1

CONTENIDOS
1.

Fundamentos

2.

Clasificacin

3.

El proceso cromatogrfico

4.

Parmetros fundamentales

5.

Aplicaciones de la cromatografa

1. Fundamentos

1903: us columnas de adsorcin para separar

pigmentos vegetales
Fase
Pigmentos

mvil

vegetales
Fig.1

Tswett (1872-1919)

Fase
estacionaria

Chroma: color
CROMATOGRAFA

Graphein: escribir

2. Clasificacin

2A. Segn la disposicin de la fase estacionaria:

Cromatografa plana:

Cromatografa en capa fina

Cromatografa en papel

Cromatografa en columna
Cromatografa de lquidos
Cromatografa de gases
Cromatografa de fluidos supercrticos

2. Clasificacin

CROMATOGRAFA PLANA
Papel

Cromatografa en papel

Fase estacionaria
Cromatografa

Adsorbente sobre soporte

Gel de slice, poliamida.

en capa fina

Lmina de vidrio, de plstico o

Tapadera

metlica

METODOLOGA DE TRABAJO
Papel

Frente de
fase mvil

Fase
mvil

Fig.1

2. Clasificacin

Fase
mvil

Fase
estacionaria

CROMATOGRAFA EN COLUMNA
Muestra
(A+B)

2. Clasificacin

2B. Segn el tipo de fase mvil:

Cromatografa de lquidos (LC)

En columna o en superficie plana

Cromatografa de gases (GC)

Cromatografa de fluidos supercrticos (SFC)

En columna

2. Clasificacin

Mtodo

Tcnica

Fase estacionaria

Tipo de equilibrio

LC

Reparto

Lquido adsorbido sobre un slido

Distribucin entre lquidos

inmiscibles

Adsorcin

Slido

Adsorcin

Intercambio inico

Resina de Intercambio Inico

Intercambio inico

Exclusin por
tamaos

Lquido en intersticios de un slido

polimrico

Distribucin/Exclusin

Gas-lquido

Lquido adsorbido sobre un slido

Distribucin entre gas y lquido

Gas-slido

Slido

Adsorcin

Especies orgnicas enlazadas a

superficie slida

Distribucin entre fluido

supercrtico y superficie
enlazada

GC

SFC

3. El proceso cromatogrfico
Muestra
(A+B)

Fase
mvil

Fase
estacionaria

Seal analtica

Detector

Tiempo, min

t0

t1

t2

t3

t4

t5

t6

A
B

t0

t1

t2

t3

t4

t5

t6
9

3. El proceso cromatogrfico

ENSANCHAMIENTO DE BANDAS
Columna
Comienzo

Fig.1

Perfil de concentracin

Fig.2

Tiempo

10

Respuesta del detector

4. Parmetros fundamentales

CH4
Inyeccin

Octano

No
identificado

Nonano

Tiempo
Fig.1

tr = tr - tm
11

4. Parmetros fundamentales

t t
t
k r m r
tm
tm

k << 1: elucin demasiado rpida

k~ 20-30: elucin demasiado lenta
2 < k < 10: elucin ideal

Factor de selectividad
()

kB

kA

= 1: Los compuestos no estn separados

> 1: Los mximos de los picos cromatogrficos
estn separados

Volumen de retencin (Vr)

Vr tr ur

ur : caudal de la fase mvil

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4. Parmetros fundamentales

ANCHURAS CARACTERSTICAS

wi
tr

Respuesta del detector

Punto de
inflexin

wh

t=0
Inyeccin

Tiempo

wi = 2
wh = 2,35
wb = 4

wb

Fig.1

wb = 2wi
wb = 1,7wh
13

4. Parmetros fundamentales

EFICACIA DE UNA COLUMNA: H, L

L
N
H
Martin y Synge

H
L

wb = 4

tR
N 16
wb

L
H

n compuestos en el cromatograma:

N
i 1

n
14

4. Parmetros fundamentales

Fig.1

Rs 1,5: separacin ideal

Rs=

wb,A + wb,B
2

1,5 > Rs > 1: separacin aceptable

Rs < 1: separacin inaceptable
15

4. Parmetros fundamentales

Resolucin
= 0,75

Seal

Seal

Resolucin
= 0,5

Seal

Seal

Resolucin
=1

Tiempo

Resolucin
= 1,5

Tiempo

F1
16

5. Aplicaciones de la cromatografa

ANLISIS CUALITATIVO

Seal analtica

Disolucin estndar
F1

CH4

Octano

Nonano

Decano

Tiempo

Seal analtica

Muestra

CH4

La muestra no contiene
metano ni octano.
Si los contiene ser a
concentraciones inferiores
a los correspondientes
lmites de deteccin

Octano Nonano? Decano?

Tiempo

Identificacin positiva: - Comparacin de datos de retencin

- Uso de detectores en lnea
17

5. Aplicaciones de la cromatografa

ANLISIS CUANTITATIVO

Seal analtica

rea
Altura, h

Fig.1
tm

tr

Tiempo

MTODOS DE ANLISIS CROMATOGRFICO CUANTITATIVO

1. Calibracin con patrones
Preparacin de disoluciones patrn
Obtencin de sus cromatogramas

18

5. Aplicaciones de la cromatografa

B. Mtodo del estndar interno

Se aade a disoluciones
patrn y a muestras

Seal analtica

Analito 1

Estndar
interno

Analito 2

Tiempo
Fig.1
19

Curso acadmico: 2012/13

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-Pgina 3, Fig.1. Direccin web: http://es.wikipedia.org/wiki/Mija%C3%ADl_Tsvet .
-Pgina 5, Fig.1. Direccin web: http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Chromatography_tank.png.
-Pgina 10, Fig.1 y Fig.2. Direccin web: http://bcs.whfreeman.com/qca/default.asp.
-Pginas 11, 13, 15 y 17, Fig.1. Direccin web: http://bcs.whfreeman.com/qca/default.asp.
-Pgina 18, Fig.1. Direccin web: http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Chromatogram_1.jpg. Autor: CCC/CHT
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