ENZIMAS

WILLIAM BENJAMIN RUIZ CHANG

MAGISTER EN BIOQUMICA

DOCENTE DE LA CTEDRA DE BIOLOGA CELULAR Y MOLECULAR

Y BIOQUMICA - UPAO

ENZIMAS
Las enzimas son biocatalizadores excelentes, mas eficaces y especficos que dirigen y
regulan reacciones de los sistemas biolgicos.
Todas las enzimas tienen las siguientes propiedades qumicas:

* Aumentan la velocidad de una reaccin al disminuir la energa de activacin.

* No se consume ni sufre cambios en sus estructura durante el proceso cataltico.

* Acta sobre una molcula orgnica denominada sustrato, transformndola en un

producto o productos.

* Son reguladas por una gran variedad de controles celulares, genticos y alostricos.

CLASIFICACION ENZIMATICA
CLASE 1: OXIDORREDUCTASAS
Catalizan reacciones de transferencia de electrones y/o protones de un sustrato a otro; es
decir reacciones de oxido-reduccin.
* Deshidrogenasas
* Oxidasas
* Oxigenasas
* Reductasas
* Peroxidasas
* Hidroxilasas

LACTATO
DESHIDROGENASA

LACTATO

PIRUVATO

CLASE 2: TRANSFERASAS
Catalizan la transferencia de un grupos funcionales entre donadores y aceptores.
Los grupos que son transferidos frecuentemente son: fosfato, amino, glucosilo.
* Quinasas

* Transaminasas

GLUCOSA

* Transmetilasas

ADENOSIN TRIFOSFATO

GLUCOCINASA

GLUCOSA-6-FOSFATO

ADENOSIN DIFOSFATO

LACTOSA

CLASE 3: HIDROLASAS
Estas reacciones implican la ruptura hidroltica
de enlaces C-O, C-N, O-P y C-S.
Se les puede considerar como como una clase
especial de transferasas en las que el sustrato
es escindido siendo sus fragmentos transferidos a
los componentes del agua (OH y H).
* Lipasas
* Glucosidasas

LACTASA

* Esterasas
* Peptidasas
GALACTOSA

GLUCOSA

LIPASA

TRIGLICERIDO

CIDOS GRASOS LIBRES

GLICEROL

CLASE 4: LIASAS
Catalizan reacciones en la que se rompen enlaces C-C, C-N y C-O, sin intervencin de
agua y con prdida de grupos funcionales simultnea a la aparicin de dobles enlaces.
* Descarboxilasas
* Desaminasas

PIRUVATO
DESCARBOXILASA
DIOXIDO DE
CARBONO
PIRUVATO

ACETALDEHIDO

CLASE 5: ISOMERASAS
Catalizan reacciones de isomerizacion de cualquier tipo, pticos, geomtricos o de posicin.
* Epimerasa
* Racemasa
* Mutasa

ALANINA
RACEMASA

L-ALANINA

D-ALANINA

CLASE 6: LIGASAS
Participan en reacciones en las que se unen
dos molculas a expensas de un enlace
fosfato de alta energa procedente del ATP.
El termino sintetasa se reserva para este
grupo de enzimas.
* Tiocinasa

CITRATO
SINTASA

* Sintetasa
Oxalacetat
o

Citrato

GLUTAMINA
SINTETASA
GLUTAMATO

GLUTAMINA

NATURALEZA QUIMICA DE LAS ENZIMAS

La mayora de las enzimas (Apoenzimas)
son de naturaleza proteica (90%).

Algunas enzimas requieren de un

componente adicional (cofactor o coenzima)
para su funcionamiento. Estos se unen por
medio de enlaces dbiles no covalentes.
Las Coenzimas son molculas orgnicas,
generalmente derivan de las vitaminas (NAD,
FAD, Biotina, Tiamina).
Los Cofactores son iones inorgnicos (Mg+2,
Cu+2, Fe+2, Zn+2).

Cofactor

Coenzima

Apoenzima

HOLOENZIMA

NADH

+
NAD

ENZIMA
SUSTRATO
OXIDADO

COMPLEJO
ENZIMA-SUSTRATO

ENZIMA

SUSTRATO
REDUCIDO

SITIO CATALITICO

El sitio cataltico o centro de fijacin del

sustrato, es una pequea grieta o hendidura en
una molcula proteica grande, donde se fija el
sustrato.
La estructura terciaria de la enzima est
plegada de tal manera que se origina una
regin con las dimensiones moleculares
idneas para acomodar un sustrato especfico.

