Costa L.Valia ; Gomez M.

Andrea ; Manrique Gabriela ; Vargas Llana Diego

 Haematococcus sp
INTRODUCCIN Microalga unicelular
biflagelada, proveniente de
las algunas de Ica, Per
Produccin de Astaxantina
Extraccin de protenas
solubles
Produccin de
Astaxantina
INTRODUCCIN: IMPORTANCIA DE
ASTAXANTINA

Entre
10 y 800 veces ms poderoso
que los antioxidantes comunes.
Introduccin: Patentes clnicas de Astaxantina
Previene los daos del estrs y fortalece el sistema inmunolgico.
(Patente # 6,265,450 (Hans Selye Canad 2001)
Previene la degeneracin macular y prdida de la visin
relacionada con el envejecimiento.
(Patente # 5,527,533 (Tso, Mark O.M., Lam; Tim-Tak 1996)
Evita los daos provocados por los rayos ultravioleta.
(Patente, # 6,433,025 (Lorenz, R. Todd 2002))
Excelente para deportistas
(Patente # 6,245,818 (Lignell 2001))
Introduccin: Patentes clnicas de
Astaxantina
Potente antiinflamatorio
(Patente #6,258,855 (Lorenz, R.Todd 2001))
Prevenir el cncer
(Patente #6,277,417 (Anderson Mark 2001))
Ayuda a la fertilidad
(Patente # 6,410,602 (2002))
Previene la cada del cabello
(Quiroz 2005)
Introduccin: Extraccin de protenas
solubles
Haematococcus pluvialis tiene
alto contenido de protena.
Comparacin con caseinato de
sodio (EC:
664 30 mL oil g1 protein, ES:
63 4%, and EAI: 56 4 m2 g1).
Resultados destacaron que la
protena de Haematococcus sp
es un buen agente
emulsificante.
UPSTREAM
PROCESSING
P-graph USP
OBTENCIN DEL CULTIVO MADRE DE
HAEMATOCOCCUS PLUVIALIS

Quistes de la
laguna de Ica,
Per 3 das de
inoculacin de
quistes.

fase
macrozoide a
los 5 das de
incubacin.
fase microzoide con flagelos a los 5 das de
incubacin.
COMPOSICION DEL MEDIO

Fuente de Carbono
Fuente de Nitrgeno
Fosforo
Macronutrientes
Micronutrientes
pH
 Acetato de
Sodio Fotoperiodo
- 0.1g/L - 12h:12h
- Ausencia - 18h:6h

Agitacin Tipo de luz

- 6 veces/dia - LED roja
- 2 veces/dia - LED blanca

Bicarbonato
- 1g/L
- Ausencia
LOS
PARMETROS
UTILIZADOS
PARA EL
ESTUDIO DE
CADA
VARIABLE
ACETATO
TEMPERATURA
PRESENCIA O
AUSENCIA NO CO2 Y AGITACION
21C
TUVO MAYOR
RELEVANCIA TEMPERATURA -BICARBONATO
(INFLUENCIA NO OPTIMA EN DE SODIO
DETERMINADA) HABITAD (FOTOSINTESIS)
NATURAL -AGITACION
(INFLUENCIA NO
DETERMINADA)
FOTOPERIODO
TIPO DE LUZ
12:12 INTENSIDAD
BLANCA (LED) LUMINICA
+ BIOMASA 2000 LUX
CELULAR + BIOMASA
CELULAR
4000 LUX
PRODUCCION
DE AXT
(NO
REALIZADO)
PH

CONCENTRACION DE SALES (ENQUISTAMIENTO)

7.5 (OPTIMO CERCANO A
LA NEUTRALIDAD) PRODUCCION DE BIOMASA
NaCl (0.8%- 2%)
(PRODUCCION DE AXT)
ESCALAMIENTO
STRESS SALINO
 1 . PURIFICACION
2 . GRAN MEDIO LIQUIDO+INO
(ESTRS)

ESCALAMIENTO 3 . VIABLES (FRASQUITO

PEQUEO) 1Oml

5 . 1L (8 DIAS)

4 . FRASQUITOS DE PAPILLA
6 . VERTIDO AL FOTOBIORREACTOR
COND. ESTERILIDAD E ILUMINACION

PROD. BIOMASA
(1ER TANQUE)

PROD. AXT
(2DO TANQUE)
DOWNSTREAM
PROCESSING
 Induccin
Filtracin Secado
del estrs

ESL con
Enfriamiento
TLC aceite de
y envasado
soya
ESTRS DE LA BIOMASA

Se agreg NaCl al 2%.

