MICROBIOLOGÍA E INMUNOLOGÍA

PRÁCTICAS DE LABORATORIO
2017 - 1
 PRACTICA N°01

Seguridad y Bioseguridad en
el Laboratorio de
Microbiología Clínica

Medicina Humana - Microbiología e

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Inmunología - 2017-1
 Personas
en/cerca

Riesgo de enf. Trabajo en

infecciosas grupo

Actitud,
Ambiente LABORATORIO DE
MICROBIOLOGÍA entrenamiento
especial
y actualización

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Inmunología - 2017-1
 CONCEPTOS GENERALES
• Salud laboral.
• Manual de seguridad y
bioseguridad.
• Plan de contingencia.
• Plan de emergencia.
– Conjunto de acciones frente a
situaciones de riesgo de un
laboratorio, minimizando
efectos sobre personas y
bienes y garantizando
evacuación segura de ser
necesaria.

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Inmunología - 2017-1
 CONCEPTOS GENERALES
• Riesgo, tipos:
– Físico: ruido, iluminación,
temperaturas extremas,
electricidad, radiación ni ionizante.
– Químico: ácidos, bases,
inflamables y colorantes.
– Ergonómico: postura, visión,
transporte.
– Psicológico: estrés, violencia,
acoso.
– Biológico: microorganismos,
cultivos celulares, que originen
infección, alergia o toxicidad.

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 CONCEPTOS GENERALES
• Peligro: todo que produzca daño o deterioro
en calidad de vida individual o colectiva.
• Daño: consecuencia de un peligro sobre
calidad de vida.
• Contaminación.
• Desinfección – antisepsia.
• Esterilización – asepsia.
• Accidente.
• Incidente.
• Grupos de riesgo para microorganismos.

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 CRITERIOS PARA CLASIFICAR EN GRUPOS DE
RIESGO A MICROORGANISMOS
• Patogenicidad.
• Modo de transmisión y
huéspedes:
– Inmunidad, densidad,
movimientos
poblacionales, vectores,
higiene ambiental.
• Medidas preventivas
eficaces disponibles.
• Tratamientos eficaces
disponibles. Medicina Humana - Microbiología e
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Fuente: Manual de Bioseguridad OMS
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 BL1 BL2

BL3

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Fuente: Manual de Bioseguridad OMS
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Fuente: Manual de Bioseguridad OMS
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 Medicina Humana - Microbiología e
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 Buenas prácticas de laboratorio incluye…
Barreras primarias Barreras secundarias
• Equipos de protección • Diseño del laboratorio:
individual edificio, ventilación, áreas y
• Cabinas de seguridad espacios, materiales de
biológica construcción, señalización
– Clase I específica, medidas de
– Clase II contención.
– Clase III

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Inmunología - 2017-1
 Medicina Humana - Microbiología e
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Inmunología - 2017-1
 Buenas prácticas de desempeño en el laboratorio

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Inmunología - 2017-1
 Buenas prácticas de desempeño en el laboratorio

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Inmunología - 2017-1
• https://www.youtube.com/watch?v=mRg_KBpYRaQ

• https://www.youtube.com/watch?v=Bv7D_b9_-ng

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Inmunología - 2017-1
 Materiales y equipos utilizados en el
laboratorio de microbiología clínica
• Mechero de gas
• Placas Petri
• Medios de cultivo
• Asas de siembra
• Láminas porta y cubre objeto
• Colorantes y reactivos
• Microscopio óptico
• Equipo de protección personal: guantes,
mascarillas, gorro, botas, mandil, lentes
• Cabina de bioseguridad
• Sistema de desecho de residuos

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Inmunología - 2017-1
 Principales técnicas diagnósticas
• Diagnóstico
microbiológico
– Coloraciones
– Cultivo e
identificación

• Diagnóstico
inmunológico
– Serología
– Pruebas antígeno -
anticuerpo
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DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO EN

BACTERIOLOGÍA

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ALGORITMO
DIAGNÓSTICO

Conjunto prescrito de instrucciones o reglas

bien definidas, ordenadas y finitas que
permite realizar un diagnóstico (……………….)
mediante pasos sucesivos que no generen
dudas a quien deba realizar dicha actividad.

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Inmunología - 2017-1
 El diagnóstico de enfermedades
infecciosas se fundamenta en…
• Signos y síntomas
• Datos epidemiológicos
• Demostración del
agente causal en fluido,
secreción o muestra
biológica
• Demostración de las
huellas del agente
causal en el sistema
inmunológico
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Inmunología - 2017-1
 ¿Cuál es el papel del laboratorio
de bacteriología clínica?
• Determinar
presencia de
patógenos
potenciales en
tejidos, fluidos
corporales o
secreciones de
pacientes e
identificarlos
• Inmunología ¿?
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Inmunología - 2017-1
 ¿Cómo se obtiene la información?
• Cultivo e identificación de patógenos  muestra clínica
• Examen microscópico  muestra clínica
• Medición o cuantificación de respuesta inmune específica
para patógeno  muestra clínica
• Detección de moléculas específicas de los patógenos 
muestra clínica

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Inmunología - 2017-1
 ALGORITMO GENERAL
DEL DIAGNÓSTICO
BACTERIOLÓGICO

Fuente: Microbiología médica de Mims

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Inmunología - 2017-1
 FASES DEL DIAGNÓSTICO
MICROBIOLÓGICO

1. FASE PRE – ANALÍTICA

2. FASE ANALÍTICA

3. FASE POST ANALÍTICA

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Inmunología - 2017-1
 FASE PRE ANALÍTICA
1. Indicación – Orden de análisis

