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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE

QUERÉTARO.
Bacteriología clínica.
Trabajo final.
Diseño de cebadores (primers) específicos para la
detección de Shigella spp. por medio del uso de la
técnica de amplificación isotérmica mediada por
bucle (LAMP).
Hidalgo Chaires Luis Alberto.
Ortiz León Javier.
Rojo Muñiz Diego.
Introducción.
 Enfermedades
gastrointestinales en países en
vías de desarrollo.

 Cerca de 1.8 millones de


personas fallecen a nivel
mundial.

 Factores como desnutrición y


falta de intervención médica
aumentan mortalidad.
 Shigella se encuentran
entre los patógenos
bacterianos más
frecuentemente.

 Cuatro grupos o especies


siendo estás S. dysenteriae,
S. flexneri, S. boydii y S.
sonnei

 Brotes en México en años


70’s Shigella dysenteriae.

 Shigella flexneri se volvió


la especie predominante
aislada de infecciones
endémicas.
 Estudios en Shigella flexneri.

 S. flexneri cruza el epitelio intestinal en la fase


inicial de la infección.

 Captación por células epiteliales especializadas.


GEN IPAD

 Necesario para la invasión.

 Formación de poros de
translocación.

 Virulencia.

 Altamente conservado en
especies de Shigella.
LAMP.
 Reacción isotérmica.

 Nivel de sensibilidad y
especificidad de la técnica es
superior en contraste con
las pruebas de PCR

 Requiere de entre 4 y 6
primers.

 Reconocen 8 regiones diana.


OBJETIVO.
 Estandarizar un método de diagnóstico para la
bacteria del género Shigella spp a través de la
técnica de la “Amplificación Térmica Aislada por
Medio de Bucle” (LAMP) en muestras de
alimentos, para una detección rápida, especifica y
sensible al patógeno.

HIPÓTESIS.
 LA UTILIZACIÓN DE LA TÉCNICA DE
“AMPLIFICACIÓN TÉRMICA AISLADA POR MEDIO DE
BUCLE” (LAMP) PERMITIRÁ UN DIAGNOSTICO
DIRECTO Y CONCISO DE LA BACTERIA SHIGELLA
SPP.
DISEÑO DE PRIMERS. GEN IPAD.
Secuencia consenso.
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AAGCTTTTTAACATATTGTCTATTGGGGTCATGTTTA
TATTGACAACATATCCCCCGTTTTTTTTAGATACCTT
GCCGATTGTTCCACCTAATTCTGTAAGCCATTTATCT
GCTTGTTCCTTACTAACAGTATTATTTGCTGGATATA
GCGGTTTATCTTCATATTTTTCCTTGAGCTTTGTCAA
TTCGTCTTTAAGCGAGTTGACTTGTAATTTCACGGA
GTTTCCGTCGTTACCTCCGGGAGAGATCCAGCCGGC
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