ESPECIFICIDAD DE LAS ENZIMAS

La especificidad reside en una regin
determinada de la superficie enzimtica, el
centro de fijacin del sustrato.
Pueden presentar especificidad ptica
absoluta para al menos, una porcin de la
molcula del sustrato o a la totalidad de
dicha molcula.

sitio cataltico de
carboxipeptidasa

PROENZIMAS
Tambin denominados Zimgenos,
se sintetizan como precursores
inactivos en un determinado tejido
u rgano.
Para poder transformarse a su
forma activa (enzimas) se debe
producir una ruptura proteoltica de
un segmento de aminocidos, este
proceso se tiene que realizar en un
tejido diferente del cual fueron
originados.
Sitio de
sntesis

Zimgeno

Enzima

Estmago

Pepsingeno

Pepsina

Pncreas

Quimotripsingeno

Quimotripsina

Pncreas

Tripsingeno

Tripsina

Pncreas

Procarboxipeptidasa

Carboxipeptidasa

Pncreas

Proelastasa

Elastasa

ISOENZIMAS
Son enzimas que tienen diferente
secuencia de aminocidos, es
decir, son formas moleculares
diferentes. pero catalizan la misma
reaccin qumica.
Estas isoformas son codificadas por
genes diferentes y sintetizados en
tejidos u rganos diferentes.
Su accin la realizan de forma
intracelular por eso cuando se
encuentran elevadas en el suero o
plasma son de gran utilidad en el
diagnostico de enfermedades.

ISOENZIMAS DE CREATINA
FOSFOQUINASA

MUSCULO
ESQUELETICO

MUSCULO
CARDIACO

ELECTROFORESI
S

DENSITOGRAMA

ISOENZIMAS DE LACTATO
DESHIDROGENASA

CEREBRO
Y RION

 Ribozimas.- son RNAs catalticos, estn

constituidos
por
nucletidos,
son
importantes en la eliminacin de intrones
y ensamblaje de exones, es decir en el
mecanismo de maduracin del RNA
Abzimas.- son anticuerpos catalticos de
naturaleza proteica del tipo de las
inmunoglobulinas (Ig), sirven como
molculas de proteccin neutralizando
sustancias extraas de daan las clulas.
Sinsimas.- son enzimas de origen
sinttico, se utilizan para el tratamiento
de enfermedades, como las adicciones a
drogas.
Granzimas.- son proteasas que inducen
o activan procesos de apoptosis, se
sintetizan como zimgenos y se activan
en lugares especficos de la clula.

Gen

Transcripcin

pre RNAm

Maduracin

RNA maduro

Clula normal

Apoptosis

Clula modificada

MODELOS ENZIMTICOS
MODELO DE LLAVE Y CERRADURA
(E. Fischer).

MODELO DEL AJUSTE INDUCIDO

(D. Koshland).

El sitio cataltico es una estructura rgida,

por lo tanto el sustrato y la enzima se
acoplan de forma estereoespecfica, de la
misma manera que una llave se ajusta a su
cerradura.

El sitio cataltico es una estructura dotada

de flexibilidad, cuando el sustrato se une a la
enzima, induce cambios conformacionales
en esta molcula, para asegurar la ubicacin
ms efectiva.

FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

CONCENTRACIN DEL SUSTRATO

Cuando aumenta la concentracin de sustrato, se produce un aumento en la velocidad

de reaccin, al seguir aumentando la concentracin de sustrato la velocidad de reaccin
se hace constante. Por lo tanto obtiene una velocidad mxima de reaccin.
Esto nos sirve para obtener la velocidad mxima media, y por ende determinar el Km de
la reaccin (constante de Michaelis-Menten)

Km = Afinidad

EFECTO DE LA TEMPERATURA
En nuestro organismo la temperatura optima es de 37C promedio, cuando
disminuye o aumenta esta temperatura la actividad enzimatica disminuye, la enzima
sufre alteraciones en su estructura.
Por debajo de la temperaura promedio la actividad de la enzima disminuye por que
esta sufre un proceso de inactivacion (proceso reversible), pero si la temperatura
aumenta por encima de la optima la actividad enzimatica tambien disminuye, pero a
diferencia de la primera la enzima sufre un proceso de desnaturalizacin (proceso
irreversible).
Temperatura ptima para
enzima de termfila

