Caracterizacion Mora

CARACTERIZACIN, EVALUACIN Y PRODUCCIN DE MATERIAL LIMPIO DE MORA CON ALTO VALOR AGREGADO
COMPILACIN DE ARTCULOS TCNICOS
COMPILADORA Y EDITORA TCNICA Luz Stella Barrero Meneses*
Investigadora Ph.D. Asociada. Laboratorio de Gentica Molecular Vegetal. Centro de Biotecnologa y Bioindustria (CBB). Corporacin Colombiana de Investigacin Agropecuaria (CORPOICA), Km. 14 va Mosquera - Cundinamarca. E-mail: lbarrero@corpoica.org.co
Barrero Meneses, Luz Stella. / Caracterizacin, evaluacin y produccin de material limpio de mora con alto valor agregado. Cundinamarca - Colombia. Corpoica. 2009. 84 p. Palabras clave: RUBUS, MANEJO DEL CULTIVO, EVALUACIN NUTRICIONAL, ALIMENTOS, BIOFERTILIZANTES, TRICHODERMA, PROPAGACIN VEGETATIVA, COLOMBIA - CUNDINAMARCA - SILVANIA.
AGRADECIMIENTOS A los productores del sector Monterrico, municipio de Silvania (Cundinamarca), al equipo de auxiliares, a los estudiantes e investigadores del Proyecto 1144, a la Comercializadora CI La Cosecha y al Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural, MADR.
Corporacin Colombiana de Investigacin Agropecuaria, Corpoica C.I. Tibaitat ISBN: CA: CUI: Primera edicin: Tiraje:
978-958-740-003-8
PN20100046 276 Junio de 2009 245 ejemplares
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CONTENIDO
Caracterizacin, evaluacin y produccin de material limpio de mora con alto valor agregado
INTRODUCCIN......................................................................................................................................... 5 CAPACITACIN SOBRE EL MANEJO DE UN LOTE EXPERIMENTAL PARA EL CULTIVO DE LA MORA EN SILVANIA (CUNDINAMARCA) ........................................................................................................ 9 IDENTIFICACION TAXONMICA DE LAS ESPECIES DEL GENERO Rubus PRESENTES EN LA COLECCIN COLOMBIANA DE MORA.......................................................................................................................25 EVALUACIN AGRONMICA, NUTRICIONAL Y SELECCIN PARTICIPATIVA DE MATERIALES DE MORA EN SILVANIA (CUNDINAMARCA). .........................................................................................34 BIOFERTILIZACIN EN EL CULTIVO DE LA MORA .................................................................................................................................43 (Rubus glaucus Benth). PROMOCIN DE CRECIMIENTO EN ENDURECIMIENTO DE PLNTULAS DE MORA PRODUCIDAS IN VITRO (EFECTO DE LA APLICACIN DE richoderma koningiopsis Th003)............................................57 VALIDACIN Y ESCALAMIENTO DE PLNTULAS DE MORA IN VITRO Y MANEJO EX VITRO PARA ENTREGA A AGRICULTORES DE SILVANIA. .......................................................................................64 NOTA TCNICA Evaluacin social y econmica ex ante y ex post..................................................................................76
INTRODUCCIN
Luz Stella Barrero Meneses
os resultados del estudio elaborado por la Asociacin Hortofrutcola de Colombia, Asohofrucol, indican que el sector frutcola viene registrando la tasa de crecimiento anual ms alta dentro del mbito agrcola del pas. Dicho crecimiento general corresponde al 14.3% y se refleja en la ampliacin de la frontera cultivable de productos como ctricos y pia, adems de aquellos que poseen un alto potencial agroindustrial, especialmente los utilizados en la elaboracin de jugos, entre los cuales se mencionan el lulo, el mango, la mora y la guayaba con un 12% (Asohofrucol, 2002). Lobo (2006) plantea que el potencial aumento de productividad de la mora (Rubus glaucus Benth) y otros frutales andinos en Colombia est determinado por varios factores como la existencia de una gran variabilidad en los Andes, rea de diversidad primaria de estos frutales; la presencia de nichos ecolgicos apropiados para su cultivo y su aceptacin por parte de consumidores locales y de otras regiones del mundo. Existen, adems, posibilidades agroindustriales y para generar desarrollo econmico a nivel de pequeos productores pues se ha visto la necesidad de aumentar el consumo de frutas en Latinoamrica, debido a su valor nutritivo y antioxidante. En este sentido, se ha descrito que las especies del gnero Rubus, se caracterizan por presentar un importante potencial nutracutico, trmino utilizado para definir sustancias capaces no slo de aportar nutrientes sino tambin de mejorar algunos aspectos medicinales (Cotes et al., 2006, Clark et al., 2007). Diferentes exploraciones acerca del cultivo de la mora en Colombia muestran que esta actividad es realizada por pequeos y medianos agricultores. En muchas regiones constituye una de las principales fuentes de ingresos; generacin de empleo rural; oferta de alimento y de agroindustria. El rea de siembra nacional se estima en 10,297 hectreas, con una produccin de 89,251 t/ao y un rendimiento de 8,7 t/ha (Arias et al., 2006). Est localizada en los departamentos de Cundinamarca, Santander, Valle, Caldas, Antioquia, Huila, Tolima, Boyac, Nario y Norte de Santander, en su mayora. Para el ao 2020, se espera un aumento de 10,000 hectreas nuevas y 104,265 toneladas de mora cosechada (Tafur et al., 2006). De acuerdo con el Primer Censo Nacional de 10 Frutas Agroindustriales y Promisorias (Asohofrucol et al., 2004), Cundinamarca representa el principal departamento productor con el 41.3% del rea nacional. Adicionalmente, la mora representa el primer frutal de importancia en este departamento en trminos de rea sembrada, cantidad de lotes (3488), cantidad de productores (2939) y cantidad de fincas productoras (3032). En el perodo 1992-2003, el rea cultivada en Cundinamarca creci a una tasa anual promedio de 10,64%, mientras que la produccin creci a una tasa del 14% anual. Por lo tanto, este departamento se ha convertido en una zona de alto potencial para la oferta de productos tecnolgicos desarrollados en ncleos pilotos por la capacidad de produccin y por los requerimientos de semillas limpias con alto valor agregado, lo que implicara replicar el modelo tecnolgico en otras zonas del pas. A pesar de la riqueza y del gran potencial de la mora, esta especie no ha adquirido el grado de importancia esperado, lo cual puede atribuirse a varias limitaciones dentro de las que se destaca, por un lado, la dependencia de un nmero reducido de variedades y la baja calidad gentica del material de siembra. En Colombia se cultiva, en mayor medida, la Mora
de Castilla, ampliamente adaptada que, sin embargo, presenta limitaciones de susceptibilidad fitosanitaria y bajo contenido de grados Brix (Botero et al., 2002; Franco et al., 2000; Franco y Giraldo, 2002). La siembra de la especie en el pas se hace, de preferencia, a partir de materiales no identificados como lite; productores y viveros propagan los materiales regionales sin normas de calidad fisiolgica y sanitaria; tampoco brindan seguridad de la identidad gentica del material (Santana, 2003). Por otro lado, la multiplicacin tradicional de semilla (acodos principalmente), constituye la forma ms considerable de transmisin de plagas y enfermedades. Los sistemas actuales de produccin de mora tienen limitaciones fitosanitarias que afectan las diferentes partes de las plantas (Botero et al., 2002). Dentro de stas se encuentra el moho gris producido por el hongo Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados reproductivos de la planta y, en algunos casos, permanece latente hasta cuando el fruto se encuentra maduro, momento en el cual se desarrolla la enfermedad en forma agresiva, produciendo la prdida completa del fruto en corto tiempo (Dashwood y Fox, 1988). El control de esta enfermedad se efecta mediante el uso de fungicidas como el Captan, Vinclozolin, Benomyl y Clorotalonil, los cuales, debido a su modo de accin (inhibicin de la sntesis de ergosterol e inhibicin del crecimiento micelial y de la germinacin), ocasionan el desarrollo de resistencia por parte del hongo, lo cual hace ineficientes sus aplicaciones. Estas limitaciones, aunadas a la necesidad, cada vez ms creciente de producir materiales con calidades nutricionales y nutracuticas, hacen necesario tomar acciones que conlleven a la evaluacin y seleccin de materiales con alto valor agregado en esquemas de produccin limpia. En el contexto anterior, el Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural (MADR) financi el proyecto denominado: Certificacin y escalamiento de material de mora con potencial nutritivo y nutracutico para entrega a pequeos agricultores, que hace parte del convenio 028 del 2005, cdigo 1144, realizado con el fin de contribuir al fortalecimiento de la cadena de la mora por medio del desarrollo tecnolgico integrado involucrando expertos de diferentes disciplinas del conocimiento y comunidades de agricultores que derivan su sustento del cultivo. Se trabaj en la caracterizacin y evaluacin de materiales cultivados (poblaciones de la coleccin nacional manejada por la Corporacin Colombiana de Investigacin Agropecuaria (CORPOICA) y materiales de productores de diferentes regiones del pas), desde el mbito morfolgico, agronmico, molecular, nutricional y potencial nutracutico. Se identificaron materiales promisorios de manera participativa con agricultores del sector Monterrico en Silvania (Cundinamarca) en un lote experimental establecido en la zona. El material seleccionado se utiliz para el desarrollo de esquemas de produccin limpia de semilla que involucr el uso de biocontroladores y biofertilizantes con el fin de mejorar su establecimiento y reducir los problemas fitosanitarios originados durante la propagacin. El material fue escalado mediante multiplicacin masiva in vitro y fueron entregadas a los agricultores para la siembra en sus terrenos 23,000 plntulas ex vitro. De esta forma, los agricultores han tenido la oportunidad de vincularse a sistemas de innovacin tecnolgica. Adicionalmente, el mismo proyecto ha generado la publicacin de un artculo cientfico relacionado con el componente de biofertilizantes (Roveda et al., 2007) y se est preparando, por lo menos, una publicacin cientfica relacionada con el componente molecular y nutracutico. Como resultado del Proyecto 1144, considerado como una primera fase y para efectos de ejecutar la segunda fase, el MADR ha aprobado la financiacin de los componentes de produccin de semilla limpia mediante proyectos como el Desarrollo de una estrategia de control biolgico de Botrytis cinerea en mora en campo y la Produccin in vitro de mora de Castilla en biorreactores de inmersin temporal como alternativa para la produccin de semilla de calidad
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Corporacin Colombiana de Investigacin Agropecuaria - Corpoica
fitosanitaria y de bajo costo, con el mismo grupo de agricultores y utilizando como punto de partida los seis materiales de mora y los biocontroladores seleccionados en el proyecto 1144. Otra propuesta, aprobada con financiacin pendiente de la ltima convocatoria del MADR 2008, considera el componente de evaluacin molecular, agronmica, nutracutica y agroindustrial de los seis materiales promisorios con testigos comerciales a travs del tiempo en Monterrico y en nuevos nichos productivos. Con lo anterior se busca responder a una demanda por parte de los agricultores, quienes, como resultado del conocimiento adquirido en cumplimiento del proyecto 1144, esperan producir material certificado de buena calidad en sus fincas. De esta forma, se pretende contribuir a la diversificacin del cultivo y al incremento de hectreas sembradas con materiales lite certificados para atender de manera adecuada las nuevas reas proyectadas, de acuerdo a la apuesta exportadora agropecuaria MADR 2006 2020 (Arias et al., 2006). En esta edicin se compilan seis artculos tcnicos y una nota dem, que renen resultados de diferentes componentes del Proyecto 1144, relacionados con las prcticas de manejo de los materiales introducidos en un lote seleccionado en el sector Monterrico y el programa de capacitacin impartido a los agricultores de la zona; la identificacin taxonmica de las especies del genero Rubus de la coleccin manejada por CORPOICA, con futuros propsitos de mejoramiento de la mora; la evaluacin agronmica, nutricional y seleccin participativa de materiales sobresalientes en el lote; los efectos de la aplicacin de biofertilizantes y biocontroladores en plntulas seleccionadas en endurecimiento; el establecimiento y produccin masiva in vitro del material seleccionado entregado a los agricultores; y, adems, la evaluacin social y econmica realizada al inicio y al final del proyecto. En la compilacin se evidencia el trabajo multidisciplinario del equipo que conform el proyecto, el cual reuni expertos de diferentes disciplinas y productores de la regin para trabajar en forma mancomunada, a fin de contribuir al desarrollo y a la competitividad del cultivo en la zona y en otras regiones del pas, en el futuro. El propsito es que esta compilacin alcance un pblico amplio no slo de tcnicos, estudiantes e investigadores, sino tambin diferentes actores de la cadena (productores, comercializadores, agroindustriales y consumidores). Finalmente, es necesario agradecer al equipo multidisciplinario que conform el proyecto, el cual incluy estudiantes, tcnicos e investigadores de CORPOICA y tambin productores de Monterrico, sin quienes no hubiese sido posible realizar un proyecto participativo de tal magnitud. A CORPOICA y al MADR, entidades financiadora y co-financiadora, respectivamente. A la comercializadora C.I. Cosecha por suministrar el primer contacto con los agricultores de Monterrico y a todas aquellas personas dentro y fuera de CORPOICA que de una u otra forma contribuyeron a la realizacin del proyecto.
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CAPACITACIN SOBRE EL MANEJO DE UN LOTE EXPERIMENTAL PARA EL CULTIVO DE LA MORA EN SILVANIA (CUNDINAMARCA)
lvarez Zambrano Roberto1, Barrero Meneses Luz Stella2, Beltrn Acosta Camilo Rubn3, Cotes Prado Alba Marina3
RESUMEN
l presente trabajo describe el manejo del cultivo de la mora en un lote experimental vinculado a un proceso de capacitacin de agricultores en el sector Monterrico en Silvania (Cundinamarca) con el fin de contribuir a su empoderamiento y a la vinculacin de tecnologas de innovacin en sus cultivos. Inicialmente, se procedi a identificar participativamente reas con potencial productivo orientadas por asociaciones dispuestas a interactuar con los investigadores. En el lote experimental se desarrollaron prcticas integrales de manejo de 35 accesiones de mora, dos de las cuales eran cultivadas en la regin. Se relacionan los aspectos de la siembra, el manejo de estos materiales y el plan de capacitacin, el cual hace parte del proyecto Certificacin y escalamiento de material de mora con potencial nutritivo y nutracutico para entrega a pequeos agricultores. En el proceso participaron los socios productores de tres asociaciones, investigadores y tcnicos de CORPOICA y otros tcnicos especializados en temas de inters para la zona. Palabras clave: Agricultores, accesiones, manejo del cultivo, capacitacin, lote experimental.
INTRODUCCIN
El cultivo de la mora requiere para su ptimo desarrollo un clima entre 1.800 y 2.400 metros sobre el nivel del mar; una humedad relativa entre el 70 y el 80 %; temperaturas entre 11 y 18 grados centgrados y una precipitacin entre 1.500 y 2.500 milmetros anuales (Erazo, 1983). Acepta suelos cidos, pero profundos y exige nitrgeno, fsforo, potasio, calcio y magnesio para su buen desarrollo y produccin. Los mejores suelos son los francos y ricos en materia orgnica (Escoto, 1994). La densidad de siembra se determina de acuerdo al material, pendiente del terreno, fertilidad del suelo, sistemas de poda y tutorado. As, para el material Sin Espinas se requieren distancias y tutorados ms amplios. Otros materiales introducidos tienen comportamientos di1 Centro de Investigacin (C.I.) Tibaitat, CORPOICA, Km. 14 va Mosquera, Cundinamarca. 2 Laboratorio Gentica Molecular Vegetal, Centro de Biotecnologa y Bioindustria (CBB), CORPOICA, Km. 14 va Mosquera, Cundinamarca. 3 Laboratorio de Control Biolgico, CBB, CORPOICA, Km. 14 va Mosquera, Cundinamarca. Autor de correspondencia: Roberto lvarez Zambrano, Ingeniero Agrnomo, pensionado de CORPOICA, e-mail: robertoalvarezzambrano@gmail.com Caracterizacin, evaluacin y produccin de material limpio de mora con alto valor agregado
ferentes por el clima, suelo, idiosincrasia y manejo de los productores, lo cual implica la ampliacin o acortamiento de distancias y el manejo de infraestructura, segn el caso. Generalmente, se utilizan distancias entre calles de 2 hasta 2.8 metros y entre plantas de 1.5 hasta 2.2 metros. Es necesario dejar lotes con calles amplias para manejo del cultivo (transporte de material, insumos, entre otros). Adicionalmente, las plantas a sembrar deben ser de origen conocido; una buena planta permite aprovechar sus mejores caractersticas de produccin, sanidad, tamao y calidad del fruto (Franco y Giraldo, 2000). El hbito rastrero de la mora y el comportamiento estructural de las diferentes accesiones exige el manejo de buenos tutorados. Algunos materiales aceptan el sistema de espaldera sencilla, pero otros exigen el sistema de chiquero con una mayor amplitud o el de espaldera en doble T. Lo anterior debe ir acompaado de podas constantes de formacin, produccin y fitosanitarias. Si las podas no se efectan constantemente y a tiempo, el incremento en jornales es mayor y se disparan las plagas y enfermedades, lo cual ocasiona altas prdidas en la produccin (Franco y Giraldo, 2000). Otras labores importantes son la fertilizacin de acuerdo al anlisis de suelo, la seleccin de arvenses o controles de las mismas en la poca adecuada y los aporques para darle mayor anclaje a la planta (Franco et al., 2000). Las plagas y enfermedades estn asociadas a las prcticas del cultivo y al clima reinante en la zona. La aplicacin de productos qumicos es complemento extremo a lo anterior (De La Rotta y Muoz, 1993). Pese a requerimientos ya establecidos, la mora se maneja en forma tradicional y con tan mnima adopcin de los mismos que inciden en la ampliacin de la brecha tecnolgica. Estos aspectos son: los altos costos de los insumos, incidencia de plagas y enfermedades, altas demandas de mano de obra, mala calidad de los materiales de propagacin, dependencia de uno o pocos materiales, deficiente manejo del cultivo, desconocimiento de avances tcnicos, escasa asistencia tcnica, nula o escasa integracin entre productores, desorganizacin de las comunidades y vas en mal estado, entre otros. En Colombia, la extensin rural ha evolucionado del mtodo de asistencia y capacitacin individual finca a finca, hacia la transferencia a travs de eventos relevantes. As se erige la parcela demostrativa y en otros casos, las fincas demostrativas como escenarios claves para realizar transferencia de tecnologa y capacitacin ms integrales, con la ventaja adicional de cumplir un papel importante en materia de desarrollo experimental (Aranzazu, 2000). En el presente trabajo se seleccion un lote en el sector Monterrico en Silvania (Cundinamarca) con el fin de realizar investigacin participativa y demostracin de manejo del cultivo con comunidades de productores de la zona, quienes fueron capacitados y sensibilizados en el uso de tecnologas para la produccin limpia de semilla con alto valor agregado como parte del proyecto Certificacin y escalamiento de material de mora con potencial nutritivo y nutracutico para entrega a pequeos agricultores, relacionado en la introduccin de esta compilacin. Su participacin en el proyecto fue decisiva, desde el mismo inicio, en la seleccin del lote y del material comercial para evaluacin; en el establecimiento y mantenimiento de materiales; en la evaluacin e identificacin de los mejores (ver artculo de Espinosa et al. de esta compilacin); y, adems, en su manejo ex vitro (ver artculo de Valderrama et al. de esta compilacin). A continuacin se describe el montaje y manejo de materiales en el lote experimental, lo cual fue acompaado de un plan de capacitacin para llevar a cabo procesos participativos de evaluacin, seleccin y produccin limpia.
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MATERIALES Y MTODOS
Material vegetal Se seleccionaron 21 poblaciones cultivadas del banco de germoplasma manejado por el Centro de Investigaciones (C.I.) La Selva de CORPOICA y 14 materiales de agricultores de diferentes regiones del pas (Cundinamarca, Antioquia, Valle del Cauca y Huila) (Tabla 1). Siembra y manejo de materiales Los materiales fueron dispuestos en un lote seleccionado en Monterrico. Una rplica de los mismos es mantenida en el centro de investigaciones C.I. La Selva, Rionegro, Antioquia. El manejo de cultivo se llev a cabo de acuerdo con Franco y Giraldo (2000; 2002) con modificaciones que se describen en los resultados. Determinacin de problemas fitopatolgicos A partir de plantas y material de propagacin de cultivos de mora provenientes de Monterrico, se tomaron muestras de tallos y frutos, sanos y con sntomas de antracnosis y moho gris. El material seleccionado se desinfect mediante un lavado en alcohol al 70% durante 3 minutos. Posteriormente se realiz un lavado en Hipoclorito de Sodio al 0.2% durante 3 minutos y dos enjuagues consecutivos con agua destilada estril durante 4 minutos cada uno. Este material se sec en cabina de flujo laminar y se dej en cmara hmeda, de una a dos semanas, para determinar la incidencia de agentes patgenos. Posteriormente, se tom micelio que se desarroll sobre los frutos y tallos, el cual se sembr en Agar Papa Dextrosa (PDA) para aislar e identificar dichos agentes de forma macro y microscpica. Se describieron algunas caractersticas del dao causado por los elementos patgenos mencionados y se hicieron recomendaciones generales para el control de estas enfermedades en campo. Sensibilizacin y capacitacin de agricultores Se realizaron eventos a modo de talleres, das de campo, visitas a los laboratorios y demostraciones de mtodo y resultado a productores de la zona, quienes actualmente conforman tres asociaciones: Moricultores Monterrico SAT (7 familias), Asociacin de Productores Agropecuarios Campesinos Forjadores de Paz (18 familias), y Asociacin Agropecuaria de Mujeres de Monterrico, ASOAGROM (17 familias). Los miembros de las asociaciones fueron capacitados desde la seleccin del lote (ao 2006), la preparacin del mismo, la siembra y mantenimiento de materiales, la evaluacin e identificacin de los mejores, hasta el manejo ex vitro de plntulas de los materiales seleccionados.
RESULTADOS Y DISCUSIN
