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Clase 2
Clase 2
CLASE 2
Los descubrimientos del siglo pasado han esclarecido en
gran parte algunos misterios como la naturaleza de la
vida.
En la actualidad podemos decir que todos los seres vivos
están formados por células y que estas unidades
de materia viva comparten una maquinaria común para
cumplir con sus funciones básicas.
En biología confluyen dos ideas fundamentales:
La asombrosa variedad individual y la constancia en los
mecanismos fundamentales.
• La imagen que se
forma debe ser
registrada por una
pantalla especial,
fluorecente o placa
fotográfica, porque
los electrones son
invisibles al ojo
humano.
• En el Microscopio Electrónico de Barrido (MEB),
los electrones no atraviesan el preparado. La pieza
es barrida por un rayo continuo de partículas y la
imagen se forma en una pantalla de TV o se
registra fotográficamente.
• El MEB tiene
un poder de
resolución algo
menor que el
MET, pero se
pueden obtener
imágenes
tridimensionale
s.
¿Cómo se prepara una muestra para
ser observada al Microscopio?
La observación de un material al microscopio
óptico común, requiere de una preparación , cuya
técnica se conoce como Técnica Histológica que
consta de los siguientes pasos:
• Obtención de la muestra.
• Fijación: Impide la autodegradación enzimática de las
células-(quimicos: Formol- alcohol etílico 100%- A.
Metílico; Físicos: desecación- calor seco, frio o
congelación).
• Deshidratación (Pasajes sucecivos en alcoholes de
concentración creciente).
• Aclaración: (Impregnar la muestra con solvente soluble
en parafina: xileno, tolueno o benceno).
• Inclusión: (En parafina o celoidina previamente
calentada. Al solidificarse da sosten para el corte. Se
denomina TACO)
• Corte: (Se utiliza un micrótomo, obteniendo una
superficie muy delgada).
• Rehidratación: (Se retira la parafina con xilol y se lava
con alcoholes de concentración decreciente
• Coloración: (La mas común Hematoxilina-Eosina, tiñe
citoplasma rosa y nucleo azul).
La observación de un material al microscopio
electrónico de transmisión (MET), requiere de la
siguiente preparación :
Fijación: (Con paraformaldehído, tetróxido de Osmio
o glutaraldehído, en solución acuosa de ph neutro.
Luego se lava con tetróxido de ósmio una hora, que se
une a las lipoproteínas de las membranas ceelulares.
Esto se denomina coloración o contrastado).
Deshidratación: (Con alcohol o acetona).
Inclusión: ( en rsinas tpo epoxi).
Corte:
(Con un Ultramicrótomo. Permite cortes de 20 a 100 nm
de espesor).
Montaje: (En pequeñas grillas de cobre).
Contrastado: (Se impregna con acetato de uranilo,
citrato de plomo u otras sustancias.)
La observación de un material al microscopio
electrónico de Barrido (MEB), requiere de la
siguiente preparación :
Fijación: (Se lava con solución Buffer y se fija igual
que el anterior).
Deshidratación: (Con alcohol o acetona).
Se depositan Sales de plata u oro, para lograr el
efecto tridimensional
Inclusión: ( en rsinas tpo epoxi).
Corte: (Con un Ultramicrótomo. Permite cortes de 20
a 100 nm de espesor).
Montaje: (En pequeñas grillas de cobre).
Métodos de Cultivo en Laboratorio
El cultivo celular es uno de los métodos más
empleados para estudiar las células vivas.
Cultivo Primario: Se obtiene directamente tejidos
animales o vegetales en condisiones asepticas, se
tratan con tripsina para generar una suspención de
células libres, que se cultivan en cápsula de Petri con
medio de cultivo adecuado.
• Tienen una envoltura compuesta por dos membranas concéntricas que poseen
vesículas tilacoides, las cuales contienen los pigmentos fotosintéticos, como la
clorofila, y demás sustancias que transforman la energía luminosa en energía
química.
Sistema de Endomembranas:
El retículo endoplásmico puede ser encontrado en todas
las células eucarióticas, exceptuando los glóbulos rojos y
los espermatozoides.