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5. Nevera y Congelador
6. Microscopio Invertido
7. Micro centrifuga
8. Depósito de Nitrógeno líquido
Autoclave
Cualquier recipiente, herramienta... Debe ser esterilizada
Tanque de Nitrógeno líquido
Congelación de líneas estables
Campana de Flujo Laminar
Esterilidad!! (no evita contaminación un mal uso)
Incubador CO2
Atmósfera controlada con elevada humedad y tensión de CO2
Micro Centrifuga
Suspensiones celulares (lavados, concentrados, subcultivos)
Microscopio Invertido
Esterilidad
Asepsia
Hábito de trabajo
Cultivos Primarios
(El principio de la historia.....)
Ventajas Desventajas
Economía
Medios de Cultivo: Medios Base
Previamente a la realización de
experimentos los medios deben ser
probados a diferentes niveles.
1. Posible Contaminación
2. Niveles de Proliferación Celular
(eficiencia)
Elección del medio de cultivo
adecuado a cada línea celular
Se deben realizar diferentes pruebas con
varios medios de cultivo en la elección del
medio más adecuado a las características de
nuestra línea.
Subcultivo
Confluencia
Tiempo de duplicación
Criogenización
Ciclo celular: Fases G1,S,G2,M y G0
¿Qué son y cómo se realizan
los subcultivos?
Objetivos:
i. Propagación de la línea celular
ii. Producción de células para la experimentación
1. Células en suspensión
Tripsinización.