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Tema 7

Expresin gnica:
transcripcin

Dr. Antonio Barbadilla

1
Objetivos tema 7
Expresin gnica: transcripcin
Debern
Debern quedar
quedar bien
bien claros
claros los
los siguientes
siguientes puntos:
puntos:

El dogma
El dogma central
central del
del flujo
flujo de
de la
la informacin
informacin gentica
gentica ->
->
el
el RNA
RNA como
como intermediario
intermediario
Propiedades del
Propiedades del RNA
RNA
Clases de
Clases de RNA
RNA
El mRNA,
El mRNA, elel mensajero
mensajero
La transcripcin:
La transcripcin: iniciacin,
iniciacin, elongacin
elongacin yy terminacin
terminacin
La transcripcin
La transcripcin en
en eucariotas:
eucariotas: modificaciones
modificaciones
(procesamiento)
(procesamiento) transcripcionales,
transcripcionales, intensificadores
intensificadores
Transcripcin inversa
Transcripcin inversa yy todas
todas las
las posibles
posibles direcciones
direcciones del
del
transferencia
transferencia dede informacin
informacin gentica
gentica
Actividad
Actividad enzimtica
enzimtica deldel RNA
RNA
RNA de
RNA de interferencia
interferencia (RNAi)
(RNAi)
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El dogma central del flujo de la
informacin gentica

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Propiedades del RNA

Una cadena, no doble hlice.


Apareamiento intramolecular -> RNA
contorsionista molecular
Azcar ribosa (OH en el carbono 2)
Esqueleto azcar-fosfato en posiciones
5-3 del azcar como DNA
Uracilo en vez de Timina, se empareja
con Adenina, y tambin con Guanina
cuando se pliega (no en la transcripcin).
Catalizador biolgico -> Ribozima

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RNA: contorsionista molecular
El emparejamiento intramolecular de nucletidos produce un
plegamiento de la molcula de RNA

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RNA vs DNA

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Tipos de RNA

RNA mensajero (mRNA)

RNA funcional

RNA de transferencia (tRNA)


RNA ribosmico (rRNA)
RNA nuclear pequeo (snRNA)
MicroRNA (miRNA)
RNA de interferencia pequeo (siRNA)

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TRANSCRIPCIN
Funcin: la formacin del transcrito de RNA
mediante la catlisis de la unin de
nucletidos libres a la cadena molde del
DNA formando una monohebra de RNA.

Propiedades que hacen posible la sntesis del transcrito de RNA

1. COMPLEMENTARIEDAD ENTRE BASES


A-U, C-G, G-C, T-A

2. UNIN DE PROTENAS ESPECIFICAS AL DNA (RNA


Polimerasa y otras protenas que actan como factores de
transcripcin).

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Nomenclatura de las
cadenas en relacin
a la transcripcin

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Orientacin y nomenclatura de las cadenas en
relacin a la transcripcin

(5) CGCTATAGCG (3) cadena codificadora del


DNA
(3) GCGATATCGC (5) cadena molde del DNA

(5) CGCUAUAGCG (3) transcrito de RNA

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Qu cadena de la doble hlice es la
codificadora?

Depende de cada gen, no es un


propiedad del cromosoma.

Orientacin de la transcripcin

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Orientacin de la transcripcin

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Orientacin de la
transcripcin de
los genes del
cromosoma 13
humano alrededor
del gen BRCA2

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RNA polimerasa
Enzima compleja, no requiere primer
(cebador), no funciona la correccin de
errores

Procariotas: slo un tipo. Con mltiples


subunidades.
E. Coli :

factor sigma iniciacin + CORE


(holoenzima)

Eucariotas: 3 tipos
I -> rRNA
II -> mRNA
III -> tRNA, snRNA, rRNA 5S
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RNA polimerasa
PROCARIOTAS
En procariotas una sola polimerasa (RNA
Polimerasa) se encarga de transcribir el DNA en
las diferentes clases de RNA

ESTRUCTURA (E. coli)


Se compone de 5 subunidades: 2 subunidades
idnticas, , , , ms el cofactor .
El cofactor tiene la propiedad de disociarse del
resto de subunidades durante el proceso dejando
el ncleo central de la enzima al descubierto.
HOLOENZIMA = 5 subunidades (con cofactor )
ACTIVA
APOENZIMA = 4 subunidades ( el cofactor
disociado) INACTIVA
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RNA polimerasa
PROCARIOTAS

