fijadores conservan indefinidamente los tejidos Un defecto de la fijacin jams puede ser corregido Es imposible realizar un estudio histolgico sobre un material con defectos de fijacin

Capacidad de bloquear la autlisis inmediatamente Poseer un efecto microbicida. Impedir la generacin de estructuras artificiales (artificios y artefactos) No generar retraccin excesiva de los tejidos ni volverlos friables o quebradizos Permitir o favorecer la aplicacin de tcnicas histolgicas ,histoqumicas o inmuno-histoqumicas especficas. Ser econmico, estable, con baja toxicidad y de fcil manejo Que posea una gran velocidad de penetracin

FIJACION HISTOLGICA O CITOLGICA: conservacin de la arquitectura y estructura de los tejidos y clulas FIJACIN HISTOQUMICA: conservacin de la composicin molecular y bioqumica de los tejidos

FIJACIN PRIMARIA: la que se realiza de forma inmediata sobre el tejido fresco

FIJACIN SECUNDARIA O REFIJACIN: consiste en colocar el tejido ya fijado en un segundo fijador para demostrar algn componente tisular especfico o simplemente para intensificar la fijacin inicial

La fijacin consiste en conservar un tejido lo ms parecido posible a sus condiciones normales para ello es necesario: Protegerlo del ataque bacteriano Evitar su autlisis Insolubilizar los constituyentes celulares

Evitar las distorsiones y retracciones

Preparar las estructuras para posteriores tratamientos

Rapidez al colocar el lquido fijador El tejido debe estar seccionado en lminas de 5mm La relacin del fijador es de 1/20 La presin osmtica del fijador y de la pieza deben ser lo ms parecidas al suero fisiolgico

El pH debe ser igual al suero fisiolgico

El tiempo especfico de cada fijador

Velocidad de penetracin Velocidad de fijacin

Coeficiente de endurecimiento
Efecto de retraccin Osmosis y pH Efecto mordiente Artefactos

FSICOS:

El tipo de muestra lo requiere Los fijadores qumicos alteran las estructuras que queremos observar Necesitamos una fijacin rpida

CONGELACION

Criodesecacin Criosustitucin

CALOR
FIJACIN POR INMERSIN

QUMICOS: utilizan soluciones acuosas compuestas por molculas fijadoras que establecen puentes entre las molculas celulares, mantenindolas en sus lugares originales e impidiendo su degradacin

INMERSIN PERFUSIN

FIJACIN POR PERFUSIN