A continuacin se describen las actividades que se llevaron a cabo con los agricultores de Monterrico para la siembra y manejo de materiales y el programa de capacitacin impartido. La evaluacin, seleccin y entrega de materiales se describen en Espinosa et al. y Valderrama et al. de esta compilacin.
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Seleccin del lote Con la participacin de los productores, se seleccion un lote ubicado en el municipio de Silvania, vereda Agua Bonita, sector Monterrico, finca El Arenal, coordenadas 42724 N 741926 O, de propiedad del agricultor Gerardo Solrzano, con una altura sobre el nivel del mar de 2,485, precipitacin mayor a 2,000 milmetros y luminosidad menor de cuatro horas diarias. Como criterios de seleccin se tuvieron en cuenta los antecedentes del terreno (contaminacin por qumicos, aplicaciones de estircoles no compostados, erosin, posibilidades de inundacin, focos de plagas, compactacin); topografa ligeramente ondulada y profundidad del suelo entre 0.70 a 0.90 centmetros (ptima para el desarrollo de las races). As mismo, la estructura de vas se encontraba en regular estado lo cual disminua la posibilidad para transportar el producto e insumos y se careca de agua para riego, lo cual hizo necesaria la instalacin de un sistema de almacenamiento de agua en el lote seleccionado. Preparacin del terreno Las labores manuales de preparacin estuvieron sujetas a las condiciones del terreno y equipos o maquinaria disponibles en la zona. La presencia de pasto kikuyo en el terreno exigi la aplicacin de matamalezas. Posteriormente, se realiz el arado y rastrillado. Los productores participaron en la toma de muestra de suelo para su respectivo anlisis en el Laboratorio de Suelos de CORPOICA, C.I. Tibaitat. Trazado y ahoyado Para el trazado se utiliz el sistema de tres bolillos a distancias de 2.20 x 2.5 metros y en el sitio se hicieron hoyos de 0.40 x 0.40 metros. De acuerdo con el anlisis de suelos, se aplic un kilo de materia orgnica y 300 gramos de cal dolomita (Figura 1A). Densidad de siembra De acuerdo con las recomendaciones (Franco y Giraldo, 2000), las distancias de siembra utilizadas en el lote fueron de 2.5 metros entre calles y 2.20 entre plantas con una calle amplia para manejo del cultivo. Se sembraron 35 accesiones en 35 surcos, cada surco con 5-10 plantas por accesin (dependiendo de la disponibilidad de la fuente, Tabla 1), para un total de 240 plantas en un lote de 3,500 metros cuadrados. Material de siembra Previamente a la siembra en el lote seleccionado, los materiales a introducir haban sido multiplicados desde la fuente (C.I. La Selva de CORPOICA en Rionegro, Cundinamarca, Caldas, Huila y Antioquia) por los sistemas de acodo, yema, o semilla (Tabla 1). Las plantas fueron colocadas en bolsas grandes (12 x 22 centmetros) y sometidas a control de fitopatgenos como Colletotrichum y Botrytis con el uso de Control 500 rotado con Benlate. Las plantas se nutrieron con aplicaciones constantes de fertilizantes foliares como Tottal y edficos como 15-15-15. Siembra Pasado un mes del ahoyado, se procedi a sembrar las plantas embolsadas que presentaban buen desarrollo en los sitios previamente enmarcados. Las plantas se retiraron de las bol12
sas; se sembraron en un sustrato enriquecido con anterioridad permitiendo que el cuello sobresaliera unos 4 centmetros; se ajust el suelo alrededor y se reg con suficiente agua cada planta. La mayora de materiales fueron sembrados en mayo de 2006 (33 accesiones). En junio de 2006, se sembraron Morn y Mora Dulce. La accesin Ranchona no se adapt. Manejo de arvenses El lote seleccionado para la siembra se trat previamente con el herbicida Roundup ya que la planta en su estado inicial de crecimiento sufre los efectos de competencia de malezas por agua, luz y nutrientes (Figura 1 B). Se mantuvo limpio el plato de la planta para que sta emitiera brotes, especialmente en los primeros nueve meses. Las calles se trabajaron con guadaa, evitando cortar las malezas a ras de suelo, con el objeto de mantener una cobertura para controlar la erosin y mantener arvenses que no compiten con el cultivo y aportan nutrientes, comnmente conocidos como la siempreviva o suelda, ailes, pega pega, man forrajero, trboles, entre otras. Fertilizacin La fertilizacin se hizo de acuerdo con las recomendaciones del anlisis de suelos y se ajust de acuerdo a diferentes pruebas realizadas por Franco et al. (2000) en varias regiones del pas, lo cual indica que la mora da respuesta positiva a la aplicacin de altas dosis de nitrgeno (cinco bultos de rea por hectrea), potasio (cuatro bultos de cloruro de potasio por hectrea), fsforo (cuatro bultos de fosforita Huila por hectrea) y a la aplicacin semestral de 40 gramos de elementos menores por planta. Se recomend que dos meses despus de la siembra, con una buena humedad del suelo, se aplicara 10-30-10 o 15-15-15 y Agrimins, en dosis de 80 y 40 gramos, respectivamente, e incrementar las dosis cada tres meses (Figura 1 C). En caso de aplicar componentes orgnicos, se recomendaron los de tipo biolgico (biofertilizantes como el sper 4) y compost orgnicos (como el Bokashi). En Roveda et al. (2007) y Roveda et al. de esta compilacin, se relaciona la aplicacin de biofertilizantes promisorios en mora con alto potencial para su futuro uso en el cultivo. Poda La poda es la principal labor cultural que se debe hacer a la mora. Una poda constante implica un ahorro de productos para el control de enfermedades, facilidad en la recoleccin, mayor duracin del cultivo y alta produccin (Franco et al., 1997). De acuerdo con lo recomendado, se llevaron a cabo tres tipos de poda: Poda de formacin: A los 45 60 das de sembrados los materiales de mora se seleccionaron seis tallos que venan debajo del suelo (Figura 1D). Se escogieron dos ramas tipo macho (el terminal o punta que tiene las hojas cerradas y crece verticalmente) con el fin de regular la produccin (ya que las ramas secundarias de los machos son las que producen todo el ao, mientras que las ramas hembras dan los picos de cosecha), lo cual permite que siempre haya fruta para cosechar (Franco et al., 1997). Inmediatamente, se cort el tallo que tena la planta al momento de la siembra. De esta forma quedaron seis tallos que venan de la cepa ya conformada; se eliminaron las ramas ltigo
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(rastreras, delgadas con hojas pequeas) y se entresacaron hojas de los primeros 30 centmetros de los tallos. Poda de produccin: Las ramas hembra (el terminal que tiene las hojas abiertas) se dejaron crecer libremente. Sin embargo, en el caso de ramas hembra y macho que sobrepasaban la segunda cuerda del tutor, se cortaron a 15 centmetros por encima del segundo alambre del sistema de tutorado empleado (espaldera compuesta en doble T). Las ramas secundarias se podaron en forma escalonada, de arriba hacia abajo (la rama de arriba, dejando dos yemas y la rama que le sigue hacia abajo dejando tres yemas y as sucesivamente, para buscar una buena entrada del sol y una mayor aireacin). Esta poda permite la programacin de cosechas (Franco et al., 1997). Poda sanitaria: Se cortaron constantemente desde la cepa, los tallos y ramas que ya haban producido, se eliminaron ltigos y ramas secas, al igual que ramas secundarias con frutos afectados por enfermedades. El material producto de la poda se retir del lote. Tutorado Debido a que el hbito de crecimiento de las 35 accesiones poda variar en la nueva zona de adaptacin, fue necesario orientar su crecimiento con la utilizacin de tutores que favorecieran la aireacin y permitieran ejecutar las labores de mantenimiento del cultivo (fumigaciones, manejo de arvenses, cosecha, entre otros) (Figura 1E). Chiquero Este mtodo es muy comn en pequeos cultivos y demanda mucha madera. Aunque no fue utilizado en Monterrico, se recomienda para el manejo de la mora en zonas de alta precipitacin. Normalmente se utiliza la forma cuadrada y se colocan cuatro postes equidistantes a un metro de la planta, dependiendo del material y a una altura de 1.4 metros. Posteriormente, se ubican travesaos, de tal forma que la planta quede en el centro desde donde, posteriormente, se dirigen los tallos hacia las varas para apoyarlos. Los tallos se distribuyen de manera equidistante (Franco et al., 1997). Espaldera compuesta en doble T Se colocaron postes de 2 metros sobre el surco, cada 3-4 plantas. En cada poste se ubic un primer travesao de longitud de 60 centmetros a los 60-80 centmetros del suelo. A este travesao se le coloc en sus extremos alambre de bajo calibre o terlenka. A 1.5 metros del suelo se ubic un segundo travesao de 0.80 metros de largo, el cual llevaba alambre ms grueso, calibre 14. Las ramas se distribuyeron de tal forma que existiera buen espacio entre ellas. Riego Las plantas se ubicaron en suelos bien drenados, a fin de evitar el dao que sufren cuando el suelo se encharca. Aunque los mtodos de riego ms convenientes para el cultivo de la mora son el goteo, micro aspersin y riego corrido (Franco y Giraldo, 2000); para el caso del lote en Monterrico, no hubo necesidad de riego por las constantes precipitaciones.
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Aporque El aporque implica un mejoramiento en el anclaje de las plantas. Este se hizo con azadn una vez transcurri la poda de formacin y no fue muy alto (5 centmetros), con el fin de facilitar la salida de ramas nuevas (Figura 1F). Posteriormente, se realizaron aporques ms altos, de 20 centmetros, y se recomend hacerlos repetidamente cada seis meses. Cultivos intercalados En las calles, o antes de instalar la mora, se recomend sembrar maz, posteriormente frjol arbustivo u otras especies de pancoger, cuyo desarrollo no afectara el cultivo de la mora. El frjol, por ejemplo, le proporciona nitrgeno al suelo, lo cual beneficia el cultivo de mora. Plagas A continuacin se describen las plagas de mayor presencia en el lote del sector Monterrico, las cuales no son de alta importancia para la economa: fidos o pulgones (Aphis spp.). Esta plaga chupa savia de retoos y hojas nuevas, las cuales se deforman; tambin transmite enfermedades causadas por virus (Castao, 1997; Figura 2 A). Trips (Frankliniella spp.). Como los fidos, los trips atacan en verano; se localizan en las partes ms jvenes de la planta donde chupan la savia de los retoos, de los brotes terminales y de las hojas jvenes. Los tallos y frutos se pueden ver afectados cuando se presenta un ataque severo, el cual frena el crecimiento y provoca momificacin en los frutos (Castao, 1997; Botero, 2007; Figura 2B). Cucarrn del follaje (Diabrotica spp.). Perforan las hojas de diferentes tamaos y ocasionan su cada. Su manejo consiste en hacer una buena fertilizacin, controlar selectivamente la malezas y regar por aspersin (Castao, 1997). Enfermedades Se encontr que el material de propagacin que usan los agricultores (estacas y acodos) es tomado de plantas de los mismos cultivos, sin tener en cuenta sus condiciones sanitarias ya que, con frecuencia, este material est infectado con Colletotrichum spp. Igualmente, los agricultores compran el material de propagacin (estacas, acodos y plntulas a partir de semillas) en viveros no certificados. Con frecuencia, este material no cumple criterios fitosanitarios y tiene un pobre establecimiento en el cultivo lo cual provoca prdidas econmicas importantes. Al analizar el material de mora colectado en Monterrico, se determin que las principales enfermedades causadas por hongos que limitan y afectan la fase de produccin y poscosecha, y adems, reducen la cantidad y calidad del fruto cosechado son el moho gris producido por B. cinerea (Figura 2 C-D) y la antracnosis producida por Colletotrichum spp. (Figura 2 E-F). Estos agentes patgenos se encontraron en el material de propagacin (estacas, acodos, semilla), tanto el colectado en campo, como el adquirido en vivero. Igualmente, se observ la presencia recurrente de mildeo velloso (Peronospora spp.) (Figura 2G), visto en tallos (recolectados) y hojas (en campo), los cuales afectan el desarrollo de los frutos en diferentes grados. A continuacin se describen las enfermedades producidas por estos agentes.
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Pudricin del fruto o moho gris (Botrytis cinerea). Esta enfermedad, producida por el hongo B. cinerea, se constituye en una de las ms limitantes en el cultivo de la mora de Castilla (De La Rotta y Muoz, 1993). Es favorecida por la alta humedad, por lo tanto, se presenta especialmente en pocas de lluvia (Franco y Giraldo, 2000). Ataca en forma agresiva, flores y frutos en formacin y en desarrollo, lo cual ocasiona prdidas en campo. Afecta los frutos maduros ya recolectados, es decir, la poscosecha (Botero, 2007). El hongo produce quemazn en las flores en campo o permanece latente dentro de sus estructuras y se desarrolla posteriormente en los frutos. Los frutos inmaduros se vuelven negros y los frutos en proceso de maduracin, se pudren. Los efectos de esta enfermedad pueden ser disminuidos con la realizacin de las siguientes prcticas: Siembra con distancias que permitan aireacin de las plantas y fcil realizacin de las podas de formacin, podas sanitarias y cosecha de los frutos. Eficiente control de malezas. Podas sanitarias y de mantenimiento que permitan que el cultivo tenga una buena aireacin y entrada de luz. Adecuada y oportuna fertilizacin. Buen drenaje del suelo. Retiro del material infectado. Aislamiento de los frutos afectados, de otros frutos o del suelo. Recoleccin de frutos en su punto ptimo de madurez y comercializacin. Control qumico recomendado por un asesor tcnico. Control biolgico con Trichoderma spp. en etapas tempranas del cultivo. Antracnosis o palo negro (Colletotrichum spp.). Tambin conocida como palo azul (estado inicial de la enfermedad) o palo negro (estado maduro y final de la enfermedad). Es causada por el hongo Colletotrichum gloeosporioides C. acutatum, el cual fue aislado de tallos sintomticos. Es una enfermedad persistente en los cultivos de mora que afecta las plntulas en vivero, en el establecimiento en cultivo y durante todo su ciclo de produccin. La humedad relativa alta y las lluvias frecuentes estimulan su desarrollo. Puede atacar los brotes tiernos y los botones florales, momifica los frutos, ocasiona manchas violeta oscuras y negras en ramas y tallos; produce el secamiento y la muerte de la rama. En las hojas se presentan manchas pardas rodeadas de un aro prpura (Franco y Giraldo, 2000; Forero de La Rotta, 2001). Esta enfermedad ocasiona la muerte progresiva de ramas y brotes y en un estado avanzado, la muerte de la planta. Para el control de esta enfermedad se recomienda la realizacin de las siguientes prcticas: Siembra con distancias que permitan aireacin de las plantas y fcil realizacin de las labores de podas de formacin, podas sanitarias y cosecha de los frutos. Podas que eliminen los tallos afectados y faciliten la entrada de aire. Retiro de residuos de las podas del cultivo para quemarlos o enterrarlos. Mantenimiento del cultivo y el plateo libres de malezas. Fertilizacin oportuna.
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Buen drenaje del cultivo. Control qumico con fungicidas cpricos recomendados por un asesor tcnico. Para su utilizacin es necesario confirmar la especie que ataca el cultivo, ya que el comportamiento y susceptibilidad de cada especie es diferente, ante los fungicidas usados. Mildeo velloso (Peronospora spp.). Esta enfermedad se ve favorecida por condiciones de alta humedad, temperaturas fras y lluvias constantes. Puede atacar hojas, tallos, pednculos y frutos. Las plantas afectadas presentan el hongo en el envs de las hojas y en los tallos en forma de pequeas reas grisceas. En los tallos produce coloraciones blancas y cuarteamiento; los pednculos presentan lesiones irregulares de color blanco que se secan; las hojas y pecolos adquieren un color violeta. Las flores presentan un amarillamiento que causa la prdida prematura de los ptalos y los frutos desarrollados se deforman, pierden color y maduran en forma desigual; los no maduros se pasman y detienen su crecimiento (Franco y Giraldo, 2000; Forero de La Rotta, 2001). Para su manejo se recomiendan las siguientes labores: Control de malezas Fertilizacin oportuna Prcticas de poda para mejorar la aireacin y la entrada de luz al cultivo Retiro del cultivo los residuos de las podas, para luego ser quemados. Buen drenaje del cultivo
Debido a las altas precipitaciones, el sector de Monterrico es muy susceptible a estas enfermedades. Fue necesario llevar a cabo un plan de control, manejo y recomendaciones con los agricultores. Para el manejo de plagas, se recomend realizar a tiempo las labores agronmicas: mantener controladas las malezas, fertilizar, regar y, en caso extremo, aplicar insecticida. Para el control de enfermedades, se instruy y entreg un paquete de recomendaciones con productos como Benlate, Bravo 720, Control 500, Derosal, Brestanid 500, Antracol, Kocide, Ridomil, Rovral y Mertec, en diferentes combinaciones y proporciones, segn el caso. Adicionalmente, se instruy sobre la necesidad de llevar a cabo un manejo integrado del cultivo con el objeto de reducir el impacto sobre el ambiente e incrementar la produccin y la rentabilidad del mismo mediante la siembra de material de alta calidad gentica y fitosanitaria, manejo de distancias de siembra, fertilizacin, desyerbas, podas, cosechas oportunas, destruccin de residuos y control biolgico, entre otros. Eventos de capacitacin con agricultores En Febrero de 2006, se inici la socializacin del proyecto con 21 productores, un miembro (el gerente en su momento) de la comercializadora C.I. La Cosecha y ocho ejecutores. En esta reunin se identificaron las responsabilidades de cada miembro en el proyecto y sus compromisos, dentro de cada componente del mismo. Despus de esto, se llevaron a cabo eventos de seguimiento y capacitacin que incluan aspectos como el manejo del cultivo en el lote experimental; la evaluacin y seleccin participativa de materiales en el lote (ver tambin artculo de Espinosa et al., en esta compilacin); la produccin limpia de la mora mediante el uso de biofertilizantes y biocontroladores (ver artculos de Roveda et al., Beltrn y Cotes, en esta compilacin); la produccin limpia (in vitro) de materiales promisorios y su entrega y manejo ex vitro (ver artculo de Valderrama et al., en esta compilacin).
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Estos eventos se llevaron a cabo a manera de talleres, das de campo, visitas a los laboratorios, y, adems, demostraciones de mtodo y resultado, los cuales contaron con la participacin de agricultores, personal cientfico y tcnico y en algunos casos comercializadores e interventora del Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural (MADR) (Tabla 2, Figura 3). Adicionalmente, se realizaron visitas continuas al sector Monterrico, en promedio, una vez cada 15 das durante los tres aos del proyecto, con visitas ms frecuentes en pocas de siembra, cosecha y entrega de materiales ex vitro.
CONCLUSIONES
Se seleccion participativamente con agricultores del sector Monterrico, Silvania, un lote experimental en el cual se sembraron 35 materiales de mora (dos cultivados por los agricultores de la regin). En el proceso participaron los socios productores de tres asociaciones, investigadores y tcnicos de CORPOICA y otros tcnicos especializados en temas de inters para la zona. Los agricultores fueron capacitados en el manejo del cultivo en el lote desde la preparacin del terreno para la siembra, el trazado y ahoyado, la densidad y el material de siembra, la siembra, el manejo de arvenses, la fertilizacin, la poda, el tutorado, el riego y el manejo de plagas y enfermedades. Se realizaron eventos y visitas frecuentes para impartir el plan de capacitacin de manejo del cultivo en el lote y para llevar a cabo investigacin participativa relacionada con la evaluacin y seleccin de los mejores materiales en las condiciones de experimentacin y con la produccin y entrega de semilla limpia.
AGRADECIMIENTOS
A las asociaciones de productores del sector Monterrico y especialmente a Alberto Vanegas, Nubia Garzn, Miguel Babativa, Genoveva Forero y Octaviano Villalobos, quienes con su apoyo permitieron el desarrollo del proyecto. A Carlos Parrado, por su continuo apoyo en labores de campo y seguimiento con los agricultores. A Yaneth Camargo, por su excelente apoyo en el seguimiento logstico y administrativo.
BIBLIOGRAFA
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TABLAS Y FIGURAS
Tabla 1. Materiales de mora introducidos en un lote del sector Monterrico.
Nombre del material Fuente (cdigo ILS )
a
Regin de origen
Tipo de No. de multipliplantas cacin sembradas
Sara 3 Cerezos Pacho 1 Gutica Sara 4 Sara 2 ILS 1863 Manzanares Guarne L.S. Sara 1 Don Matas El Retiro Pantanillo La Ceja Crdoba Villa Mara Pcora Ro Sucio Salamina La Finca Monteloro Guarne Francesa San Bernardo Sin Espinas
Pasca Hartona Castilla Maniz Ranchona Huila Castilla Monterrico Agricultor Monterrico Yema Castilla Monterrico Agricultor Monterrico (ILS2367) Semilla Castilla Fusa Agricultor Monterrico Mora Dulce Morn
a
C.I. La Selva (ILS 2286) C.I. La Selva (ILS 2268) C.I. La Selva (ILS 2280) C.I. La Selva (ILS 2273) C.I. La Selva (ILS 2287) C.I. La Selva (ILS 2285) C.I. La Selva (ILS 1863) C.I. La Selva (ILS 2276) C.I. La Selva (ILS 2272) C.I. La Selva (ILS 2284) C.I. La Selva (ILS 2270) C.I. La Selva (ILS 2271) C.I. La Selva (ILS 2281) C.I. La Selva (ILS 2274) C.I. La Selva (ILS 2269) C.I. La Selva (ILS 2288) C.I. La Selva (ILS 2279) C.I. La Selva (ILS 2282) C.I. La Selva (ILS 2283) C.I. La Selva (ILS 2275) C.I. La Selva (ILS 2277) Universidad de Antioquia Universidad de Antioquia Vivero Los Arcngeles, Fusa Vivero Los Arcngeles, Fusa (ILS 3400) Agricultor (ILS 2375) Agricultor Agricultor (ILS 2365) Agricultor (ILS 2376) Agricultor (ILS 2370)
Salamina, Caldas Manizales, Caldas Manizales, Caldas Gutica , Caldas Salamina, Caldas Salamina, Caldas La Cocha, Nario Manzanares, Caldas Guarne, Antioquia Salamina, Caldas Don Matas, Antioquia El Retiro, Antioquia Envigado, Antioquia La Ceja, Antioquia Crdoba, Quindo Villamara, Caldas Pcora, Caldas Riosucio, Caldas Salamina, Caldas SD b Tula, Valle Antioquia SD San Bernardo, Cundinamarca San Bernardo, Cundinamarca Pasca, Cundinamarca Manizales, Caldas Manizales, Caldas Manizales, Caldas Huila Monterrico, Silvania, Cundinamarca Monterrico, Silvania, Cundinamarca Fusa, Cundinamarca Monterrico, Silvania, Cundinamarca Monterrico, Silvania, Cundinamarca
b
Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Semilla Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Acodo Yema Semilla Semilla Semilla Yema
5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 10 10 10 10 10 10 10 10 7 10 10 10 6 6
