Medios de cultivo de bacterias

Preparacin y colonias de bacterias

2-sep-05

Tipos de medios
Los medios de cultivo se dividen acorde a sus caractersticas en generales, selectivos o diferenciales. Generales: permiten el crecimiento de cualquier tipo de bacteria. Selectivos: slo permiten crecer un cierto tipo, p.ej. slo un gnero. Diferenciales: permiten distinguir entre dos o mas bacterias por caractersticas coloniales.
2-sep-05

Medios generales
Agar Soya Tripticasa (TSA)* Agar marino 2216 o Zobell Agar Nutritivo**
* aadir 2.0 % NaCl ** aadir 2.5 % NaCl
2-sep-05

Medios selectivos
Agar Tiosulfato, Citrato, Sales de bilis, Sacarosa (TCBS): Vibrio Agar Cetrimida: Pseudomonas

2-sep-05

Medios diferenciales
Agar Eosina Azul de Metileno: coliformes y E. coli

2-sep-05

Preparacin de medios
Siempre preparar los medios con agua destilada (salvo el Marino). Es necesario ajustar simpre el pH. Todos los utensilios deben estar perfectamente limpios. Todos los medios deben esterilizarse de alguna forma.
2-sep-05

 Los medios se preparan en matraces cnicos con tapa Se pesa la cantidad de medio requerida, se disuelve o suspende en el agua. Se ajusta el pH. Se esteriliza a 121C por 20 min Se espera a que enfrie (42C o hasta que se pueda sostener el recipiente sin quemarse la mano) Servir 20 ml Aprox. en cada caja de Petri

2-sep-05

2-sep-05

Esterilizacin
Es el proceso mediante el cual se destruyen o remueven todos los microrganismos

Tipos de esterilizacin
Hmeda, autoclave Seca, horno Gaseosa: xido Filtracin:

etileno, formaldehdo o H2O2.

membranas de 0.45 y 0.22 m.

2-sep-05

Esterilizacin hmeda
No colocar recipientes completamente cerrados en la autoclave. El vapor debe entrar en contacto con todo lo que se quiere esterilizar No esterilizar solventes o qumicos corrosivos Si se esterilizan lquidos, bajar la presin lentamente y dejar enfriar los recipientes dentro de la autoclave Se esterilizan mejor los lquidos si se dividen en pequeos recipientes que en uno grande (> 1 lt)
2-sep-05

10

Esterilizacin hmeda (Cont.)

Temperatura: 121 -123C (250-254F) Presin: 15 psi Tiempo: 10-15 min instrumentos* 20 -30 min lquidos* * el tiempo depende de que tan llena este la cmara de
la autoclave, muy llena mas tiempo.
2-sep-05

11

Agar TCBS

2-sep-05

12

agar Marino y TSA

2-sep-05

13

Colonias en agar TCBS

2-sep-05

14

2-sep-05

15

Purificacin de vibrios

2-sep-05

16

Colonias en agar Marino

2-sep-05

17

Vibrios en TSA

2-sep-05

18

2-sep-05

19