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Biotecnol
Biotecnol
Biotecnologa
Vegetal en la
Fitopatologa
Qu es la Biotecnologa ?
La Biotecnologa es toda aplicacin tecnolgica que
utilice sistemas biolgicos u organismos vivos o sus
derivados para la creacin o modificacin de
productos o procesos para usos especficos.
Convenio sobre Diversidad Biolgica,1992
Biotecnologa Vegetal
Conjunto de tcnicas de cualquier tipo,
empleadas sobre vegetales como organismos
enteros o sobre alguna de sus partes (tallos,
hojas, orgnulos etc.)
Virologa
Biologa
Fisiologa Molecular
Vegetal
Biotecnologa
Vegetal
Botnica
Bioqumica
Biologa
Agricultura
Celular
Historia de la Biotecnologa Vegetal
Biotecnologa tradicional
Descubrimiento de la agricultura (8000-7000 ac)
Fabricacin de cerveza de los sumerios (6000 ac)
Elaboracin del vino en Mesopotamia (5000-4000 ac)
Produccin del pan en Egipto (4000-3000 ac)
Biotecnologa Clsica (siglo XIX)
La finalidad principal es la mejora de
distintas plantas para obtener variedades
con las caractersticas seleccionadas
Introduccin consciente de la diversidad
gentica en las poblaciones cruzando
progenitores con caractersticas notables
Es ptima para el manejo de
caractersticas que depende de la
interaccin de muchos genes
Biotecnologa moderna (a
partir 1970)
Se apoya en la puesta en
prctica de la ingeniera
gentica, consiste en introducir
informacin gentica nueva en
un organismo para dotarlo de
capacidades que antes no
posea
Ofrece mejoras para
caracteres que dependen de
un nmero de genes reducido
Ventajas y desventajas de la
Biotecnologa
1) Ventajas
Rendimiento superior
Reduccin de pesticidas
- Perdida de biodiversidad
- Problemas ticos
Plantas transgnicas
Produccin
plantas
transgnicas
Protoplastos vegetales
Haploides
Propagacin clonal rpida
Aplicaciones en Fitopatologa:
- Aporta estabilidad gentica o ausencia de mutaciones
Se Replica:
Produce copias exactas de ciertas partes de cada molcula de DNA o del
todo el genoma.
Las copias:
Permanecen en la misma clula.
Son distribuidas en cada una de las clulas hijas
Es Transcrito en RNA: este puede ser:
RNA ribosomal (RNAr).
RNA de transferencia (RNAt).
RNA mensajero (RNAm) Son los nicos que pueden traducirse a
protenas
Casi todos los RNAs son Procesados son modificados por la
clula antes de que maduren.
Gen
Definicin Cada segmento de DNA que es transcrito
en un RNA funcional.
Cuando se expresa? Cuando se transcribe a RNAm.
Proceso:
RNAm
Traduce
Protena
Transloca
Locus adecuado
RNAm
T.I
DNAc
Plsmido bacteriano
DNA pol
Sobreviven Mueren
7. Se aslan las bacterias resistentes
Permiten estudiar:
La estructura y disposicin de los genes en el genoma.
Las secuencias de DNA que delimitan a los genes.
Cmo se obtienen?
Se aslan por separado
DNA se purifica y se
DNA degrada parcialmente por
E.R Enzimas de Restriccin
Actualmente se ha logrado:
Transferir.
Incorporar. Ciertos genes clonados de
Expresar
3. Vectores que se utilizan
para clonacin gentica en
plantas
Vectores:
Son aquellos organismos capaces de transferir material gentico de un
organismo a otro
- El material gentico
persiste.
- Se expresa en la clula
Donador Receptor
receptora
Los ms utilizados:
Plsmido de la bacteria fitopatgena Agrobacterium tumefaciens.
El virus del mosaico de la coliflor
Otros en estudio:
Geminivirus Con DNA de una sola banda.
Virus del mosaico del tabaco Con un RNA de una sola banda.
Otros virus.
Transposones
I. Plsmidos bacterianos como vectores
Cepas virulentas de
A.tumefaciens
Formacin de tumores
Induce
Infectan
AGALLAS DE LA CORONA
Si entra en contacto con una planta ya lesionada
Planta lesionada
Problemas:
Demasiado grandes.
Difciles de manipular desde el punto de vista gentico.
Las clulas infectadas se transforman en clulas tumorosas Es
difcil regenerarlas como plantas completas
Clulas Tumorosas
Clula infectada
Difcil regenerar
Ventajas:
Ninguno de los genes incluidos dentro del DNA T son necesarios para
que ocurran la transferencia e integracin de ese DNA.
El material gentico de las clulas animales, bacterianas y vegetales
no emparentadas que se insertan en el DNA T:
Se transfieren al genoma nuclear de la planta.
Los genes solo se expresan cuando la regin promotora del gen
de la opina sintetasa se incorpora al gen extrao Gen
Quimrico.
P P
DNA T
Gen quimrico
Kanamicina r
Problema del gran tamao:
a) Se utiliza un plsmido Ti no tumoroso:
Se conservan las secuencias terminales del DNA T.
Los genes entre las regiones terminales de DNA T se sustituyen
por un pequeo plsmido de E.coli..
El DNA del gen extrao tambin se clona en otro plsmido pBR32
Gen extrao
Regin pBR32
Secuencias terminales
del DNA T Gen extrao
+ +
Recombinacin en
la regin pBR32 Regin
Plsmido Ti Regin pBR32 pBR32
a) Clonar regiones:
Se van a clonar:
Regiones terminales del DNA T (junto con los genes extraos
que comprende) en un plsmido pequeo.
Regin de virulencia en otro plsmido similar.
Por si solos ningn plsmido causa infeccin.
Pero si:
Miniplsmido Ti es virulento
Virulencia
DNA T y el gen o genes
extraos que contienen Se
integran a los cromosomas de
DNA T
la planta.
El conocimiento sobre l:
Conocimiento relacionado a la patologa de este agente
fitopatgeno.
Capacidad para transferir selectivamente de un planta a otra los
genes que confieran resistencia.
Protenas de la cpside
Geminivirus
idnticas
DNAs con diferente
secuencia de nucletidos
Elementos extracromosmicos.
Elementos cromosmicos.
Elementos transponibles o transferibles
Elemento hbrido
Elementos extracromosmicos
1. Incorporacin:
De DNA en fragmentos cromosmicos o plsmidos.
De cromosomas completos en protoplastos vegetales.
Cmo se hace?:
Mezclar c. nucleico + Protoplastos.
En presencia de cationes Polietilenglicol.
Medio con
Polietilenglicol
cationes
c. nucleico Protoplasto
1. Electroporacin o
electrotransformacin:
Tratamiento de un mezcla
de protoplastos vegetales y
de DNA extrao Pulso elctrico
Con breves pulsos
elctricos:
Rompe temporalmente la
membrana celular
Permite que el DNA extrao Mezcla
penetre en la clula.
El DNA extrao puede
expresarse despus y los
protoplastos convertirse en Expresin
plantas. del DNA
Para plantas
monocotiledneas y
dicotiledneas.
1. Microinyeccin directa del cido nucleico en
clulas vegetales:
Es una tecnologa que permite la introduccin mecnica
de soluciones en el interior de la clula mediante una
micropipeta.
Es una tcnica muy sensible.
1. Inclusin del DNA o RNA en liposomas y fusin
de estos con los protoplastos.