Agricultor Monterrico (ILS2372) Agricultor Monterrico (ILS2378)
ILS = Cdigo de introduccin de la coleccin C.I. La Selva.
SD = Sin dato.
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Tabla 2. Eventos de capacitacin y socializacin del proyecto con agricultores de Monterrico, tcnicos e investigadores.
Tema Fecha Asistentes
Socializacin del proyecto y taller ex ante Manejo del cultivo de la mora Buenas prcticas agrcolas para el cultivo de la mora Manejo adecuado de la poda y fisiologa Taller anual y gira a CORPOICA C.I. Tibaitat Riegos para el cultivo de la mora Evaluacin de materiales con productores Manejo de suelos Evaluacin de materiales con productores Manejo Integrado de plagas y enfermedades de mora Manejo de plantas in vitro, biofertilizantes, evaluacin y produccin Evaluacin de materiales con productores Manejo de vitroplntulas en invernadero Montaje de vitroplntulas en pre-ensayo con productores Manejo de poda, control de enfermedades y fertilizacin de la mora Taller de socializacin de resultados para seleccin de materiales de mora con productores Visita a lote con interventor del MADR, taller de mercado y pos-cosecha de la mora Taller de manejo de la mora ex vitro con productores Jornada de trabajo para el embolsado de material de mora propagada in vitro Taller de capacitacin sobre embolsado de material de mora propagado in vitro Da de campo para entrega de 9,723 plntulas ex vitro Manejo agronmico y vivero. Capacitacin de manejo de la mora ex vitro con productores Taller ex post de mora con productores Da de campo para entrega de 3,300 plntulas ex vitro Visita a fincas para seguimiento de material entregado Visita a fincas para seguimiento de material entregado Seguimiento y capacitacin para manejo y siembra de plntulas de mora Da de campo para coordinacin de entrega de plntulas de mora Da de campo para evaluacin en condiciones de invernadero y seguimiento del cultivo Da de campo para entrega de 5,000 plntulas de mora Da de campo para entrega de 5,000 plntulas de mora
Febrero 7 y 22, 2006 Abril 25, 2006 Agosto 2, 2006 Septiembre 12, 2006 Abril 10, 2007 Junio 8, 2007 Agosto 17, 2007 Agosto 28, 2007 Septiembre 18, 2007 Diciembre 11, 2007 Enero 22, 2008 Enero 31, 2008 Febrero 5, 2008 Febrero 26, 2008 Abril 1, 2008 Mayo 20, 2008 Julio 21 de 2008 Agosto 12 de 2008 Agosto 21, 2008 Septiembre 3, 2008 Octubre 7, 2008 Noviembre 11, 2008 Noviembre 20, 2008 Diciembre 4, 2008 Diciembre 12, 2008 Enero 21, 2009 Febrero 13, 2009 Febrero 16, 2009 Febrero 18, 2009 Febrero 25, 2009
30 19 25 28 12 31 10 6 22 26 15 8 7 14 20 25 12 8 6 12 12 21 5 8 11 6 5 4 3 3
Noviembre 30, Diciembre 1, 2006 43
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Figura 1. Establecimiento y manejo del cultivo en lote de Monterrico. A. Trazado y ahoyado. B. Manejo de arvenses. C. Fertilizacin. D. Podas. E. Tutorado. F. Aporque. 22
D G
F
Figura 2. Plagas y enfermedades presentes en el lote de Monterrico. A. fidos. B. Trips. C y D. Fruto maduro con moho gris. E y F. Plantas a partir de semilla y estacas afectadas por antracnosis. G. Mildeo velloso en hoja.
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Figura 3. Algunas fotografas de eventos de capacitacin con los agricultores de Monterrico en las instalaciones de CORPOICA C.I. Tibaitat (A y B) y en la escuelita de Monterrico en Silvania (C y D).
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IDENTIFICACIN TAXONMICA DE LAS ESPECIES DEL GNERO RUBUS PRESENTES EN LA COLECCIN COLOMBIANA DE MORA
Espinosa Bayer Natalia1; Medina Cano Clara Ins2; Lobo Arias Mario2
RESUMEN
La mora es un frutal andino, del gnero Rubus, con importancia actual creciente en Colombia. El desarrollo sostenible de la especie requiere del soporte de una coleccin amplia de materiales del taxn cultivado y la existencia de una coleccin de recursos genticos de la entidad biolgica y taxa relacionados. Tiene un conjunto de poblaciones locales, silvestres y cultivadas y algunas introducciones forneas de diversas especies de Rubus, las cuales son conservadas por parte de la Corporacin Colombiana de Investigacin Agropecuaria, CORPOICA, entidad que tiene a cargo el Sistema de Bancos de Germoplasma de la Nacin Colombiana para la Alimentacin y la Agricultura. Este conjunto germoplsmico debe apoyar los sistemas productivos, mediante procesos de conocimiento de la diversidad inter e intraespecfica disponible. El primer paso es determinar y categorizar las especies presentes en el conjunto mencionado, para lo cual se seleccionaron accesiones morfolgicamente contrastantes, con toma de material para su identificacin en el Herbario de la Facultad de Agronoma de la Universidad Nacional (Sede Bogot). Se logr determinar la presencia de cinco taxa diferentes en la metapoblacin objeto del estudio: R. macrocarpus (sin. R. nubigenus), R. niveus, R. urticifolius, R. glaucus y R. floribundus, mediante el empleo de claves taxonmicas, ejemplares de referencia para tal fin y el apoyo de expertos en el rea. Esto permitir disear una bsqueda de entidades biolgicas del gnero reportadas en el pas, no presentes en el sistema de mantenimiento, para procesos de colecta, conservacin y utilizacin. Palabras clave: Recursos genticos, sistemtica, herbarios, morfologa.
INTRODUCCIN
Focke (1910, 1914, citado por Romoleroux, 1996), trabaj en la taxonoma del gnero Rubus. El autor estableci 12 subgneros con 429 especies, de los cuales, los tres subgneros ms importantes, por el nmero y relevancia de las especies agrupadas, fueron: Rubus, Idaeobatus y Malachobatus con 132, 117 y 115 taxa, respectivamente. Diversos trabajos taxonmicos posteriores sealan a Rubus como uno de los gneros de plantas ms complejos, debido a la ocurrencia de hibridacin entre especies relacionadas y aun entre subgneros, a la poliploida y a la presencia de pseudogamia (Alice y Campbell, 1999; Antonius-Klemola, 1999; Nybom y Kraft, 1995; Weber, 1996).
1 Laboratorio de Gentica Molecular Vegetal, Centro de Biotecnologa y Bioindustria (CBB), CORPOICA, Km. 14 va Mosquera, Cundinamarca. 2 Centro de Investigacin (C.I.) La Selva, CORPOICA, Rionegro, Antioquia. Autor de correspondencia: Mario Lobo Arias, Ph.D. Gentica, e-mail: mlobo@corpoica.org.co Caracterizacin, evaluacin y produccin de material limpio de mora con alto valor agregado
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La permanencia o separacin del receptculo de las drupeolas, al cosechar el fruto, se ha utilizado para diferenciar los subgneros Rubus e Idaeobatus, que corresponden a nivel hortcola, a las zarzamoras o moras y a las frambuesas, respectivamente (Clark et al., 2007). Sin embargo, Clark et al (2007), sealan que, aun cuando esta diferenciacin es de gran utilidad en Europa y Norteamrica, las especies de Rubus presentes en Centro y Suramrica exhiben atributos de los dos tipos hortcolas, por lo cual la mencionada diferenciacin carece de aplicabilidad en las especies latinoamericanas. El apoyo de las tcnicas moleculares, en particular ITSs (Internal transcribed spacer region sequences), a los estudios morfolgicos y citolgicos, empleados en taxonoma y filogenia, han evidenciado que el gnero Rubus en conjunto y 10 de los 12 subgneros establecidos por Focke, no soportan tratamiento monofiltico (Alice, 2002; Alice y Campbell, 1999). En el contexto anterior, el subgnero Orobatus, exclusivo de Amrica Latina, admiti monofilia, tal cual fue establecido por Focke y el subgnero Rubus es monofiltico al incluir R. glaucus Benth. (subg. Idaeobatus) y R. alpinus Macfad. (subg. Lampobatus) y excluir a R. ursinus Cham. et. Schltdl. Este resultado indica la necesidad de revisar la taxonoma del gnero Rubus (Alice, 2002; Alice and Campbell, 1999; Ballington et al., 1993). En los Andes ecuatorianos se han encontrado, en mayor proporcin, especies de los subgneros Orobatus y Rubus, entre las cuales se destaca en el subgnero Orobatus, la entidad biolgica R. macrocarpus Benth o R. nubigenus H.B.K., conocida en Colombia como Morn (Popenoe, 1920; Rivera et al., 1997). Esta se distribuye en zonas ecolgicas entre los 2600 y los 3400 msnm. El taxn se distingue por el color rojo a vino del fruto, un sabor ligeramente cido al madurar y el gran tamao de sus bayas (2.5 x 5 cm), caracterstica, esta ltima, que dio origen a su nombre (Ballington et al., 1993; Popenoe et al., 1989; Popenoe, 1920; Thompson, 1997). Otra especie del subgnero Rubus es R. urticifolius Poir., conocida como Mora de Piedra, la cual se reconoce porque la planta est cubierta completamente por tricomas glandulares rojizos (Ballington et al., 1993; Rivera et al., 1997; Romoleroux, 1996). Por su parte, R. glaucus Benth es un taxn que gener controversia sobre el subgnero al cual perteneca (Rubus o Idaeobatus), por su morfologa, debido a que combina atributos de crecimiento y follaje (tallos y hojas) de frambuesa y caractersticas del fruto, como la permanencia del receptculo en el fruto maduro, asociadas a la zarzamora; elementos que en forma conjunta con una probable reproduccin apomctica, han hecho que se considere como un posible hbrido intersubgenrico (Rubus x Idaeobatus) o un anfidiploide frtil (Ballington et al., 1993; Popenoe et al., 1989; Popenoe, 1921; Thompson, 1997). Los resultados obtenidos con marcadores ITS, indican que R. glaucus pertenece al subgnero Rubus (Alice, 2002; Alice y Campbell, 1999; Ballington et al., 1993; Popenoe et al., 1989; Popenoe, 1921; Thompson, 1997). Del subgnero Idaeobatus se encuentra R. niveus Wall., conocida como frambuesa, la cual es una especie introducida, proveniente de Asia continental e Indonesia que crece asilvestrada y se caracteriza por su hojas imparipinnadas (Ballington et al., 1993; Rivera et al., 1997; Romoleroux, 1996). En Colombia, Rivera et al. (1997), adelantaron un estudio sobre la distribucin y ecologa de especies Rubus silvestres en la cuenca del ro El Palmar en Ubaque, Cundinamarca, en un rea de estudio comprendida entre los 1500 y 3600 msnm, donde se report la presencia de 10 taxa silvestres del gnero, las cuales representan aproximadamente el 50% de las reportadas en el pas. Los autores reportaron la presencia de R. acanthophyllus, R. compactus, R. floribundus y R. macrocarpus restringidas a la zona de pramo entre los 2800 y los 3600 msnm, en tanto que registraron una amplia distribucin, entre los 1500 a los 3000 msnm, de los taxa R. bogotensis, R. glaucus, R. megalococcus y R. urticaefolius, en el Bosque Andino y Subandino (1500 a 3000 msnm). Por su parte, el taxn R. porphyromallus, exhibi una poblacin reducida a 2700 msnm y los investigadores hallaron, creciendo
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en forma espontnea, la especie introducida R. idaeus (Rivera et al., 1997). Las especies en estudio se relacionan con hbitats intervenidos por el hombre, ya que se encuentran en bosques y matorrales secundarios, cercas de piedra o linderos, bordes de carreteras y lotes abandonados. Aguilar (2006), inform que en Colombia se cultivan diversas especies del gnero Rubus, aparte de R. glaucus Benth, el taxa ms importante, se encuentran R. bogotensis HBK, sembrada en altitudes entre los 1700 y los 3700 msnm; R giganteus o macrocarpus Benth, entre los 2600 y los 3400 msnm; R. megalococcus Focke, entre los 2300 y los 2700 msnm y R. nubigeus (sin. R. macrocarpus, Romoleroux, 1996), entre los 2600 y los 3100 msnm. El Sistema de Bancos de Germoplasma de la Nacin Colombiana, a cargo de CORPOICA, posee una coleccin de Rubus, la cual incluye actualmente poblaciones cultivadas y espontneas, colectadas en diversas zonas del pas y algunas introducciones de otras reas del mundo. Esta se ha conformado para conservar la variabilidad del gnero y promover su utilizacin, en sistemas productivos, mediante la realizacin de procesos de valor agregado de diversa ndole, los cuales parten de la identificacin de las especies presentes. Por ello, se realiz el estudio actual, tendiente a categorizar sistemticamente los demes presentes en la metapoblacin en mantenimiento. Las poblaciones cultivadas de esta metapoblacin fueron evaluadas participativamente con agricultores en Silvania
MATERIALES Y MTODOS
En forma previa al trabajo de categorizacin de las especies, presentes en la Coleccin de Mora de la Nacin Colombiana, se realiz una visita al Herbario Nacional Colombiano del Instituto de Ciencias de la Universidad Nacional de Colombia, sede Bogot, con el fin de conocer los atributos presentes en las especies del gnero Rubus, con las caractersticas particulares de cada una y con las muestras utilizadas en la determinacin taxonmica de especies. De la coleccin de campo, ex situ de poblaciones de Rubus conservada en el C.I. La Selva, por CORPOICA en Rionegro (Antioquia), se seleccion al azar la accesin Sara 4 de aquellas que mostraron caractersticas tpicas de la especie R. glaucus. Adems, se incluyeron los demes que exhibieron particularidades morfolgicas distintas a R. glaucus: ILS 2187, ILS 1817, ILS 1865, Sin Espinas, Frutilla, La Macha y Morn, para un total de ocho entradas. De las anteriores, se tomaron muestras de rganos vegetativos (tallos y hojas) y reproductivos (flores y frutos) de un individuo por accesin, con prensado y secado de las muestras, para su transporte e identificacin en el precitado Herbario. Para el proceso de identificacin taxonmica de las muestras, se cont con la asesora del MSc Juan Carlos Granados, curador del Herbario de la Facultad de Agronoma de la Universidad Nacional de Colombia, sede Bogot. Esta se realiz con la utilizacin de la clave de especies de Rubus, compendiada en la serie Flora del Ecuador (Romoleroux, 1996), mediante examen de las muestras con estereoscopio, con el fin de apreciar las caractersticas diferenciales de taxa, como son el indumento en hojas, tallos y flores, entre otras. Adicionalmente, las muestras fueron revisadas por el profesor Edgar Linares, del Instituto de Ciencias Naturales de la Universidad Nacional de Colombia sede Bogot, experto en el gnero Rubus.
En las ocho accesiones analizadas, se encontraron cinco especies diferentes, las cuales se relacionan en la Tabla 1. La accesin La Macha, exhibi caractersticas del taxn cultivado R. glaucus, tales como flores de ptalos blancos lanceolados y cerosidad en el tallo, as como caracteres de
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especies silvestres, correspondientes a hojas trifoliadas y pentafoliadas y presencia de aguijones pronunciados. Adems de estos elementos, observados en laboratorio, en campo fue evidente la ausencia de formacin de frutos o el aborto temprano de estos, en todas las plantas de dicha poblacin. Lo anterior, condujo a concluir, en principio, que este material puede ser producto de un evento de hibridacin entre R. glaucus y una especie silvestre no determinada. Al respecto, en el gnero Rubus, los cruzamientos naturales interespecficos e intersubgenricos son frecuentemente reportados (Alice and Campbell, 1999; Nybom, 1995). Con la asesora del profesor Edgar Linares se clasific la accesin mencionada, en principio, como R. glaucus, Tabla 1, lo cual amerita, un estudio posterior para elucidar si la desviacin morfolgica de los atributos de sta es producto de hibridacin interespecfica o de variabilidad gentica dentro del taxn. Igualmente, el material llamado: Sin Espinas fue categorizado como R. glaucus, ya que todas sus estructuras vegetativas y reproductivas coinciden con la descripcin de esta especie, exceptuando la presencia de aguijones, los cuales han sido reemplazados por rudimentos de aguijn. sta modificacin constituye una ventaja a nivel de manejo agronmico, pues se facilita la realizacin de las diferentes labores en campo. Las otras especies, ubicadas en los materiales objeto de identificacin, exhiben los siguientes atributos: R. macrocarpus Benth o R. nubigenus H.B.K. Estpulas ovadas, hojas trifoliadas, inflorescencias laxas con ms de 4 flores, envs tomentoso o viloso. De acuerdo con Romoleroux (1996), el taxn exhibe tallos tipo terete, tomentosos a glabrescentes, usualmente glandulares estipitatos, con aguijones curvos, que se estrechan de la base hacia la punta, con 1 a 3 mm de longitud; las estpulas son ovatas a auriculadas y subcoriceas; las hojuelas son acartonadas a corceas con 7 a 11 pares de venas secundarias, una base redondeada a cuneada y pice redondeado a agudo, con mrgenes serrulados a dentados. Las inflorescencias son cimas compuestas de 8 a 16 cm de longitud con 8 a 20 flores que tienen 20 a 30 mm de dimetro, con spalos que exhiben pice agudo o acuminado; los ptalos son magenta o prpura y los carpelos tomentosos; los frutos tienen forma ovoide-globosa, con spalos reflexos, exhibiendo 40 a 60 drupeolas por receptculo y color vino tinto a negro (Figura 1). R. niveus Thumb, De Rubo. Estpulas filiformes, hojas imparipinadas 5-7 foliolos; drupeolas que se separan del receptculo y frutos rojos. Al respecto, Romoleroux (1996), seala que ste es un arbusto suberecto de 2 m de alto, con tallos terete, glabros, pruinosos, con aguijones que se estrechan a partir de una base amplia, de 7 a 10 mm de anchos, derechos o ligeramente curvos. Las estpulas son lanceaoladas, glabrescentes; los pecolos son espinosos; las hojas imparipinadas, con 5 a 7 fololos; las hojuelas son ovatas a ligramente rmbicas, subcoriceas, con 9 a 11 pares de venas secundarias; las ramas florales son pilosas con pequeas espinas, las inflorescencias exhiben entre 20 y 50 flores, con pedicelos de 5 a 10 mm de longitud y acculas; los frutos son ovoide-globosos, con presencia de ptalos reflexos y 50 a 80 drupeolas por receptculo, de color rosa a profundamente rosadas (Figura 2). R. urticifolius Poir. Glndulas ssiles esparcidas en el tallo; ms de 30 flores por inflorescencia, hojas pentafolioladas, sin glndulas, carpelos pilosos en el pice. Sobre la especie Romoleroux (1996), informa
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que es un arbusto rastrero de 2 a 3 m de alto; cubierto de pelos de color rojizo; tallos angulosos, que exhiben una alta densidad de aguijones curvos, que se estrechan de la base al pice; estpulas subulatas o filiformes, tomentosas a glabrescentes, pecolos armados, pilosos; hojas con 5 foliolos, cuyas hojuelas son ovatas o elpticas, acartonadas, con base redondeada, pice agudo-acuminado, margen serrado, envs tomentoso en las venas, haz ligeramente piloso, tomentoso en las venas. Las inflorescencias son panculas piramidales con 50 a 150 flores y gran ramificacin. Las flores presentan spalos ovatos o lanceolados, pice apiculado o acuminado, con ptalos ampliamente obovatos, de color rosado o rosado claro. Los frutos son ovoides a globosos, con spalos ascendentes y 30 a 50 drupeolas por receptculo, glabros y de color rojo a negro (Figura 3). R. glaucus Benth. Estpulas filiformes, hojas trifolioladas, drupelas permanecen adheridas al receptculo, menos de 30 flores por inflorescencia, tallos glabros, frutos con ms de 50 drupeolas por receptculo. Romoleroux (1996). Reporta que R. glaucus presenta tallos trepadores teretes, glabros, con aguijones que se estrechan de la base al pice; la planta exhibe estpulas lineares acartonadas, glabras. Las hojas son trifoliadas, con hojuelas ovato-lanceoladas, subcoriceas, con 10 a 13 pares de venas secundarias, base redondeada o ligeramente truncada, pice acuminado y margen biserrado. El envs es lanoso de color blanquecino y el haz glabro; las inflorescencias son cimas compuestas con 15 a 22 flores que exhiben spalos deltados, pice acuminado a filiforme, ptalos obovatos blancos y carpelos pilosos. Los frutos son ovoides a globosos, con spalos reflexos y 70 a 100 drupeolas por receptculo, de color rojo a negro (Figura 4). R. floribundus H.B.K. Estpulas filiformes, drupeolas adheridas al receptculo, ms de 40 flores por inflorescencia, hojas pentafolioladas, tallos con glndulas dispersas estipitadas, pecolo no pulvinulado, base de los fololos redondeado. Tallos y ramas sin glndulas, envs pubescente, tallos tomentosos, foliolos con 10 a 12 pares de venas secundarias, margen serrado. Romoleroux (1996), seala que el taxn exhibe tallos trepadores, angulosos-tomentosos a glabrescentes, a menudo con glndulas dispersas ssiles o subssiles; exhibiendo aguijones curvos que se estrechan de la base al pice. Las estpulas son lanceoladas, acartonadas, tomentosas o glabrescentes. Los pecolos tienen aguijones y son tomentosos a glabrescentes; las hojas tienen 5 fololos, con hojuelas ovato-elpticas, acartonadas, pice agudo, margen aserrado, envs velloso o piloso, tomentoso en las venas y haz piloso; inflorescencias con 30 a 80 flores, en algunas oportunidades con una rama terminal simosa, pedicelos tomentoso-vellosos, a menudo con glndulas ssiles o subssiles; flores con spalos ovatos, pice subapiculado o acuminado, ptalos blancos o rosado-claros, carpelos glabros o ligeramente pilosos en el pice; frutos ovoide-globosos, con spalos ascendentes, con presencia de 40 a 50 drupeolas por receptculo, glabras o glabrescentes, de color negro (Figura 5).
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
El estudio realizado permiti determinar la presencia de materiales de cinco especies del gnero Rubus en el Sistema de Bancos de la Nacin Colombiana a cargo de CORPOICA, de las aproximadamente veinte especies, presentes en el pas.
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En la coleccin hay ejemplares de los taxa: R. macrocarpus (sin: R. nubigenus), R. niveus, R. urticifolius, R. glaucus y R. floribundus. Esto indica la posibilidad de emplear, no slo el material de la especie ms sembrada: R. glaucus, sino tambin de taxa relacionados, lo cual se favorece por la posibilidad de hibridacin interespecfica, la cual ha sido reportada en forma espontnea en el gnero, posibilidad que hay que determinar en cada cruzamiento entre el taxn cultivado y los relacionados. El conocimiento de los taxa, presentes en la coleccin, permite desarrollar una estrategia de colecta de aquellos reportados en Colombia, no presentes en el sistema de conservacin.
AGRADECIMIENTOS
Al Curador del Herbario de la Universidad Nacional de Colombia, Sede Bogot, M. Sc. Juan Carlos Granados y al Profesor Edgar Linares, del Instituto de Ciencias Naturales del mismo centro docente, por su apoyo, constante y decisivo, en el proceso de clasificacin taxonmica de los materiales de Rubus.
BIBLIOGRAFA
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TABLAS Y FIGURAS
Tabla 1. Especies identificadas en la Coleccin de Rubus de la Nacin Colombiana, a cargo de CORPOICA
Especie Accesin
R. macrocarpus, sin R. Nubigenus R. niveus R. urticifolius R. glaucus R. floribundus
Morn Frutilla ILS 1865 Sara 4, Sin Espinas, La Macha ILS 2187, ILS 1817
Figura 1. R. macrocarpus Benth o R. nubigenus H.B.K. Hoja, flor y fruto.

