INTRODUCCIN-CUESTIONARIO

FUNDAMENTOS DE LAS PRUEBAS

DE DIGESTION

Hidrlisis de Gelatina
PRINCIPIO:Determinar la capacidad de un
microorganismo de producir enzimas de tipo proteoltico
que licuan/hidrolizan la gelatina.
ENZIMA

GELATINASAS

La gelatina es una protena que tiene la capacidad de

gelificar, cuando es hidrolizada por la gelatinasa en los
aminocidos que la componen, pierde su caracterstica de
gelificar.
Protena

Gelatinasas

Aminocidos Individuales

Hidrlisis del Almidn

Determinar la capacidad de un microorganismo de hidrolizar el almidn. Probar la desaparicin
del almidn con el uso de un reactivo con yodo.
Estructura bsica del almidn: amilosa (lineal), amilopectina (ramificada)

-amilasa: Enzima que hidroliza los enlaces (1-4) de polmeros de

glucosa.

Agar Almidn
Sustrato: Almidn (polmero de glucosa).
Enzima: Amilasa (exoenzima).
Producto: Glucosa.
Revelador: Lugol.
Almidn Dextrinas Maltosa Glucosa

Digestin de Casena
Las proteasas son excretadas al medio para
la degradacin de protenas, la casena es la
protena de la leche que le confiere el color
blanco. cuando la casena es hidrolizada
desaparece el color blanco alrededor del
crecimiento microbiano

Enzimas proteolticas (caseasas) hidrolizan

protenas de la leche.
Agar Leche Descremada Sustrato: Casena
(protena). Enzima: Caseinasa (Proteasa,
exoenzima). Producto: Aminocidos.
Revelador: No requiere.

Hidrlisis de Fosfolpidos
Los fosfolpidos son steres complejos de alcohol, cido
graso, cido fosfrico y una base nitrogenada.
Las fosfolipasas son enzimas catabolicas importantes en el
metabolismo de los fosfolpidos que se producen
constitutivamente.
Nutritivo, proceso infeccioso
*Fosfolipasa A
Fosfolpidos
lisofosfolpidos y cidos grasos
*Fosfolipasa C:
Fosfatidil colina
Fosforilcolina y diglicrido

Medio de cultivo agar yema de huevo

Composicin:
Triptona, extracto de carne, extracto de levadura,
glicina, piruvato de sodio, cloruro de litio, telurito de
potasio.
Interpretacin:
Prueba positiva: Formacin de un halo
transparente alrededor de la colonia.

Prueba Positiva

Prueba negativa

Medio de cultivo agar sangre

Composicin:Infusin de corazn de ternera,
triptosa, cloruro de sodio
Prueba positiva: Se visualiza una zona
amarillenta
opaca
traslcida
hidrlisis de fosfolpidos de la
membrana celular de los eritrocitos.

Interpretacin:
he
m
li
si
s
pa
rci
al

Hal
o
opa
co
am
arill
ent
o

enlaces
ster
fosfato con
acumulaci
on
extracelula
r de
diglicerido
s

Digestion de proteinas y
fermentacion de la leche
tornasolada

Accion sobre la leche tornasolada

INFORME

RESULTADOS:
Crecimiento1
Microo
rganis 48h
mo

72h

Hidrlisis de gelatina en tubo

Hidrlisis2
48h

72h

Esche
richia
coli

Bacillu
s
subtili
s

Pseud
omon
as
aerugi
nosa

Salmo
nella

Escherichia coli.
Hidrlisis de Gelatina
No hubo crecimiento en
gelatina en tubo.
Teora: Desarrollo sin
licuefaccin
Posiblemente debido a la
concentracin de gelatina.

Bacillus subtilis.
Hidrlisis de gelatina en tubo

Prueba result un
50 % positiva
Terica: positiva

Proteus vulgaris

Hidrlisis gelatina
vu P.
lga
ris

Sin desarrollo
Teora:
Desarrollo y
licuefaccin

Staphylococcus Aureus.

Prueba: Negativa
S
au .
reu
s

Terica: Positiva

Klebsiella pneumoniae

Prueba: negativa
pne K.
um
oni

Teorica: Negativa
ae

HIDRLISIS DE GELATINA EN PLACA

Microorg
anismo

Crecimient
o1

Hidrlisis2

Escheric
hia coli

Bacillus
subtilis

Pseudom
onas
aerugino
sa

Salmonel
la typhi

Proteus
vulgaris

Proteus vulgaris

Hidrlisis de Gelatina en Placa

Prueba negativa
formacin de p.p.
blanco.

Escherichia coli
Hidrlisis de Gelatina en Placa

Prueba negativa:
form precipitado
blanco.

E.

li
o
C

Bacillus subtilis.
Hidrlisis de fosfolpidos: yema de huevo
Prueba 100%
positiva
Terica: positiva

Proteus vulgaris

Hidrlisis Fosflipidos: Yema de huevo

Prueba negativa.
Teora: Prueba
positiva

Staphylococcus Aureus.

Escherichia coli.
Hidrlisis Fosflipidos: Agar sangre

E. Co
l

Hemlisis tipo :
Halo opaco, hidrlisis
de los enlaces ster
fosfato.

Bacillus subtilis.
Hidrolisis de fosfolipidos: agar sangre
Prueba 75%
hemolisis y 25%
hemolisis
Bacillus
subtilis

Terica: hemolisis

Proteus vulgaris

Hidrlisis Fosflipidos: Gelosa Sangre

Hemlisis :
Ausencia de halo,no
utilizacin de
eritrocitos
membranales.

Escherichia coli
Digestin de la Casena en placa
E.
Co
li

Prueba negativa:no hay

presencia de halos de
hidrlisis.

Escherichia coli
Leche Tornasolada

Acidificacin
Coagulacin
Reduccin
Teora:

E.

li
o
C

Proteus vulgaris

Hidrlisis de Casena
Prueba positiva.
Teora: prueba
positiva

Bacillus subtilis.
Digestin de casena

Prueba 100%
positiva
Bacillus
subtilis

Terica: positiva

Proteus vulgaris

Leche Tornasolada
Alcalinizacin.

Proteus
vulgaris

Bacillus subtilis
Digestin de proteinas y fermentacion de leche
tornasolada

Bacillus
subtilis

Prueba
reduccion
licuefaccion
alcalinizacion