DETERMINACIÓN SIMULTÁNEA DE BROMATO,

CLORITA Y ÁCIDOS HALOACÉTICOS POR

CROMATOGRAFÍA DE IONES DE ELIMINACIÓN
BIDIMENSIONAL DE MATRIZ CON COLUMNAS
ACOPLADAS CONVENCIONALES Y CAPILARES

Paloma Castilla Ramírez

Carlos Omar Ramírez Beltrán
RESUME
N
METODOLOGÍA

Este método combina el CI (Cromatografía iónica)

convencional en primera dimensión con IC capilar en la
segunda dimensión junto con la detección de conductividad
suprimida.
La primera dimensión utiliza una columna de alta capacidad
para resolver parcialmente la matriz de los analítos
objetivo.Los analítos diana atrapados se entregaron a la
columna capilar para una mayor separación y detección. La
programación de la temperatura se usó para mejorar la
selectividad en la columna de segunda dimensión para
obtener una resolución completa de los analitos objetivo.
INTRODU
CCIÓN
DESINFECCIÓN DEL AGUA

La desinfección del agua es el proceso de eliminación de

microorganismos patógenos.
Ha ayudado a reducir significativamente la incidencia de
enfermedades transmitidas por el agua, como la poliomielitis
y el cólera.
Desinfectantes más comunes: cloro, dióxido de cloro y
cloraminas.
El ozono es otro tipo de desinfectante que es efectivo en el
tratamiento de organismos resistentes al cloro.
DESINFECCIÓN DEL AGUA
DESINFECCIÓN DEL AGUA

Sin embargo, durante el proceso de desinfección, los

subproductos de desinfección (DBP) se forman debido a la
reacción de los desinfectantes con la materia orgánica e
inorgánica natural en el agua de la fuente.
Estos DBP toman muchas formas, hasta la fecha se han
informado más de 600 tipos de DBP para los principales
desinfectantes utilizados.
ÁCIDO HOLOACÉTICOS

Los ácidos haloacéticos (HAA) son uno de los grupos más

prevalentes de DBP en el agua clorada.
Son altamente solubles en agua como aniones (rango de
pKa de ~0.7 a 2.8)
Se sospecha que la mayoría de ellos son agentes
carcinógenos y posibles amenazas para la salud, como
abortos espontáneos y defectos de nacimiento.
Cinco HAA comunes: HAA5: ácido monocloroacético
(MCAA), ácido dicloroacético (DCAA), ácido tricloroacético
(TCAA), ácido monobromoacético (MBAA), ácido
dibromoacético (DBAA)
(HAA) COMUNES

Nivel máximo de contaminación (MCL) de 60 􏰂 g / L en

agua potable (En EUA).
Han demostrado ser carcinógenos en animales incluso a baja
concentración.
MÉTODO
S
PRODUCTOS QUÍMICOS

Sales clorita
Potasio de bromato Bromuro (Br-)
Clorato (ClO3 -) Cloruro (Cl-)
Fluoruro (F-) Nitrito (NO2 -)
sulfato (SO4 2-) Nitrato (NO3 -)

Fosfato (PO4 3-)

Sales de sodio de
PRODUCTOS QUÍMICOS
Las soluciones madre para cada uno
de los productos químicos se
prepararon a una concentración de
1000 mg/L y se almacenaron en el
refrigerador a 4 ° C.
El estándar estándar de clorato se
preparó cada 2 semanas y se almacenó
protegido de la luz a 4 ° C.
Todos los estándares de trabajo se
prepararon diariamente con agua
diluida de un sistema de purificación
TKA Smart2Pure (Alemania) con una
resistencia específica de 18,2 M 􏰂
cm.
INSTRUMENTACIÓN

El control instrumental, la adquisición de datos y el

procesamiento fueron realizados por el sistema de datos de
cromatografía Thermo Scientific Dionex Chromeleon.
Eluyente: hidróxido de potasio (KOH) se generó a partir del
cartucho de EG mediante la alimentación en una corriente de
agua desionizada.
Separaciones en la segunda dimensión: se realizaron en
una columna capilar IonPac AS26 (0,4 mm x 250 mm) y una
columna de protección AG26 (0,4 mm x 50 mm).
ANÁLISIS DE MUESTRAS DE AGUA REAL