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Figura 2. R. niveus Thumb, De Rubo. Hoja, flor y fruto.
Figura 3. R. urticifolius Poir. Hoja, flor y fruto. 32

Figura 4. R. glaucus Benth. Hoja y fruto.
Figura 5. R. floribundus HBK. Hoja y fruto.

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EVALUACIN AGRONMICA, NUTRICIONAL Y SELECCIN PARTICIPATIVA DE MATERIALES DE MORA EN SILVANIA, CUNDINAMARCA

Espinosa Bayer Natalia1, Snchez Len Dora2, Garca Ramrez Andrea2, Ariza Nieto Magnolia2, Ariza Nieto Claudia2, Barrero Meneses Luz Stella1
RESUMEN
a mora es un frutal andino cultivado por pequeos y medianos agricultores y su cultivo constituye, en algunas regiones de Colombia, una de las principales fuentes de ingresos, empleo rural, oferta de alimento y utilizacin en la agroindustria. La Mora de Castilla (Rubus glaucus Benth), ampliamente adaptada se cultiva, aunque con limitaciones de susceptibilidad fitosanitaria y bajo ndice de madurez (bajos grados Brix y alta acidez). La escasa oferta de materiales puede conducir a la vulnerabilidad en la produccin. Estos aspectos aunados a la necesidad cada vez ms creciente de producir materiales con alto valor agregado, hacen necesario tomar acciones que conlleven a la evaluacin de nuevos materiales en nichos especficos. En el presente trabajo se evalan materiales de mora provenientes del banco de germoplasma manejado por CORPOICA y material de agricultor por atributos relevantes de tipo morfolgico, agronmico, nutricional y antioxidante en procesos participativos con agricultores de el sector Monterrico en Silvania (Cundinamarca). A partir de 34 materiales evaluados, se seleccionaron seis que presentan caractersticas agronmicas sobresalientes, alta calidad nutricional y una buena variabilidad para los atributos estudiados. Estos materiales fueron multiplicados in vitro y entregados a los agricultores del sector Monterrico (Ver artculo de Valderrama et al., en esta compilacin). Palabras clave: Investigacin participativa, material promisorio, valor nutricional, base gentica.
INTRODUCCIN
Dentro de la cadena frutcola, la mora (Rubus glaucus Benth) es un frutal andino con propiedades agronmicas, nutritivas y antioxidantes con alto potencial en el mercado nacional e internacional (Tafur et al., 2006). En Colombia se cultiva principalmente la Mora de Castilla, material o conjunto de materiales similares ampliamente adaptados que, sin embargo, presen1 Laboratorio de Gentica Molecular Vegetal, Centro de Biotecnologa y Bioindustria (CBB), CORPOICA, Km. 14 va Mosquera, Cundinamarca. 2 Laboratorio de Nutricin, CBB, CORPOICA, Km. 14 va Mosquera, Cundinamarca. Autor de correspondencia: Luz Stella Barrero Meneses, Ph.D. Gentica y Mejoramiento Vegetal, e-mail: lbarrero@corpoica.org.co
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tan limitaciones de susceptibilidad fitosanitaria y bajo ndice de madurez (bajos grados Brix y alta acidez) (Barnett y Murant, 1970; Botero et al., 2002; Franco et al., 2000; Franco y Giraldo, 2002). Adicionalmente, la escasa oferta de materiales puede conducir a la vulnerabilidad en la produccin, por tanto se hace necesario ampliar la base gentica del cultivo. Esto, aunado a la necesidad cada vez ms creciente de producir semilla con altas calidades nutricionales y antioxidantes, exige tomar acciones que conlleven a la evaluacin de materiales para atributos de calidad morfolgica, agronmica y nutricional que permitan seleccionar aquellos con alto valor agregado adaptables a ambientes especficos y que representen buena parte de la variabilidad gentica del cultivo. Los estndares internacionales en Rubus para atributos morfolgicos, agronmicos y nutricionales indican que la evaluacin primaria se debe realizar en el perodo de fructificacin y normalmente se tiene en cuenta el ndice de madurez, el cual se basa en el cambio del color del fruto (NTC-4106), acompaado de cambios en los slidos solubles totales o grados Brix; la acidez expresada como cido mlico y el pH. Adicional a la evaluacin primaria, los frutos se cosechan y se determina el ndice de calidad en el cual se incluye la apariencia (tamao, forma y ausencia de defectos), firmeza, sabor (slidos solubles totales o grados Brix, acidez titulable y presencia de voltiles) y valor nutricional (Vitaminas, minerales y fenoles) (Clark et al., 2007). Estas evaluaciones son imperativas para la seleccin de genotipos lite y la promocin de la siembra de material gentico con propiedades diferenciales. En Colombia, los estudios han mostrado que para algunos parmetros morfolgicos y agronmicos existe variabilidad en Rubus. Seis materiales provenientes de Antioquia y forneos presentaron un comportamiento agronmico diferencial entre materiales Rubus y R. glaucus Benth. Entre estos el material originario de San Antonio fue el de mayor produccin, lo cual fue atribuible a su precocidad, mayor cantidad de ramas productivas, inflorescencias y frutos, y baja o nula emisin de tallos vegetativos (Crdoba y Londoo, 1996). De otro lado, en materiales Rubus (R. glaucus, R. urticifolius y R. robustus) colectados en el Valle del Cauca, Cauca y Nario, se identificaron algunos sobresalientes por su mayor peso de fruto, grados Brix y menor nmero de espinas (Zamorano et al., 2007). En cuanto a atributos nutricionales y potencial nutracutico, tambin se ha encontrado variabilidad. En frambuesa, R. idaeus, se han identificado once compuestos fenlicos, incluidas algunas antocianinas. En diferentes cultivares los contenidos individuales de compuestos de este tipo varan significativamente tanto por factores de desarrollo como por factores genticos (Patel et al., 2004; Anttonena y Karjalainen, 2005; Beekwilder et al., 2005), lo cual concuerda con estudios recientes del potencial nutracutico por medio de ORAC o FRAP (mtodos para deteccin de antioxidantes), antocianinas, flavonoles y fenoles, de materiales de Rubus, donde se evidencian algunos cultivares con una variacin muy amplia y una muy alta capacidad antioxidante. Estos resultados han conducido a proponer que el valor nutricional de Rubus puede ser optimizado por medio de programas de ampliacin del germoplasma y que el mejoramiento gentico puede incrementar estos niveles (Clark et al., 2007). El Sistema de Bancos de Germoplasma de la Nacin Colombiana, a cargo de CORPOICA, posee una coleccin del gnero Rubus, la cual incluye poblaciones cultivadas y espontneas, colectadas en diversas zonas del pas y algunas introducciones de otras reas del mundo. Con el fin de promover la utilizacin de estos materiales en sistemas productivos del pas, se propuso evaluar, en material cultivado, variables relevantes de tipo morfolgico, agronmico, nutricional y antioxidante en procesos participativos con agricultores del sector Monterrico en Silvania (Cundinamarca), junto con material de agricultor de la regin y seleccionar aquellos con mejores atributos y adaptacin en la zona de estudio.
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MATERIALES Y MTODOS
Material vegetal Se evaluaron 34 accesiones pertenecientes a la Coleccin de Rubus mantenida por CORPOICA, sembradas en un lote de la zona productora de mora en el sector Monterrico del Municipio de Silvania, Cundinamarca. De estas, 32 correspondan a Mora de Castilla (R. glaucus) y las otras dos a Morn (R. macrocarpus) y Mora Dulce (Rubus spp). Dos de ellas (Castilla Monterrico Yema y Castilla Monterrico Semilla) eran tradicionalmente cultivadas por los agricultores de la regin. Una rplica de las accesiones es mantenida en el Centro de Investigacin, C.I. La Selva, Rionegro, Antioquia. Para las evaluaciones, se sembr un surco por accesin con un contenido entre cinco y diez plantas (para detalles de la siembra y el manejo del cultivo en el lote, ver artculo de lvarez et al. de esta compilacin). Seleccin participativa Se realizaron dos encuestas a los agricultores de Monterrico. En la primera se busc identificar las preferencias de cultivar de los agricultores, respecto a su sistema productivo y a las caractersticas de la zona. Para tal fin, se seleccionaron variables reproductivas de carcter cualitativo, las cuales se ponderaron asignndoles un valor mayor, de acuerdo con los criterios que los agricultores consideraron favorables. Por ejemplo: en el caso de la variable forma del fruto, los estados posibles son alargado o redondo. Los agricultores prefirieron que el fruto fuera alargado, entonces se le asign tres al tipo alargado y uno al tipo redondo. De esta manera se le otorg mayor importancia en la calificacin final a las caractersticas apreciadas por el productor (Tabla 1). En la segunda encuesta, el objetivo consisti en calificar los materiales de mora establecidos en el lote con base en los criterios del productor y en criterios comerciales. Se concentr la atencin en evaluar las mismas variables de la primera encuesta con los agricultores que tuvieron mayor participacin en el desarrollo del ensayo; se organizaron cuatro parejas de productores que observaron y calificaron todas las accesiones. Para el anlisis de las encuestas, se procedi a ponderar las calificaciones de los estados de las variables evaluadas y sumarlos. De esta manera se obtuvo una calificacin total de cada material con un mximo de 20 para el mejor. La segunda encuesta se llev a cabo en enero de 2008, cuando las accesiones mostraron estabilidad en su produccin despus de ao y medio de sembradas. Evaluacin agronmica y nutricional Una vez terminadas las encuestas, se procedi a tomar datos en campo de la variable cuantitativa de rendimiento por planta (expresado en gramos). Las moras se cosecharon en el estado de madurez organolptica (estado en el cual el fruto se desea comercializar, debido a su caracterstica no climatrica); condicin fisiolgica del fruto que limita cambios en el ndice de madurez despus de la cosecha (Wills, 1998). En laboratorio, se midieron las variables: longitud de fruto y ancho de fruto (en centmetros) utilizando un calibrador digital en las zonas ms ancha y ms larga del fruto y, adems, peso de fruto (en gramos) utilizando una balanza digital (Crdoba y Londoo, 1996). El ndice de madurez se midi a travs de los grados Brix y acidez. El valor nutracutico se determin a travs de la capacidad antioxidante por el mtodo FRAP (Benzie & Strain, 1996, Huang, et al., 2005). De
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cada accesin se tomaron cinco plantas para evaluar rendimiento y de cada planta cinco frutos para el resto de variables.morfolgicas del fruto. El valor nutricional se determin teniendo en cuenta los estados de madurez 3, 4 y 5, siendo este ltimo, el estado de madurez fisiolgica para este fruto no climatrico (Wills, 1998). Los datos de campo y laboratorio se evaluaron estadsticamente mediante anlisis de componentes principales y anlisis de conglomerados (Daz, 2007; Hidalgo, 2003).
Los resultados de las encuestas de seleccin participativa indicaron que el tipo de fruto alargado y dulce es el preferido por los agricultores (Tabla 1). Las mejores accesiones que tuvieron calificacin de agricultores de 18-20 fueron Sin espinas, ILS1863, Monteloro, Castilla Fusa y Riosucio. Sin embargo, Castilla Fusa present un bajo contenido de antioxidantes (Tabla 2). Para la seleccin de los seis materiales que representaron los mejores atributos, se consideraron como parmetros de mayor importancia el contenido de antioxidantes, la calificacin de los agricultores y el rendimiento, seguido por otros parmetros. De esta manera se seleccionaron los materiales Monteloro, Riosucio, Cerezos, Sin espinas y Monterrico Yema e ILS 1863 en este ambiente. Cabe sealar la importancia de realizar evaluaciones a travs del tiempo, en la misma localidad y en nuevas localidades. Tambin se consider en una segunda fase que los materiales seleccionados representaran variabilidad de la especie R. glaucus. En este sentido se llevaron a cabo anlisis de componentes principales y de conglomerados con los datos obtenidos. El anlisis de componentes principales mostr que los primeros cuatro componentes presentaron valores propios superiores a uno y fueron los de mayor relevancia en la medida que agruparon alrededor de un 86% de la variacin total de los datos originales (Tabla 3). Se encontr que las variables que mostraron mayor relacin con los cuatro primeros componentes principales descritos en la Tabla 3 fueron en su orden longitud de fruto, peso de fruto, ancho de fruto, madurez, grados Brix y acidez. Lo cual indica que stas fueron las variables que ms aportaron en la discriminacin de los materiales de Rubus. En la figura 1 se observan las agrupaciones que se obtuvieron a partir del anlisis de conglomerados con la utilizacin de todas las variables en estudio, donde se conformaron tres grupos de cultivares, de los cuales, el segundo se subdividi en otros dos. Los materiales con mejores caractersticas agronmicas y fisicoqumicas se ubicaron en el grupo 2B, el cual incluy tanto materiales de la especie R. glaucus como Mora Dulce (Rubus spp.). ste grupo mostr tamao de fruto mayor, en cuanto a longitud (alrededor de 3 cm), ancho y peso (~6 g) (Tabla 4). En el grupo 1 se encontraron materiales de fruto pequeo con algunas caractersticas importantes en cuanto a calidad nutricional como madurez (2.58) y grados Brix (7.45). Mientras que en el grupo 2A, se encontraron materiales intermedios, de mayor tamao de fruto y caractersticas nutricionales inferiores al grupo 1. Por su parte R. macrocarpus o Morn que se diferenci con claridad form un nuevo grupo (el 3) con caracteres interesantes en cuanto a su tamao de fruto (~ 10 g) y calidad nutricional (madurez de 2.65 y grados Brix de 7.7), muy superiores a los de R. glaucus, por tanto es un material a tener en cuenta en un programa de mejoramiento de mora (Tabla 4). Los materiales seleccionados por sus caractersticas agronmicas sobresalientes, alta calidad nutricional y por participacin de los agricultores, se ubicaron en los grupos 1, 2A y 2B, lo cual indica que se escogieron materiales con diferentes ventajas nutricionales o agronmicas.
37
A cinco de las accesiones se les determinaron los parmetros fisicoqumicos (grados Brix, pH, acidez) de tres estados de madurez (3, 4 y 5). No se presentaron diferencias significativas en los anlisis fisicoqumicos de las accesiones evaluadas (Tabla 5). Sin embargo, se mostr que, en la medida en que aumenta el estado de madurez del fruto, los grados Brix y el ndice de madurez tambin aumentan, lo cual indica que el fruto acumula la mayor cantidad de slidos solubles totales en la madurez fisiolgica (estado 5).
CONCLUSIONES
Despus de evaluar 34 materiales de mora provenientes del banco de germoplasma manejado por CORPOICA y material de agricultor por atributos relevantes de tipo morfolgico, agronmico, nutricional y antioxidante en procesos participativos con agricultores del sector Monterrico en Silvania (Cundinamarca), se seleccionaron como promisorios: Monteloro, Riosucio, Cerezos, Sin espinas, Monterrico Yema e ILS 1.863, de acuerdo con su contenido de antioxidantes, calificacin de los agricultores y rendimiento, seguido por otros parmetros de importancia en el cultivo para el ambiente en estudio. Los seis genotipos seleccionados se ubicaron en diferentes grupos (1, 2A y 2B), lo cual indica que se escogieron materiales con diferentes ventajas nutricionales o agronmicas. Para cinco accesiones evaluadas por grados Brix, pH y acidez en tres estados de madurez (3, 4 y 5) se encontr que el fruto acumula la mayor cantidad de slidos solubles totales en la madurez fisiolgica (estado 5).
AGRADECIMIENTOS
A las Asociaciones de productores de Monterrico. A Roberto lvarez por su continuo apoyo con los agricultores del sector. A Yaneth Camargo por su excelente apoyo logstico y administrativo.
BIBLIOGRAFA
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38
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TABLAS Y FIGURAS
Tabla 1. Variables cualitativas evaluadas por productores de mora en Silvania (Cundinamarca).
Variable Estado Valor asignado por preferencia
Forma del fruto
Redonda Alargada Dulce Acido Inspido Mucha
1 3 5 3 1 5 3 1 5 3 1
Sabor
Cantidad de fruto
Regular Poca Buena
Calificacin general
Regular Mala
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Tabla 2. Calificacin de agricultores y parmetros agronmicos y fisicoqumicos de las accesiones establecidas en Silvania*.
CalifiRendicacin agri- miento cultores (g/planta) Antioxidantes (FRAP) Largo de fruto Relacin largo/ancho
Accesin**
Brix
Ph
Acidez
Monteloro Manzanares Pantanillo Riosucio La Finca Pacho 1 Cerezos Don Matias Sara 4 Sin Espinas Castilla M. yema ILS 1863 Sara 1 Pcora Gutica El Retiro Villa Maria San Bernardo Castilla Maniz. Salamina Castilla M. semilla Sara 3 Guarne Francesa Pasca Guarne L.S. Castilla Fusa La Ceja Hartona Morn Crdoba
18 8 12 18 8 10 15 5 14 20 11 18 10 16 12 12 14 12 12 10 14 14 12 14 12 14 18 12 16 16 8
150 78 80 84 86,67 16,67 310 65 72,5 208 90 203,33 62,5 125 96,67 86 135 67,5 84 56 97,5 41,67 37 51 125 94 140 18,75 87 128 80
3446 3165 2627 2536 2482 2145 2118 1991 1963 1937 1870 1850 1776 1693 1597 1533 1490 1326 1290 1275 1239 1211 1196 1143 850 777 745 727 428 382 327
7,6 8,4 6,7 6,6 8,5 8,3 7 6,9 7,7 8,2 7 8,1 8,1 7,5 7,2 6,5 7,6 7,5 7,1 6,8 6,8 7,3 7 6,9 6,6 7,1 7,3 8,8 7,3 7,7 7
2,45 2,33 2,21 2,71 2,35 2,27 2,47 2,58 2,43 2,28 2,37 2,33 2,17 2,28 2,23 2,65 2,36 2,33 2,44 2,57 2,5 2,54 2,73 2,66 2,33 2,48 2,46 2,4 2,25 2,27 2,5
3,03 2,78 3,26 2,92 3,08 2,78 3,57 3,16 3,09 3,19 3,14 3,42 4,2 3,04 3,24 3,32 3,29 3,51 3,46 2,66 3,23 2,98 2,92 3 3,3 3,11 3,34 3,45 3,29 2,93 3,35
2,66 2,32 2,69 2,26 2,29 2,1 2,39 2,27 2,57 2,48 2,43 2,54 2,47 2,63 2,31 2,71 2,42 2.377 2,38 2,28 2,53 2,35 2,55 2,23 2,6 2,11 2,71 2,46 2,29 3,3 2,3
1,26 1,21 1,3 1,11 1,18 1,17 1,17 1,15 1,27 1,19 1,26 1,24 1,22 1,29 1,23 1,33 1,16 1,18 1,23 1,22 1,18 1,25 1,29 1,1 1,23 1,11 1,26 1,24 1,18 1,05 1,16
* Los datos fueron ordenados por contenido de antioxidantes. Los materiales seleccionados para multiplicacin in vitro se sealan en rojo. ** M. = Monterrico, Maniz. = Manizales
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Tabla 3. Valores propios y porcentaje de varianza de nueve componentes en accesiones de Rubus.

Nmero Valor Propio Porcentaje de la varianza total explicada Absoluto Acumulado
1 2 3 4 5 6 7 8 9
2.9692 2.1073 1.6286 1.0252 0.7312 0.4451 0.0838 0.0061 0.0035
32.99 23.41 18.10 11.39 8.12 4.95 0.93 0.07 0.04
32.99 56.41 74.50 85.89 94.02 98.96 99.89 99.96 100.00
Tabla 4. Valores promedio de las caractersticas de las agrupaciones obtenidas por anlisis de conglomerados.
Variable Grupo 1 Grupo 2: 2A 2B Grupo 3: Morn
Longitud fruto (cm) Peso fruto (g) Ancho fruto (cm) Madurez Brix Acidez
2.15 4 1.88 2.58 7.4 2.91
2.41 4.47 1.85 2.15 7.3 3.29
2.57 5.9 2.05 2.30 7.0 3.33
3 10.97 3.04 2.65 7.7 2.93
Tabla 5. Efecto de la accesin y el estado de madurez sobre caractersticas fisicoqumicas de la mora.

Factor Accesin Grados Brix pH Acidez ndice de madurez
Castilla M. Yema ILS 1863 Sin Espinas Pcora Villa Mara

Estado
6.80 2.83 6.90 1.49 5.34 0.72 7.46 1.74 6.37 2.34 5.12 0.63b 5.94 0.67b 7.98 1.97a NS * NS
2.98 0.09 2.70 0.21 2.80 0.12 2.82 0.11 2.92 0.09 2.77 0.16 2.79 0.12 2.89 0.18 NS NS NS
3.62 0.45 3.93 0.61 3.15 0.27 3.61 0.63 3.12 0.58 3.62 0.53 3.81 0.43 3.11 0.53 NS NS NS
1.92 0.93 1.84 0.77 1.69 0.21 2.17 0.94 2.13 1.09 1.42 0.09b 1.57 0.07b 2.61 0.75 NS * NS
3 4 5
Accesin Estado Accesin x Estado

a,b
Efectos
Promedios con letras distintas son significativamente diferentes (P<0.05); NS, no significativo. * P <0.05.
41
Clasificaci n j er rquica ACP
3
RNU29 RG33 RG03 RG32
Morn Sin espinas* Pcora Monteloro*
RG10 RG23 RG19 RG31 RG02
2A
RG25 RG39 RG26 RG28 RG17 RG21
RG12 RG11 RG06 RG15 RG22 RG08
2B
RS30 RG13 RG20 RG16
RG27 RG04 RG09 RG24 RG07 RG05 RG18 RG14 RG01
Sara 4 Sara 3 La Ceja ILS 1863* Villa Mara Sara 2 C. Fusa C. Manizales El Retiro Monterrico S. Sara 1 Huila Gutica San Bernardo Hartona Pantanillo Pasca Mora dulce Crdoba Don Matas Castilla M. Yema* Monterrico Y.* Cerezos* Manzanares La Finca Pacho 1 Francesa Guarne L.S. Guarne Salamina Riosucio*
* Accesiones seleccionadas por caractersticas agronmicas, nutricionales, nutracuticas y calificacin de agricultores.
Figura 1. Dendograma obtenido por anlisis de conglomerados.
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BIOFERTILIZACIN EN EL CULTIVO DE LA MORA (RUBUS GLAUCUS BENTH)

Roveda Gabriel 1, Ramrez Margarita 2, Pearanda Andrea 1, Cabra Lucrecia 1
RESUMEN
urante la ltima dcada se ha incrementando en Colombia el uso de la micropropagacin in vitro a partir del cultivo de meristemos. Esta tecnologa permite la propagacin masiva de clones especficos de frutales, y garantiza alta calidad y mayor uniformidad en programas de obtencin de semilla limpia con materiales libres de agentes patgenos. Sin embargo, el uso de esta tecnologa ha sido restringida, debido al alto grado de mortalidad de plntulas (> 50%), ocasionado por una cutcula poco desarrollada, estomas no funcionales y un sistema radical dbil que facilita la deshidratacin. El principal propsito de esta investigacin se relaciona con la obtencin de semilla limpia de mora, endurecida, procedente de cultivo de tejidos e inoculada con Hongos de Micorrizas Arbusculares (HMA) para mejorar la supervivencia de plntulas, reducir el uso de fertilizantes, mejorar la calidad del fruto y ampliar el acceso a los mercados. Mediante la investigacin, realizada en las instalaciones de CORPOICA, en condiciones controladas, se evaluaron varias cepas nativas aisladas de las zonas productoras de mora de los departamentos de Cundinamarca y Boyac. Los mayores beneficios se lograron con la inoculacin de la cepa MA4, aislada en Silvania (Cundinamarca), con esporas nativas de Glomus y Acaulospora, expresados en plantas con mayor biomasa (foliar y radical), porte, rea foliar, estado nutricional y alta capacidad de absorcin de nutrientes esenciales (P, N, Ca y Mg). Se concluy, adems que el uso de la cepa MA4 permite sustituir el 50% de la fertilizacin comercial, con valores similares al testigo comercial (T100) en absorciones de P y Ca, y superiores a T100 en N y Mg.
INTRODUCCIN
Colombia posee una enorme riqueza en especies frutales con potencial como alimentos funcionales (Echeverry, 2003). Existen algunas evidencias sobre las propiedades antioxidantes del gnero Rubus, dentro de las cuales se encuentra la mora. Este gnero presenta una gran diversidad que actualmente comprende cerca de unas 300 especies distribuidas por todo el mundo. La mora (Rubus glaucus Benth) es una especie originaria de los Andes Tropicales de Amrica; pertenece a la familia Rosceae y fue descubierta por Hartw y descrita por Benth. La Mora de Castilla es la ms conocida y cultivada en Colombia. Aunque existen diversas especies de Rubus en el pas, tales como: R. bogotensis (Antioquia, Valle, Santander y Cundinamarca); R. nubigenus (Caldas, Cundinamarca, Cauca); R. megalococus (Cundinamarca); R. floribundus y R. giganteus, entre otras (Franco y Giraldo, 1998).
1
2
Laboratorio de Ecofisiologa Vegetal, Centro de investigaciones C.I. Tibaitat, CORPOICA.