El Haematococcus pluvialis
genera astaxantina ante altas
concentraciones salinas.
Realizado en el biorreactor.
FILTRACIN
Filtracin al vaco.
-60KPa.
Eliminarla mayor cantidad
posible de medio restante.
Recuperacin de la torta.
Debris celular y
compuestos de inters.
SECADO
Mufla a 70C durante 4
horas.
Eliminar el medio lquido
restante.
Astaxantina es
termorestable.
Polvo seco listo para ESL.
THIN LAYER CHROMATOGRAPHY

Fase mvil: acetona y ter

de petrleo.
Muestras de la fase
superior y la inferior.
Rf de aceite: 0.46
Rf de agua: 0.95
Identidad: monosteres de
astaxantina.
ENFRIAMIENTO Y ENVASADO

Se dej enfriar a
temperatura ambiente.
Decantacin.
Presentacin final en viales
pequeos.
Propuesta de elaboracin
de aceite comercial con
astaxantina.
DISEO DEL
BIORREACTO
R
MATERIALES Y DIMENSIONES
Vessels Vidrio Sodo-Clcico

Bases Acrlico

Soporte Varillas de metal

Entradas Mangueras y Vlvulas

/Salidas de plstico

Aireacin/
Bomba de Pecera
Agitacin

Iluminacin Cintas LED

DIMENSIONES DISEO EN 3D
CARACTERISTICAS Y CONDICIONES
OPERATIVAS

REACTOR REACTOR
CARACTERISTICA
PRIMARIO SECUNDARIO
Altura (cm) 16 16
Dimetro (cm) 10 8
H/D 1.6 2
Volumen Total (cm3) 1.2 L 0.8 L
Volumen til (cm3) 942 600
rea de Iluminacin
502.656 cm2 No se necesita
(cm2)
Feed- Batch
Tipo Feed- Batch
CARACTERISTICAS Y CONDICIONES OPERATIVAS

REACTOR PRIMARIO
Medio de Cultivo : Bristol
T : 21 C (Ambiente)
Luz : LED Blanca sobre toda el rea del reactor
Fotoperiodo: 12 h 12 h
Agitacin: Continua
pH: 7 (Neutro)

REACTOR SECUNDARIO
Medio de Cultivo : Bristol + Solucin Salina NaCl 2 %
T : 21 C (Ambiente)
Agitacin: Continua
No requiere de luz
pH: 7 (Neutro)
 CARACTERISTICAS Y
CONDICIONES OPERATIVAS
REACTOR PRIMARIO
Entrada: Medio Liquido Estril + Inculo
Entrada: Aireacin
Salida: Muestreador ( pH, T, Concentracin celular)
Salida que conecte al reactor secundario: Salida de
Biomasa en fase Vegetativa.

REACTOR SECUNDARIO
Entrada: Biomasa procedente del reactor primario
Entrada: Aireacin
Entrada: Suspensin Salina para causar estrs celular
Salida: Salida de Biomasa en fase Enquistada para
recuperacin de Astaxantina.
PRESUPUESTO
COSTO TOTAL S/. 107.5

ITEM PRECIO
Acrlicos 40
Corte de Acrlicos 25
Varillas y Tuercas 15
Silicona y Jebes 16
Vessels 19.5
Luces 15
Mangueras y vlvulas 7.5
Soldimix 5.5
Bomba de Pecera 15
Transformador para Luces 25
Otros 4
TOTAL 187.5
PRODUCCION
Y ANALISIS DE
ASTAXANTINA
CURVA DE CRECIMIENTO

FASES DE CRECIMIENTO
Fase de latencias ( fin ) 12 da
Fase exponencial 10 da
Fase estacionaria despus de los 24 das
Densidad mxima da 22
 Produccin de
Esterilizacin de Purificacin de la biomasa
quistes la micro alga
(escalamiento)

Induccin de
Secado Filtracin
estrs con sales

Producto final:
Extraccin Slido
aceite
- Lquido con
enriquecido con
aceite de soya
Astaxantina
CROMATOGRAFA EN CAPA FINA (TLC)
FASE ESTACIONARIA

FASE MVIL
REFERENCIAS (M. Borowitska, Liaaen
Jensen 1998)

RESULTADO

RF= 0.48