Se recogieron muestras de agua del grifo doméstico al

permitir que el grifo funcione durante aproximadamente 2
minutos.
Las muestras de agua embotellada se compraron en la
tienda de comestibles.
Se recogieron muestras de agua superficial de un lago y se
compararon con un recipiente de muestra de 500 ml.
Todas las muestras se almacenaron a 4 ° C en el refrigerador
antes del análisis. Las muestras se filtraron a través de un filtro
de 0,2 μm antes del análisis y se analizaron el mismo día.
CONDICIONES DEL EQUIPO

Columna primera dimensión: IonPac AS19 (240 􏰂 equiv /

columna), debido a su capacidad para manejar altas
concentraciones de matriz.
El hidróxido se eligió como eluyente porque proporcionaba el
mejor entorno para concentrar y capturar el pico de interés
en la columna para un análisis posterior en la segunda
dimensión.
Se realizó la separación en primera dimensión a 20 ° C para
preservar la integridad de la muestra en la primera
dimensión.
ANALÍTOS DE INTERES

Además de los analitos diana (BrO2-, ClO2-, HAA5), algunos

aniones comunes de interferencia (F-, Cl-, NO2-, Br-, ClO3-,
NO3-, SO42- y PO4 3-) también se incluyeron en el análisis
para garantizar que no interfirieron con los picos del analíto
objetivo.
RESULTA
DOS
CROMATOGRAMA DE PRIMERA
DIMENSIÓN
Se muestra el cromatograma de primera dimensión de una
solución estándar de oxihalogenuros y HAA5, así como aniones
de interferencia obtenidos usando la columna IonPac AS 19.
CROMATOGRAMA DE SEGUNDA
DIMENSIÓN
Se encontró que siempre aparecían algunos picos
desconocidos en el cromatograma de segunda dimensión,
pero no se veían en el cromatograma de primera dimensión.
Estos picos desconocidos se encontraron incluso en el
análisis de agua desionizada
CROMATOGRAMA DE SEGUNDA
DIMENSIÓN
Se creyó que estos picos desconocidos podrían ser los
compuestos de lixiviación de los materiales poliméricos del
tubo o la fase estacionaria de las columnas utilizadas.
Se usaron cuatro ventanas de corte en este estudio para
transferir solo los analitos objetivo a la columna de trampa.
La primera ventana de corte, 5.3-6.6 min, permitió la
desviación de bromato, clorita, MCAA y MBAA en la columna
de trampa, mientras que 7.4-8.3 min, 8.6-9.4 min y 13.4-15.0
min permitieron la desviación de DCAA, DBAA y TCAA en a
la columna de trampa, respectivamente.
CROMATOGRAMA DE SEGUNDA
DIMENSIÓN
Se creyó que estos picos desconocidos podrían ser los
compuestos de lixiviación de los materiales poliméricos del
tubo o la fase estacionaria de las columnas utilizadas.
Se usaron cuatro ventanas de corte en este estudio para
transferir solo los analitos objetivo a la columna de trampa.
La primera ventana de corte, 5.3-6.6 min, permitió la
desviación de bromato, clorita, MCAA y MBAA en la columna
de trampa, mientras que 7.4-8.3 min, 8.6-9.4 min y 13.4-15.0
min permitieron la desviación de DCAA, DBAA y TCAA en a
la columna de trampa, respectivamente.
CROMATOGRAMA DE SEGUNDA
DIMENSIÓN
Se empleó la columna capilar IonPac AS26 para el análisis
de la segunda dimensión. La química de esta columna
capilar proporcionó una selectividad diferente en
comparación con la química IonPac AS19.
Los resultados muestran que el aumento de la temperatura
condujo a un aumento en la resolución de los picos de ClO2-,
Cl-, BrO3-, MCAA y MBAA, pero disminuyó la resolución de
los picos DBAA y ClO3-.
Considerando que algo de ClO3- puede transferirse a la
columna de trampa debido a la estrecha elución con DBAA
en la primera dimensión, se empleó la programación de
temperatura para obtener una resolución completa.
CROMATOGRAMA DE SEGUNDA DIMENSIÓN A
TEMPERATURA Y GRADIENTE ÓPTIMOS

