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HISTOLOG A

GENERAL Y
BUCODENTAL

HISTOLOGA
La palabra histologa significa el estudio
del tejido y se refiere al anlisis de la
composicin microscpica y la respectiva
funcin del material biolgico.
Marcello Malpighi es el fundador de la
histologa.
El Tejido se forma por la agrupacin de
clulas con la misma funcin.

HISTOLOGA
La anatoma que es el estudio de la forma
y la estructura de los organismos vivos,
comienza a dividirse de manera gradual en
anatoma MACROSCOPICA, que
comprende las estructuras observables a
simple
vista; y la anatoma
MICROSCOPICA, que requiere el uso de
los auxiliares pticos.

METODOS
HISTOLGICOS
son aquellos procedimientos o tcnicas
utilizados para conocer y estudiar las
diferentes estructuras microscpicas de
los tejidos biolgicos.

CLASIFICACIN:
A- Mtodo de observacin de clulas y
tejidos vivos.
B- Tcnicas de aislamiento de
componentes celulares por mtodos de
centrifugacin.
C- Mtodos de observacin de tejidos
muertos o inanimados.

METODOLOGA

* El tipo de microscopio usado.


* La preparacin del tejido u rgano para
que pueda ser visto con el microscopio.

MICROSCOPIO
MIKROS=pequeo
SKOPEO= mirar, ver
Es un instrumento ptico que sirve para ver y
examinar de cerca objetos muy diminutos.
Es utilizado en todos los mtodos histolgicos.
Para el estudio del material biolgico se
dispone de varios tipos de microscopios, su
clasificacin depende del tipo de fuente
luminoso que utilizan:
* Microscopios que utilizan fuente de luz
Visible e invisible.

TIPOS DE MICROSCOPIO
A-Microscopio de luz u ptico.

B- Microscopio Electrnico.

TIPOS DE MICROSCOPIO
PTICO
* Comn.
* Campo Oscuro.
* Contraste de fases.
* Interferencia.
* Luz Polarizada.
* Fluorescencia.
* Luz Ultravioleta.

Microscopio ptico
Es aquel que utiliza la luz.
Est compuesto por partes mecnicas y
pticas.
Los componente pticos:
CONDENSADOR
OBJETIVO
OCULAR
Longitud de onda = aprox. 500n

Microscopio ptico
Condensador: produce un haz de luz
que ilumina el objeto estudiado.
Objetivo: aumenta el objeto y proyecta la
imagen sobre el ocular.
Ocular: aumenta aun ms la imagen y la
proyecta sobre la retina del ojo del
observador.

RESOLUCIN
La distancia mnima que debe existir
entre dos puntos del objeto para que se
visualicen separados. La calidad de una
imagen depende del poder de resolucin
de un microscopio.

AUMENTO

La relacin entre el tamao de la imagen


y del objeto, en valores lineales.

Microscopio Electrnico
Se utiliza un haz de electrones con longitud
de onda de 0,005n.
Tipos :
* Microscopio electrnico de
transmisin (MET).
* Microscopio electrnico de barrido (MEB).
* Microscopio de tnel de barrido (MTB).
* Difraccin de rayos X.

Unidades Histolgicas
Son las unidades de medidas utilizadas
en histologa.
= micra
m = micrmetro
nm = nanmetro
= Angstrom

1 m
1 nm

1 mm
1 m
1 nm
1

10-mm
10-6 mm
0,001mm(10-mm)

10-7mm
10m=106mm=107

10nm=104
10
1 m

Cortes Histolgicos
Son secciones muy finas, de tejidos
muertos frecuentemente transparentes a ser
atravesados por la luz y ser observados al
microscopio previa coloracin.

Microtomo
Es un dispositivo mecnico que
permite la elaboracin de cortes finos de
muestras para su observacin al
microscopio.

Preparacin de tejidos
1- Muestra de tejido.
2- Fijacin.
3- Inclusin.
4- Corte.
5- Tincin y Montaje

Muestra de tejido

Se toma el tejido que se desea


estudiar, debe estar muerto.

Fijacin
Es el proceso que tiene como finalidad
preservar la morfologa y composicin
qumica de los componentes del tejido,
de tal modo de que lo observado
al microscopio corresponda a lo que
exista en el tejido vivo.

FIJADORES
FUNCIN:
Insolubilizar las protenas de los tejidos.
Evitan la auto lisis y la degeneracin postmortem.
Son bactericidas.
Los ms utilizados :
*FORMALDEHIDO
*GLUTALDEHIDO
*TETROXIDO DE OSMIO

TIPOS DE FIJACIN
* Fijacin por inmersin
* Fijacin por perfusin
Previo a la Inclusin:
- La deshidratacin. Alcohol.
- Aclaramiento. Xilol.

INCLUSIN
Los tejidos quedan muy blandos para
ser cortados en trozos muy delgados,
estos deben ser incluidos y envueltos por
una sustancia de consistencia firme y
serosa como:
* Parafina
* Celoidina
* Gelatina
* Resina epoxi
Calentamiento 60 = Taco

CORTES
- Los tacos son cortados por el
microtomo.
- Los cortes se extienden en agua
caliente.
- Espesor de 5 nanmetros.
- Luego son adheridos a las lminas
portaobjetos.
- A veces es necesario usar el criostato.

Congelacin-Desecacin
* Con este mtodo la variacin estructural
y la extraccin qumica sea la misma.
* Para conservar la actividad enzimtica.
* Se congela rpidamente el trozo de
tejido y se coloca en una cmara de
vaco a baja temperatura.
* Se deshidrata por evaporacin lenta del
agua.

Congelacin-Sustitucin
1- Fijacin moderada y tratamiento con sacarosa.
2- Congelacin rpida del tejido.
3- Una deshidratacin a 85C en metanol puro.
4- Se transfiere el tejido a un medio de inclusin
plstico.
5- Este se infiltra mientras se incrementa la temperatura
hasta -20C.
6- Se polimeriza por irradiacin con luz ultravioleta el
medio de inclusin, que se seca, y se puede cortar el
taco terminado.

COLORACIN
Es el procedimiento de teir o colorear un
tejido.
La mayora de los colorantes se
comportan como cidos y bases.
Los componentes que se tien con
colorantes cidos se le llaman acidfilo y
los que se tien con colorantes bsicos
se llaman basfilos.

COLORACIN
ACIDOFILIA: Es la capacidad que tiene
un componente tisular o celular de
teirse con colorantes cidos llamados
aninicos.
BASOFILIA: Es la capacidad que tiene
un componente tisular o celular de
teirse con colorantes bsicos llamados
catinicos.

COLORACIN
El mtodo de coloracin histolgico ms
usado es de la hematoxilina-eosina(H.E.)
HEMATOXILINA: Colorante bsico
(catinico).
EOSINA: Colorante cido (aninico).
El ncleo (cido) se colorea violeta-azul(H)
El citoplasma(bsico) se colorea rosado(E)

EJEMPLOS DE
COLORANTES
HISTOLGICOS
Coloracin con tricrmico de Mallory.

Colorantes de Tiazina=azul de toluidina y tionina.


El reactivo de Schiff.
PAS (Mtodo del cido perydico-schiff.
Mtodo de Feulgen.
Colorantes Sudan: rojo y negro.
Giensa.
Gram.
Van Gieson.
Impregnacin Argntica
Hematoxilina Frrica
Etc.

PREGUNTAS ?
Bibliografa
Histologa . Finn Geneser 3. Edicin

gracias