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  • Separacion e Identificación de Proteínas. Bioquimica

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    Daniel Alberto Vargas Gomez
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    Separacion e Identificación de Proteínas. Bioquimica (1).pptx

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    de 10

    Separación e Identificación

    de Proteínas expresadas en
    LLA type B
    ● Jefferson Hernandez Perez
    ● Angie Alexandra Gomez Suárez
    ● Daniel Alberto Vargas
    ● Jennifer Jaimes Claro
    Introducción: LLA

    Linfoblastos Linfocitos

    50%
    “Estudio proteómico 2DEDIGE en plasma sanguíneo
    de pacientes en etapa infantil con leucemia
    linfoblástica aguda”
    Inmunodepleción
    ● 85% Albúmina 70% IgG
    ● Buffer basado en Urea
    permite seguir con 2DE.
    ● ProteoPrep®
    Immunoaffinity Albumin
    & IgG Depletion Kit
    Technical Bulletin.
    ● Inmunoafinidad.
    Ácido Bicinconínico
    ● BCA 1% pH 11,25 :
    CuSO4. (100:1)
    ● Colorimétrico
    ● Producido a partir de
    reaccion de
    Pfitzinger (Isatin y
    Acetoin)
    Electroforesis 2D-DIGE
    4 Mezclas:
    -Casos 1-3
    -Casos 4-6
    -Controles 1-3
    -Controles 4-6

    Marcaje DIGE flúor, Cy3 ó Cy5;


    estandar Cy2

    SDS-PAGE
    A) Cy2, Estandar ; B) Cy3 Pacientes ; C) Cy5 Controles ; D) Imagenes
    sobrepuestas
    Cromatografía líquida acoplada a espectrometría de
    masa

    Separación
    Identificación
    Análisis de Resultados

    FIGURA 1.
    FIGURA 2.
    Análisis de imágenes mediante Progenesis Haptoglobina, Zinc-alfa-2-glicoproteína, Alfa-1-
    SameSpots v4.5 en plasma inmunodepletado de antitripsina, Serotransferrina, Complemento C3
    pacientes LLA-B y controles. y la Alfa-2 Glicoproteína
    ANÁLISIS BIOINFORMÁTICO

    FIGURA 3.
    Referencias
    BCA. https://www.academia.edu/9694783/Measurement_of_protein_using_bicinchoninic_acid?auto=download

    https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/Sigma/General_Information/bicinchoninic_acid_method.pdf

    http://sgpwe.izt.uam.mx/files/users/uami/acym/27_METODOS_PARA_LA_CUANTIFICACION_DE_PROTEINAS.pdf

    Immunodepletion. https://www.sigmaaldrich.com/life-science/proteomics/protein-sample-preparation/protein-depletion-
    products.html#targetText=Protein%20Depletion,greater%20analysis%20of%20the%20proteome.&targetText=We%20offer%20a%20complete%20line,%2C%20mouse%2C%20rat%20
    or%20plant.

    Leucemia

    https://www.pediatriaintegral.es/wp-content/uploads/2016/09/Pediatria-Integral-XX-06_WEB.pdf#page=32

    https://scielo.conicyt.cl/pdf/rcp/v58n3/art07.pdf

    Espectrometría de masas - cromatografía líquida


    https://www.tesisenred.net/bitstream/handle/10803/2729/4.pdf?sequence=4&isAllowed=y

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