Actividad

Temperatura ptima para una

tpica enzima humana

20

40

Temperatura (C)

Temperatura ptima para dos enzimas

80

100

EFECTO DEL PH
La mayoria de las enzimas tiene un pH ptimo
que varia entre 6-8. Pero tambien va a
depender del tejido o del organo
para poder
determinar
el pH mas optimo para las enzimas. Los
cambios de pH en el medio pueden afectar el
estado de ionizacin de ciertos grupos
funcionales en la enzima y tambin en la del
sustrato.
Tanto la disminucion, como el aumento del
pH, afectan la actividad enzimatica por que
producen la desnaturalizacion de la enzima.
Fosfatasa alcalina
Lipasa pancretica
Quimotripsina
Tripsina
Catalasa
Carboxipeptidasa
Amilasa salival
Fosfatasa cida
Pepsina

pH ptimo para pepsina

(enzima del estmago)

pH
9.5
8.0
8.0
7.9
7.6
7.5
6.8
5.0
1.5

pH ptimo para
tripsina
(enzima
intestinal)

Actividad

ENZIMA

3
4
0
2
1
pH ptimo para dos enzimas

INHIBICIN ENZIMTICA
Los inhibidores enzimticos son aquellos agentes que interfieren con la catlisis,
disminuyendo o deteniendo la reaccin enzimtica. Se dividen en 2 grandes grupos:
1.- INHIBICIONES REVERSIBLES
2.- INHIBICION IREVERSIBLE
Inhibicin no competitiva
Inhibicin competitiva y
Inhibicin acompetitiva
INHIBICIN COMPETITIVA
El inhibidor generalmente tiene una estructura quimica semejante al sustrato, por lo tanto
puede combinarse con la enzima libre, de tal modo que compite con el sustrato especifico por
el sitio cataltico. Una caracterstica de este tipo de inhibicin est dada por el hecho de que
puede ser revertida aumentando la concentracin de sustrato.
Sustrato

Inhibidor
Competitivo

Inhibidor Competitivo

INHIBICIN NO COMPETITIVA
El inhibidor no tiene una estructura semejante a
la del sustrato, por lo tanto se une a un sitio
activo diferente al sitio catalitico de la enzima,
deformndola de tal manera que no puedan
formarse el complejo enzima-sustrato (ES).

Inhibidor No competitivo

No existe competencia por el sitio catalitico

entre el sustrato y el inhibidor.

Sustrato

Sustrato
Inhibidor
No Competitivo

INHIBICION ACOMPETITIVA
El inhibidor no tiene ninguna semejanza estructural con el sustrato, se une a un sitio activo
de la enzima, pero no se une a la enzima sola, este se une al complejo ES, formando de
esta manera un complejo ESI.
Sustrato

Inhibidor
Acompetitivo

Inhibidor Acompetitivo

INHIBICIN IRREVERSIBLE:
El inhibidor produce un cambio permanente en la molcula de enzima, que resulta en un
deterioro definitivo de su capacidad cataltica.
Por lo general estos inhibidores modifican qumicamente residuos de aminocidos en la
enzima que tienen funciones fundamentales en la catlisis. Ej. los gases nerviosos, como el
fluorofosfato de diisopropilo (DIFP) que reaccionan con aminocido serina de la enzima
acetilcolinesterasa, el cido iodoactico y iodoacetamida que reaccionan con cistena.

IMPORTANCIA DE LAS ENZIMAS EN EL DIAGNOSTICO

Enzima srica

Abreviatura

Enfermedad

Aspartato aminotransferasa

AST

Enfermedades hepticas
Isquemia miocrdica

Alanina aminotransferasa

ALT

Enfermedades hepticas
Isquemia miocrdica

Amilasa

Pancreatitis aguda

Creatinfosfocinasa

CPK

Isquemia miocrdica

Colinesterasa

CHE

Intoxicacin alcohlica aguda

Fosfatasa cida

ACP

Carcinoma de Prstata

Fosfatasa alcalina

AP

Ictericia obstructiva. Tumores

Glutamato descarboxilasa

GAD

Diabetes mellitus(tipo I)

-Glutamil transferasa

GT

Cirrosis alcohlica.

Lipasa

Pancreatitis aguda