Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
MOLECULAR UV-VIS
(ESPECTROFOTOMETRÍA UV-VIS)
8.1.- TRANSMITANCIA
Transmitancia: fracción de
radiación incidente transmitida
por la disolución.
PT
T
PO
8.2.-ABSORBANCIA
PO
A log T log
PT
La absorbancia de una disolución aumenta a medida que
aumenta la atenuación del haz.
PT potencia del haz de radiación transmitida.
Transmitancia: fracción de radiación que una sustancia deja pasar cuando la REM atraviesa la
muestra.
Cuando no hay absorción de radiación Po= PT y entonces A=0, mientras que si se absorbe el
99% de la radiación, solo se transmite el 1%, la A=2
8.3.- RELACIÓN ENTRE ABSORBANCIA Y CONCENTRACIÓN: LEY DE BEER
A a·b·c A ·b·c
a: cte de proporcionalidad llamada absortividad. (unidades L·cm-1·g-1, si c=g/L)
b: longitud del camino que recorre la radiación a través del medio absorbente.
c: concentración expresada en g/L (mg/L, ...) Cuando en la ecuación la
concentración viene expresada en mol/L, la cte de proporcionalidad se denomina
absortividad molar y se representa por (unidades L·cm-1·mol-1. )
-Disoluciones que contienen más de una clase de especies
absorbentes:
A = A1 + A2 + .... + An
Como A = · b · c
A = 1 · b · c1 + 2 · b · c2 + …. +n · b · cn
Siendo 1, 2, …, n los componentes absorbentes.
8.4.- LIMITACIONES DE APLICABILIDAD DE LA LEY DE BEER
HIn H+ + In-
Color 1 Color 2
Desviación positiva a 430 y negativa a 570 nm.
8.4.- LIMITACIONES DE APLICABILIDAD DE LA LEY DE BEER
C) Limitaciones Instrumentales
FOTÓMETROS
* Instrumento sencillo utilizado para medir la absorbancia y
que emplea filtros de absorción o interferencia para
seleccionar la longitud de onda.
ESPECTROFOTÓMETROS
* Instrumento empleado para medir la absorbancia que
utiliza un selector monocromático para seleccionar la longitud
de onda.
* Puede usarse en la región UV, Vis e IR.
A b s o r b a n c ia
0 .6 0 G e s to d e n o (5 .4 m g /L )
L e v o n o r g e s tr e l (7 .2 m g /L )
0 .4 0
0 .2 0
0 .0 0
2 2 0 .0 2 4 0 .0 2 6 0 .0 2 8 0 .0 3 0 0 .0
L o n g itu d d e o n d a (n m ) CH3
OH
CH3 C CH OH
CH2 C CH
CH3
OH
CH2 C CH
HO
O
ETINILESTRADIOL (ETE) LEVONORGESTREL (LEV)
O
GESTODENO (GTD)
NaSO3 N=N COONa
HO
SO3Na
Tartracina (E-102)
OH
NaSO3 N=N
SO3Na
A. Anaranjado (E-110)
8.6.- ESPECIES ABSORBENTES
B) Absorción por compuestos inorgánicos
-Los espectros presentan máximos de absorción anchos y poca estructura
fina.
-Excepción: iones de la serie de los lantánidos y actínidos. Los e- (4f
y 5f) responsables de la absorción están apantallados de influencias
externas por e- situados en orbitales de nº cuánticos elevados.
Consecuencia: bandas de absorción estrechas y están relativamente poco
afectadas por la naturaleza de las especies asociadas a ese ión y por el
disolvente.
CAMPO DE APLICACIÓN
- Especies absorbentes: compuestos orgánicos que contengan grupos
cromóforos y especies inorgánicas como son los metales de transición.
- Especies no absorbentes: los analitos reaccionan con un reactivo
para producir un compuesto absorbente.
8.7.- APLICACIONES
APLICACIONES MEDIOAMBIENTALES
8.7.- APLICACIONES
MEZCLAS DE ANALITOS
8.7.- APLICACIONES
detector
• El espectrofotómetro convencional Un espectrofotómetro
convencional enfoca la luz policromática de la fuente en un
monocromador. Este tiene como componentes principales una
ranura de entrada, un elemento que dispersa la luz en sus
longitudes de onda componentes (en general una red de
difracción), y una ranura de salida que permite seleccionar la
longitud de onda deseada.
• Esa luz “monocromática” atraviesa la muestra, y llega al
detector. Las mediciones fotométricas se hacen en base a la
relación entre la potencia de luz que alcanza al detector cuando
está interpuesta la muestra (P) y cuando no lo está (P0) o
cuando está interpuesto un “blanco”.
• El espectrofotómetro de dispositivo de diodos
• El espectrofotómetro de dispositivo de fotodiodos (diode array,
de diodos fue introducido a mediados de los ’70. Utiliza una
óptica invertida respecto del convencional: toda la luz de la
fuente atraviesa la muestra, luego es dispersada en un
monocromador que en lugar de una ranura de salida tiene en el
plano focal un dispositivo que integra en un pequeño circuito
varios cientos de detectores tipo fotodiodo de silicio. El número
de elementos varía actualmente entre 64 y 4096, siendo los más
comunes de 512 y 1024 elementos.
• Cada elemento del dispositivo recibe luz de un rango particular
de longitudes de onda, y un ordenador procesa los datos
recibidos. Las principales ventajas del espectrofotómetro de
dispositivo de fotodiodos son que para obtener un espectro no
hace falta mover ningún elemento, y los espectros se obtienen
en forma casi instantánea.
diodos