Laboratorio de Microbiologa de Suelos, Centro de Biotecnologa y Bioindustria (CBB), CORPOICA.
Autor de correspondencia: Gabriel Roveda, M.Phil. Fisiologa de plantas, e-mail: groveda@corpoica.org.co Caracterizacin, evaluacin y produccin de material limpio de mora con alto valor agregado
43
La Mora de Castilla se distribuye ampliamente en el pas. Se encuentra en forma silvestre, desde el departamento del Putumayo hasta el Valle del Magdalena, y es posible cultivarla en altitudes entre los 2.000 y 3.200 metros (Asohofrucol et al., 2004). Su fruto morado brillante se caracteriza por altos contenidos de azcar; forma alargada, cnica, tamao grande y tallos con espinas (Franco y Giraldo, 1998). Los cultivos de mora presentan grandes altibajos en productividad ocasionados por diversos limitantes agronmicos como problemas fitosanitarios que inciden en la baja calidad de la semilla. Otras causas tienen que ver con el sistema de propagacin y la carencia de semilla certificada. La mayora de los cultivos establecidos en Colombia parten de material de propagacin asexual, mediante acodos o estacas que, frecuentemente, transmiten enfermedades fungosas, bacterianas y virales que dejan grandes prdidas al agricultor (vilan et al., 1989; Angulo, 2003). En Colombia se ha incrementado, en la ltima dcada, el uso de la micropropagacin de meristemos en frutales, mediante la tcnica de cultivo de tejidos (Angulo, 2003). Este sistema, adems de permitir la propagacin masiva de clones especficos, garantiza alta calidad, mayor uniformidad y semilla limpia, con materiales libres de agentes patgenos (Jaizme-Vega y Barea, 1992; Jaizme-Vega, 1999). Este sistema de propagacin in vitro es una valiosa alternativa para la multiplicacin de clones seleccionados (Broome y Zimmerman, 1978; Castro y Gaviria, 1995). Los resultados de investigaciones donde se comparan plantas propagadas por acodo tradicional y plantas micropropagadas permiten establecer que las plantas propagadas in vitro presentan una mejor calidad en la produccin, y frutos de mayor tamao, peso y homogeneidad (Castro y Gaviria, 1995). A pesar de los mltiples beneficios que genera la micropropagacin, existen limitantes para un uso ms extendido de esta tcnica. La transferencia de plntulas en condiciones in vitro (Laboratorio) a condiciones ex vitro (vivero o campo), constituye uno de los pasos ms crticos de la micropropagacin, debido al alto grado de mortalidad de plntulas (entre 50 y 90%) (Sutter, 1985; Ziv et al., 1987). Estas prdidas se producen por problemas de aclimatacin, como consecuencia de una cutcula poco desarrollada, estomas no funcionales con un inadecuado control del estado hdrico de la planta y un sistema radical dbil, que facilita la deshidratacin (Vestberg y Estan, 1994; Elmeskaoui et al., 1995; Alarcn y Ferrera-Cerrato, 2000; Schultz, 2001). Por otra parte, se ha observado que algunas plantas micropropagadas como la uva, la manzana, la pia, el aguacate, el pltano y el ann presentan, por lo general, alta dependencia en las relaciones micorrcicas (Nemec, 1986), ya que, al inocular las plantas micropropagadas con hongos formadores de micorrizas arbusculares (HFMA) se logra alcanzar un crecimiento ptimo (Gianinazzi et al., 1990). En la actualidad, este conocimiento ha permitido integrar ambas biotecnologas, la micropropagacin in vitro y el uso de la inoculacin micorrcica en diversas plantas de inters (Lovato et al., 1996). Las ventajas de la inoculacin con HFMA ex vitro en plantas micropropagadas in vitro se han probado en muchas especies de frutales como uvas, manzana, ciruelo, pia, aguacate, fresa, frambuesa, cereza (Varma y Schepp, 1995; Fortuna et al., 1996; Lovato et al., 1996; Azcn-Aguilar et al.,1997), pltano (Jaizme-Vega y Azcn, 1995; Jaizme-Vega, 1999), patrones clonales de peral y melocotonero (Rapparini et al., 1994), pistacho (Schubert y Mazzitelli, 1988), kiwi (Schubert et al., 1992) ann y cereza silvestre, las cuales mostraron una mejor adaptacin, toma de nutrientes y crecimiento vegetal (Azcn-Aguilar et al., 1997; Lovato et al., 1994). La fase de aclimatacin es un paso crtico en el ciclo de la micropropagacin. Algunas investigaciones recientes en plantas de yuca (Azcn-Aguilar et al., 1997) y micropropagacin de los rizomas de rboles frutales. Monticelli et al., 2000, citado en Schultz, 2001, han demostrado que la inoculacin con micorrizas, al inicio de esta etapa, reduce el choque del transplante, aumenta la supervivencia y produce la consiguiente estabilizacin de la planta (Schultz, 2001). Es importante
44
realizar experimentos para la seleccin de las mejores cepas del hongo formador de micorriza arbuscular en bsqueda de un eficiente desarrollo micorrcico en plantas micropropagadas (Guillemin et al., 1992). Si bien se conocen las bondades de una etapa de endurecimiento del material in vitro, muchos de los laboratorios comerciales que emplean estas tcnicas de propagacin, no realizan el endurecimiento de los materiales antes del transplante definitivo a campo, por considerar este proceso difcil y costoso pues representa entre el 35 y el 75% del costo total de la semilla (Encina, 1996). La tecnologa de biofertilizacin, a partir de hongos formadores de micorrizas arbusculares, es una estrategia importante para aumentar la supervivencia de plntulas multiplicadas in vitro, por la tcnica de cultivo de tejidos. Esta inoculacin mejora, a la vez, la aclimatacin durante la fase de transplante a condiciones de vivero y campo. Adicionalmente, optimiza la nutricin vegetal y ejerce una proteccin del cultivo contra enfermedades y el ataque de elementos patgenos, con implicaciones en reduccin de costos de produccin y aumentos en productividad. El principal propsito de esta investigacin es la obtencin de semilla limpia de mora, endurecida, procedente de cultivo de tejidos e inoculada con Hongos Formadores de Micorrizas Arbusculares (HFMA) que mejore la supervivencia de plntulas, la calidad del fruto y el acceso a los mercados e incida en la reduccin del uso de fertilizantes qumicos.
MATERIALES Y MTODOS
Diseo experimental La investigacin se realiz en los invernaderos y laboratorios de micropropagacin y ecofisiologa vegetal del Centro de Investigaciones Tibaitat (CORPOICA). El diseo experimental seleccionado se realiz con bloques completos al azar: ocho tratamientos y tres repeticiones, cada bloque con cuatro unidades experimentales. Se realizaron dos tipos de muestreos: uno de seguimiento o monitoreo, con una frecuencia quincenal, y tres muestreos destructivos a los 30, 80 y 120 das, despus del transplante. Los tratamientos evaluados fueron los siguientes: Tres tratamientos testigo sin inoculacin: uno sin fertilizar (T0), uno con 50% de fertilizacin (T50), y un testigo comercial con 100% de fertilizacin (T100), y cinco tratamientos inoculados con HFMA+50% de la fertilizacin comercial (MA1, MA2, MA3, MA4 y Mycobiol). Preparacin del sustrato e inoculantes Despus de la fase de enraizamiento in vitro, al inicio de la etapa de aclimatacin, se utilizaron tinas de plstico con turba canadiense (sustrato estril), previamente humedecida. A los 30 das despus de la siembra (dds), se pasaron a materas desinfectadas de 1.8 Kg con un sustrato compuesto por una mezcla de suelo y cascarilla de arroz en proporcin 3:1 (V:V). De acuerdo con el anlisis de suelo, las caractersticas qumicas fueron: pH ligeramente cido (5,0), alto contenido de materia orgnica (11,4%), niveles bajos de fsforo (9 mg.kg-1), situacin ideal para la evaluacin de HFMA. De igual manera, se evaluaron nutrientes como azufre (23 mg.kg-1), calcio (3 cmol+.kg-1), magnesio (1,9 cmol+.kg-1), potasio (1,7 cmol+.kg-1), cobre (1,8 cmol+.kg-1), manganeso (16 cmol+. kg-1), sodio (0,3 cmol+.kg-1), zinc (6,9 mg.kg-1), boro (0,3 mg.kg-1) y hierro (360 mg.kg-1). Los inculos de micorriza arbuscular se obtuvieron a partir de muestras de suelo rizosfrico de cultivos establecidos de mora de los departamentos de Antioquia y Cundinamarca. Con estas muestras se inici la multiplicacin de las cepas nativas de hongos formadores de micorriza arbuscular, para luego proceder a inocular las plntulas de mora.
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Inoculacin y Condiciones experimentales Se utilizaron propgulos de mora de tres semanas en enraizamiento in vitro, propagadas en el Laboratorio de Micropropagacin de Plantas del Centro de Biotecnologa y Bioindustria (CBB) de CORPOICA. La inoculacin se realiz en el momento de la siembra, en el Laboratorio de Ecofisiologa Vegetal, utilizando una concentracin de 200 esporas por planta. El endurecimiento de plntulas de mora requiere una humedad relativa alta durante los primeros das. En trabajos realizados en CORPOICA se sembraron las plntulas en recipientes plsticos, con una mezcla de sustratos slidos e inoculados con micorrizas arbusculares y se cubrieron con papel Vinipel, para garantizar una mayor supervivencia de plntulas, en las cuales se obtuvo cerca del 100% de supervivencia de plntulas endurecidas (Roveda et al, 2007). Cada tres das se aplic solucin nutritiva de Hoagland a todos los tratamientos y cuatro semanas ms tarde se pasaron a materas; luego se trasladaron al invernadero. Sistema de muestreo y variables analizadas Se realizaron tres muestreos destructivos de la siguiente manera: En la fase de aclimatacin (ex vitro), 30 das despus de la siembra (dds), y durante la fase de endurecimiento de los materiales, 80 y 120 das despus del transplante (ddt). En este momento se cuantificaron los efectos de la inoculacin sobre la acumulacin de biomasa en plantas, crecimiento vegetal y absorcin de nutrientes. Adicionalmente, se analiz la asociacin simbitica mora-HFMA a travs del porcentaje de colonizacin en raz de micorrizas arbusculares, empleando la metodologa de tincin con Azul de Tripn, propuesta por Phillips & Hayman (1970), para lo cual se tomaron muestras de races a los 80 y 120 ddt. El monitoreo de tamao de planta se realiz a partir de los 83 ddt hasta los 160 ddt, con una frecuencia quincenal. Se cuantific la concentracin de nutrientes (N, P, K, Ca, Mg y S) en tejido vegetal, teniendo en cuenta la metodologa del Laboratorio de Suelos y Tejidos del Programa Nacional de Recursos Biofsicos (CORPOICA). Para la cuantificacin del fsforo y el azufre se utiliz el mtodo colorimtrico mediante Molibdato-Vanadato y Cloruro de Bario, respectivamente. La concentracin de K, Mg y Ca en tejido vegetal se determin mediante espectrometra de absorcin atmica y la concentracin de nitrgeno se determin por el mtodo de Kjeldahl (AOAC. 16 edicin, 1996). Finalmente, los resultados experimentales obtenidos se compararon estadsticamente, mediante anlisis de varianza (P<0,05 y P<0,01) y la prueba de comparacin de Tukey, con un nivel de confianza de (P<0,05).
Aislamiento y recoleccin de hongos formadores de micorrizas arbusculares con potencial como biofertilizantes. En la tabla 1 se pueden observar los resultados de anlisis del nmero de esporas/g de suelo, y % de colonizacin, subdividido en Frecuencia de micorrizacin (%F), Intensidad de micorrizacin (%M) e Intensidad de micorrizacin de los fragmentos infectados (%m), para cada una de las muestras recolectadas. Inicialmente, se aislaron del suelo esporas de hongos formadores de micorrizas arbusculares (HFMA) en plantaciones de mora, para diferentes localidades de los municipios de Cundina46
marca y Antioquia, con el propsito de obtener cepas nativas adaptadas a condiciones de suelo y clima de las zonas productoras de mora. Los resultados presentan una amplia variacin en las poblaciones de HFMA, expresadas en nmero de esporas por gramo de suelo. Estas diferencias en las poblaciones se registraron entre municipios y dentro de la misma finca, as como para el municipio de Silvania, 70 esporas por gramo de suelo; mientras que para Chocont, se aislaron 18,8 y 7,9 esporas/g de suelo en dos lotes de una misma finca del departamento de Cundinamarca (Tabla 1). De igual forma, en el departamento de Antioquia, se observaron diferencias importantes entre los municipios de Santa Cruz, La Manuela y Montenevado, con valores promedio de 82, 40 y 54 esporas/g de suelo. Estos cambios en las poblaciones residentes del hongo, frecuentemente estn asociados a las caractersticas del suelo: contenido de materia orgnica, tal como se observa en la Figura 1. La reduccin en las poblaciones de HFMA puede estar asociada a procesos erosivos, es decir que, durante la prdida de suelo se presenta un arrastre de esporas y propgulos de hongos formadores de micorrizas arbusculares. Otras posibles explicaciones se relacionan con la incidencia de las prcticas culturales inadecuadas para el manejo de los cultivos, tales como la labranza y el uso excesivo de pesticidas, entre otros. Es importante destacar que en el caso de la Finca Santa Cruz en Antioquia, se presentan los mejores niveles de colonizacin, acompaados por un alto nmero de esporas. El porcentaje de colonizacin indica el grado de asociacin entre la raz de la planta hospedera y los HFMA, esto es, el nivel de simbiosis entre estos dos organismos (Figura 2). Para una mejor interpretacin de nivel de asociacin, se utilizaron dos variables: La frecuencia de micorrizacin (%F) y la intensidad de micorrizacin (%m). La primera, representa el porcentaje de races colonizadas con relacin al nmero total de races observadas, mientras que la segunda representa la intensidad de micorrizacin de los fragmentos infectados para cada una de las muestras recolectadas, con base en una escala. Los resultados experimentales muestran diferencias importantes entre localidades respecto a la frecuencia de micorrizacin (Figura 3). Las altas frecuencias observadas en Santa Cruz muestran que los hongos formadores de micorrizas arbusculares pueden asociarse con facilidad a las races de plantas de mora, es decir que se trata de una especie vegetal con tendencias micotrficas. Estos resultados sugieren un buen potencial de asociacin de mora-HFMA, lo que significa que es posible utilizar tecnologas de biofertilizacin con xito en plantaciones de mora. Sin embargo, este xito de la simbiosis requiere una adecuada seleccin de cepas y su interaccin con los cultivares de mora, debido a que no todos los HFMA son igualmente eficaces al colonizar races de plantas de mora. Respecto a la segunda variable analizada: intensidad de la micorrizacin (%m), en general, present valores muy bajos, inferiores a 25% m, excepto en una de las fincas de Santa Cruz, con 72% m (Figura 4). Estos resultados sugieren que existe algn factor que inhibe el avance de la colonizacin del hongo en la raz de la planta. Dentro de las posibles explicaciones que se reportan en la literatura est el efecto de las prcticas inadecuadas de manejo en las plantaciones lo cual puede restringir el avance de la asociacin simbitica. Entre tales prcticas se cuentan una excesiva fertilizacin, labranza inadecuada y alto uso de pesticidas, entre otros. Los resultados obtenidos sugieren que, a pesar de existir un alto potencial en la utilizacin de hongos formadores de micorrizas en programas de biofertilizacin, es necesario realizar un proceso de seleccin de las mejores combinaciones materiales de mora con cepas de HFMA, y adems es de gran importancia revisar las prcticas inadecuadas de manejo del cultivo, las cuales pueden estar inhibiendo el grado de asociacin simbitica, aunque se observa una tendencia micotrfica de los materiales de mora cultivados en Cundinamarca y Antioquia.
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Efecto de los HFMA en la acumulacin de biomasa de plantas de mora durante la etapa de endurecimiento La inoculacin con HFMA, en este ensayo, se realiz con aislamientos de cepas nativas, los cuales provenan de plantaciones establecidas de mora, a los cuales se hizo identificacin taxonmica, para determinar los gneros que se encontraban en cada muestra. La tabla 2 muestra los resultados obtenidos en la identificacin de gneros de HMFA. La acumulacin de biomasa en las plantas de mora se determin a nivel de la parte area de la planta (tejido foliar) y en la raz. Durante la fase inicial de aclimatacin (30 dds) no se encontraron diferencias significativas entre tratamientos para materia seca foliar y fresca radical, de acuerdo con el anlisis de varianza (GLM). No obstante, a partir de los 80 ddt, durante la etapa de endurecimiento, se presentaron diferencias altamente significativas (Figura 5). Durante la fase de aclimatacin se inicia el proceso de establecimiento de la colonizacin del hongo a las races de plntulas de mora, por lo tanto, en esta etapa no se observan beneficios en la planta. Por el contrario, el hongo demanda fotosintatos de carbono provenientes de la planta para su crecimiento, durante la colonizacin. Los beneficios de la asociacin simbitica se presentaron en la etapa de endurecimiento, una vez establecida la simbiosis en el sistema radical de las plntulas, posiblemente con la formacin de arbsculos o hifas tipo coil, tal como se explica a continuacin: Las diferencias debidas a la fertilizacin se pueden observar al comparar los tratamientos testigo, donde el testigo T100 mostr los valores ms altos en acumulacin de materia seca, superiores a testigo absoluto (sin fertilizacin), similares al testigo T50 a los 80 ddt, pero ligeramente ms altos, en las variables peso seco foliar y peso fresco radical. En los tratamientos micorrizados se destac la cepa MA4 con 50% de fertilizacin en la acumulacin de materia seca foliar y fresca radical a los 80 ddt, con relacin a las dems cepas. Es importante resaltar que estas diferencias de la cepa MA4 (50%) superaron al testigo absoluto y T50, pero presentaron valores similares al testigo comercial (T100), en materia seca (foliar y radical). Las otras cepas como MA1, MA2, MA3, Mycobiol presentaron valores similares al tratamiento testigo T50, con un 50% de fertilizacin. Los resultados permiten ver el efecto benfico de la cepa MA4 sobre la acumulacin de biomasa y muestran la capacidad de esta cepa para sustituir el 50% de la fertilizacin en plantas de mora al presentar resultados superiores a T50, y similares al testigo comercial con el 100% de la fertilizacin (T100). Efecto de las Micorrizas Arbusculares sobre la absorcin de nutrientes en plantas de mora A partir de la determinacin de la concentracin de nutrientes en tejido vegetal y los valores de materia seca vegetal, cuantificados en los laboratorios de ecofisiologa vegetal y qumica de suelos, se calcul la absorcin de nutrientes esenciales en plantas de mora a los 120 ddt. Los nutrientes analizados fueron nitrgeno (N), fsforo (P), potasio (K), calcio (Ca), magnesio (Mg) y azufre (S). Respecto a la absorcin de N, las plantas inoculadas con la cepa MA4 (236.91 mg/planta) fueron significativamente superiores al testigo absoluto (24.81 mg/planta) y a la cepa MA2 (86.63 mg/planta), pero similares a los dems tratamientos, T100 con 173.11 mg/planta, T50 con 132.76 mg/planta y las cepas MA1 (142.57 mg/planta), MA3 (115.22 mg/planta) y Mycobiol (129.16 mg/ planta), segn Tukey (Figura 6).
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En muchos de los procesos vitales, las plantas requieren del nitrgeno en grandes cantidades, pues ste forma parte de compuestos esenciales para las clulas, tales como los aminocidos y los cidos nucleicos. Por tanto, la deficiencia del nitrgeno inhibe rpidamente el crecimiento de la planta. Esta deficiencia se puede ver en las plantas inoculadas con la cepa MA2 que tuvieron un comportamiento similar al del testigo absoluto, con un menor crecimiento y desarrollo y presentan plantas de menor porte, respecto a los otros tratamientos. Estos resultados muestran la importancia de los HFMA, particularmente la cepa MA4. No slo se limita a mejorar la absorcin de fsforo, sino que participa en la toma de nutrientes esenciales como el nitrgeno. Con relacin a la absorcin de fsforo, se destacan las plantas inoculadas con la cepa MA4 seguida del tratamiento T100, con valores de 14.44 y 12.83 mg/planta, los cuales fueron similares entre s y significativamente superiores (P<0.05) al testigo absoluto con 2.612 mg/ planta, segn Tukey. Los dems tratamientos T50, MA1, MA2, MA3 y Mycobiol presentaron valores intermedios entre 6.37 y 9.47 mg/planta, similares tanto al tratamiento MA4 y T100, como al testigo absoluto. Es importante recordar que la fertilizacin fosfatada de los tratamientos con HFMA fue slo del 50% respecto al testigo comercial, con 100% de fertilizacin y, sin embargo, segn el anlisis estadstico, las inoculaciones con cepa MA4 fueron similares al testigo comercial T100, en cuanto a la absorcin de fsforo. Los resultados obtenidos concuerdan con lo citado por algunos autores, entre ellos Sanders y Tinker (1973) y Jakobsen (1995), quienes dicen que la absorcin de fsforo por los tejidos radicales puede ser influenciada positivamente por la presencia de los HFMA. Sin embargo, este aumento en la eficiencia de la absorcin de fsforo est determinado por la cepa utilizada. As, la cepa MA4, fue la ms eficiente, mientras que la cepa MA2 fue la menos eficiente, aunque no se detectaron diferencias significativas entre los dos tratamientos. Con relacin a los fertilizantes fosfatados se ha establecido que, en presencia de los HFMA, inducen en sus hospederos una mayor eficiencia, cuando estos se aplican en cantidades moderadas que no inhiben la actividad micorrcica (Sieverding, 1991). El fsforo es un elemento importante para las plantas porque participa en la respiracin, en la fotosntesis, acta en el metabolismo de las plantas en forma de ATP y hace parte de los cidos nuclicos como el ADN y ARN. Con relacin a la absorcin de calcio, se destacan el testigo T100 y las plantas inoculadas con la cepa MA4, con valores de 16.88 y 18.46 mg/ planta, los cuales fueron similares entre s y significativamente superiores (P<0.05) al testigo absoluto con 3.68 mg/ planta. Los dems tratamientos presentaron valores intermedios entre T100, MA4 y T absoluto, con los siguientes valores: 12.43 mg/ planta para T50 y niveles de absorcin entre 8.04 y 10.14 mg/planta para plantas inoculadas con las cepas MA1, MA2, MA3 y Mycobiol. El calcio es un nutriente de vital importancia en procesos como la divisin celular (mitosis) y es un constituyente fundamental para el normal funcionamiento de las membranas celulares. Adems, se considera un segundo mensajero para las diversas respuestas de la planta al medio ambiente y est relacionado con la accin de varias fitohormonas. Su deficiencia se manifiesta como una necrosis en las zonas meristemticas, tales como yemas apicales y nuevas races (Taiz y Zeiger., 2006). En cuanto a la absorcin de magnesio, nuevamente la cepa MA4 de los hongos de micorrizas mostr los mayores niveles de absorcin de este nutriente: 11.9 mg/planta. Estos valores fueron significativamente superiores al testigo absoluto con 2.18 mg/planta y similares a los otros tratamientos, T100 con 9.65 mg/planta, T50 con 7.37 mg/planta, y los micorrizados, MA1 (6.58 mg/planta), MA2 (5.23 mg/planta), MA3 (6.38 mg/planta) y Mycobiol (6.65 mg/planta), de acuerdo con Tukey. El magnesio participa en la activacin de las enzimas involucradas en los procesos de respiracin, fotosntesis y en la sntesis de ADN y ARN y hace parte de la molcula de clorofila. La deficiencia de este nutriente se ve reflejada en una prdida prematura de las hojas, por tanto es de vital importancia para las plantas (Taiz y Zeiger., 2006).
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Como sntesis de los principales resultados obtenidos, se observa un provechoso efecto de la inoculacin con HFMA con relacin a la absorcin de nutrientes esenciales (N, P, Ca y Mg) en tejido vegetal. Sin embargo, es importante anotar que no todas las cepas contribuyen en igual forma a mejorar la absorcin de nutrientes en plantas de mora. Las plantas inoculadas con la cepa MA4 muestran mayor nivel de absorcin de nutrientes, seguida por el tratamiento T100, mientras que el testigo absoluto y MA2 son los tratamientos con menores niveles nutricionales en plantas de mora a los 125 das despus del transplante, como se ilustra en las Figuras 6 y 7.
CONCLUSIONES
Los resultados sugieren que existe un alto potencial en la utilizacin de hongos formadores de micorrizas en programas de biofertilizacin, por la condicin micotrfica de la planta de mora. Sin embargo, se hace necesario realizar un proceso de seleccin de las mejores combinaciones materiales de mora con cepas de HFMA. De igual forma, es de gran importancia revisar las prcticas de manejo del cultivo, las cuales pueden estar inhibiendo el grado de asociacin simbitica. Los mayores beneficios de la micorrizacin se lograron con la inoculacin de plntulas con la cepa MA4, procedente de la finca El Arenal en Silvania, Cundinamarca, con esporas nativas de los gneros Glomus sp y Acaulospora sp. Las plantas de mora mostraron mejor adaptacin al medio, expresada en acumulacin de biomasa foliar y radical y en mejor estado nutricional, con mayor absorcin de nutrientes esenciales (P, N, Ca y Mg). La inoculacin de la cepa MA4 hace posible sustituir el 50% de la fertilizacin comercial, tal como lo corroboran los resultados obtenidos. Es as como plantas inoculadas con esta cepa presentaron absorciones similares de fsforo y calcio al testigo comercial, T100, y superiores a ste en absorciones de nitrgeno y magnesio. Las anteriores conclusiones permiten considerar la cepa MA4 como promisoria en programas de biofertilizacin en plantaciones de mora y componente importante de la Buenas Prcticas Agrcolas (BPA), en cultivos convencionales o de produccin limpia.
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TABLAS Y FIGURAS
Tabla 1. Resultado de anlisis de micorrizas en el cultivo de mora, en fincas de Cundinamarca y Antioquia
Departamento Municipio Finca %F %M %m N sporas/g
Cundinamarca Cundinamarca Cundinamarca Cundinamarca Antioquia Antioquia Antioquia Antioquia Antioquia Antioquia Antioquia Antioquia Antioquia
Silvania Chocont Chocont Fusagasug Envigado Envigado Envigado Envigado Envigado Envigado Envigado Envigado Enviqado
El Arenal Saucido Saucido Santa Luca Santa Cruz Santa Cruz Santa Cruz La Manuela La Manuela La Manuela Montenevado Montenevado Montenevado
53.33
3.00
5.63
86.66 100.00 80.00 37.50 12.50 40.00 53.85 61.53 15.38
9.26 72.50 23.30 10.00 0.13 0.40 8.69 0.92 0.15
10.69 72.50 29.13 26.60 1.00 1.00 16.14 1.50 1.00
70.0 18.8 7.9 33.0 76.0 74.0 96.0 36.0 22.0 63.0 78.0 42.0 42.0
Tabla 2. Gneros identificados en los aislamientos de cepas nativas de HFMA procedentes de cultivos establecidos de mora.
Cepa HMA Gneros de HMA
MA 1 MA 2
MA 3
MA 4
Gigaspora sp Acaulospora sp Glomus sp Acaulospora sp Glomus sp Gigaspora sp Acaulospora sp Glomus sp Scutellospora sp Acaulospora sp Glomus sp
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Figura 1. Relacin entre el nmero de esporas/gramo de suelo y el porcentaje de materia orgnica en fincas de Cundinamarca y Antioquia
ANTIOQUIA
CUNDINAMARCA
Figura 2. Races de plantas de mora colonizadas por hongos formadores de micorrizas arbusculares de Cundinamarca y Antioquia (Fuente, Roveda et al., 2007)
% Materia orgnica
53
Figura 3. Frecuencia de micorrizacin en cultivos de mora en fincas de Antioquia.
Figura 4. Intensidad de micorrizacin en cultivos de mora en fincas de Antioquia.
54
Letras diferentes indican: Diferencias altamente significativas (P<0.05), de acuerdo con la Prueba de Tukey.
Figura 5. Efecto de micorrizas arbusculares sobre el peso seco de plntulas de mora 80 das despus del transplante.
Figura 6. Efecto de micorrizas arbusculares en la absorcin de nitrgeno en plntulas de mora, 120 das despus del transplante.
55
Figura 7. Efecto de micorrizas arbusculares en la absorcin de nutrientes (P, Ca, Mg) en plntulas de mora, 120 das despus del transplante.
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PROMOCIN DE CRECIMIENTO EN ENDURECIMIENTO DE PLNTULAS DE MORA PRODUCIDAS IN VITRO (EFECTO DE LA APLICACIN DE TRICHODERMA KONINGIOPSIS TH003)
Beltrn Acosta Camilo Rubn1, Cotes Prado Alba Marina1
RESUMEN
on el propsito de mejorar las condiciones en el establecimiento de plntulas de mora producidas in vitro, se evalu un bioplaguicida a base de Trichoderma koningiopsis (Th003) a una concentracin de 1x106 conidios.mL-1 en dos frecuencias de aplicacin, una cada siete das y otra cada 14 das desde el momento de la siembra, como parte del proceso de endurecimiento utilizando turba como sustrato. Las variables evaluadas fueron peso fresco y peso seco. De acuerdo con los resultados obtenidos se seleccion la aplicacin del bioplaguicida cada 14 das, con el cual se obtuvieron los mayores valores de peso seco promedio (0.22 g.) con ms del 46.6% y 33.3% en produccin de biomasa respectivamente con relacin al testigo (0.15 g.) y con la aplicacin del bioplaguicida cada 7 das (0.17 g.), este ltimo tratamiento slo present un 13.3% de aumento en biomasa con relacin al testigo. As mismo se observ mejor establecimiento, desarrollo y vigor de las plntulas reflejado en el crecimiento del sistema radicular, tallos y hojas. El resultado obtenido evidenci que la aplicacin del bioplaguicida a base de T. koningiopsis (Th003) en plntulas de mora producidas in vitro present efectos benficos en su crecimiento y adaptabilidad al sustrato. Palabras clave: Rubus glaucus, Trichoderma koningiopsis, bioplaguicida, promocin de crecimiento, produccin limpia.
INTRODUCCIN
Una estrategia para el manejo de los problemas fitosanitarios en un programa de agricultura sostenible, es el control biolgico, utilizado de manera integral con las diversas prcticas culturales usadas en el manejo del cultivo. El uso de buenas prcticas para la produccin de la mora es un requisito indispensable para su comercializacin y para la apertura de nuevos mercados. Dentro de ese contexto, la implementacin de sistemas de produccin de semilla de alta calidad que
1 Laboratorio de Control Biolgico, Centro de Biotecnologa y Bioindustria (CBB), CORPOICA, Km. 14 va Mosquera, Cundinamarca. Autor de correspondencia: Alba Marina Cotes, Ph.D. Fitopatologa, e-mail: amcotes@corpoica.org.co Caracterizacin, evaluacin y produccin de material limpio de mora con alto valor agregado
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asegure la sanidad del cultivo, es un paso esencial para la produccin limpia, siendo el control biolgico uno de los elementos principales. El control biolgico de los agentes patgenos de las plantas se define como la reduccin del inculo de un agente patgeno o de su actividad patognica mediante la utilizacin de uno o ms organismos diferentes al hombre (Baker, 1987). Los microorganismos biocontroladores han demostrado ventajas frente al uso de molculas qumicas ya que no generan riesgos para el medio ambiente; no son txicos; no presentan problemas de residualidad y, en muchos casos, la eficacia demostrada ha sido comparable a la de otros productos qumicos recomendados (Van Lenteren, 2000, Shtienberg y Elad, 2002). Ciertos agentes biocontroladores como Trichoderma spp. utilizan varios mecanismos de accin para controlar un agente patgeno. Diferentes autores han atribuido el fenmeno de control del micoparasitismo y a la capacidad de este antagonista para producir toxinas. Dicho fenmeno ha explicado el control ejercido por diferentes cepas contra Rhizoctonia solani y Sclerotinia americana (Weinding, 1934), Phytophtora spp. (Howel y Stipanovic, 1980), Pythium ultimum (Lumsden et al., 1992), entre otros. Otros autores han atribuido el fenmeno de control a la competencia del hongo por espacio y nutrientes y particularmente por la habilidad de algunas cepas para colonizar la rizsfera (Howel et al., 2000; Harman, 2001). Recientemente, se ha evidenciado que el fenmeno de control de diversos agentes patgenos depende de la produccin de enzimas lticas de Trichoderma spp. del tipo quitinasas y glucanasas. Estas enzimas demuestran capacidad para romper los polisacridos quitina y B-glucanos, constituyentes de la pared de los agentes patgenos que le confieren rigidez a su pared celular (Howell, 2003). Esta accin enzimtica ha sido descrita en la interaccin cebolla- Sclerotium cepivorum - T. koningii (Metcalf y Wilson, 2001). Igualmente, Lorito et al. (1998), transfirieron el gen que codifica una endoquitinasa de T. harzianum en tabaco y papa y obtuvieron en estas plantas una resistencia de amplio espectro contra diferentes agentes patgenos. Otro concepto interesante con relacin a la accin de la enzimas de Trichoderma spp. es descrito por Elad y Kapat (1999), quienes demostraron que la proteccin conferida por T. harzianum contra B. cinerea en frjol se debe, principalmente, a la produccin de proteasas que inactivan las exo y endopoligalacturonasa, pectin-metilesterasa, pectato liasa poligalacturonasa, celulasa y cutinasa del agente patgeno. El principal rol fue atribuido a una cistein proteasa (Elad, 2000). Del mismo modo, la induccin de resistencia en la planta hospedera es otro mecanismo que ha sido demostrado en plntulas de cohombro en las que, despus de la inoculacin con T. harzianum se observ aumento de las actividades de peroxidasa y quitinasa, as como acumulacin de calosa (Yedidia et al., 1999). Posteriormente, en la misma interaccin se demostr que la inoculacin con T. harzianum induca diferentes protenas relacionadas con la patognesis dentro de las que se destacan hidrolasas (Yedidia et al., 2000). Un estudio similar demostr que, al inocular semillas de algodn con T. virens o con sus filtrados de cultivo, se estimula en las races de las plntulas, la sntesis de altas concentraciones de terpenoides altamente inhibitorios de R. solani (Howell et al., 2000). Tambin se demostr que, al aplicar T. harzianum en sitios espacialmente separados de aquel en el que se inoculaba B. cinerea se logra entre un 25 y un 100% de reduccin de la enfermedad en tomate, lechuga, pimentn, frjol y tabaco. Este efecto se relacion con la induccin de resistencia sistmica lo cual ha sido igualmente demostrado cuando se usa una cepa de T. hamatum en rbanos (Krause et al., 2003), y en pepino (Khan et al., 2004) y una cepa de T. harzianum contra Phytophtora capsici en pimiento. En este ltimo se observ acumulacin de capsidiol (Sid Ahmed et al., 2000). Un efecto de Trichoderma que tambin podra tener un rol en el control ejercido contra diferentes elementos patgenos es la estimulacin del crecimiento vegetal, ya que este microorganismo tiene la habilidad de incrementar la tasa de crecimiento y desarrollo de las plntulas, en
