PRUEBA DE DIFUSION EN AGAR

BAUER-KIRBY
PROCEDIMIENTO: ES ESTANDARISADO POR NACIONAL COMITÉ Y CLINICA
LABORATORIO ESTANDAR(NCCLS) SIGUE LA SIGUIENTE SECUENCIA.
 PREPARACION DE INUCULO

 ESTANDARISACION DEL INOCULO

 INOCULACION EN LAS PLACAS DE AGAR
 APLICACIÓN DE DISCOS DE ANTIBIOTICOS
 MEDICION DE HALOS DE INHIBICION
 INTERPRETACION DE RESULTADOS SEGÚN NORMAS DE LA NCCLS


 PREPARACION DE INOCULOS
 HAY DOS TIPOS:
 1:METODOS DE CRECIMIENTO
 PREVIO; PARA MICROORGANISM.
 DE CRECIMIENTO RAPIDO
 CULTIVO CON MAS DE 24 H.
 CULTIVO EN MEDIO CELECTIVO:
 MAC CONKEY
 CULTIVO CON MUY POCAS COLONIAS
 SELECCIONAR 3 A 5 COLONIAS DE LA MISMA MORFOLOGIA TOCAR LA
PARTE SUPERIOR DE CADA COLONIA CON AZA TRANFERIR LAS COLONIAS A
UN TUBO QUE CONTENGA CALDO BHI,CALDO SOYA TRIPTICASA O CON
AGUA PEPTONADA INCUBAR A 35°C DURANTE 4H.APROXIMADAMENTE
LUEGO ESTANDARIZAR EL INOCULO HASTA ALACANZAR LA TURBIDEZ DE 0,5
MC FARLAND ANTES DE SEMBRAR EN EL MEDIO DE CULTIVO
 2:METODO DE SUSPENSIÓN DIRECTA; MICROORGANISMOS DE
CRECIEMIENTO FASTIDIOSO.
 CULTVO FRESCO CON 18 A 24 H DE INCUBACION
 SELECCIONAR DE 3 A 5 COLINIAS DE LA MISMA MORFOLOGIA TOCANDO
LA PARTE SUPERIOR DE CADA COLONIA CON UN AZA TRANFERIR LAS
COLONIAS DIRECTAMENTE EN: SOLUCION FISIOLOGICA A CALDO MUELLER
–HINTON E INMEDIATAMENTE SEMBRAR EN EL MEDIO DE CULTIVO
 PRUEBA DE SUCEPTIBILIDAD POR
DIFUSION BAUER-KIRBY

 PRINCIPIO DE ANTIBIOGRAMA
 Se basa en el uso de una cantidad constante del antimicrobiano
impregnado en un reservorio del papel filtro el cual al ser aplicado
sobre la superficie del agar en el que se ha sembrado el
microorganismo. En cu4stion formara por difusión un gradiente de
concentración del antimicrobiano cuya sensibilidad se indicara por
el tamaño del halo de inhibición de crecimiento alrededor del
disco
ANTIBIOGRAMA
APLICACIONES

 Útil para bacteria de rápido desarrollo como enterobacterias

algunas pseudomonas, acinoteobacter ssp, staphylococcus spp,
enterococos y vibrio cholerae.
 Puede usarse también para bacterias de crecimiento fastidioso
como streptococcus spp, haemophilus spp y neisseria spp.
 La lectura e interpretación debe realizarse bajo normas de la
national committe for clinical laboratory standars NCCLS.
 Todo el procedimiento se realizara siguiendo normas de garantía
de calidad