Inactivacin Epigentica de la reparacin

del ADN en cncer de mama

Laboratorio de Gentica General

Lorena Torres

Introduccin

El genoma humano controla el destino

celular de una manera muy sistemtica,
precisa. El ADN genmico est bajo asalto
constante que a menudo resulta en
alteraciones
potencialmente
transformacin de una clula normal a una
lesin precancerosa. La acumulacin de
estos cambios o mutaciones en el tiempo
con el tiempo conduce al cncer con el
crecimiento celular incontrolado

Introduccin

Mecanismos
genotxicos:
Implican
cambios en secuencias de ADN genmico
que conducen a mutaciones
Mecanismos no genotxicos: Modulan la
expresin gnica directamente

Introduccin

Las mutaciones pueden ser ya sea congnita o

adquirida y son causadas tanto por agentes
endgenos y exgenos.
crecimiento celular desregulada y la apoptosis
en el cncer se deben a cambios genticos y
epigenticos
tales
como
mutaciones
puntuales,
deleciones,
duplicaciones,
inserciones,
translocaciones,
aberraciones
cromosmicas, infecciones virales.

Introduccin
La epigentica acta como promotor de inactivacin
de la hipermetilacin y la desacetilacin de histonas.
Estos mecanismos pueden afectar la secuencia de
ADN, pero en ltima instancia, cambiar la funcin y
regulacin de los productos de los genes o dar lugar a
ganancias / prdidas de la funcin de los genes
crticos.
Prdida de la funcin de p53: Inestabilidad
genmicacambios metablicos, insensibilidad a las
seales de apoptosis, invasin y la motilidad.

Introduccin

Una mutacin de inactivacin en el gen

supresor de tumores conduce a la hiperproliferacin de las clulas epiteliales y / o
la inactivacin de genes de reparacin del
ADN. La misma mutacin puede inactivar
varios ms genes supresores de tumor
antes de la resultante en el cncer.

Introduccin

Modificaciones Epigenticas
Las protenas de la cromatina asociadas con el ADN
pueden ser activados o silenciados.
La cromatina se regula dinmicamente para impactar
diferente celular procesos, a menudo a travs de
modificaciones post-traduccionales en las histonas.
Modificaciones de las histonas incluyen acetilacin,
metilacin, fosforilacin, sumoilacion, poli (ADP)
-ribosilacin, y Ubiquitinacin.

Modificaciones Epigenticas

Modificaciones Epigenticas

Las modificaciones pueden alterar la carga electrosttica de la histona

resulta en un cambio estructural en las histonas o su unin a ADN.
Las alteraciones pueden actuar tambin como sitios de unin para los
mdulos de reconocimiento de protenas, tales como el redes eltricas
de bromo y cromo, que reconocen lisinas acetiladas o lisinas
metiladas, respectivamente.
- Histona acetilato acetiltransferasas: inducen descondensacin de la
cromatina
- Histonas desacetilasas (HDAC): que eliminan los grupos acetilo y
promueven una unin ms fuerte de las histonas al ADN
- Histonas metiltransferasas (HMTs): que promueven o inhiben la
transcripcin dependiendo de la histona residuo diana
- Histonas desmetilasas (HDM), que contrarrestan los HMTs

1. Metilacin

Metilacin del ADN es una modificacin

qumica covalente, que resulta en la adicin
de un grupo metilo (CH3) en la posicin del
carbono 5 del anillo de pirimidina o citosina
(dinucletido CpG) el nitrgeno nmero 6
del anillo de purina adenina.

1. Metilacin
Lametilacin
de
mantenimiento
es
responsable de agregar grupos metilo a la cadena
recin sintetizada de DNA en posiciones opuestas
a los sitios metilados de la cadena progenitora,
garantizando que las molculas de DNA hijas
conserven el patrn de metilacin de la molcula
progenitora, heredndose despus de la divisin
celular
Lametilacin de novo aade grupos metilo en
posiciones totalmente nuevas y, as cambia el
patrn de metilacin en una regin localizada del
genoma

1. Metilacin

La metiltransferasa de ADN es responsable del

establecimiento y mantenimiento de los patrones de
metilacin de ADN que se traduce en la represin de
genes estables a largo plazo.
Sin embargo, hay diafona significativa entre la
metilacin de ADN y la modificacin de las vas de
histonas, que est mediada por las interacciones entre
HMTs (Histonas Metiltransferasas) y Metiltransferasas de
ADN

1. Metilacin
06- metilguanina metiltransferasa (MGMT), gen que codifica una
protena de reparacin del ADN que elimina grupos alquilo desde la
posicin O6 de la guanina, un importante sitio de alquilacin de ADN.
La protena metilguanina metiltransferasa reconoce especficamente
laO6- metil guanina, una guanina con un grupo metilo en
elcarbonilodelcarbono6.
Esta guanina alterada no se aparea con lacitosina, sino con latimina,
por lo que lareplicacinde ese ADN originara una mutacin. Una vez
reconocida la lesin, la metil guanina metil transferasa transfiere el
grupo metilo de la guanina a una cistenade la propia protena.
Una molcula de MGMT puede transferir un solo grupo metilo ya que
la metilacin de la cistena inutiliza la protena para otras
transferencias y la protena inactivada es degradada por la va
proteoltica de laubiquitina.