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especial del sistema radical. Este efecto estimulante de crecimiento causado por Trichoderma ha sido demostrado al aplicae T. harzianum en plntulas de pepino, lo cual se atribuye a la penetracin del biocontrolador dentro de las races y el control de agentes patgenos en la rizsfera. Esta respuesta ha sido descrita por Ahmad y Baker (1987) en cultivos de pepino, arveja, tomate y rbano, y, adems, Windham et al. (1986) en tabaco y tomate, entre otros autores. Se han sugerido algunas explicaciones a este fenmeno que involucran desde la inhibicin y alteracin de la microflora normal de las races, la produccin de sustancias estimuladoras del crecimiento (factores de crecimiento y fitohormonas) y la liberacin de nutrientes en el suelo (Yedidia et al., 1999). En el Laboratorio de Control Biolgico del Centro de Biotecnologa y Bioindustria de CORPOICA (CBB), se realizan diferentes investigaciones que han permitido aislar, seleccionar, producir, formular y evaluar microorganismos nativos altamente eficaces en el control de agentes fitopatgenos. Es el caso del hongo nativo T. koningiopsis (aislamiento Th003) con el cual se ha obtenido entre 70% y 100% de control en los siguientes patosistemas: R. solani en frjol (Cotes, 1993); P. splendens en frjol y pepino (Cotes et al., 1996); R. solani y Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici en tomate (Cotes et al., 2001); B. cinerea y Oidium sp. en tomate (Moreno, 2003); Sclerotinia sclerotiorum en lechuga y Alternaria dauci en cilantro (Villamizar et al., 2004). Dichos modelos han involucrado actividades a nivel de laboratorio, pruebas experimentales bajo condiciones controladas en invernadero y a nivel de cultivos comerciales, en campo abierto e invernadero. A este aislamiento no solamente se le ha atribuido una accin directa en el control de fitopatgenos en la interaccin tomate - F. oxysporum (Cotes, 2001), sino un efecto de induccin del crecimiento vegetal (Cotes et al., 2001) y un efecto en induccin de respuestas de defensa en las plantas (Cotes et al., 1996; Cotes et al., 2001). A partir de este aislamiento se ha desarrollado en CORPOICA un bioplaguicida microbiano el cual consiste en un granulado dispersable que puede ser aplicado directamente al suelo o dispersado en agua y se utiliza para el tratamiento de semillas y sustratos de siembra, ya que puede ser empleado con equipos comunes de aspersin. El presente artculo muestra los resultados obtenidos con el bioplaguicida a base de T. koningiopsis (Th003) en material de mora seleccionado participativamente con agricultores de Silvania (ver artculo Espinosa et al., de esta compilacin).
MATERIALES Y METODOS
Se evalo el efecto de la aplicacin de un bioplaguicida granulado a base de T. koningiopsis Th003 (Figura 1) sobre la promocin de crecimiento vegetal en plntulas de mora de las accesiones Monteloro, Monterrico y Sin Espinas seleccionadas de acuerdo a criterios participativos con agricultores de Silvania y propagadas in vitro en el Laboratorio de Micropropagacin de Plantas del CBB (ver artculos Espinosa et al. y Valderrama et al. de esta compilacin, Figura 2). Ocho das previos al transplante de las plntulas de mora, se humedeci segn la capacidad del campo, el sustrato de siembra (turba) con una suspensin del producto granulado Th003 a una concentracin de 1x106 conidios.mL-1, con el fin de establecer el antagonista en el sustrato. Previo al transplante, las plntulas de 28 das in vitro, de las tres accesiones mencionadas se sumergieron en una suspensin de Th003 a igual concentracin (Figura 3). Se realizaron tres tratamientos: un primer tratamiento (testigo) consisti en plntulas sembradas en sustrato humedecido a capacidad de campo con agua de la llave y dos tratamientos con sustrato humedecido con una suspensin del bioplaguicida Th003 a una concentracin de 1x106 conidios.mL-1. Estos ltimos se diferenciaron en las aplicaciones de refuerzo del bioplaguicida, realizadas cada siete das durante un mes y aplicaciones de refuerzo cada catorce das durante un mes en el proceso de endurecimiento.
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Al evaluar el peso seco promedio de las plantas, se encontraron diferencias significativas entre el peso seco de las plantas tratadas con el bioplaguicida granulado de Th003, aplicado en el momento del transplante, con una frecuencia de 14 das, respecto a los dems tratamientos. Presentaron un peso seco promedio de 0.22 gramos con ms del 46.6% en la produccin de biomasa respecto al testigo 33.3% (0.15 g.) y con la aplicacin del bioplaguicida granulado cada 7 das (0.17 gramos) (Figuras 4 y 5). El peso seco entre plntulas con aplicacin del bioplaguicida granulado aplicado al momento del transplante cada 7 das durante un perodo de 28 das (0.17 g.) y el testigo absoluto (0.15 g.), no present diferencias significativas (Figura 5). Sin embargo, cuando las plntulas fueron tratadas con el bioplaguicida cada 14 das, durante la fase de endurecimiento, se adaptaron mejor y presentaron los mayores valores de peso seco promedio con relacin a los dems tratamientos (Figuras 4 y 5). En las plantas correspondientes al testigo se observ menor crecimiento y desarrollo del sistema radicular, tallos y hojas, adems de hojas secas y clorticas debido al estrs ocasionado al retirarlos del contenedor y del medio de crecimiento. Con la aplicacin de T. koningiopsis, las plantas presentaron una mejor tolerancia y adaptabilidad al sustrato y se observaron efectos benficos en el crecimiento y desarrollo de las plantas respecto al control (Figuras 4 y 5).
CONCLUSIN
La aplicacin del bioplaguicida a base de T. koningiopsis (Th003) en plntulas de mora producidas in vitro produjo efectos benficos en su crecimiento y adaptabilidad al sustrato.
AGRADECIMIENTOS
Al Laboratorio de Micropropagacin de Plantas del Centro de Biotecnologa y Bioindustria de CORPOICA por proveer el material multiplicado in vitro.
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FIGURAS
A B
Figura 1. A. Observacin microscpica de T. koningiopsis (40x). B. Producto granulado a base de T. koningiopsis (Th003).
Figura 2. Plntulas de mora producidas in vitro.
Figura 3. Plntulas de mora in vitro sumergidas en una suspensin de un bioplaguicida a base de T. koningiopsis (Th003) a una concentracin de 1x106 conidios.mL-1.
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Testigo
Th003 7 das
Th003 14 das
Figura 4. Comparacin de plntulas de mora del genotipo Monteloro producidas in vitro e inoculadas con T. koningiopsis Th003. La aplicacin se hizo al momento del transplante y cada siete das (Th003 7 das) y al momento de transplante y cada catorce das (Th003 14 das). Evaluacin despus de 35 das post-transplante.
Figura 5. Peso seco promedio de plntulas de mora producidas in vitro inoculadas con T. koningiopsis Th003 (evaluacin a los 35 das). La aplicacin se hizo al momento del transplante y cada siete das (Th003 7D), o al momento de transplante y cada catorce das (Th003 14D). Valores con letras distintas difieren significativamente entre s, conforme a Kruskal Wallis, LSD. (=0.05).
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VALIDACIN Y ESCALAMIENTO DE PLNTULAS DE MORA IN VITRO Y MANEJO EX VITRO PARA ENTREGA A AGRICULTORES DE SILVANIA
Valderrama Ana Milena 1, lvarez Roberto 2, Barrero Luz Stella 3, Robayo Mnica 3, Nez Vctor 3
RESUMEN
espus de la seleccin participativa de seis genotipos promisorios con agricultores del sector Monterrico en Silvania (Cundinamarca) se llev a cabo el ajuste, validacin y escalamiento in vitro de estos materiales para la entrega a los productores de la zona. En la fase de establecimiento in vitro con tratamiento de desinfeccin ajustado para material de campo, se obtuvieron porcentajes de supervivencia entre 27.9% y 57.3% dependiendo del genotipo. El genotipo Cerezos fue el ms bajo por la presencia de una bacteria endgena. En la fase de multiplicacin, se lograron coeficientes entre el 2.2 y 4.7, lo que permiti obtener, por cada yema introducida, entre 100 y 9.000 brotes respectivamente, despus de cinco subcultivos. Para la fase de enraizamiento in vitro se lograron condiciones apropiadas para cada genotipo. Los genotipos Cerezos y Riosucio fueron los de ms tardo desarrollo. Adicionalmente, de cuatro medios evaluados se seleccion el Basal de Lepoivre modificado, por permitir el mejor desarrollo de brotes con la presencia de un buen sistema radicular para futuros trabajos. Durante la fase de endurecimiento, con el mtodo empleado, se obtuvieron porcentajes de supervivencia entre el 90 y el 95% para los seis genotipos evaluados. Los materiales fueron trasplantados en condiciones de vivero y permanecieron un mes hasta cuando alcanzaron un tamao aproximado de 10 cm de longitud; presentaron color verde intenso y un sistema radicular bien formado. Un total de 23.000 vitroplantas de mora fueron transportadas a Monterrico y entregadas a los productores, para su siembra en campo. Palabras clave: Mora, micropropagacin in vitro, endurecimiento, entrega, agricultores.
INTRODUCCIN
La mora pertenece a la familia de las Rosceas, gnero Rubus. Es un arbusto que forma parte de los berries o frutos menores (Anta y Torres, 1998). El cultivo de mora tiene caractersticas
1 Laboratorio de Micropropagacin de Plantas, Centro de Biotecnologa y Bioindustria (CBB), CORPOICA, Km. 14 va Mosquera, Cundinamarca. 2 Centro de Investigacin (C.I.) Tibaitat, CORPOICA, Km. 14 va Mosquera, Cundinamarca. 3 Laboratorio de Gentica Molecular Vegetal, Centro de Biotecnologa y Bioindustria (CBB), CORPOICA, Km. 14 va Mosquera, Cundinamarca. Autor de correspondencia: Ana Milena Valderrama, M.Sc. Biotecnologa, e-mail: avalderrama@corpoica.org.co
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agroindustriales promisorias exportables como fruta fresca y como materia prima en la industria alimenticia (Agronet, 2006). Recientemente, se han identificado propiedades medicinales por sus caractersticas antioxidantes, lo cual ha influido en su demanda nacional e internacional (Clark et al., 2007). Sin embargo, la Mora de Castilla, presenta limitaciones de susceptibilidad fitosanitaria y bajo contenido de grados Brix. Adicionalmente, existe una baja calidad del material de siembra, desde el punto de vista gentico y fitosanitario, lo cual est afectando el posicionamiento de la mora en el mercado internacional (Franco et al., 2000; Franco y Giraldo, 2002). Tradicionalmente, el cultivo de mora se propaga de manera vegetativa, ya sea por acodo o estaca, lo que ha generado que los productores y los viveros propaguen los materiales regionales sin ninguna norma de calidad fisiolgica ni sanitaria. Por cuanto este medio de propagacin es la principal fuente de introduccin de plagas y enfermedades (Castro y Daz, 2001), se hace necesario el desarrollo de tcnicas alternativas de propagacin, mediante el cultivo de tejidos para garantizar una semilla de alta calidad fisiolgica, fitosanitaria y gentica. El cultivo de tejidos vegetales in vitro o micropropagacin, constituye dentro de la biotecnologa, la tcnica que mayor aporte prctico ha brindado (Cetz, 2005). La micropropagacin es un mtodo alternativo para la propagacin clonal de plantas. La mayor diferencia entre la propagacin convencional y la propagacin in vitro consiste en que las plantas son producidas bajo condiciones estriles en un medio artificial. En estas condiciones, las plantas no son afectadas por circunstancias adversas del clima y, como consecuencia, el crecimiento se da mucho ms rpido que cuando se utilizan los mtodos tradicionales (Hannweg, 1997). Las aplicaciones de la micropropagacin son varias: Regeneracin de plantas, obtencin de plantas libres de agentes patgenos, conservacin de germoplasma, produccin de metabolitos secundarios y mejoramiento gentico (Prez et al., 1998). La mayor desventaja de la micropropagacin in vitro es que requiere un ambiente estril de crecimiento para evitar contaminacin con bacterias u hongos (Hannweg, 1997). Sin embargo, las condiciones de asepsia se manejan con xito en los laboratorios especializados. La micropropagacin de Rubus involucra tpicamente cultivo in vitro de pices (del ingls shoot tip culture), el cual es considerado el mtodo ms eficiente para una rpida proliferacin y eliminacin de la variacin somaclonal (Pelto y Clark, 2000). A nivel mundial se tienen varios reportes del cultivo in vitro de diferentes especies de Rubus, tales como: R. parvifolius y R. caesius (Chang y Reed, 1999), R. arcticus (Kokko et al., 1996), R. idaeus (Palonen y Buszard, 1998); Taylor y Harrier, 2000), R. fruticosus (mora), e hbridos entre mora y frambuesa (McNicol y Graham, 1990; Swartz et al., 1990) y R. chamaemorus (Martinussen et al., 2004). En Colombia, Marulanda y Mrquez (2002), obtuvieron plantas procedentes de Caldas y Quindo mediante organognesis a travs de callo, las cuales, junto con las plantas en los subcultivos F4 y F15 del proceso de multiplicacin in vitro, presentaron alta estabilidad gentica (evaluada por marcadores RAPD), lo que llev a recomendar hasta 10 subcultivos para la multiplicacin masiva de Rubus in vitro. Castro y Daz (2001) tambin han desarrollado propagacin de Mora de Castilla in vitro, utilizando plantas madre seleccionadas para la obtencin de yemas en la etapa de establecimiento. Desde al ao 2005 se ha venido trabajando con la implementacin del sistema de micropropagacin de mora en el Laboratorio de Micropropagacin de Plantas de CORPOICA. Durante este tiempo se han desarrollado y ajustado los protocolos de introduccin, multiplicacin y enraizamiento de mora in vitro. De esta forma, se ha mejorado el sistema de endurecimiento de las vitroplantas para su entrega a los agricultores. Con este trabajo se implement el sistema de micropropagacin y endurecimiento de plantas de mora desarrollado en CORPOICA, para seis genotipos de importancia agronmica y nutricional, seleccionados con base en resultados de encuestas a agricultores y caractersticas
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agronmicas y nutricionales (ver artculo Espinosa et al., de esta compilacin). Este sistema de propagacin permiti la entrega de 23.000 vitroplantas de mora a agricultores del sector Monterrico, vereda Aguabonita del municipio de Silvania (Cundinamarca) listas para la siembra en campo. Lo equivalente a 2.000 vitroplantas es mantenido por el Laboratorio de Micropropagacin de Plantas del Centro de Biotecnologa y Bioindustria (CBB) de CORPOICA, para su utilizacin en futuros proyectos. Adicionalmente, se busca ajustar la metodologa de micropropagacin que permita el desarrollo de las etapas de multiplicacin y enraizamiento en un solo medio de cultivo. Con este fin se probaron diferentes medios para reducir el tiempo y costos de la etapa de enraizamiento in vitro. Actualmente, se busca ir mejorando el sistema de micropropagacin de mora con la implementacin de nuevas metodologas.
MATERIALES Y MTODOS
Ubicacin El trabajo se desarroll en las instalaciones del Laboratorio de Micropropagacin de Plantas del CBB y en los invernaderos de vidrio, situados en CORPOICA C.I. Tibaitat, ubicado a una altura de 2542 m.s.n.m y con un promedio de temperatura de 13C. Material vegetal Las plantas madre de mora fueron recolectadas en la Finca El Arenal, sector Monterrico de la Vereda Aguabonita (Silvania, Cundinamarca). Con base en resultados de encuestas a agricultores y caractersticas agronmicas y nutricionales, se seleccionaron seis genotipos promisorios del cultivo de mora establecido en Monterrico. Los genotipos seleccionados fueron: Monteloro, Riosucio, Cerezos, Sin Espinas, Castilla Monterrico Yema e ILS 1863 (ver artculo Espinosa et al., de esta compilacin). Establecimiento in vitro Del material establecido en Monterrico se seleccionaron estacas sanas, no florecidas, de aproximadamente 50 cm de longitud y se llevaron envueltas en papel peridico, al Laboratorio de Micropropagacin de Plantas. Las estacas fueron cortadas cerca del pice hasta obtener miniestacas de 5 cm de longitud aproximadamente; las miniestacas fueron lavadas con cepillo y una solucin jabonosa; posteriormente, fueron lavadas con una solucin bactericida con agitacin constante, durante 10 minutos y luego fueron transferidas a una solucin fungicida durante 20 minutos. Para terminar la desinfeccin, las miniestacas fueron trasladadas a una solucin de hipoclorito durante 10 minutos y alcohol al 70% por un minuto. Despus de cada solucin desinfectante, se lavaron tres veces con agua destilada estril. Las miniestacas desinfectadas se cortaron nuevamente hasta obtener un explante de 2 centmetros de longitud aproximadamente y se sembraron en el medio de introduccin que contiene sales MS (Murashine & Skoog, 1962), suplementadas con una mezcla de auxina/citoquinina que permite el desarrollo de los explantes. Despus de 15 das de incubacin a una temperatura promedio de 20C, fotoperodo de 16 horas luz/8 horas oscuridad y una intensidad lumnica de 2.000 lux, se retiraron los explantes contaminados y se dejaron los que estaban sanos en crecimiento, durante 15 das ms.
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Multiplicacin in vitro Los explantes sanos y libres de contaminacin se dividieron y se pasaron al medio de multiplicacin, que contiene sales MS (Murashine & Skoog, 1962), suplementadas con una mezcla de auxina/citoquinina que permite la formacin de brotes axilares. Despus de cuatro semanas de crecimiento a una temperatura promedio de 20C, fotoperodo de 16 horas luz/8 horas oscuridad y una intensidad lumnica de 2000 lux, se dividieron los explantes nuevos y se transfirieron a un medio fresco de multiplicacin hasta obtener el nmero de explantes requeridos por genotipo. Enraizamiento in vitro Los explantes multiplicados se dividieron, se sembraron en el medio de enraizamiento, que contiene sales MS (Murashine & Skoog, 1962), suplementadas con una auxina que induce la formacin de raz. Los explantes se incubaron durante cuatro semanas a las mismas condiciones de temperatura, fotoperodo e intensidad lumnica usadas para la multiplicacin in vitro. Medio de cultivo de una sola fase Con el objetivo de implementar un medio de cultivo doble propsito para las etapas de multiplicacin y enraizamiento de mora, se dise un experimento con cuatro medios de cultivo, con diferencia en las soluciones de macronutrientes y en la concentracin hormonal. Se seleccion el mejor medio, teniendo en cuenta la formacin de raz y brotes formados. Endurecimiento de las vitroplantas A las plantas con formacin de raz, se les retir el gelificante con agua, se sumergi la raz en una solucin enraizadora y se sembraron en bandejas de germinacin de 50 alvolos que contena una mezcla de turba y micorriza comercial (un kg/bulto de turba), que contiene esporas de Glomus sp., Acaulospora sp., Scutesllospora sp. y Entrophospora sp. en una concentracin de 230 esporas viables/gramo de suelo. Se llevaron a una condicin de cmara hmeda durante 15 das con una temperatura promedio de 22C. Despus de este tiempo se abri paulatinamente el plstico para ir preparando las plantas a su condicin ex vitro y se fertiliz foliarmente cada semana con una solucin de N/P/K/ (10/52/10) ms elementos traza, hasta completar cinco semanas de adaptacin ex vitro. Cada 15 das se aplic foliarmente una solucin que contena Trichoderma konigiopsis Th003 (1 x 10 6 conidios/ml), producida por el Laboratorio de Control Biolgico del CBB (ver Embolsado de las plantas endurecidas Las plantas con un tamao de aproximadamente siete centmetros, de color verde intenso y con buena formacin de raz fueron sembradas en bolsas negras de una libra de capacidad que contenan una mezcla de suelo y cascarilla de arroz. Las plantas fueron fertilizadas foliarmente cada semana con una solucin de N/P/K (15/15/15). Despus de 15 das de su siembra, las plantas fueron llevadas a Monterrico para su adaptacin a la zona.
artculo Beltrn y Cotes, de esta compilacin.
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Entrega de plntulas endurecidas a agricultores La entrega de plntulas endurecidas de los seis genotipos seleccionados se llev a cabo en cuatro etapas. La primera en septiembre de 2008 (9.723 plntulas), la segunda en noviembre de 2008 (3.300 plntulas) y las dos ltimas en febrero de 2009 (10.000 plntulas). Cada vez se realiz un acta de entrega, un acuerdo de transferencia y un documento de recomendaciones para manejo del material ex vitro en vivero y campo (ver tambin artculo de lvarez et al., de esta compilacin).
Establecimiento in vitro La Figura 1 muestra el proceso de establecimiento in vitro desarrollado en el Laboratorio de Micropropagacin de Plantas del CBB. Con el tratamiento de desinfeccin ajustado para el material de campo, se obtuvieron porcentajes de supervivencia entre el 27.9% y el 57.3%, dependiendo del genotipo (Tabla 1). El porcentaje de supervivencia para el genotipo Cerezos fue bajo, respecto a los otros evaluados; se observ una alta prdida para los genotipos Cerezos y Riosucio por la presencia de una bacteria que se reflejaba, semanas despus del establecimiento, con la licuefaccin del medio de cultivo. Para los otros genotipos evaluados, los porcentajes de supervivencia fueron superiores al 40%. Las diferencias en el porcentaje de supervivencia, de acuerdo al genotipo pueden ser producidas por factores que influyen en la respuesta al establecimiento in vitro, como por ejemplo: la poca del ao, el estado fisiolgico de la planta y las condiciones ambientales. Estos factores, posiblemente, influyeron en la respuesta al establecimiento in vitro, ya que los genotipos fueron recolectados en diferentes pocas del ao. Los primeros materiales seleccionados fueron los genotipos Sin Espinas, Monterrico y Monteloro y se inici su establecimiento en el ao 2007, mientras que los genotipos Cerezos, Riosucio e ILS 1863 fueron introducidos en el ao 2008. Lo ms aconsejable para el establecimiento de plantas in vitro es realizar una desinfeccin semanal de las plantas en condiciones de invernadero, con fungicidas y bactericidas que permitan obtener explantes con menor carga microbiana en el momento de su establecimiento. En este sentido, en el estudio desarrollado por Jones y Flores (2007) para el establecimiento in vitro de plantas de R. idaeus, provenientes de invernadero, se lograron porcentajes de supervivencia entre el 25% y el 45%. Sin embargo, para este trabajo no fue posible realizar una desinfeccin previa, ya que no se contaba con el material gentico en condiciones de invernadero sino en campo abierto. Esta situacin fue tomada en cuenta para el desarrollo del protocolo de desinfeccin, que permiti obtener plantas sanas y vigorosas de los seis genotipos seleccionados para el estudio. Multiplicacin in vitro Los explantes establecidos fueron transferidos al medio de multiplicacin con el objetivo de inducir brotes mltiples, los cuales se separaron cada 30 das (Figura 2). En la Tabla 2 se observa el promedio del coeficiente de multiplicacin para cada uno de los genotipos evaluados. Se obtuvieron coeficientes de multiplicacin entre el 2.2 y 4.7, lo que permite conseguir entre 100 y 9.000 brotes por cada yema introducida, despus de cinco subcultivos.
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Castro y Daz (2001) reportan que para la etapa de proliferacin se pueden obtener hasta 500 brotes por yema establecida in vitro de R. glaucus. La diferencia en el nmero de brotes obtenidos puede ser atribuida a la combinacin de hormonas en el medio de proliferacin o a diferencias en los genotipos evaluados. El medio de cultivo en el CBB de CORPOICA contena una mezcla de las hormonas cido indol actico (AIA) y 6-Bencilaminopurina (BAP), mientras que el medio de proliferacin de Castro y Daz utiliza la hormona 6-benciladenina. Despus de obtener el nmero de plantas requerido, los brotes fueron individualizados y sembrados en el medio de enraizamiento. Enraizamiento in vitro Los brotes individualizados y sembrados en el medio de enraizamiento permanecieron cuatro semanas hasta la formacin del sistema radicular (Figura 3). Sin embargo, para los genotipos Riosucio y Cerezos se necesitaron cinco semanas para la formacin de la raz. El medio de cultivo contena la hormona Acido Indol Butrico (AIB), pero se requiere evaluar por cada genotipo concentraciones diferenciales de la hormona AIB, que permitan el desarrollo de la raz en un menor tiempo. Medio de cultivo de una sola fase Con el fin de mejorar el proceso de enraizamiento y acortar el tiempo de obtencin de plantas completas, se disearon experimentos para obtener formacin de brotes con un buen sistema radicular en el mismo medio. De cuatro medios evaluados, se seleccion el medio Basal de Lepoivre, modificado con compuestos inorgnicos y orgnicos (Tabla 3). Este medio permiti el mejor desarrollo de brotes con la presencia de un buen sistema radicular para garantizar una buena adaptacin de las plantas (Figura 4). Endurecimiento de las vitroplantas Las plantas enraizadas fueron endurecidas en bandejas de germinacin con una mezcla de turba+micorriza (Figura 5). Despus de cinco semanas de endurecimiento se obtuvieron plantas de un tamao aproximado de 7 centmetros de longitud, con buena formacin de raz y de color verde intenso. Con el mtodo empleado de endurecimiento, se obtuvieron porcentajes de supervivencia entre el 90 y el 95% para los seis genotipos evaluados. Marulanda (2000), reporta porcentajes de supervivencia del 50%, 40% y 35% con la utilizacin de Jiffy pellets, mezcla de arena con tierra en bandejas de polipropileno y en bolsas plsticas, respectivamente. Castro y Daz (2001), emplean como sustrato, arena desinfectada con agua caliente e inculo micorrzico y Prez (2007), evala diferentes sustratos que permiten la obtencin de porcentajes de supervivencia ms altos cuando se utiliza arena estril+Trichoderma+micorriza. La fase de endurecimiento y adaptacin ex vitro resulta ser la ms problemtica en el proceso de produccin de vitroplantas de mora, debido al alto grado de mortalidad de plntulas (50-90%), como consecuencia de una cutcula poco desarrollada, estomas no funcionales y un sistema radical dbil que facilita la deshidratacin por estrs hdrico. Los factores ms determinantes para la supervivencia de las plantas son humedad, frecuencia de riego y calidad del sustrato (Marulanda, 2000). Mediante el trabajo desarrollado en el CBB de CORPOICA
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en el proceso de endurecimiento de vitroplantas de mora, se obtuvieron plantas con un alto porcentaje de supervivencia y calidad fsica. Embolsado de las plantas endurecidas En el proceso de trasplante a bolsa plstica se utiliz una mezcla de suelo y cascarilla de arroz para el desarrollo de la parte radicular y area de la planta, antes de su siembra en campo (Figura 6). Despus de un mes del trasplante se obtuvieron plantas de un tamao aproximado de 10 cm de longitud, de color verde intenso y un sistema radicular bien formado. Entrega de plntulas endurecidas a agricultores Las vitroplantas embolsadas fueron transportadas a Monterrico y 23.000 de los seis genotipos seleccionados fueron entregados en muy buen estado a los agricultores de Monterrico, despus de un tiempo de endurecimiento en vivero de CORPOICA (Figura 7 A). Sin embargo, para la primera y segunda entrega, una vez establecidas las plntulas en vivero de Monterrico, stas empezaron a deteriorarse (Figura 7 B). El clima ha sido el principal enemigo de las plntulas ex vitro. El sector de Monterrico se ubica a 2485 msnm con precipitaciones mayores a 2000 mm y luminosidad menor de cuatro horas diarias, lo cual facilita la aparicin de enfermedades (Ver artculo de lvarez et al., de esta compilacin). Lo anterior, aunado al inadecuado manejo del material por parte de los productores, a pesar de las recomendaciones impartidas, contribuy a la prdida de gran parte del mismo. Para recuperar parte de este material, se acord que un solo productor lo manejara, siguiendo las recomendaciones indicadas y lo entregara a los agricultores de cada asociacin para siembra en sus fincas (Figura 7C-D). Los productores ms juiciosos han logrado mantener plntulas en buen estado, despus del trasplante a campo (Figura 7E). Ellos han observado que un buen manejo es fundamental para el xito del proceso. De esta forma, ha sido posible salvar cerca del 25% de las dos primeras entregas. Para las ltimas entregas de materiales a los agricultores, las mesas receptoras ubicadas en el vivero de Monterrico, se desinfectaron con hipoclorito y creolina y se reubic el plstico del invernadero y la polisombra (Figura 7F). Adicionalmente, CORPOICA entreg nuevas recomendaciones para el estricto cuidado del material. En visitas posteriores a estas ltimas entregas, se encontr que las plntulas en el vivero reformado y con buen manejo fitosanitario estaban en excelentes condiciones (Figura 7 G). Los agricultores aprendieron que un manejo adecuado es fundamental para el mantenimiento y adaptacin bajo condiciones de vivero de las plntulas ex vitro. Es necesario un seguimiento continuo del material de campo y de vivero, para dar el acompaamiento a los productores de mora y lograr una mayor competitividad productiva del material de siembra obtenido a travs de tcnicas in vitro.
CONCLUSIONES
Se llevaron a cabo procedimientos de ajuste, validacin y escalamiento in vitro para los genotipos Monteloro, Riosucio, Cerezos, Sin Espinas, Castilla Monterrico Yema e ILS 1863, seleccionados con agricultores del sector Monterrico en Silvania (Cundinamarca). En la fase de establecimiento in vitro con tratamiento de desinfeccin ajustado para material de campo, se obtuvieron porcentajes de supervivencia entre 27.9% y 57.3% dependiendo del genotipo, siendo el genotipo Cerezos el ms bajo por la presencia de una bacteria endgena.
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En la fase de multiplicacin, se lograron coeficientes entre el 2.2 y 4.7, lo que permiti obtener entre 100 y 9.000 brotes respectivamente, por cada yema introducida, despus de cinco subcultivos. Para la fase de enraizamiento, se lograron obtener condiciones apropiadas para cada genotipo. Los genotipos Cerezos y Riosucio son los de ms tardo desarrollo. Adicionalmente, de cuatro medios evaluados, se seleccion el Basal de Lepoivre modificado por permitir el mejor desarrollo de brotes con la presencia de un buen sistema radicular. Durante la fase de endurecimiento, se obtuvieron porcentajes de supervivencia entre el 90 y el 95% para los seis genotipos. Los materiales fueron trasplantados en vivero y se entregaron 23.000 vitroplantas a los productores de Monterrico, una vez su sistema radicular se encontraba bien formado.
AGRADECIMIENTOS
A Patricia Martnez, Vicky Lorena Arango, Rodrigo Gonzlez, Yolanda Torres, Camilo Martnez y Luz Stella Rincn, auxiliares del Laboratorio de Micropropagacin de Plantas por su compromiso y trabajo para la entrega del material in vitro. A las asociaciones de productores de Monterrico. A Yaneth Camargo por su excelente apoyo logstico y administrativo.
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TABLAS Y FIGURAS
Tabla 1. Porcentaje de supervivencia en la etapa de establecimiento in vitro de mora
Genotipo % supervivencia
Tabla 2. Promedio de coeficiente de multiplicacin in vitro de mora

