BIOAUMENTACION A GRAN ESCALA DE

SUELOS CONTAMINADOS CON PETROLEO

UTILIZANDO UN CONSORCION MIXTO
MICROBIANO
AUTORES:
Gregory Poi
Arturo Aburto Medina
Puah Chum Moke
Andrew S. Ball
Esmaeil Shahsavari
 INTRODUCCION

MATERIALES Y METODOS

RESULTADOS

DISCUSIONES

CONCLUSIONES
 INTRODUCCION

 Es uno de los puertos mas activos del mundo.

 Esta industria petrolera generan cantidades sustanciales de subproductos de
desechos contaminantes.
 La gestión de residuos en Singapur se basa en dos tecnologías centrales: el
relleno sanitario y la incineración.
 Se usó la tecnología de biorremediación o el uso de microorganismos para
degradar hidrocarburos de petróleo utilizando técnicas como atenuación
natural controlada, bioestimulación y bioacumulación.
 El suelo presentaba altos niveles de contaminación (> 700,000 mg kg -1)
 Se realizaron ensayos para comprobar los niveles de toxicidad del suelo con la
planta Brassica rapa.
 MATERIALES Y
METODOS
1. BIOAUMENTACION
2. PREPARACIÓN DEL INOCULO

Las cepas puras se cultivaron en agar

nutritivo y luego se incubaron
Estos fueron utilizados para
durante la noche a 37 ° C en 50 ml
inocular 500 ml de medio PB
de medio de caldo de producción
que se incubó durante 24–48 h
(PB)
a 37 ° C

Cada cepa pura fue luego

El consorcio estaba listo para mezclada con 500 ml de
use y almacene en tampón fosfato y se agruparon
carbohidratos de 4 L a 4 ° C todos los cultivos juntos en un
hasta que se requiera. Braunfermenter.
3. EXPERIMENTOS DE LABORATORIO

Se aplicó una combinación de

Aproximadamente 5 kg de
suelo contaminado con TPH
se colocaron en una bandeja
de plástico
bioaumentación y bioestimulación a
cuatro lotes de suelo contaminado
con TPH etiquetado como A y C en
consecuencia, cada uno con
aproximadamente 500 g.

Los suelos se incubaron a

30 ° C para mantener la
temperatura de campo

El muestreo se realizó
durante 4 semanas
4. EXPERIMENTOS EN CAMPO
​el suelo contaminado con TPH fue
inoculado con el consorcio bacteriano en
adiciones regulares, hasta que la
concentración de TPH fue inferior a
1,000 mg kg − 1. Se realizaron estudios
de campo en lotes de 250 toneladas
métricas.
 5. DETERMINACION DE TPH
El sistema GC utilizado fue un HP 5890
Series II junto con el software Agilent GC
Chemstation. La columna utilizada fue
una columna capilar Agilent DB-5 (30 m
por 0.25 mm con 0.25 m de espesor de
película).
El suelo (15 g) se molió y se colocó en un
embudo de separación, se mezcló con
10g de sulfato de sodio y 75 ml de
Diclorometano
El GC se equipó con un FID para
la detección de sólidos y líquidos
con puntos de ebullición inferiores
a 2.500 ° C con un límite de
detección de 1 mg L − 1
Los estándares utilizados fueron
Alphagaz PIANO Calibration
Estándares de Supelco®,
Esta mezcla se dejó reposar Se usó una jeringa para extraer una
durante 2 minutos y se agitó muestra del medio de la capa
nuevamente, antes de dejarla superior de la muestra separada.
durante la noche

se inyectó (6 µl) de muestra en Esta muestra se prefiltró utilizando

el GC y se dejó correr. un filtro de 0,45 m;
 6. ENSAYO DE FITOTOXICIDAD

Semillas de Brassica 10 semillas de B. rapa

Se coloco (20 g) de muestra
rapa separadas

s
i ll a
0 sem
d e 1 n to se dejaron germinar a
d o s am i e
ca t 25°C, 80% de
u pl i d a t r a
5 d a ca humedad, sin luz/4
pa r días
Control con
suelo no
contaminado

se añadió 5 ml de agua
RO y se tapo sin sellar
 7. RECUENTO MICROBIANO

Muestras de suelo
diluidas con Sln de
NaCl al 0,85%
−3
10
 

−4
10
 
(UFC) g − 1
AN a 28 ◦ C/ 2 días
suelo seco
−5
10
 
8. ANALISIS DE DATOS

Los datos obtenidos de este estudio se sometieron a

IMB SPSS (versión 21) y la significación estadística se
determinó mediante prueba t o análisis de varianza
(ANOVA) y prueba de Tukey
RESULTADOS Y DISCUSIONES

ESTUDIO DE LABORATORIO
ESTUDIO DE CAMPO
CONCLUSIONES

• Este estudio destaca la importancia de un consorcio indígena adaptado para mejorar

la degradación de hidrocarburos

• confirma la biorremediación como una estrategia adecuada para el tratamiento de

suelos contaminados con hidrocarburos a escala comercial.

• Aunque se han realizado varios estudios de biorremediación en Singapur (Mathew et

al., 1999, 2006, Zheng y Obbard, 2003)

• según el conocimiento de los autores, este es uno de los primeros estudios que
informan la degradación exitosa de grandes volúmenes (hasta 2500 toneladas) de
Suelo contaminado con TPH.