1. Metilacin
Factores que alteran los niveles de metilacin del
ADN sin cambios en la secuencia del ADN genmico:
- Envejecimiento: ADN hipometilados en
hipermetilados
- Dieta: Nutrientes para las vas metablicas
- Agentes presentes en el ambiente:
Arsnico: Produce hipometilacin del gen RAS
Cadmio: Induce a la hipometilacin global,
inactivando DNMT (metiltransferasa)

2. Acetilacin
La adicin del grupo funcional COCH3 o acetilacin
de los residuos de lisina en el extremo N de las
protenas histona elimina cargas positivas,
reduciendo as la afinidad entre las histonas y el
DNA.
Esto hace ms fcil para el ARN polimerasa y
factores de transcripcin
acceder a la regin
promotora. Por lo tanto, en la mayora de los
casos, la acetilacin de histonas aumenta la
transcripcin mientras que la desacetilacin de
histonas reprime la transcripcin.
Los grupos acetilo se transfieren comnmente a
partir de acetil-CoA a la coenzima A, que es un
intermedio en la sntesis biolgica, as como en el
fracaso de muchas molculas orgnicas.

2. Acetilacin
Los cambios de acetilacin y / o
Desacetilacin en la histona se
observan en una variedad de
cnceres:
-

Cncer
Cncer
Cncer
Cncer
Cncer
Cncer

de mama
de prstata
de colon
testicular
renal
Pancretico

2. Acetilacin
Acetilacin de histonas es catalizada
por la histona acetiltransferasas (HAT)
y la desacetilacin de histonas es
catalizada por las HDAC (histona
deacetilasa).
Se han identificado varias formas
diferentes de estas enzimas. Entre
ellos, CBP / p300 es probablemente el
ms importante, ya que puede
interactuar con numerosos reguladores
de la transcripcin, incluyendo p53.

2. Acetilacin
Elimina las cargas positivas, reduciendo as la
afinidad entre histonas y ADN. Esto hace que la
ARN polimerasa y factores de transcripcin ms
fcil acceder a la regin promotora.
As, acetilacin de histonas tiende a abrirse
estructura de la cromatina.
- histona acetiltransferasas (HAT) tienden a ser
activadores transcripcionales
- histona deacetilasa (HDAC) tienden a ser
represores.

2. Acetilacin

Hiper-acetilacin de las histonas

conduce a la activacin de ATM que
es un gen ataxia telangiectasia
mutado que sndrome de Louis-barr.

3. Ubiquitinacin
Es una actividad enzimtica de modificacin proteica
post-traduccional (PTM) en el que el cido carboxlico
de la glicina de terminal desde di-glicina de la
ubiquitina activada, forma un enlace amida a la amina
psilon de la lisina en la protena modificada.

3. Ubiquitinacin
Funciones del sistema de Ubiquitinacin:
El procesamiento de antgenos
La apoptosis
La biognesis de orgnulos
Ciclo celular y la divisin
La transcripcin del ADN y la reparacin
La diferenciacin y el desarrollo, la respuesta inmune y
la inflamacin
Degeneracin neuronal y muscular
La morfognesis de las redes neuronales
La modulacin de receptores de superficie celular,
canales inicos y la va secretora, l
La respuesta al estrs y moduladores extracelulares
La biognesis de ribosomas, y la infeccin viral

4. Fosforilacin
La fosforilacin es la adicin de un grupo fosfato a una
protena u otra molcula orgnica.
Eventos de fosforilacin puede activar o desactivar
muchos genes y por lo tanto, la fosforilacin reversible de
las protenas es un importante mecanismo de regulacin.
- Quinasas = Fosforilacin
- Fosfatasas= Desfosforilacin
La fosforilacin por lo general ocurre en los residuos de
serina, treonina, tirosina e histidina.

4. Fosforilacin

Puesto que la regulacin epigentica de la expresin

gnica desempea un importante papel en la regulacin
de una variedad de procesos celulares incluyendo la
expresin de genes, la replicacin del ADN, la
reparacin del ADN, el vstago de mantenimiento
celular y la diferenciacin, y dado el papel causal de la
epigentica en una variedad de enfermedades
humanas,
incluyendo
la
carcinognesis
y
el
envejecimiento.
Analizamos a continuacin la posible aplicacin de la
epigentica
para
el
diagnstico,
pronstico
y
tratamiento del cncer de mama.

Modificaciones Epigenticas en
Cncer de mama

La alta heterogeneidad histolgica y molecular de la

enfermedad representa una amenaza significativa a la terapia.
Varios subtipos de los cnceres de mama que presentan
distintos comportamientos clnicos y respuestas a las terapias:
Los cnceres luminal o basal, receptor de estrgeno (ER) y / o
receptor de progesterona (PR) y /o el factor de crecimiento
epidrmico humano receptor 2 (HER2) positivo o el cncer de
mama negativo.
Recientemente una clasificacin adicional describi como un
fenotipo claudina-baja se ha descrito que se correlacionan de
mal pronstico en la clnica.

Modificaciones Epigenticas en
Cncer de mama

Modificaciones Epigenticas en
Cncer de mama

La hipermetilacin del ADN indica que los

genes se desactivan en los tumores de
mama.
Curiosamente, la prdida de 40% de la
citosina metilada se observa en tumores
de mama.
Los genes importantes en el cncer de
mama familiar son tambin silenciados
epigenticamente.

Modificaciones Epigenticas en
Cncer de mama

Muchas mujeres con cncer de mama terminan

siendo sobre-tratada o sin el tratamiento debido
a la falta de biomarcadores fiables.
Las modificaciones epigenticas son un
biomarcador prometedor para esta enfermedad.
Durante la ltima dcada, los enfoques de genes
candidatos han puesto de manifiesto varios
genes cuya metilacin en tumores de mama
vara segn las caractersticas
clinicopatolgicas del tumor tales como el
estado de los receptores hormonales.