Genotipo Promedio coeficiente de multiplicacin
Cerezos Riosucio ILS 1863 Monteloro Monterrico Sin Espinas
27.9 37.5 42.5 57.3 49.3 47.4
Cerezos Riosucio ILS 1863 Monteloro Monterrico Sin Espinas
3 2.2 2.2 4.1 4.1 4.7
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Tabla 3. Medio de cultivo seleccionado para el cultivo de una sola fase

Componentes Solucin madre Cantidad por litro
Macro Lepoivre Micro Lepoivre Hierro MS Tiamina GA3 AIB Inositol Azcar GelRite pH
20X 100X 50X 1000ppm 1000ppm 600ppm -
50 ml 1 ml 10 mL 0.4 mL 1.0 mL 0.17 mL 0.1 gr 20 gr 3 gr 5.8
Figura 1. Proceso de establecimiento in vitro de mora. A. Estacas de mora. B. Corte de miniestacas. C. Miniestacas en desinfeccin. D. Vitroplantas de mora establecidas
73
Figura 2. Vitroplantas de mora multiplicadas in vitro listas para ser individualizadas.
Figura 3. Vitroplantas de mora en medio de enraizamiento.
B
Figura 4. Vitroplantas de mora completas formadas en el medio Basal de Lepoivre. A. Planta in vitro con buen estado de desarrollo foliar y formacin de sistema radicular. B. Planta completa bien desarrollada lista para adaptacin ex vitro.
Figura 5. Vitroplantas de mora endurecidas en bandejas de germinacin y cmara hmeda en invernadero de Corpoica. 74
Figura 6. Vitroplanta de mora endurecida lista para embolsar.
Figura 7. Entrega de plntulas a agricultores en Monterrico (Silvania). A. Primera entrega. B. Mal estado de plntulas de la primera entrega en vivero. C. Manejo por un solo productor y entrega a cada asociacin. D. Material manejado por un solo productor completamente recuperado, segn las recomendaciones de CORPOICA. E. Material recuperado sembrado en campo. F. Preparacin de vivero previo a ltimas entregas. G. Buen estado de material de las ltimas entregas en vivero, segn las recomendaciones de CORPOICA.
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NOTA TCNICA Evaluacin social y econmica ex ante y ex post