La separación se realizó primero a 35 ° C para mejorar la

resolución de los picos de ClO2-, Cl-, BrO3-, MCAA y MBAA;
y luego disminuya a 20 ° C a los 24 min para mejorar la
resolución de DBAA y ClO3-,
CROMATOGRAMA DE SEGUNDA DIMENSIÓN A
TEMPERATURA Y GRADIENTE ÓPTIMOS

Aquí, la temperatura ha demostrado tener un mayor impacto

en la mejora de la resolución de picos superpuestos y de
elución cercana.
DETERMINACIÓN DE LINEALIDAD Y
DETECCIÓN
La linealidad se midió mediante inyección estándar de
analitos diana a diferentes niveles de concentración por
triplicado.
Todas las curvas de calibración exhibieron una excelente
linealidad con coeficientes de correlación mayores a 0.998.
Los LOD y los LOQ se definieron como 3 y 10 veces la
desviación estándar del blanco, respectivamente.
Los LOD para el método optimizado de una dimensión
también se determinaron para la comparación. Los LOD para
el método 2-D variaron de 0,30 a 0,64 μg / l, que fueron
notablemente inferiores a los obtenidos por el método
unidimensional.
DETERMINACIÓN DE LINEALIDAD Y
DETECCIÓN
Los LOD para muestras de agua del grifo también se
determinaron para investigar el posible impacto matricial, se
obtuvieron excelentes límites de detección que variaron de
0,38 a 0,72 μg / l como se tabula
ANÁLISIS DE MUESTRAS DE AGUA

se aplicó el método 2-D propuesto para el análisis de

bromato, clorita y HAA5 en diversas muestras de agua. Se
analizaron las aguas superficiales, las aguas embotelladas,
el agua potable y el agua de reactivos para el nivel nativo de
estas especies y luego se fortificaron a diferentes niveles de
concentración.
El método exhibió una precisión aceptable con una
recuperación que oscilaba entre 90 y 116%, y una buena
precisión con una DSR menor del 6,1%
ANÁLISIS AGUA EMBOTELLADA UTILIZANDO EL
MÉTODO BIDIMENSIONAL

Demuestran que el método propuesto 2-D es un método

sensible y útil para la determinación de oxihaluros de bajo
nivel y HAA en una amplia gama de matrices de muestra.
CONCLU
SIONES
CROMATOGRAFÍA DE PRIMERA
DIMENSIÓN
Esta separación permitió establecer el tiempo de desviación
de los analítos objetivo para atrapar la columna y desviar los
iones de interferencia hacia el desecho.
CROMATOGRAFÍA DE PRIMERA
DIMENSIÓN
Del cromatograma, se pudo ver que ClO -, BrO -, 23 MCAA y
MBAA eran coeluyentes. Se propuso que dado que estos
cuatro compuestos eran analitos de interés, podrían
desviarse a la columna de la segunda dimensión para lograr
una separación suficiente.
CROMATOGRAFÍA DE SEGUNDA
DIMENSIÓN
Dado que algunos de los aniones potencialmente
interferentes también pueden eluir estrechamente con los
analitos diana, el tamaño de la ventana de corte también
determinó la cantidad de aniones interferentes que entran en
la columna de la segunda dimensión.
El tamaño de la ventana de corte puede afectar el número de
picos desconocidos en el cromatograma de segunda
dimensión, así como su intensidades pico.
Por lo tanto, se recomienda mantener el ancho de la ventana
de corte lo más pequeño posible para minimizar los picos de
interferencia de la primera dimensión, así como el número de
picos desconocidos, en la segunda dimensión.
CROMATOGRAFÍA DE SEGUNDA
DIMENSIÓN
Se debe asegurar que el ancho de la ventana cortada sea
adecuado para la captura completa de todos los analitos
objetivo sin ninguna pérdida
El efecto de la matriz de alta fuerza iónica en los tiempos de
retención de bromato, clorito y HAA5 también es un factor
crítico que debe abordarse
VENTAJAS

Comparado con el rendimiento del CI unidimensional, el

enfoque bidimensional dio como resultado un aumento
significativo de la sensibilidad para todos los analitos objetivo
con un límite de detección que oscila entre 0,30 y 0,64 μg / L
Se obtuvo una buena linealidad para todos los analitos
objetivo con coeficientes de correlación> 0,998.
El método permite la inyección directa de muestras y el uso
de columnas con diferente selectividad, por lo tanto, reduce
significativamente el nivel de resultados falsos positivos.