2. Toma de muestra
a) Consideraciones particulares
b) Tipo de muestra
c) Transporte
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Inmunología - 2017-1
 Indicación – Orden de Análisis
Orden de análisis con los datos necesarios para la orientación diagnóstica.
 Llenado de datos del paciente :
 Generales de Identidad. Nombre, Edad, Sexo, Antecedentes patológicos personales (APP) y
familiares (APF) de interés en la situación actual, HC, Procedencia, Sospecha Diagnóstica,
Consulta Externa o Servicio de Hospitalización, Antibióticos u otros medicamentos que
actualmente utiliza, …
Parte 1 INDICACIÓN U ORDEN DE ANÁLISIS
Paciente: (apellido paterno, materno, nombre) Sexo: M --- F ---. Edad: --------- Estado civil:
Soltera/o------ Casada/o--------Divorciada/o-------- Viuda/o ------- Conviviente ---------
H.C. ------------------ Procedencia: --------Dirección: ------------------------- Teléfonos: -----------
DNI: ------------ Correo electrónico: -------------------------
Aviso en caso de emergencia: ------------------------------
Antecedentes patológicos familiares: ---------------------------------------------------------------------
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Antecedentes patológicos personales: --------------------------------------------------------------------
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Impresión diagnóstica: ---------------------------------------------------------------------------------------
Tratamiento con antibióticos o antisépticos urinarios u otros de interés: ----------------------
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
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 Tipo de muestra
 Muestra o producto
patológico:
 Sangre, LCR, LS, LP,
Biopsias, Orina,
Herida, Faringe,
Fosas Nasales,
Nasofaringe,
Amígdalas, Ganglios,
Piel, Esputo,
Aspirados; gástrico,
biliar, bronquial,
Heces, …
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Inmunología - 2017-1
 Toma de muestra
 En muestras supuestamente
estériles, …
 Evitando contaminación, ….
 Seleccionando sitios apropiados,
….
 Previsiones de aseo, …
 Previsiones de bacterias
implicadas y sus exigencias
nutritivas, respiratorias,
temperatura, …
Medicina Humana - Microbiología e
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Inmunología - 2017-1
Transporte
 Transporte y envío acondicionados
para la protección de las cualidades
de la muestra, la bioseguridad y la
seguridad ambiental.

Fuente: Manual de bacteriología clínica SEIMC

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Inmunología - 2017-1
 FASE ANALÍTICA

1. Recepción de la muestra
2. Análisis
A. Diagnóstico presuntivo
B. Diagnóstico confirmatorio
a) Cultivo
b) Proceso de identificación
a) Bioquímica, tolerancia
b) Serología
c) Sensibilidad y resistencia a antibióticos
3. Reporte con resultados

Medicina Humana - Microbiología e

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Inmunología - 2017-1
 Recepción
Recepción de la Indicación y
la muestra en las
condiciones exigidas.

Fuente: Manual de bacteriología clínica SEIMC

Medicina Humana - Microbiología e

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Inmunología - 2017-1
 En casos de emergencia…
Analizar si procede el
diagnóstico rápido
confirmativo, por
técnicas específicas
antígeno -
anticuerpo,
moleculares, de no ser
factible, continuar con
el paso siguiente.

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Inmunología - 2017-1
 Diagnóstico presuntivo
• Microscopía en fresco y/o con coloraciones.
• Indicación y el origen o sitio anatómico de donde proviene la
muestra  provenientes de sitios supuestamente estériles.
• Coloración universal: GRAM.
• El examen microscópico puede incluir: Conteo de células
bacterianas y/o células leucocitarias o epiteliales
• Evaluar la calidad de la muestra para orientar la procedencia a la
identificación confirmativa.

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Inmunología - 2017-1
 Fuente: Manual de
bacteriología clínica
SEIMC

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Inmunología - 2017-1
Diagnóstico confirmatorio
Cultivo en medios
adecuados a la
impresión diagnóstica
o al diagnóstico
presuntivo de
Laboratorio. Medio
de cultivo universal:
agar nutritivo con
sangre de carnero.

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Inmunología - 2017-1
Diagnóstico confirmatorio
Aislamiento de colonias características.

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Inmunología - 2017-1
Diagnóstico confirmatorio
Proceso de Identificación: Pruebas fisiológicas y/o bioquímicas,
de tolerancia.

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Diagnóstico confirmatorio
Pruebas de identificación antígeno - anticuerpo de la cepa
aislada (si procede).

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Inmunología - 2017-1
 Diagnóstico confirmatorio
SENSIBLE INTERMEDIO RESISTENTE
ANTIBIÓTICO
Prueba de sensibilidad y resistencia x
Ampicilina
de la cepa aislada y/o Trimetropin /Sulfametoxazole x
identificada a los Nitrofurantoína x
antimicrobianos. Norfloxacino x

Amikacina x

Amoxicilina/Ac. Clavulánico x

Ciprofloxacino x

Gentamicina x

Ampicilina/Sulbactam x

Cefalotina x

Cefotaxima x

Cefuroxima x

Ceftriaxona x

Imipenem x

Meropenem x

UROCULTIVO > 100,000 u.f.c./ml

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Inmunología - 2017-1
 FASE POST - ANALÍTICA
Lectura e interpretación de resultados.
Concordancia clínica.
 Toma de decisiones diagnósticas y terapéuticas específicas.
 Toma de decisiones epidemiológicas, diferenciales, …

Reporte a SIL – WHONET – mapa microbiológico.

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Inmunología - 2017-1
 Medicina Humana - Microbiología e
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Inmunología - 2017-1
 VALOR PREDICTIVO POSITIVO
Valor predictivo positivo (PV+): probabilidad de tener la enfermedad
si el resultado de la prueba diagnóstica es positivo.

Valor predictivo negativo (PV-): probabilidad de no tener la

enfermedad si el resultado de la prueba diagnóstica es negativo.

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Inmunología - 2017-1