Paredes Zambrano Guillermo Alfredo1, Barrero Meneses Luz Stella2
RESUMEN
on el fin de caracterizar la lnea base de aspectos sociales y econmicos del cultivo de la mora por parte de agricultores del sector Monterrico en Silvania, adscritos al proyecto Certificacin y escalamiento de material de mora con potencial nutritivo y nutracutico para entrega a pequeos agricultores y de hacer seguimiento y evaluacin a los cambios tcnicos ligados al proyecto, relacionados con la capacitacin impartida para el manejo del cultivo en un lote sembrado con materiales para evaluacin, seleccin y produccin limpia, se llevaron a cabo dos talleres participativos, uno al inicio y otro al final del proyecto. El taller inicial se realiz para identificar la tecnologa de produccin utilizada por los productores en el cultivo de la mora. Una vez finalizado el ciclo de capacitacin, se hizo un taller final con el objeto de medir el nivel de conocimiento adquirido en las diferentes capacitaciones y el uso o implementacin de las tecnologas propuestas por el proyecto. Como resultado de la comparacin entre el sistema tradicional de produccin, con la tecnologa propuesta, los agricultores adquirieron nuevos conocimientos acerca del manejo del cultivo en el lote experimental para la ejecucin del proyecto y la importancia de seleccionar materiales de buena calidad y producirlos de manera limpia. Sin embargo, los conocimientos no han sido aplicados totalmente en sus parcelas, debido principalmente a que an no cuentan con cultivos nuevos, por lo que se hace necesario realizar seguimiento al montaje de nuevas parcelas. En una segunda fase del proyecto se esperara evaluar el impacto socio-econmico sobre los ingresos y la produccin de los cambios en productividad ligados a la adopcin de nuevos genotipos y las tecnologas vinculadas con este proceso. Palabras clave: evaluacin, impacto, ex ante, ex post, tecnologa
INTRODUCCIN
Un estudio de mapificacin de las zonas ptimas actuales y potenciales de mora, lulo, pitaya, uchuva y mango comn presenta a la Regin del Sumapaz como una de las zonas del Departamento de Cundinamarca que ofrece mejores condiciones comparativas (suelos, clima, agua, infraestructura, etc.) para la produccin de mora. No obstante, las condiciones en que este proceso productivo se ha desarrollado, lo coloca en una difcil situacin en trminos de competitividad. En efecto,
1 Centro de Investigacin (C.I.) Tibaitat, CORPOICA, Km. 14 va Mosquera, Cundinamarca. 2 Laboratorio de Gentica Molecular Vegetal, Centro de Biotecnologa y Bioindustria (CBB), CORPOICA, Km. 14 va Mosquera, Cundinamarca. Autor de correspondencia: Guillermo Alfredo Paredes Zambrano, M.Sc. Economia, e-mail: aparedes@corpoica.org.do
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aspectos tales como la dispersin de las reas sembradas, las limitaciones para el acceso a material gentico certificado, la utilizacin excesiva y/o sin criterio tcnico de productos qumicos, las inadecuadas prcticas de manejo del cultivo y de los procesos de cosecha y poscosecha, la intermediacin excesiva en el proceso de comercializacin, entre otros, ponen de presente la necesidad de adelantar acciones coherentes y consistentes en materia de desarrollo tecnolgico y transferencia de tecnologa que redunden en el mejoramiento de la competitividad del producto (Pinzn et al., 2002 y 2004). Segn Estbanez (2002), El impacto social de la ciencia y de la tecnologa ha sido definido como los efectos positivos o negativos en la poblacin, de la incorporacin de conocimiento cientfico y tecnolgico en prcticas sociales, hbitos e instituciones. Para ello, necesariamente, el anlisis se dirige a la sociedad y los cambios que en ella operan y los diversos aspectos relacionados a la ciencia y a la tecnologa pasan a constituirse en factores explicativos de estos cambios. Estbanez, aade que la dificultad bsica que se plantea en un anlisis de esta naturaleza es la factibilidad de identificar y ponderar la intervencin de la ciencia y la tecnologa en la sociedad, la cultura y la economa y, en particular, en la calidad de vida de la poblacin, ante la existencia de muchos factores que operan en la produccin de los cambios sociales. Una de las vas ms firmes para realizar un estudio de impacto efectivo son los estudios retrospectivos que limitan el anlisis a la reconstruccin histrica de la secuencia o cadena de procesos de conocimiento y sus efectos sociales en un tema particular. Otra modalidad existente que tambin incorpora la dimensin temporal son los estudios de tipo prospectivo basados en la posibilidad de establecer a futuro los efectos del conocimiento producidos en determinado campo o las consecuencias de la difusin y uso de ciertas tecnologas (Estbanez, 2002). La metodologa utilizada en el presente trabajo busca combinar las dos modalidades, mediante el establecimiento de la lnea base del cultivo de la mora, es decir, la tecnologa tradicional utilizada por el productor y sus implicaciones econmicas, para luego compararla, al final del proceso, con la nueva tecnologa utilizada por el productor y los efectos sobre su produccin e ingresos. El mtodo a seguir consiste en realizar, al inicio del proceso, una encuesta a los productores para ver su nivel de desarrollo tecnolgico y luego realizar esta misma encuesta al final del proceso para identificar los cambios tecnolgicos introducidos por los productores en su sistema de produccin. En el contexto anterior, el proyecto cdigo 1144: Certificacin y escalamiento de material de mora con potencial nutritivo y nutracutico para entrega a pequeos agricultores financiado por el Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural (MADR), referido en la introduccin de esta compilacin, contempl el establecimiento de la lnea base del cultivo de la mora, al inicio del proceso, en una zona del Sumapaz, ubicada en el sector Monterrico, vereda Agua Bonita del municipio de Silvania (Cundinamarca). Durante el proyecto se estableci un lote experimental para la siembra, evaluacin y seleccin de materiales promisorios por sus caractersticas morfolgicas, agronmicas, nutracuticas y nutricionales (ver artculos de lvarez, et al. y Espinosa et al., de esta compilacin). El material seleccionado fue producido de manera limpia mediante multiplicacin in vitro y adaptacin ex vitro y fue entregado a los agricultores para la siembra en sus terrenos (ver artculo de Valderrama et al., de esta compilacin). El material de propagacin fue tambin evaluado con fertilizantes y controladores biolgicos con el fin de mejorar su vigor y sanidad (Roveda et al., 2007, Roveda et al. y Beltrn y Cotes, de esta compilacin). Durante el proceso se llev a cabo un programa de capacitacin integral a los agricultores (ver lvarez et al., de esta compilacin). Al final del proyecto se realiz la misma encuesta de la lnea base para identificar cambios tecnolgicos que los agricultores hubiesen introducido en su sistema de produccin como resulCaracterizacin, evaluacin y produccin de material limpio de mora con alto valor agregado
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tado de la capacitacin impartida. Debido a que el final del proyecto 1144, no se considera el final del proceso, ya que es necesaria una segunda fase de seguimiento de nuevas reas de siembra con el nuevo material producido in vitro, entregado a los agricultores, se esperara en esta segunda fase hacer seguimiento a la nueva tecnologa utilizada por el productor y a los efectos sobre la produccin e ingresos.
METODOLOGA
Para la evaluacin ex ante del proyecto 1144 se realiz un taller con los productores del sector Monterrico, vereda Agua Bonita del municipio de Silvania (Cundinamarca), el 22 de febrero de 2006 al inicio del proyecto con el objeto de identificar la lnea base del cultivo de la mora, es decir, la situacin inicial de los productores, desde el punto de vista tecnolgico, as como la importancia econmica y social del cultivo en la regin. Para el anlisis de la tecnologa local de produccin se aplic una encuesta sobre las diferentes actividades que se realizan en el establecimiento y sostenimiento del cultivo. Para la evaluacin ex post se llev a cabo un taller el 11 de noviembre de 2008, el cual tuvo como objeto realizar seguimiento y evaluacin del impacto econmico y tecnolgico (grado de adopcin de la tecnologa) que ha tenido la capacitacin en el manejo del cultivo, la evaluacin y seleccin de materiales y la produccin limpia de material de propagacin, que se hizo llegar al grupo de productores por medio del proyecto. Para lograr el objetivo se realiz un taller en el cual los productores respondieron una encuesta similar a la realizada al inicio del proyecto. Las encuestas se aplicaron a agricultores pertenecientes a tres asociaciones de la vereda (ver lvarez et al., de esta compilacin). Se relacionan principalmente los aspectos de tipo cualitativo aplicados en las encuestas; los de tipo cuantitativo, esperan utilizarse para anlisis posteriores de impacto de la tecnologa. Igualmente, los criterios de cosecha, pos-cosecha y mercadeo que se evaluaron en las encuestas, no se relacionan debido a que el corto tiempo del proyecto y el largo tiempo de produccin del cultivo, no permitieron mejorar estos aspectos, por lo que se hace necesaria una segunda fase.
Evaluacin ex ante La evaluacin ex ante permiti identificar la lnea base del cultivo de la mora en el sector Monterrico, Silvania. A continuacin se relacionan los resultados encontrados: 1. Seleccin del lote. Para identificar la forma en que los productores seleccionaban los lotes para la siembra, se tuvieron en cuenta ocho criterios y si stos eran considerados para realizar dicha seleccin. Los agricultores consideraban criterios de facilidad de acceso, topografa y caractersticas del suelo. Sin embargo, no consideraban los criterios de disponibilidad de agua para riego, sanidad, distancias a centros de acopio, cultivos anteriores (rotacin) y luminosidad. 2. Preparacin del lote. Inicialmente aplicaban matamalezas con bomba de espalda, lo que les demandaba dos jornales por hectrea. A continuacin realizaban un plateo con azadn y12 jornales por hectrea. 3. Material de siembra. El material de siembra por tradicin es la Mora de Castilla.
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4. Semillero. Los que hacan semillero, embolsaban las plntulas en tierra mezclada con cascarilla de arroz en proporcin 3:1; no utilizaban materia orgnica compostada y tampoco desinfectaban; no utilizaban productos para combatir los problemas de antracnosis; gran parte de los productores compraban las plntulas en viveros de Fusagasuga, las cuales provenan de semillas obtenidas artesanalmente de frutos recogidos en la regin. En los viveros tampoco se desinfectaba la tierra y los productores no exigan registros sanitarios. 5. Siembra. Por la condicin climtica de la zona, la siembra se realizaba en cualquier poca del ao. La distancia de siembra utilizada era de 2 x 2 metros. En el ahoyado utilizaban 15 jornales y para la siembra tres jornales por hectrea. 6. Tutorado. En la regin se utilizaban dos sistemas: Tutorado por hilera y Espaldera de una sola T. Cualquiera de los dos sistemas requera de 30 jornales para la instalacin. 7. Podas. Poda de formacin: La efectuaban a los tres meses de la siembra, dejando generalmente dos ramas por planta y requera de dos jornales por hectrea. Poda sanitaria o de mantenimiento: Se realizaba, por lo general, cada mes y medio, pues entre ms tiempo transcurra, requeran ms mano de obra; utilizaban ocho jornales por hectrea. Realizaban dos aporques al ao empleando ocho jornales por aporque. En ningn caso desinfectaban los equipos de poda, tijeras, o ramas cortadas. 8. Fertilizacin. No hacan anlisis de suelo y realizaban las siguientes aplicaciones: 15-15-15 (N-P-K), tres meses despus de la siembra, 80 kilos por hectrea; 10-30-10 (N-P-K) + nutrin + agrixin; a los seis meses de la siembra, 144 kilos por hectrea; 10-20-20 (N-P-K); a los nueve meses de haber sembrado, 144 kilos por hectrea. Mensualmente aplicaban abono foliar con boro y NPK. En el momento de la siembra, algunos combinaban gallinaza o porquinaza (de 20 das de compostaje) con cal en una relacin de 20:4 y agregaban un kilo de esta mezcla al suelo de cada planta. Para una hectrea utilizaban 40 bultos de 40 kilos de abono. 9. Manejo del agua. Por tener disponibilidad de agua de manera permanente, no le daban un manejo apropiado. Se presentaron dos pocas de menor suministro durante los meses de febrero-marzo y de agosto-septiembre que, sin embargo, no fueron crticas. 10. Principales problemas sanitarios. Los principales problemas sanitarios que se presentaban en la zona, en orden de priorizacin de los productores fueron: Antracnosis y Botrytis, trips, nematodos, mildeo velloso, mildeo polvoso, araa roja, fidos, Fusarium y chizas. El manejo que los productores daban a algunos de estos problemas se relaciona en la Tabla 1. Para ello, se utilizaban dos jornales por hectrea, y se efectuaba mensualmente. 11. Manejo de arvenses. El principal problema era el manejo del kikuyo. Su control era de tipo qumico (Roundup, gramozone) aplicndose una mezcla de un litro de herbicida en 200 litros de agua. El control se realizaba anualmente y se invertan dos jornales por hectrea. 12. Manejo de los productos qumicos. A pesar de conocer los grados de toxicidad de los productos y de leer las recomendaciones de sus etiquetas, los productores no utilizaban equipos de proteccin cuando realizaban aplicaciones. Los envases de los productos los acumulaban en el suelo para luego quemarlos. 13. Instalaciones para almacenamiento de productos qumicos. Guardaban en un solo saln fertilizantes, plaguicidas y equipos. No utilizaban sealizacin. Evaluacin ex post La evaluacin ex post permiti identificar las condiciones utilizadas por los productores para el cultivo de la mora en sus predios, al finalizar el proyecto. A continuacin se relacionan los resultados encontrados:
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1. Seleccin del lote. Como resultado del proyecto, en el cual se seleccion participativamente un lote en predios de los productores para evaluacin y seguimiento de materiales introducidos (ver lvarez et al., de esta compilacin), los productores consideran que una ubicacin adecuada del cultivo favorece la organizacin del mismo y por ende la calidad del producto y los ingresos. 2. Preparacin del lote. Como resultado del proyecto, en el cual se prepar el lote seleccionado (ver lvarez et al., de esta compilacin), los productores conocen las ventajas de utilizar el anlisis de suelos antes de iniciar cualquier cultivo. Actualmente, realizan un plateo menos profundo en sus terrenos. 3. Material de siembra. Los productores recibieron diversas capacitaciones sobre la importancia de contar con semilla de alta calidad gentica y fitosanitaria (ver articulo lvarez et al., de esta compilacin). Ellos encontraron que los materiales en el lote experimental presentaban diferencias y que algunos sobresalan sobre los dems por atributos morfolgicos, agronmicos y nutricionales (ver Espinosa et al., de esta compilacin). Igualmente, participaron en la etapa de endurecimiento ex vitro de los seis materiales seleccionados participativamente (ver Valderrama et al., de esta compilacin). Aunque al inicio del proceso de entrega de material ex vitro se presentaron prdidas de plntulas, en el vivero de los productores, mayores al 50%, al final del proceso, las prdidas disminuyeron notablemente y se empez a observar un mayor empoderamiento por parte de ellos. No obstante lo anterior, los productores requieren mejorar el manejo del material de siembra en sus fincas. 4. Siembra. En el lote que se sembr el material a evaluar, se utiliz una mayor distancia de siembra, de 2.5 metros entre calles y 2.2 entre plantas con una calle amplia para manejo del cultivo, frente a los 2 metros utilizados en la regin. Los productores han podido observar que ese incremento en las distancias de siembra les ha trado como resultado una menor incidencia de plagas y enfermedades y una mayor facilidad para realizar actividades como las podas y la aplicacin de controles fitosanitarios. Lo anterior ha tenido como consecuencia la reduccin del nmero de jornales por hectrea. Actualmente, se utilizan cinco jornales por hectrea. 5. Podas. Como se coment en el prrafo anterior, al incrementar las distancias de siembra se ha facilitado las labores de poda. Sin embargo, los agricultores continan haciendo las podas con la tecnologa local en sus terrenos. 6. Fertilizacin. Como resultado del proyecto, los agricultores aprendieron a conocer la importancia del anlisis de suelos y a realizar los planes de fertilizacin. Igualmente, advierten la importancia de la aplicacin de fertilizantes biolgicos, los cuales, fueron identificados para mora (Roveda et al., 2007 y Roveda et al., de esta compilacin). Sin embargo, se requiere una segunda fase para la produccin y evaluacin en campo. 7. Problemas sanitarios. Como producto del proyecto, los agricultores conocen las ventajas del manejo del cultivo y del control biolgico (ver lvarez et al. y Beltrn y Cotes, de esta compilacin). Dadas las altas precipitaciones en la zona, se siguen presentando los mismos problemas en sus parcelas. Dado que el proyecto slo llega hasta la identificacin de biocontroladores, mas no su produccin para evaluacin en campo, el MADR recientemente financi otro proyecto relacionado con el desarrollo de una estrategia de control biolgico de Botrytis cinerea en mora en campo, en el cual participan los mismos agricultores. 8. Manejo de arvenses. El plateo realizado para la evaluacin participativa de materiales en el lote experimental (ver lvarez et al., de esta compilacin), ha sido ventajoso, segn los productores, ya que disminuye problemas de malezas.
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9. Manejo de productos qumicos. A pesar de haber recibido capacitacin y adquirido conciencia de los perjuicios que el mal manejo de los productos trae para la salud del trabajador, los agricultores siguen realizando las labores sin utilizar los elementos de proteccin.
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
El anlisis de las respuestas dadas por los productores en el taller realizado al finalizar la capacitacin indica que gran parte de las enseanzas impartidas en los diferentes talleres, fueron asimiladas. Sin embargo, no estn aplicando algunas de stas. Lo anterior podra ser ocasionado porque an no existen cultivos en produccin con los materiales promisorios seleccionados participativamente y producidos de manera limpia (in vitro), ya que hasta ahora se est sembrando material nuevo. El cultivo de la mora es el de mayor importancia econmica y social en el sector Monterrico. Por un lado, ha permitido la formacin de varias asociaciones de productores y por otro, genera los principales ingresos y el mayor nmero de jornales. Sin embargo, un aspecto generalizado que se observa en productores de escasos recursos es que su tiempo de dedicacin a las buenas prcticas agrcolas acompaadas de innovaciones tecnolgicas es escaso, lo cual se refleja en la lentitud para adoptar nuevas tecnologas. Adicionalmente, el que existan varias asociaciones en un solo sector puede limitar la realizacin de iniciativas para la regin por la rivalidad que se da entre ellas. No obstante, el esfuerzo realizado por CORPOICA y la solicitud de apoyo que han manifestado los productores, apuntan a la necesidad de hacer seguimiento a las reas sembradas, con nuevo material entregado en Monterrico a fin de evaluar su comportamiento en el tiempo en ste y en nuevos ambientes. De esta forma, se podr seleccionar el material lite con mayor acierto y mejorar las prcticas de su cultivo en nichos especficos. Un anlisis social y econmico ex post del proceso permitir hacer seguimiento al grado de aplicacin de la tecnologa y su impacto.
AGRADECIMIENTOS
A las asociaciones de productores de Monterrico. A Yaneth Camargo por su excelente apoyo logstico y administrativo.
BIBLIOGRAFA
Estbanez, M.E. 2002. Impacto Social de la Ciencia y la Tecnologa: estrategias para su anlisis. En: Estado de la Ciencia. Principales indicadores de la ciencia y la tecnologa Iberoamericana/Interamericana. Buenos Aires, RICYT. 15 p. Pinzn, L.M., Carvajal, G.H., Romero, M. 2002. La competitividad de la mora en Cundinamarca y eje cafetero. Proyecto de Mapificacin de Frutales. Convenio SENA-CORPOICA, Bogot. Documento interno. 52 p. Pinzn, L.M., Carvajal, G.H., Romero, M. 2004. Caracterizacin de las zonas productoras de lulo en Cundinamarca. En: Estudio de mapificacin de las zonas ptimas actuales y potenciales de mora, lulo, pitaya, uchuva y mango comn. Convenio SENA-CORPOICA, Bogot. Documento interno. 38 p. Roveda, G., Cabra, L., Ramrez, M., Pearanda A. 2007. Efecto de las micorrizas arbusculares sobre la aclimatacin y endurecimiento de microplntulas de mora (Rubus glaucus). Revista Corpoica Ciencia y Tecnologa Agropecuaria. 8: 41-49.
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TABLAS
Tabla 1. Manejo a problemas fitosanitarios que utilizaban los productores al inicio del proyecto
Problema Manejo Producto utilizado
Antracnosis Botrytis Trips
Fertilizacin y poda Fumigacin Fumigacin
Segn cuadro de fertilizacin Fitorax, forum, rhodax, centauro, top sul y mezclas de antracol, forum y tilt Neofat, efectrina, aj
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Termin de imprimirse en junio de 2009 en Tel: 2885338 Bogot, DC, Colombia www.produmedios.org

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CARACTERIZACIN, EVALUACIN Y PRODUCCIN DE MATERIAL LIMPIO DE MORA CON ALTO VALOR AGREGADO

COMPILACIN DE ARTCULOS TCNICOS

COMPILADORA Y EDITORA TCNICA Luz Stella Barrero Meneses*

PN20100046 276 Junio de 2009 245 ejemplares

www.produmedios.org Diseo grfico: Impreso en Colombia Printed in Colombia

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Tipo de No. de multipliplantas cacin sembradas

Agricultor Monterrico (ILS2372) Agricultor Monterrico (ILS2378)

ILS = Cdigo de introduccin de la coleccin C.I. La Selva.

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Noviembre 30, Diciembre 1, 2006 43

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R. macrocarpus, sin R. Nubigenus R. niveus R. urticifolius R. glaucus R. floribundus

Figura 1. R. macrocarpus Benth o R. nubigenus H.B.K. Hoja, flor y fruto.

Figura 2. R. niveus Thumb, De Rubo. Hoja, flor y fruto.

Figura 3. R. urticifolius Poir. Hoja, flor y fruto. 32

Figura 4. R. glaucus Benth. Hoja y fruto.

Figura 5. R. floribundus HBK. Hoja y fruto.

EVALUACIN AGRONMICA, NUTRICIONAL Y SELECCIN PARTICIPATIVA DE MATERIALES DE MORA EN SILVANIA, CUNDINAMARCA

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Forma del fruto

Redonda Alargada Dulce Acido Inspido Mucha

Regular Poca Buena

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Tabla 3. Valores propios y porcentaje de varianza de nueve componentes en accesiones de Rubus.

2.9692 2.1073 1.6286 1.0252 0.7312 0.4451 0.0838 0.0061 0.0035

32.99 23.41 18.10 11.39 8.12 4.95 0.93 0.07 0.04

32.99 56.41 74.50 85.89 94.02 98.96 99.89 99.96 100.00

2.15 4 1.88 2.58 7.4 2.91

2.41 4.47 1.85 2.15 7.3 3.29

2.57 5.9 2.05 2.30 7.0 3.33

3 10.97 3.04 2.65 7.7 2.93

Tabla 5. Efecto de la accesin y el estado de madurez sobre caractersticas fisicoqumicas de la mora.

Castilla M. Yema ILS 1863 Sin Espinas Pcora Villa Mara

Accesin Estado Accesin x Estado

Clasificaci n j er rquica ACP

Morn Sin espinas* Pcora Monteloro*

RG10 RG23 RG19 RG31 RG02

RG25 RG39 RG26 RG28 RG17 RG21

RG12 RG11 RG06 RG15 RG22 RG08

RS30 RG13 RG20 RG16

RG27 RG04 RG09 RG24 RG07 RG05 RG18 RG14 RG01

* Accesiones seleccionadas por caractersticas agronmicas, nutricionales, nutracuticas y calificacin de agricultores.

Figura 1. Dendograma obtenido por anlisis de conglomerados.

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BIOFERTILIZACIN EN EL CULTIVO DE LA MORA (RUBUS GLAUCUS BENTH)

Laboratorio de Ecofisiologa Vegetal, Centro de investigaciones C.I. Tibaitat, CORPOICA.

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86.66 100.00 80.00 37.50 12.50 40.00 53.85 61.53 15.38

9.26 72.50 23.30 10.00 0.13 0.40 8.69 0.92 0.15

10.69 72.50 29.13 26.60 1.00 1.00 16.14 1.50 1.00

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Figura 3. Frecuencia de micorrizacin en cultivos de mora en fincas de Antioquia.

Figura 4. Intensidad de micorrizacin en cultivos de mora en fincas de Antioquia.

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Figura 2. Plntulas de mora producidas in vitro.

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artculo Beltrn y Cotes, de esta compilacin.