2 subunidades = ensamblan el enzima


y promueven interacciones
APOENZIMA = 4 subunidades
= actividad cataltica
= se une al DNA
= ensamblaje y regulacin expresin
= Se une a las regiones promotoras
y posicional a la holoenzima en el sitio
de inicio

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RNA polimerasa
Ciclo de la RNA pol bacteriana

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Etapas de la transcripcin
Iniciacin:
Secuencias promotoras (se une la RNA polimerasa)
Procariotas: Secuencias consenso Pribnow (-10
pb aguas arriba) y regin -35 pb

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Etapas de la transcripcin
Iniciacin:
Secuencias promotoras (se une la RNA polimerasa)
Procariotas: Secuencias consenso Pribnow (-10
pb aguas arriba) y regin -35 pb

Eucariotas: Caja TATA (-25 pb) y CAAT (-70


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pb)
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Etapas de la transcripcin
Iniciacin:
Secuencias promotoras (se une la RNA polimerasa)
Procariotas: Secuencias consenso Pribnow (-10
pb) y regin -35 pb
Eucariotas: Caja TATA (-25 pb) y CAAT (-70
pb)

Elongacin:
5->3
Enrollamiento aguas arriba (5) y desenrollamiento
aguas abajo (3) del DNA

Terminacin:
Dependiente del factor Rho
Independiente de Rho
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Etapas de la transcripcin
Iniciacin:
Secuencias promotoras (se une la RNA polimerasa)
Procariotas: Secuencias consenso Pribnow (-10
pb) y regin -35 pb
Eucariotas: Caja TATA (-25 pb) y CAAT (-70
pb)

Elongacin:
5->3
Enrollamiento aguas arriba (5) y desenrollamiento
aguas abajo (3) del DNA

Terminacin:
Dependiente del factor Rho
Independiente de Rho
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Terminacin: DNA Palndrome
estructura secundaria

Palndrome:

dabale arroz a
la
zorra el abad

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Terminacin:
mecanismo intrnseco ->
DNA Palndrome,
estructura tallo-bucle

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Regin 3 no traducida de ~ 40 bases (3UTR)


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Estructura del gen y el mensajero
procariota

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Transcripcin Eucariotas
RNAs Polimerasa en Eucariotas
1- Existen tres tipos de RNA polimerasa

La I, la II y la III

RNA polimerasa I, 13 subunidades. Se localiza en el


ncleo y en el nucleolo. -> Sntesis de rARN 45S.

RNA polimerasa II, 12 subunidades. Se localiza en el


nucleoplasma. -> Sntesis de los hnRNA (transcrito
primario), los precursores de los mRNA.

RNA polimerasa III, 17 subunidades. Se localiza en el


nucleoplasma. -> Sntesis rRNA 5S y tRNA.

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Transcripcin Eucariotas

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28
Transcripcin
Eucariotas

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29
Transcripcin
Eucariotas

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Transcripcin Eucariotas

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31
Transcripcin Eucariotas

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Eliminacin de intrones por corte y empalme (splicing)

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Reaccin transesterificacin
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Regla GU-AG

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34
Empalmosoma
(Spliceosome)

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35
Autosplicing en Tetrahymena (Tom Cech 1981)

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RIBOZIMA
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Estructura mensajero eucariota

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37
Flujo de la
informacin en
eucariotas

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Diferencias eucariotas - procariotas

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Diferencias eucariotas - procariotas

Caracterstica Procariota Eucariota

Promotor Cajas y zona operadora Solo cajas

Cistrn Policistrones Monocistrones

una sola, con 5 subunidades


RNA polimerasa 3 RNA polimerasas.
distintas

Contiene, al comienzo de la cadena, 7-metil-


Estabilizacin El RNA recin transcrito, no
guanosina o CAP, y al final de la cadena, una
tiene.
secuencia poli A.

RNA pol, necesita la presencia de protenas de


Comienzo RNA pol, se autoacopla al iniciacin, que se unan antes que ella al ADN.
promotor

Intrones No tiene Tiene y se eliminan mediante splicing (corte y


empalme).
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Lugar de accin Inmediatamente, al ser creado En el citoplasma.

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Transcripcin inversa

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El dogma central revisado

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RNA World

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RNA de interferencia

RNA interference

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MicroRNAs

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Links de inters

DNA, RNA, protein


Image Library of Biological Macromolecules - DNA
DNA berkeley
DNA Learning Center
Beginner's guide to Molecular Biology
Glosario de Gentica molecular
Central Dogma
Animacin de la transcripicin
Animacin del splicing
Animacin del RNA de interferencia

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